993例乙型肝炎患者血清学标志分析

目的：探讨乙型肝炎病毒(HBV)血清标记的表现模式。方法：收集993份乙肝患者血清标本，均以stat FAX-2100酶标仪进行定性检测。结果：本组血清病毒学标记模式可分为12种模式。以“145”、“245”、“135”、“25”、“2”模式为主，占全部病例的83．68％。随访结果表明，模式改变大致可分为5种类型。结论：HBV血清免疫学标记的模式较为复杂。除了检验误差外，产生少见模式的主要原因有低滴度抗．HBe等。检测HBV血清免疫标志模式转换的顺序依次为e系统的转换，s系统的转换，抗-HBe消失或抗-HBe和抗-HBs同时消失等。     

中国艾滋病病毒1型AE循环重组型毒株env基因的变异和进化分析

目的　研究中国艾滋病病毒 1型 (HIV 1)AE循环重组型 (CRF0 1 AE)毒株env不同基因区序列变异的特点及其与进化压力的关系。方法　应用巢式聚合酶链反应 (nested PCR)对从全国部分省收集来的HIV 1感染者血液样本中的HIV 1外膜蛋白 (env)基因进行扩增和亚型鉴定后 ,选择 3 4份CRF0 1 AE重组型HIV 1毒株env基因V3～V4区及其邻近区域的序列进行系统进化树和氨基酸变异分析 ,并计算和分析氨基酸同义替换 (Ks)值和非同义替换 (Ka)值及Ks Ka比值。结果基因系统树显示中国的 3 4份样本CRF0 1 AE重组型毒株与我国代表株AE .97CNGX2F和泰国代表株AE .CM 2 40、AE .93TH2 53聚集在一起。氨基酸替换主要发生在C3和V4区 ,而V3区和V3上游区氨基酸序列相对保守 ,糖基化位点也比较保守。V 3环顶端四肽以GPGQ为主 (87.50 % )。大部分毒株的第 3 0 6和 3 2 0位点上没有出现带正电荷的氨基酸。整个V 3～V4区的Ks值显著高于Ka值(P <0 .0 0 1) ,且Ks Ka比值显著高于 1(P <0 .0 0 1) ,只有V4区Ks Ka比值显著低于 1(P <0 .0 1)。结论　目前多数流行于中国的CRF0 1 AE重组型HIV 1毒株具有较高的同源性 ,在进化上关系密切。氨基酸替换主要发生在C3和V4区 ,而不是V3区。由于大部分毒株的第 3 0 6和 3 2 0位点上没有出现带正电荷的     

我国HIV-1 B''亚型毒株gag基因变异特征研究

目的研究我国人免疫缺陷病毒1型（HIV-1）B’亚型主要流行株在宿主免疫压力下的基因变异及抗原表位的变化特征，探讨选择压力、基因离散率和抗原表位变化之间的关系。方法从确诊的HIV-1感染者的全血样本中提取基因组DNA，经套式聚合酶链反应（PCR）扩增后，将扩增产物进行纯化和测序。然后将所得序列进行系统进化树和氨基酸变异分析，使用GCG软件包的Distance程序对P17和P24两个区段计算基因距离，用Diverge程序计算同义替换（1（s）和非同义替换（1（a）及二者之间的比值，并对我国人群中较常见的HLA型别限制的CTL表位的突变情况进行分析。结果HIV-1B’亚型毒株的P17区段的Ks／Ka值〈1，而P24区段的Ks／Ka值〉1；P24部分的基因离散率低于P17部分；P17区段抗原表位的保守率为34．94％，而P24区段抗原表位的保守率为67．38％；从基因离散率、所受的选择压力及抗原表位的突变率3个方面来看，HIV-1的P17区段均明显大于P24区段。结论HIV-1B’亚型毒株的P17区段的抗原表位变化较大，而P24区段的抗原表位相对较为保守。提示P24区段的CTL表位更适合于表位疫苗的研制。     

