呼吸道合胞病毒疫苗的研究进展

呼吸道合胞病毒（RSV）是婴幼儿下呼吸道感染的最重要病原，膜表面融合蛋白F和粘附蛋白G是疫苗研究的重要内容，通常采用BALB /c小鼠作为实验模型，在BALB/c小鼠中进行了广泛的免疫病理学研究；该病毒的疫苗研究主要集中在活病毒疫苗、亚单位疫苗、DNA疫苗和病毒载体递送系统等领域；另外，不同佐剂对疫苗的免疫原性也有重要影响；目前，已有几个有希望的减毒活疫苗和两个蛋白疫苗正在进行临床试验。     

双黄连注射液抗呼吸道合胞病毒的实验研究

呼吸道合胞病毒(RSV)是引起婴幼儿毛细支气管炎和肺炎的主要病毒之一,对婴幼儿的健康构成严重威协。迄今尚无安全有效的疫苗和化学药物防治RSV感染。中药双黄连注射液是近年来应用于治疗婴幼儿肺炎的一种中     

呼吸道合胞病毒疫苗的研究进展

呼吸道合胞病毒(RSV)是婴幼儿下呼吸道感染的最重要病原,RSV也是造成老年人和免疫缺陷成人高患病率和死亡率的重要原因。因此,研制安全有效的RSV疫苗保护易感人群非常重要。感兴趣的科研工作者研究RSV疫苗已经有几十年的历史,然而至今尚未有成熟的疫苗上市,本文就有关呼吸道合胞病毒疫苗的研究从RSV生物学性状、动物模型建立和效果评价、疫苗研究进展进行归纳。     

金欣口服液阻断呼吸道合胞病毒入侵的实验研究

目的 研究金欣口服液含药血清时呼吸道合胞病毒入侵宿主细胞环节的影响.方法 在病毒和细胞接触期间采用转换温度方法观察金欣口服液含药血清对 RSV 黏附、侵入的影响.观察药物作用前后宿主细胞表面F蛋白的表达.结果 温度转换前(黏附阶段)加入金欣口服液含药血清,实验组和对照组OD值无差异;温度转换后(侵入阶段)加入金欣口服液含药血清组OD值明显升高,与对照组比有显著性差异.荧光标记的F蛋白位于感染细胞表面,RSV 感染后,细胞发生融合的部位荧光明显增强,金欣口服液含药血清作用后荧光减少.结论 金欣口服液拮抗呼吸道合胞病毒的机制之一是抑制病毒的膜融合,作用位点是病毒的F蛋白或其受体.     

呼吸道合胞病毒感染研究的新进展

呼吸道合胞病毒(简称RSV)于1956年首先从呼吸道感染的猩猩体内分离得到,在组织培养过程中因其繁殖时能引起明显的细胞融合现象而得名.RSV是一种RNA病毒,含有8种结构蛋白,其中,使病毒吸附于细胞的G蛋白和使细胞融合的F蛋白是该病毒的主要抗原决定簇,可诱导机体产生中和抗体和保护性抗体.以往认为RSV只有一个血清型,近年来用单克隆抗体和新分离的RSV试验,根据反应模式的不同,可将RSV分为A、B两大亚型.     

呼吸道合胞病毒逃逸宿主免疫监视与致气道炎症反应的机制

呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus,RSV）是世界范围内婴幼儿时期呼吸道感染的主要病原体,与小儿喘息反复发作密切相关。流行病学资料显示,RSV是我国儿童呼吸道感染住院首要原因,至今尚无有效预防疫苗及特异性的治疗方法。     

呼吸道合胞病毒肺炎

呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial vires,RSV)简称合胞病毒,是引起小儿病毒性肺炎最常见的病原,可引起间质性肺炎及毛细支气管炎.RSV属副黏液病毒科,电镜下所见与流感病毒类似,因其在组织培养中能形成特殊的细胞融合病变而得名.RSV为单股负链RNA病毒,在其表面有两个主要的糖基蛋白,G蛋白和F蛋白.G蛋白帮助病毒粘附在气道上皮细胞上,F蛋白具有使细胞融合形成多核巨细胞的能力.     

