甘草养阴汤在改善小鼠银屑病样皮损和调节炎症反应中的作用

[目的] 探索自拟方甘草养阴汤（GNY）对咪喹莫特（IMQ）诱导的银屑病样皮肤损伤小鼠模型的疗效。[方法] 将小鼠分为健康对照组、模型组（IMQ诱导银屑病小鼠）和治疗组（给予银屑病小鼠GNY,浓度为2.5、5 g/kg）;共4组（动物数=8/组）。采用银屑病病灶面积和严重程度指数（PASI）、苏木-精伊红染色和Baker评分用于评估疾病的严重程度。采用免疫组织化学或免疫荧光染色法对真皮的Gr-1,CD11c,RORγt和TGF-β阳性的炎性细胞进行计数。采用流式细胞仪分析脾脏细胞中的CD4⁺IL-17+Th17细胞和CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg细胞比例。使用qPCR半定量IL-6、IL-10、IL-17A、IL-22、IL-23、TNF-α、TGF-β和AMPK-1的相对mRNA表达。[结果] 与模型组相比,GNY治疗的小鼠在两种浓度下均能够改善了病灶的形态学特征,包括PASI评分和上皮角质细胞增生。较高浓度的GNY可显着降低银屑病小鼠模型真皮中的Gr-1,CD11c,RORγt和TGF-β阳性细胞比例;下调脾脏Th17细胞比例,增加Treg细胞的表达。此外,IMQ模型组小鼠的真皮内IL-6、IL-10、IL-17A、IL-22、IL-23、TNF-α、TGF-β和AMPKɑ1的相对mRNA表达升高,在以5g/kg浓度的GNY治疗的模型小鼠中表达明显降低。[结论] 研究表明GNY可改善IMQ诱导的小鼠银屑病样皮肤损伤表现、减轻炎症反应;为临床治疗银屑病提供依据。     

B族链球菌孕妇感染血清炎症因子、Th1/Th2、β-hCG的变化及其对胎膜早破、妊娠结局的预测价值

目的 探讨B族链球菌孕妇感染血清炎症因子、Th1/Th2、β-绒毛膜促性腺激素（β-hCG）变化及对胎膜早破发生、妊娠结局的预测价值。方法 选取2016年3月—2019年1月攀枝花市妇幼保健院收治的168例B族链球菌感染孕妇（GBS感染组）及200例无B族链球菌感染孕妇（无GBS感染组）。根据是否发生胎膜早破将B族链球菌感染组孕妇分为无胎膜早破组147例、胎膜早破组21例，比较B族链球菌感染与未感染者、胎膜早破与无胎膜早破者血清炎症因子、Th1/Th2细胞因子［干扰素-γ（IFN-γ）、IL-2、IL-4、IL-10］、β-hCG水平、胎膜早破发生率、妊娠结局、新生儿Apgar评分。采用Logistic回归性分析影响胎膜早破发生的因素，采用受试者工作特征（ROC）曲线及ROC下面积（AUC）分析各指标预测胎膜早破发生的价值，采用Pearson法分析各指标与新生儿Apgar评分的相关性。结果 B族链球菌感染者IL-1、TNF-α、IFN-γ、IL-2、β-hCG水平及胎膜早破发生率、不良妊娠结局发生率较无B族链球菌感染者高，IL-4、IL-10水平较无B族链球菌感染者低（P <0.05）；胎膜早破组患者IL-1、TNF-α、IFN-γ、IL-2、β-hCG水平较无胎膜早破组患者高，IL-4、IL-10水平及新生儿Apgar评分较无胎膜早破组患者低（P <0.05）；高IL-1水平［O^R=3.161（95% CI：2.551，3.916）］、TNF-α水平［O^R=1.985（95% CI：1.367，2.883）］、IFN-γ水平［O^R=1.526（95% CI：1.269，1.834）］、IL-2水平［O^R=1.809（95% CI：1.112，2.943）］及β-hCG水平［O^R=2.944（95% CI：1.819，4.765）］是胎膜早破发生的危险因素（P <0.05），高IL-4水平［O^R=0.397（95% CI：0.204，0.771）］与IL-10水平［O^R=0.545（95% CI：0.531，0.559）］是胎膜早破的保护因素（P <0.05）；预测胎膜早破的AUC IFN-γ> IL-2 >β-hCG> IL-4 > IL-1 > TNF-α > IL-10，截断值依次为>12.99 ng/ml（敏感性为61.90%，特异性为82.31%）、> 10.6 ng/ml（敏感性为85.71%，特异性为55.10%）、>13 280.64 IU/L（敏感性为90.48%，特异性为46.26%）、< 2.12 ng/ml（敏感性为71.43%，特异性为62.59%）、>0.4 ng/ml（敏感性为66.67%，特异性为69.39%）、>435.56 pg/ml（敏感性为95.24%，特异性为31.97%）、<2.12 ng/ml（敏感性为47.62%，特异性为73.47%）；IL-1、TNF-α、IFN-γ、IL-2、β-hCG水平与新生儿Apgar评分呈负相关，IL-4、IL-10水平与新生儿Apgar评分呈正相关（P <0.05）。结论 B族链球菌感染孕妇血清IL-1、TNF-α炎症因子与β-hCG水平较高，Th1/Th2失衡，检测外周血各指标水平，可预测胎膜早破的发生及妊娠结局。     