2型糖尿病患者血清脂蛋白(a)检测的临床意义

目的:探讨2型糖尿病血清脂蛋白(a)[Lp(a)]水平及其变化的临床意义。方法:采用免疫透射比浊法测定了20例正常人2、0例冠心病患者和70例2型糖尿病(DM)患者的血清Lp(a)水平,综合考虑其血清尿素氮(BUN)、肌酐(CRE)、尿微量白蛋白(mAlb)水平,将70例2型糖尿病患者分为2组:2型糖尿病无肾病组40例(BUN<7.30 mmol/L,CRE<105μmol/L,mAtb<11.7 mg/L),糖尿病肾病(DN)组30例(BUN>7.30 mmol/L,CRE>105μmol/L)。结果:正常人和2型糖尿病无DN组间血清Lp(a)水平差异无显著性(P>0.05);糖尿病肾病组Lp(a)水平显著升高(P<0.05),这一点与冠心病患者相似。2型糖尿病患者中,血清Lp(a)水平与mAlb呈简单正相关关系(r=0.03,P<0.05),多元线性回归分析显示,mAlb未能进入多元回归方程。结论:2型糖尿病患者无DN时,血清Lp(a)水平与非糖尿病患者相比差异无显著性;2型糖尿病合并DN患者出现血清Lp(a)水平显著增高,且与尿微量白蛋白呈正相关关系,提示Lp(a)水平升高可能继发于DN的肾脏损害,随肾脏损害进展而逐步升高。     

沙眼衣原体DNA的荧光定量PCR检测

沙眼衣原体(CT)的实验室检测技术主要分为细胞培养观察包涵体的经典细胞生物学方法；免疫学方法和以核酸扩增技术为代表的分子生物学检测方法。长期以来一直以前者作为沙眼衣原体感染诊断的金标准，但该方法操作复杂，技术要求高，所需时间长，所受影响因素多，因此，一直未得到普遍应用。本实验采用实时荧光定量PCR（fluorescence quantitatire PCR，FQ-PCR)方法，检测沙眼衣原体，克服了上述缺点，取得了较好的效果。现报告如下。     

真菌与致病性真菌的感染与诊断

真菌（fungus，fungi）一词来源于拉丁文的sfungus，即蘑菇，同词源的希腊文为sphongis，意思是海绵状物。中文早期称为蕈，后称菌，又称真菌。真菌属于真核生物，没有质体。营养方式为吸收，无吞噬作用。细胞壁含有甲壳质和B-葡聚糖。线粒体具扁平的突起，常有过氧化物体，有高尔基体。有单细胞或菌丝体和多核细胞单倍体的菌丝体。行有性生殖和无性生殖，双倍体存在的时间短。营腐生，寄生，共生和超寄生生活。     

亚健康与检验医学

世界卫生组织（WHO）给健康下了新的定义,即健康是一种身体,精神和交往上的完美状态,而不仅仅是身体没有疾病。根据这一定义,可将人群分为3类,即健康者（第一状态）,患病者（第二状态）及亚健康状态（第三状态）。亚健康状态是健康与疾病之间的临界状态,即非病非健康状态。机体无明显疾病,但可有各种各样的不适感觉。常见的表现为体力下降,容易疲劳,反应能力降低,思维涣散,心烦意乱,记忆力减退,精神状态欠佳,免疫功能低下。亚健康状态如果得到及时适当的处理,身体可向健康转化,如得不到及时适当的处理,则必然患病。     

