电针对脑心综合征大鼠脑组织细胞凋亡及Caspase-3表达的影响

目的观察电针对脑心综合征(cerebral-cardiac syndrome,CCS)大鼠血肿周围脑组织细胞凋亡及Caspase-3表达的影响。方法从70只健康SD大鼠中随机选择10只作为假手术组,其余60只用于CCS模型复制。选取造模成功的大鼠30只,分为模型组、电针组和电针非经非穴组,每组10只。采用胶原酶加肝素联合注射大鼠尾状核方法造模,假手术组向大鼠尾状核注入等量0.9%氯化钠注射液。于造模第1天开始电针,电针组选取水沟、风府、内关和心俞穴,电针非经非穴组选取臀部非经非穴点4处,每次20min,每天1次,连续3天。假手术组和模型组仅每天抓空1次。分别采用TUNEL法和免疫组化法检测血肿周围脑组织细胞凋亡及Caspase-3表达。结果假手术组偶可见TUNEL细胞,Caspase-3少量表达;模型组血肿周围组织出现较多的TUNEL阳性细胞,Caspase-3大量表达;电针组TUNEL阳性细胞和Caspase-3表达均较模型组和电针非经非穴组明显减少(P<0.01)。结论电针可以抑制CCS大鼠脑组织细胞凋亡,其机制可能与下调血肿周围脑组织Caspase-3表达有关。     

奥拉西坦对脑出血大鼠的脑保护作用及对Caspase-3表达的影响

目的观察奥拉西坦对大鼠急性脑出血(ICH)血肿周围Caspase-3表达的影响,探讨奥拉西坦对脑出血大脑的保护作用。方法采用立体定位钻孔自体血注入法制备大鼠内囊出血模型,对照组只切开头皮,不做任何处理;模型组及奥拉西坦高、低剂量组分别给予相应药物腹腔注射,在6 h、12 h、24 h 3个时间点分别取材,通过免疫组化的方法检测Caspase-3蛋白的表达变化。结果手术组的大鼠较对照组Caspase-3蛋白的表达明显增多,其中奥拉西坦高、低剂量组Caspase-3蛋白表达较模型组明显减少(P均<0.01),奥拉西坦高、低剂量组Caspase-3蛋白表达比较有显著性差异(P均<0.05)。结论奥拉西坦可通过调节Caspcase-3免疫阳性细胞的表达,抑制脑出血周围神经细胞凋亡,促进细胞代谢,从而对脑出血大鼠大脑起保护作用。     

丹参注射液对实验性大鼠脑出血灶周围神经元凋亡的影响

目的 探讨丹参注射液对实验性大鼠脑出血灶周围神经元凋亡的影响.方法 应用脑立体定位仪将肝素化Ⅶ型胶原酶注人大鼠尾壳核建立脑出血模型.大鼠随机分为正常对照组、出血对照组和治疗组.分别在不同时间段观察大鼠神经行为学、凋亡蛋白Caspase-3的表达及神经元的超微结构变化等指标.结果 治疗组大鼠神经行为学评分较出血对照组明显减少(P＜0.05);治疗组Caspase-3阳性细胞数较出血对照组明显降低(P＜0.05);7 d治疗组Caspase-3阳性细胞数较3d治疗组降低(P＜0.05);电镜结果显示,治疗组与出血对照组比较,神经元细胞各结构形态相对完整.结论 丹参注射液对抑制大鼠脑出血灶周围神经元的凋亡具有较好的作用.     

电针对大鼠肾缺血再灌注损伤的疗效及对肾组织中caspase-3表达的影响

目的:探讨电针治疗对肾缺血再灌注大鼠肾功能及组织中Caspase-3表达的影响。方法:将30只清洁级健康SD雄性大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组(IRI组)和电针组,每组10只。采用右肾摘除,左肾肾蒂夹闭缺血45min后再灌注的方法制备动物模型。电针组于造模成功后给予电针肾俞和涌泉穴治疗。各组均于术后24h采用全自动生化分析仪检测血清尿素氮(BUN)和肌酐(Scr),观察肾组织病理形态学改变,TUNEL法检测肾组织细胞凋亡率和免疫组化检测肾组织细胞中Caspase-3的表达。结果:肾缺血再灌注后大鼠血清BUN和Scr明显升高,肾组织切片显示有明显的病理改变,肾组织细胞凋亡率及Caspase-3阳性细胞表达显著升高。与缺血再灌注组比较,电针组大鼠BUN和Scr显著下降,肾组织细胞凋亡率显著降低,Caspase-3阳性细胞的IOD值显著降低。结论:电针对IRI所致肾功能损害具有显著的保护作用,能够抑制Caspase-3蛋白表达,具有抑制细胞凋亡的作用,该作用可能是电针对IRI后肾脏保护作用的重要机制之一。     