小鼠胶原诱导性关节炎模型的建立及其免疫学变化研究

目的 胶原诱导性关节炎模型(collagen induced arthritis,CIA)是研究类风湿性关节炎发病机制和治疗药物筛选的理想模型,也是目前国际上公认的关节炎模型.但是,目前鲜见Ⅱ型胶原诱导CIA模型的系统免疫学变化的报道.因此,本研究采用DBA/1小鼠诱导了CIA模型,并对其免疫学改变进行了系统研究.方法 将牛Ⅱ型胶原与完全弗氏佐剂混和并充分乳化,于DBA/1小鼠尾根部皮内注射进行初次免疫,20 d后同样方法进行再次免疫.应用千分尺测量CIA模型小鼠的左右两侧足掌厚度,并进行关节炎评分.酶联免疫吸附试验测定小鼠血清Ⅱ型胶原特异性抗体,Luminex技术和αLISA技术测定血清及培养上清中的细胞因子水平.结果CIA小鼠于造模后23 d开始,陆续出现前肢、后肢的红肿、功能障碍,发病率高达100％,且随着时间的延长其关节肿胀程度呈进行性加重,关节炎评分增高.CIA小鼠脾脏指数较正常组明显升高,且Ⅱ型胶原刺激的特异性T细胞增殖明显增强.细胞因子检测结果表明,脾细胞培养上清中IFN-γ和1L-4含量及IFN-γ/IL-4比值明显升高,TNF-α和IL-1β水平亦显著升高.此外,CIA小鼠血清中存在高水平的Ⅱ型胶原特异性抗体.结论 Ⅱ型胶原诱导CIA模型发病率高,免疫学改变以Th1细胞因子升高为主,兼有细胞免疫功能及体液免疫功能损伤.     

扶正胶囊提取物对环磷酰胺诱导的免疫低下小鼠免疫调节作用研究

[目的] 探讨扶正胶囊提取物对免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用。[方法] 将60只昆明小鼠进行随机分组,每组10只,分为空白组、模型组、阳性对照组以及扶正胶囊提取物低、中、高剂量组。采用环磷酰胺腹腔注射建立小鼠免疫功能低下模型,检测各组小鼠的胸腺指数和脾脏指数、单核细胞吞噬能力、血清中白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素10（IL-10）、白细胞介素-17（IL-17）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素-γ（IFN-γ）水平和脾T淋巴细胞亚群CD3⁺T淋巴细胞（CD3⁺）、CD4⁺T淋巴细胞（CD4⁺）、CD8⁺T淋巴细胞（CD8⁺）的分布与比例。[结果] 扶正胶囊提取物能提升由环磷酰胺诱导的免疫低下小鼠的胸腺指数和脾脏指数,增强单核细胞吞噬功能,显著提高小鼠细胞免疫因子IL-4、IL-10、IFN-γ含量,降低IL-17、TNF-α含量,上调脾淋巴细胞亚群CD3⁺CD4⁺的表达程度和提升CD3⁺CD4⁺/CD3⁺CD8⁺比值。[结论] 扶正胶囊提取物能够提升环磷酰胺所致的免疫抑制小鼠的免疫功能。     