植物药抗呼吸道合胞病毒有效部位研究进展

呼吸道合胞病毒（Respiratory Syncytial Viruses,RSV）是造成婴幼儿呼吸道感染的最主要病毒性病原体之一,同时也是老年人、免疫缺陷者感染的一种主要病原。具有较强的传染性。目前西药治疗尚缺乏理想药物,亦无可靠疫苗。当前从植物中筛选有效成分已成为抗RSV新药研发的热点和趋势,鉴于此,文章就近10年来有关植物药抗RSV有效成分研究的文献进行了检索、整理、综述。     

呼吸道合胞病毒相关性细支气管炎的诊治和预防进展

急性毛细支气管炎(简称毛支)是婴幼儿时期最常见的急性下呼吸道感染性疾病,呼吸道合胞病毒(RSV)是引起小婴儿急性毛细支气管炎和肺炎最常见的病原体,达50%～90%。国内外对其诊治和预防进行了大量研究。多种药物被应用于临床,但迄今仍缺乏令人满意的治疗方法。本文就RSV 相关性毛支的诊疗和预防作一综述。一、病因和流行病学RSV 是副粘病毒科肺病毒属成员,由单股 RNA 组成,有15222个核苷酸,主要编码10种基因蛋白,包括3种跨膜蛋白(F、G、SH),3种核衣壳蛋白(N、P、L),2种基质蛋白(M1、M2)和2种非结构蛋白(NS1、NS2)。F 和 G 蛋白在感     

免疫磁珠纯化人呼吸道合胞病毒F蛋白方法的建立

目的 利用免疫磁珠分离技术(IMS)建立快速纯化人呼吸道合胞病毒(RSV)融合蛋白(F)的方法.方法 表达RSV F的重组腺病毒FGAd/F感染293细胞,收获细胞裂解液,利用兔抗人RSV多抗包被表面活化的免疫磁珠富集和纯化F蛋白,同时建立夹心ELISA,检测纯化的F蛋白浓度以及 F蛋白的回收率.结果 采用IMS成功纯...     

抗呼吸道合胞病毒单克隆抗体的制备及其病毒蛋白特异性的识别

应用呼吸道合胞病毒(RSV)武汉地方株滴鼻加用病毒感染的Hela细胞免疫Balb/C鼠,取脾细胞与来自实体瘤的SP2/0细胞融合,培育出分泌抗RSV单克隆抗体的杂交瘤细胞株8株其中3株有中和病毒作用。应用RSV感染Hela细胞作为RSV抗原建立了RSV的免疫转印方法,并应用免疫转印对各单抗的病毒蛋白特异性进行了初步识别:发现1株单抗识别RSV M蛋白,1株识别22 K蛋白,2株识别G蛋白,另外4株单抗的蛋白特异性尚待进一步研究确定。     

抗人半胱氨酸和甘氨酸富集蛋白2单克隆抗体的制备和鉴定

目的制备半胱氨酸和甘氨酸富集蛋白2(Cysteine and glycine-rich protein 2,CRP2)的单克隆抗体,探讨CRP2蛋白的生物学功能。方法利用重组CRP2蛋白为免疫原,免疫BALB/C小鼠,取免疫小鼠的脾细胞和同系小鼠的骨髓瘤细胞SP2/0进行常规融合,通过间接ELISA筛选和有限稀释克隆化,获得鼠抗CRP2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,通过ELISA,Western-blot和免疫共沉淀实验等方法对其特性进行鉴定。结果成功地建立了2株稳定分泌抗CRP2蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为F001和F002。两株单克隆抗体与重组抗原有较强的特异性反应。同时,两株单克隆抗体通过Western-Blot实验都能特异性地结合真核细胞内源性的CRP2蛋白,并且,两株抗体都可以应用于免疫共沉淀实验。结论获得了效价高、特异性好的CRP2蛋白的单克隆抗体,为CRP2的生物学功能研究奠定了基础。     