长托宁对癫痫持续状态大鼠海马神经元保护作用研究

目的探讨长托宁干预对癫痫持续状态（SE）后大鼠海马神经元损伤的保护作用及其可能机制。方法54只Wistar大鼠随机分为A组（对照组）、B组（模型组）和C组（长托宁组）,后两组又分为6h、12h、24h、48h亚组。应用氯化锂-匹罗卡品制备SE模型。TUNEL法检测大鼠海马细胞凋亡,免疫组化法检测Bcl-2和Caspase-3的表达。结果SE后6h海马组织可见TUNEL、Caspase-3和Bcl-2阳性细胞表达,TUNEL和Caspase-3表达高峰均在24h;Bcl-2表达高峰在12h。C组各时间点TUNEL、Caspase-3阳性细胞较B组减少（除6h外,均P〈0.05）,而Bcl-2阳性细胞数增加（除6h外,均P〈0.05）。结论长托宁可以上调Bcl-2,下调Caspase-3,长托宁可能通过抑制SE后海马神经元凋亡的机制,减轻SE时脑组织损伤,起到脑保护作用。     

肾阳虚对实验大鼠胃窦粘膜组织凋亡及凋亡相关基因的影响

目的探讨G细胞异常凋亡对肾阳虚模型大鼠消化功能的影响。方法建立肾阳虚证模型大鼠的基础上,采用TUNEL法、免疫组化法检测胃窦粘膜组织的细胞凋亡、GAS分泌G细胞及其凋亡相关蛋白Caspase-3的表达,并以假手术组作为对照组,参附汤组作为治疗组。结果模型组大鼠胃窦粘膜组织细胞的AI显著升高;胃窦粘膜组织G细胞的平均光密度值显著下降;胃窦粘膜组织G细胞表达凋亡相关基因Caspase-3的百分率显著升高。参附汤组大鼠的各病理指标均明显好转。结论胃窦粘膜组织及G细胞的过度凋亡是肾阳虚影响消化功能的主要机制之一,参附汤可改善此病理改变。     

盐酸法舒地尔对大鼠癫痫持续状态海马神经元的保护作用

目的探讨盐酸法舒地尔对大鼠癫痫持续状态（SE）后凋亡的影响及其可能作用机制。方法将大鼠随机分成3组,对照组（A组）、模型组（B组）和盐酸法舒地尔组（C组）,对采用氯化锂-匹罗卡品诱发癫痫大鼠模型的海马神经元细胞,采用免疫组化法对TUNEL、XIAP及Caspase-9阳性细胞进行测定。结果模型组海马神经元细胞TUNEL、XIAP及Caspase-9较对照组明显增多（P〈0.05）;盐酸法舒地尔组TUNEL、Caspase-9较模型组明显减少（P〈0.05）,XIAP较模型组显著增加（P〈0.05）。结论 SE后海马神经元细胞内TUNEL、XIAP及Caspase-9表达均明显增加,盐酸法舒地尔能够减轻海马神经元细胞TUNEL、Caspase-9的表达,促进海马神经元细胞XIAP的表达。盐酸法舒地尔可能通过促进XIAP生成进而抑制Caspase-9表达,从而起到保护神经元的作用。     