重症肌无力患儿血清炎性介质水平及其与压力性损伤程度的相关性

目的 探讨重症肌无力患儿血清炎性介质水平及其与压力性损伤程度的相关性。方法 选取2017年10月至2019年10月于南京医科大学附属儿童医院就诊的重症肌无力伴压疮患儿87例进行对照研究,根据压力性损伤严重程度将患儿分成I期（11例）、II期（30例）、III期（25例）、IV期（21例）4组,比较不同程度压力性损伤患儿超敏反应蛋白（hs-CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、IL-1β水平差异,同时采用Spearman等级相关分析各炎性介质与压力性损伤程度的相关性。结果 I期、II期、III期、IV期压力性损伤重症肌无力患儿血清hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-1β水平比较,差异均有统计学意义（P<0.05）;Spearman相关性分析结果显示,血清hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-1β水平均与压力性损伤程度呈正相关（r=0.384、0.457、0.418、0.273,P<0.05）。结论 重症肌无力患儿血清hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-1β水平均与压力性损伤程度呈正相关。     

补骨脂素对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的改善作用

研究补骨脂素（psoralen，PSO）对四氯化碳（CCl₄）致小鼠急性肝损伤的改善作用及其机制。雌性C57BL/6J小鼠连续灌胃补骨脂素或阳性对照药烯丙基化硫（DAS） 4 d，第4天腹腔注射CCl₄，建立CCl₄致急性肝损伤小鼠模型。检测血清生化指标丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）水平；HE染色观察肝脏病理学变化；Western blot检测细胞色素P450 2E1（CYP2E1）的蛋白水平；免疫组织化学染色（IHC）检测CYP2E1的蛋白水平；RT-PCR检测CYP2E1以及炎症因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6 （IL-6）的基因水平。与模型组相比，补骨脂素能够改善CCl₄引起的炎性细胞浸润以及肝细胞坏死情况，显著降低血清ALT、AST水平，下调炎症因子TNF-α和IL-6的水平，抑制CYP2E1的蛋白表达。结果表明，补骨脂素对CCl₄致小鼠急性肝损伤具有改善作用，其机制可能是通过抑制CYP2E1的蛋白表达发挥药效作用。     

Th22细胞及血清IL-22水平与狼疮性肾炎患者疾病活动度评分的相关性

目的 初步探索狼疮性肾炎（LN）患者外周血Th22细胞及血清白细胞介素22（IL-22）的表达，及其与系统性红斑狼疮疾病活动度评分（SLEDAI）的相关性。方法 该研究纳入健康志愿者作为健康对照组（HC组）10例，LN组20例，系统性红斑狼疮（但肾脏未受到侵袭）SLE组20例，通过流式细胞术检测各组淋巴细胞亚群Th1和Th22水平，酶联免疫吸附试验检测各组血清IL-22水平，并分析LN患者IL-22与Th22的相关性，以及两项指标与SLEDAI评分的相关性。结果 LN组和SLE组的C反应蛋白、红细胞沉降率及免疫球蛋白高于HC组（P <0.05），血清补体C3和C4低于HC组（P <0.05）。3组Th1比较，差异无统计学意义（P >0.05）；LN组和SLE组Th22、IL-22水平高于HC组（P <0.05），但LN组与SLE组的Th22、IL-22水平比较，差异无统计学意义（P >0.05）。LN患者Th22与IL-22水平呈正相关（r =0.804，P =0.002），且Th22、IL-22与SLEDAI评分呈正相关（r =0.342和0.448，P =0.032和0.016）。结论 Th22、IL-22参与SLE和LN的发病，同时LN患者Th22与IL-22水平呈正相关，且均与SLEDAI评分呈正相关。     