抗人PDCD10单克隆抗体的制备和鉴定

目的:制备鼠抗人程序性细胞死亡分子10(programmed cell death 10, PDCD10)的单克隆抗体,探讨PDCD10蛋白的结构和功能.方法:利用重组PDCD10蛋白为免疫原,免疫BALB/C小鼠,取免疫小鼠的脾细胞和同系小鼠的骨髓瘤细胞Sp2/0进行常规融合, 通过间接ELISA的筛选和有限稀释克隆化,获得鼠抗PDCD10蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,通过ELISA,Western blot和免疫荧光实验等方法对其特性进行鉴定.结果:成功地建立了3株稳定分泌抗PDCD10蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为5G1, 4F7和3H5.3株单克隆抗体的免疫球蛋白亚类分别为IgG1(4F7和5G1)和IgG2b(3H5).ELISA检测的单克隆抗体腹水效价可达1:10⁷.3株单克隆抗体与重组PDCD10蛋白有较强的特异性反应,而与大肠杆菌细胞裂解液以及谷胱苷肽-S转移酶(glutathione S-transferase,GST)没有交叉反应.同时,5G1单克隆抗体也能特异性地结合真核细胞内源性和超表达的PDCD10蛋白,免疫荧光竞争结合实验以及Western blot的结果证明3株PDCD10的单克隆抗体能够识别不同的抗原表位,内源性以及超表达的PDCD10蛋白主要定位在细胞核.结论:获得了效价高、特异性好的PDCD10蛋白的单克隆抗体,为PDCD10的生物学功能研究奠定了基础.     

抗RalB单克隆抗体的制备及初步应用

目的制备抗Ras相关蛋白RalB的单克隆抗体(McAb),探讨RalB蛋白在哺乳动物真核细胞中的表达,为进一步研究RalB功能奠定基础。方法以纯化的原核表达RalB蛋白免疫的BALB/c小鼠脾细胞与Sp2/0融合,通过间接ELISA的筛选和有限稀释克隆化,获得稳定分泌抗RalB蛋白的McAb的杂交瘤细胞株。通过免疫组织化学方法和Western-blot方法分别对RalB在组织中的表达及特异性进行鉴定。结果获得2株能高效分泌特异性McAb的抗RalB的杂交瘤细胞系F001,F002,其免疫球蛋白亚类均为IgG1。免疫组织化学实验结果表明RalB定位于肝癌细胞的细胞膜,Western-blot显示RalB在不同的肝癌细胞及正常肝细胞中均有表达。结论成功获得抗RalB的特异性的单克隆抗体,为进一步研究RalB与肿瘤的相关功能研究创造了条件。     

呼吸道合胞病毒单克隆抗体抵抗株的体内筛选

目的：Palivizumab（PZ）是目前唯一用于防治感染性疾病的单克隆抗体药物，主要用于预防高危患儿RSV感染。体外筛选获得的PZ逃逸株F基因发生众多突变，且在棉鼠体内完全抵抗大剂量PZ预防效应。本研究评估RSVPZ逃逸株在动物体内是否出现。方法：用环磷酰胺（CY）腹腔注射法制备免疫抑制棉鼠模型，鼻腔接种病毒前24h或后6周肌注15mg／kgPZ。感染后12周收集棉鼠肺脏，用逆转录PCR法扩增RSVF基因片断并克隆入质粒载体，测定克隆cDNA序列筛查F基因突变。结果：在5只接受PZ预防或治疗的棉鼠中，3只棉鼠肺内病毒为含有逃逸株和原型株的混合群体；来自上述3只棉鼠的F基因cDNA克隆中，超过50％显示与体外PZ逃逸株相同的F基因突变。从其中1只棉鼠肺脏中分离的病毒抵抗PZ中和效应。结论：RSV在环磷酰胺处理的棉鼠模型肺内复制时间明显延长，在PZ筛选压力存在情况下，PZ逃逸株可在体内产生，并可能导致PZ预防或治疗失效，提示今后有必要在PZ使用人群中长期监控逃逸株是否出现.     