脑脉Ⅱ号口服液对高血压脑出血大鼠脑组织细胞凋亡的抑制作用

目的 探讨高血压脑出血大鼠血肿周围脑组织细胞凋亡的时程变化规律，并观察中药复方制剂脑脉Ⅱ号口服液对细胞凋亡的影响。方法 70只SD大鼠随机分为正常组（5只）、假手术组（5只），模型组（30只）．治疗组（30只）。向双肾双夹肾血管性高血压大鼠右侧尾状核注入含0．4U胶原酶（Ⅶ型）的生理盐水2μL诱导脑出血。假手术大鼠与模型大鼠手术过程相同，仅向尾状核注入2μL生理盐水。注射后2h开始，每日灌胃给予脑脉Ⅱ号口服液（8mL／d，6倍临床等效剂量）或等容积蒸馏水直至处死。注射后6，12h，1，3，7，14d取脑。用末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记（TUNEL）法检测凋亡细胞并计数TUNEL阳性细胞，用流式细胞术检测血肿周围细胞凋亡百分率。结果 正常组和假手术组大鼠脑内可见极少量凋亡细胞。与假手术组比较，模型组TUNEL阳性细胞数在注射后6h显著增加（P〈0.01），3d达到高峰，7d以后明显下降，持续增加至14d后；细胞凋亡百分率的时程变化规律与TUNEL阳性细胞数的变化规律一致。注射后12h至14d各时间点，治疗组TUNEL阳性细胞数和细胞凋亡百分率均较模型组显著降低（P〈0．05）。结论 脑脉Ⅱ号口服液对高血压脑出血大鼠血肿周围脑组织细胞凋亡具有抑制作用。     

针刺对脑出血急性期血肿周围脑组织中凋亡细胞及其百分率影响的时效关系

目的:通过观察针刺对脑出血模型大鼠血肿形成后不同时间的血肿周围脑组织凋亡细胞及其百分率影响,研究针刺作用及其时效性的相关保护机制。方法:采用Wistar大鼠尾状核自体血缓慢注入法制作脑出血模型。脑组织细胞凋亡率测定分别应用TUNEL法及流式细胞术。结果:脑出血急性期TUNEL阳性细胞率显著升高,针刺各组均偏低,但高于假手术组,且针刺干预越早该比率越低;流式细胞检测结果基本与其一致。结论:针刺治疗能够改善脑出血急性期所造成的血肿周围脑组织相关的凋亡情况,从而在脑出血急性期起到保护脑组织的作用,且脑出血发生后针刺干预越早疗效越好。     

丹红注射液对大鼠脑缺血再灌注神经细胞凋亡的影响

目的观察丹红注射液对大鼠脑缺血再灌注（I/R）后大脑皮质缺血灶周围区Caspase-3、Survivin的时相表达及对神经细胞凋亡的影响。方法将Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、丹红注射液治疗组（治疗组）时检测,应用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞（MCAO）再灌注模型。假手术组于术后,模型组、治疗组于缺血2 h后再灌注6 h2、4 h、48 h、72 h时检测,应用免疫组化技术和原位末端标记法（TUNEL）检测不同时相各组缺血灶周围脑区Caspase-3、Survivin和TUNEL阳性细胞的表达。结果大鼠I/R后在缺血灶周围区各个时间点均可见到Caspase-3、Survivin和TUNEL阳性细胞的表达,治疗组与模型组比较,两组Caspase-3、Survivin和TUNEL阳性细胞的表达趋势基本一致,Caspase-3和TUNEL阳性细胞的表达高峰在I/R后24 h,Sur-vivin的表达高峰在I/R后48 h。治疗组各时间点Caspase-3和TUNEL阳性细胞的光密度值较模型组明显降低（P〈0.05）,Sur-vivin的光密度值较模型组明显升高（P〈0.05）。结论丹红注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤有保护作用,其作用机制可能与丹红注射液促进Survivin的表达,抑制Caspase-3表达,减轻迟发性神经元的凋亡有关。     

黄芩苷对脑出血大鼠脑组织凝血酶受体-1表达及细胞凋亡的影响

目的研究黄芩苷对大鼠脑出血后神经组织的保护作用及其机制。方法大鼠随机分为5组:假手术组、脑出血模型组、黄芩苷小、中、大剂量组,采用胶原酶Ⅶ诱导大鼠脑出血模型,术后2h各治疗组给予不同剂量的黄芩苷腹腔注射,余组给予等容量生理盐水,每天1次,连续用药1、3、5、10天后取脑组织,Western blot法检测脑出血周围脑组织凝血酶受体1(protease-activated receptor-1,PAR-1)表达,TUNEL法检测细胞凋亡情况,干湿比重法测定脑组织水肿情况。结果与脑出血模型组比较,黄芩苷各治疗组的大鼠脑组织PAR-1表达和TUNEL阳性细胞数明显减少、脑水肿减轻,差异均有统计学意义(P0.01)。结论脑出血后的脑组织PAR-1高表达可能介导了细胞凋亡和脑水肿,黄芩苷对脑出血大鼠有保护作用,可能参与抑制脑出血后脑组织PAR-1表达、减少细胞凋亡,从而减轻脑水肿症状。     