威灵仙总皂苷抗类风湿性关节炎的作用机制

目的:对威灵仙总皂苷(TSRC)抗类风湿关节炎的作用机制进行研究.方法:利用刀豆蛋白A(ConA)诱导小鼠T淋巴细胞增殖模型;利用大鼠IL-1β、IL-2、TNF-α定量酶联检测试剂盒测定原发性佐剂性关节炎大鼠血清中IL-1β、IL-2、TNF-α的含量;利用氢氧化钾-甲醇溶液法测定原发性佐剂性关节炎大鼠肿胀足前列腺素E2(PEG2)的含量.结果:TSRC能抑制ConA诱导小鼠T淋巴细胞的增殖;降低大鼠佐剂性关节炎细胞因子(IL-1β、IL-2、TNF-α)的含量;降低佐剂性关节炎大鼠炎性肿胀足PGE2的含量.结论:TSRC可能是通过抑制T淋巴细胞的过度增殖、抑制细胞因子和PEG2来发挥抗类风湿性关节炎作用.     

双氢青蒿素通过调节Th17/Treg平衡改善银屑病小鼠皮损机制研究

目的验证双氢青蒿素(DHA)是否能改善咪喹莫特(IMQ)诱导的银屑病小鼠皮损, 并探讨其可能的机制。方法24只雌性BALB/c小鼠随机分为4组:空白对照组(Control组)、模型组(Model组)、25 mg/kg DHA治疗组(DHA-L组)、50 mg/kg DHA治疗组(DHA-H组)，每组6只。每天观测小鼠皮肤变化并进行PASI评分。连续给药6 d，取小鼠皮肤进行HE染色和Ki67免疫组织化学染色；流式细胞仪检测小鼠脾Th17细胞和调节性T细胞(Treg)；ELISA检测小鼠血清白细胞介素17A(IL-17A)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果IMQ成功诱导银屑病小鼠模型，DHA治疗后小鼠皮损改善，组织病理学改善，DHA-L和DHA-H组PASI评分及Ki67阳性细胞数量均低于Model组(P < 0.05)；Model组脾Th17细胞比例较Control组升高(P < 0.05)，DHA-L组和DHA-H组均较Model组降低(P < 0.05)；DHA-L组和DHA-H组脾Treg细胞比例较Model组升高(P < 0.05)；Model组血清IL-17A和TNF-α水平均较Control组升高(P < 0.05)，与Model组相比，血清IL-17A水平在DHA-L和DHA-H组均降低(P < 0.05)，而血清TNF-α水平仅DHA-H组降低(P < 0.05)。结论DHA可以改善IMQ诱导的银屑病小鼠皮损，其机制可能和调节Th17/Treg细胞平衡有关。     

IL-1、IL-6、TNF-α及IFN-γ在脾肾阳虚型溃疡性结肠炎模型大鼠血清及组织中的表达

目的 通过对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠血清及结肠组织中IL-1、IL-6、TNF-α及IFN-γ表达水平的检测, 探讨它们在UC发生发展过程中的作用。方法 采用灌服大黄水煎液+肌肉注射氢化可的松并结合TNBS(2,4,6-三硝基苯磺酸)+ 乙醇灌肠建立脾肾阳虚型UC动物模型。将60只大鼠随机分为空白组、脾肾阳虚型UC模型7、14d及21d组, 采用酶联免疫法检测各组大鼠血清及结肠组织中IL-1、IL-6、TNF-α及IFN-γ的含量。结果 与空白组比较, 脾肾阳虚型UC模型组大鼠血清及结肠组织中IL-1、IL-6、TNF-α及IFN-γ含量明显升高(P<0.05);尤以模型21d组最为明显。结论 促炎性细胞因子IL-1、IL-6、TNF-α及IFN-γ在脾肾阳虚型UC发病过程中起重要作用。     

CD_4~+T细胞在哮喘中的作用

哮喘是由多种细胞和细胞组分参与的呼吸道慢性炎症性疾患。其发病机制复杂,T淋巴细胞中CD4+T细胞在哮喘的发生发展中起重要作用。目前认为Th1/Th2失衡可导致Th2极化反应,并释放大量细胞因子产生呼吸道慢性炎症;CD4+CD25+调节性T细胞通过细胞接触和分泌细胞因子抑制哮喘的发展;Th17主要是通过分泌细胞因子参与炎性反应。     