乳腺癌手术前行前哨淋巴结活检术的临床价值观察

目的观察分析乳腺癌手术前行前哨淋巴结活检的临床价值。方法计算机检索选取100例2008年1月～2011年3月期间在本院接受乳腺癌治疗的患者,根据术前是否行前哨淋巴结活检将患者分为试验组和对照组,每组50例。对照组患者被给予乳腺癌行乳腺癌改良根治术,指导试验组患者术前行前哨淋巴结活检术,观察两组患者的临床表现,统计两组患者的康复时间、并发症发生率和3年后转移率,分析乳腺癌手术前行前哨淋巴结活检的临床价值。结果手术均获得成功。试验组患者的康复时间（15.6±4.5）d显著优于对照组（21.9±6.0）d,差异具有统计学意义（P〈0.05）;试验组患者的术后并发症发生率（2.00%）显著优于对照组（18.00%）,差异具有统计学意义（P〈0.05）;试验组患者的3年术后腋窝淋巴结转移率（4.00%）高于对照组（2.00%）,但差异无统计学意义（P〉0.05）。结论乳腺癌手术前行前哨淋巴结活检具有显著的临床价值,缩短康复时间,术后并发症少,3年后转移率无显著差别,值得临床的推广与应用。     

中国HIV-1主要流行重组株B/C Tat基因第一外显子序列特征分析

目的 研究我国人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)流行重组株B/C Tat基因第一外显子变异特点,探讨这些变化对其功能的影响.方法 从确诊的HIV-1感染者全血样本中提取基因组DNA,经套式聚合酶链反应(PCR)扩增和测序.使用GCG和Bioedit软件中的程序进行系统进化树和氨基酸变异分析,同时进行网上三级结构预测.结果 总计154份样品中CRF07-BC为120份,CRF08-BC为34份,两种亚型有较广泛的分布,CRF07-BC与标准株的平均基因离散率为(5.748±1.352),CRF08-BC与标准株的平均基因离散率为(1.259±1.931).结论 我国流行重组株CRF07-BC比CRF08-BC有较长的流行时间,CRF07-BC与CRF08-BC基因第一外显子氨基酸相比,主要为半胱氨酸富含区和核心区的变化.在这两个区位点变化可能影响Tat与细胞因子如cyclin T1的结合能力,而成为CRF07-BC在我国流行中获得传播优势的原因.     

使用多重巢式PCR对我国HIV-1主要流行株亚型鉴定方法的建立

目的 建立一套新的亚型鉴定方法，仅仅使用巢式PCR，一次扩增，即可对我国HIV-1主要流行株B、C和CRF01-AE进行亚型鉴定。方法 从HIV阳性样本中提取核酸，使用能覆盖HIV-1型M组gag区的引物进行第一轮扩增，第二轮扩增则使用分别检测B、C、CRF01-AE亚型的三套特异性引物进行扩增，三套引物放在同一个反应管中。反应产物经琼脂糖电泳后观察，不同亚型的位置不同，以此来判断亚型。另外设计一套引物，专门检测我国重组株CRF07-BC和CRF08-BC。所有样品均经过基因测序、系统进化树分析，以进行结果验证。结果 在检测的119份样品中，经基因测序和系统进化树分析证实B亚型样品43份(欧美B11份，泰国B32份)，C、CRF01-AE、A和D亚型样品分别为54份、17份、3份和2份。其中C亚型的样品，有52份属于CRF07-BC和CRF08-BC。而经过上述多重巢式PCR方法检测到的B亚型样品为35份(81．4％)，C亚型46份(85．2％)和CRF01-AE13份(76．5％)。另外，检测CRF07-BC和CRF08-BC重组株的引物特异性地检测到43份(82．7％)样品。上述结果与基因分析结果吻合，各个亚型之间无交叉，一种亚型的特异性引物只对该亚型有反应，而对其他亚型无反应，特异性达到100％。虽然有时会有非特异扩增带，但一般不影响结果判断。结论 我们建立了一套简单快速的H1V-1亚型鉴定方法，不需基因测序，即可检测我国主要流行株B、C、CRF01-AE、CRF07-BC和CRF08-BC。该方法具有高度特异性和敏感性，可以作为初筛方法在我国及其他国家HIV-1实验室推广使用。