头针透刺对脑出血大鼠脑组织Caspase-3表达影响的研究

目的：观察头针透刺对脑出血大鼠脑组织Caspase-3的动态调控,探讨针刺对脑出血神经细胞凋亡的干预作用。方法：健康雄性Wistar大鼠48只,将其随机分为模型组和针刺组,制备ICH大鼠模型,另设6只大鼠作空白对照组,采用免疫组织化学法观察模型组和针刺组不同时间点Caspase-3的动态变化。结果：与模型组比较,针刺组血肿周围组织Caspase-3阳性细胞各时间点表达均显著下调。结论：针刺抑制Caspase-3表达,在干预脑出血神经细胞凋亡中发挥作用。     

三七总皂苷对脑出血大鼠细胞凋亡及Bcl-2和Bax表达的影响

目的探讨三七总皂苷对脑出血大鼠细胞凋亡及Bcl-2和Bax表达影响。方法将大鼠随机分为假手术组、脑出血组、三七总皂苷治疗组,用大鼠自体血脑内注入法建立脑出血动物模型。造模后72 h采用免疫组化法观察大鼠额顶部皮质Bcl-2和Bax蛋白表达,TUNEL法检测神经细胞凋亡。结果与假手术组比较,脑出血组凋亡细胞明显增加,Bcl-2和Bax表达增加;与脑出血组比较,三七总皂苷治疗组均显著凋亡细胞明显减少,增加Bcl-2表达、减少Bax表达。结论三七总皂苷对脑出血大鼠具有保护作用,其机制可能与通过增加Bcl-2表达,减少Bax表达,及抗凋亡有关。     

脑宁康颗粒对脑出血大鼠的脑保护作用

目的研究依据清热解毒法制成的脑宁康颗粒对脑出血大鼠脑组织的保护作用及机制。方法将大鼠随机分为5组：假手术组、脑出血模型组、脑宁康小、中、大剂量组,采用胶原酶Ⅶ诱导大鼠脑出血模型,术后2h各治疗组给予不同剂量脑宁康颗粒灌胃,余组给予等容量生理盐水,连续用药3天和7天后取脑组织,采用HE染色观察脑组织病理形态学改变,免疫组织化学法和TUNEL法分别检测脑出血周围组织凝血酶受体-1（PAR-1）的表达和神经细胞凋亡情况,干湿比重法测定脑组织水肿情况。结果脑出血大鼠脑组织PAR-1表达增强,各脑宁康治疗组脑组织病理形态明显改善,脑组织PAR-1表达减少,TUNEL阳性细胞数减少,脑水肿减轻,与模型组比较差异有显著性（P〈0.05,P〈0.01）。结论脑出血后的脑组织PAR-1高表达可能介导了神经细胞凋亡和脑水肿,脑宁康颗粒对出血脑组织有保护作用,可能与其抑制脑出血后脑组织PAR-1表达、减少细胞凋亡,从而减轻脑水肿相关。     

黄芪联合丹参注射液对大鼠脑出血半暗带区神经元凋亡抑制作用的研究

目的 探讨黄芪联合丹参注射液对大鼠脑出血半暗带区神经元凋亡的抑制作用.方法 应用脑立体定位仪于大鼠尾壳核注入肝素化Ⅶ型胶原酶建立脑出血模型.将大鼠随机分为正常组、出血对照组和治疗组.分别对各组大鼠进行神经行为学、吉姆萨(Giemsa)染色、免疫组化染色及细胞超微结构等实验观察.结果 各治疗组大鼠神经行为学评分较出血对照组明显减小(P＜0.05).各治疗组脑出血灶周围细胞凋亡数量及程度较出血对照组明显降低.与相应出血对照组比较,各治疗组Bcl-2阳性表达均明显升高(P＜0.05),Bax及Caspase-3阳性表达均明显降低(P＜0.05);与相应术后24 h给药治疗组比较,各术后6h给药治疗组Bcl-2阳性表达均明显升高(P＜0.05),Bax及Caspase-3阳性表达均明显降低(P＜0.05);与相应3d各时间给药治疗组相比,7d给药治疗组Bcl-2阳性表达均明显升高(P＜0.05),Bax及Caspase-3阳性表达均明显降低(P＜0.05).各治疗组与出血对照组比较,神经元细胞线粒体、核膜、内质网等结构相对完整.结论 黄芪联合丹参注射液对大鼠脑出血半暗带区神经元凋亡具有较好的抑制作用.     