重组人3型腺病毒六邻体蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

目的 制备抗人3型腺病毒六邻体蛋白的单克隆抗体并对单抗进行鉴定.方法 用纯化的重组六邻体蛋白免疫BALB/c小鼠.取其脾细胞与骨髓瘤细胞融合.经ELISA间接法筛选和克隆化培养,获得4株分泌抗腺病毒六邻体蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,纯化其腹水获得单抗.使用ELISA、Western blot和中和实验等方法鉴定单抗的敏感性、特异性以及中和活性.结果 ELISA和免疫印迹结果表明这4株单抗与腺病毒六邻体蛋白可以特异性结合.而且,4C6株单抗具有中和活性.结论 获得了4个单抗为腺病毒六邻体蛋白的单克隆抗体,可用于3型腺病毒的早期诊断和药物治疗的研究.     

Toll3受体在呼吸道合胞病毒感染中作用的实验研究

目的探讨呼吸道合胞病毒（RSV）感染人肺上皮A549细胞后,Toll样受体3（TLR3）的水平变化及其产生的I型干扰素的抗病毒作用。方法RSV感染体外培养的人肺上皮A549细胞,并给予TLR3特异性抗体处理,分别感染4h、8h、12h、16h和24h后收集各组细胞。未感染病毒的细胞作为对照组。lit—PCR法检测TLR3、IFN-α、IFN—β,RSVF蛋白的mRNA表达水平变化。结果RSV感染A549细胞后,TLR3、IFN—α、IFN-β,RSVF蛋白的mRNA表达量均升高且有时间依赖性。结论RSV感染A549细胞后可上调TLR3表达,其活化细胞介导产生的I型干扰素能起到抗病毒作用。     

抗人凋亡相关蛋白TFAR19的单克隆抗体制备及鉴定

目的：研制鼠抗人凋亡相关蛋白ＴＦＡＲ１９的单克隆抗体,以进一步探讨ＴＦＡＲ１９蛋白的结构与功能。方法：以纯化的重组人ＴＦＡＲ１９蛋白为抗原,免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,将ＴＦＡＲ１９蛋白免疫的小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞ＳＰ２／０进行细胞融合,经克隆筛选获得鼠抗人ＴＦＡＲ１９蛋白单抗的杂交瘤细胞株,以间接ＥＬＩＳＡ、Ｗｅｓｔｅｒｎ免疫印迹分析等方法进行单克隆抗体的鉴定。结果：获得了３株稳定分泌抗人ＴＦＡＲ１９单克隆抗体的杂交瘤细胞株（Ｃ１,Ｃ１０,２Ｃ１２）,其分泌的单抗效价高,特异性好,亲和力不一,免疫球蛋白亚类均为ＩｇＧ１。Ｗｅｓｔｅｒｎ免疫印迹分析证明ＴＦＡＲ１９蛋白在调亡细胞中高表达。结论：所获单抗能特异识别原核及真核细胞表达的ＴＦＡＲ１９蛋白,为进一步探讨ＴＦＡＲ１９蛋白的生物学效应提供了条件。     

Mapping epitopes of human papillomavirus type 16 L1 protein with a phage display epitope library

Ｍａｐｐｉｎｇｅｐｉｔｏｐｅｓｏｆｈｕｍａｎｐａｐｉｌｏｍａｖｉｒｕｓｔｙｐｅ１６Ｌ１ｐｒｏｔｅｉｎｗｉｔｈａｐｈａｇｅｄｉｓｐｌａｙｅｐｉｔｏｐｅｌｉｂｒａｒｙＬｉｕＴｉａｎｊｕ刘天菊，ＳｉＬüｓｈｅｎｇ司履生，ＷａｎｇＹｉｌｉ王一理，ＳｕｎＸｉａ...