T细胞在结核杆菌感染中的研究进展

结核病患者体内由CD4+T细胞分化而来的Th1、Th2和Th17细胞亚群失衡。Th1表达降低,Th2增加。Th17细胞分泌的细胞因子白细胞介素17、白细胞介素23水平升高,为结核病发病的重要机制之一。因此,Th1、Th2和Th17细胞及其相关因子可能为此类疾病的治疗提供新的靶点和途径。     

肺纤维化中细胞因子网络

目前,细胞因子网络在介导炎症及肺纤维化过程中所起的作用日益受到重视。根据分泌细胞因子不同将Th细胞分为I型辅助性T细胞（Th1）和Ⅱ型辅助性T细胞（Th2）两种类型。I型细胞因子具有抗纤维化作用,可抑制成纤维细胞的增殖及纤维的形成。Ⅱ型细胞因子可促进成纤维细胞的增生、导致胶原蛋白合成增加、抑制胶原蛋白的降解。有研究表明,肺纤维化形成过程中存在Th1和Th2细胞因子间的免疫失衡,从而促进了成纤维细胞激活、增生、细胞外基质沉积,最终导致肺纤维化。     

布地奈德鼻喷剂对变应性鼻炎患者血中IL-5和IL-12的影响

目的 探讨布地奈德鼻喷剂对变应性鼻炎患者Th 1/Th 2细胞因子平衡的影响.方法 采用ELISA法检测30例变应性鼻炎患者应用布地奈德鼻喷剂治疗前、治疗2周后以及20例健康体检者外周血Th2细胞因子IL-5和Th 1细胞因子IL-12水平.结果 变应性鼻炎患者治疗前后血中IL-5水平明显高于健康体检组,而IL-12水...     

流式细胞术检测人和小鼠Th细胞亚群

目的建立人和小鼠Th1和Th2细胞的检测方法,探讨两者在流式细胞仪检测方面的不同.方法采用PMA和离子霉素共同刺激外周血单个核细胞,观察在不同时间和不同剂量的PMA刺激下外周血T淋巴细胞CD3、CD4、CD8表达的变化;采用多色荧光共同标记分析技术检测外周血单个核细胞IL-4和IFN-γ的表达.结果在PMA和离子霉素共同刺激后4 h,人外周血T淋巴细胞表面CD4表达迅速下降,而小鼠T淋巴细胞表面CD4表达仅轻度下降;采用多色分析技术可以有效的检测Th1细胞和Th2细胞;采用CD3、CD8设门分析可以有效的区分人Th细胞;采用CD4设门可以有效区分小鼠Th细胞.结论人Th细胞检测宜采用4色染色分析技术,小鼠Th细胞检测采用3色染色技术即可.     

IFN-γ/TL-4在儿童免疫性血小板减少性紫癜中的表达

目的：分析儿童急性特发性血小板减少性紫癜（ITP）血中细胞因子IFN-γ/IL-4的含量,从细胞因子水平探索急性ITP患儿Th1/Th2细胞分化趋势,可望揭示其部分发病机理。方法：应用实验研究策略,选择急性ITP患儿发作期组30例,缓解期组28例,于同群体中选择健康儿童20名为对照组,用ELISA法检测血浆IFN-γ和IL-4含量,进行分析比较。结果：①IFN-γ血浆含量发作期组（269.33±13.03）pg/ml明显高于缓解期组（178.84±7.22）pg/ml和对照组（149.26±10.66）pg/m,且缓解期组亦高于对照组,差异均有统计学意义（P〈0.01,95%可信区间内不包含1）;②IL-4发作期组（12.34±1.14）pg/ml明显低于缓解期组（21.38±1.36）pg/ml和对照组（26.41±1.53）pg/ml,且缓解期组亦低于对照组,差异均有统计学意义（P〈0.01,95%可信区间内不包含1）。结论：血中IFN-γ增高,IL-4降低,显示儿童急性ITP存在明显的Th1优势分化现象。     

肾综合征出血热患者外周血Th1/Th2水平及意义

目的探讨肾综合征出血热(HFRS)患者外周血Th1/Th2细胞因子的水平及意义。方法采用放射免疫分析法(IRA)测定HFRS患者病程各期IL-2、IFN-γI、L-4I、L-10的水平。结果HFRS患者外周血IL-2、IFN-γI、L-10均见升高(P<0.05或<0.01),以低血压少尿期最为明显,IFN-γ增幅最大,IL-4在轻症组低血压少尿期和重症组发热期稍低于正常水平(P<0.05),其他各期均在正常范围。低血压少尿期IFN-γI、L-10水平轻症组高于重症组,病程前三期Th1/Th2比值均显著增高,以低血压少尿期增高最为明显。结论Th1/Th2平衡偏移引起免疫网络紊乱,免疫平衡偏向Th1类,细胞因子在HFRSV的致病与免疫过程中起重要作用。     

哮喘发病机理及Th1/Th2比例的关系

哮喘是一种慢性炎症性疾病 ,这一过程包括肥大细胞、嗜酸性粒细胞及Ｔ细胞的共同参与与激活 ,并伴随支气管高反应性及不同程度的气流阻塞。喘息、呼吸困难、咯痰这些临床表现以及不同程度的生理性气道阻塞和病理性支气管壁增厚是疾病的主要特征。过去３０年中 ,虽然人们付出了巨大的努力 ,进行了大量的调查研究 ,对哮喘的理解也逐渐深刻 ,但事实上至今仍未对哮喘下出精确的定义。因此人们对于哮喘的描述多于解释。哮喘一词在古希腊语中意为“气喘” ,故最早关于哮喘表现的描述为 :呼吸困难。近代研究者们则更多地注意到支气管哮喘是一种气道…     

溃疡性结肠炎患者Th17和Th1／Th2细胞亚群的研究

目的检测溃疡性结肠炎（Ulcerativecolitis,UC）患者外周血中辅助性T细胞亚群（Th1、Th2和Th17）数量和比例的变化,探讨其在UC发病机制中的作用。方法选择40例UC患者,分离外周血单核细胞（PBMc）,采用流式细胞术（FCM）检测Th1、Th2、Th17细胞的数量及Th1／Th2比值,用ELISA测定培养上清中IFN-γIL-4、IL-17水平,与同期选择的健康对照组比较并与患儿的病情进行相关性分析。结果UC患者PBMC中IFN-γ＋Th1细胞的数量、IL--γ7＋Th17细胞的数量均高于健康对照组[（27．0±2．9）％,（23．2±1．7）％,P〈O．05;（26．61±2．6）,（11．4±1．2）,P〈0．011;Th1／Th2比值高于健康对照组[（12．8±1．6）,（8．60±1．9）,P〈0．01],Th17细胞的数量与疾病程度呈正相关（P〈0．05,r=0．42）。结论IL-17＋Th17细胞与Th1／Th2比值变化可能参与UC患者的免疫学发病机制。     

地塞米松对哮喘小鼠气道炎症反应和STAT6表达的影响

目的：研究地塞米松对支气管哮喘小鼠急性气道炎症反应的作用及对信号转导子和转录激活子6（STAT6）表达的影响。方法：用免疫组织化学法检测给予地塞米松后哮喘小鼠肺组织中STAT6的表达。结果：哮喘组小鼠肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数、嗜酸粒细胞（EOS）绝对值显著高于对照组（P〈0.01）,上述炎症细胞计数地塞米松组比哮喘组明显减少（P〈0.01）。HE染色示地塞米松组小鼠气道炎症反应程度较哮喘组减轻。STAT6在气道上皮细胞表达,哮喘组气道上皮细胞中STAT6表达较对照组增加,地塞米松组STAT6表达与哮喘组比较明显减少,较对照组增加。支气管上皮细胞STAT6蛋白与BALF中的EOS绝对值呈显著正相关。结论：地塞米松可在一定程度上减轻哮喘小鼠的气道炎症反应,作用机制可能是通过下调肺脏组织中STAT6蛋白的过度表达,从而抑制依赖于STAT6/IL-4通路的急性气道炎症反应。