逐痰通络汤对脑出血大鼠纤溶系统的影响

目的：探讨逐痰通络汤对脑出血大鼠不同时间点纤溶系统的影响。方法：大鼠随机分为脑出血组、假手术组和逐痰通络汤治疗组（2g/mL）;利用脑立体定位仪,于脑一侧尾状核注射胶原酶制作模型;分别于出血后1、2、3和7天分别进行前肢放置和角落转向试验;测定大鼠脑内血肿容积;ELISA法测定大鼠血浆t-PA、PAI-1和D-二聚体含量。结果：与ICH模型组相比,逐痰通络汤治疗组第3、7天显著降低脑血肿容积（P〈0.05或P〈0.001）;从第2天开始,显著性升高ICH大鼠血浆t-PA和D-二聚体含量（P〈0.01或P〈0.001）,同时降低血浆PAI-1含量,差异均有统计学意义（P〈0.05或P〈0.001）。结论：逐痰通络汤通过激活内源性纤溶系统的活性,减轻脑血肿,达到对脑出血大鼠的保护作用。     

中风胶囊对实验性脑出血大鼠保护机制的研究

目的：探讨中风胶囊治疗脑出血急性期的作用机制。方法：采用自体血注射法制作大鼠实验性脑出血模型，行末端脱氧核糖核酸转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）观测血肿周围细胞凋亡程度，行免疫组化法观测血肿周围白细胞介素-6（IL-6）蛋白的表达情况。并设立正常组，假手术组，模型组以及中风胶囊大（2．7g·kg^-1·d^-1），小（1．8g·kg^-1·d^-1）剂量组。结果：中风胶囊组能够抑制细胞凋亡，并降低血肿周围IL-6的阳性细胞比例数。结论：中风胶囊能降低脑组织中IL-6蛋白的含量，从而抑制细胞凋亡，具有减轻炎症，减轻脑组织损伤的作用。     

应用可视光组织氧监测急性心肌缺血模型的舌诊研究

目的观察急性心肌缺血大鼠模型的舌及心脏氧饱和度(stO2)变化以及对药物干预的反应。方法将健康SD雄性成年大鼠随机分为假手术组、模型组、西药组(美托洛尔0.2mg/kg)、大蒜素组(2.7mg/kg)、大蒜素普通脂质体组(2.7mg/kg)、大蒜素长循环脂质体组(2.7mg/kg)。制备急性心肌缺血再灌注大鼠模型,测验舌及心脏表面的stO2。结果在结扎前、给药后10min、再灌注5min时,心脏与舌比较,stO2下降更明显。从模型组能看出舌stO2在开胸手术后的各时间段与实验前比较都有明显下降。药物干预与舌stO2的影响不显著。除了假手术组以外,各组心脏stO2在结扎后和给药后,具有明显的下降,再灌注后则显著回升。结论急性心肌缺血可使舌stO2下降,但较心脏反应缓慢。本研究所选的药物对造模后stO2的影响不显著。     

大蒜素对二甲基亚硝胺诱发的肝纤维化大鼠的保护作用

目的　研究大蒜素对实验性肝纤维化大鼠的保护作用。方法　 SD大鼠随机分为 5组 :正常对照组、模型组(给等量蒸馏水 )、大蒜素 (11、2 2 mg/ kg)组、秋水仙碱 (0 .15 g/ kg)组。二甲基亚硝胺 (DMN)诱发大鼠肝纤维化模型 ,各组在造模开始时 ig给药 ,实验共进行 4 2 d。腹主动脉取血 ,制备血清 ,进行肝功能、血脂、肝细胞病理学检查。结果　大蒜素各组均能明显降低实验性肝纤维化大鼠血清丙氨酸转氨酶 (AL T)、谷草转氨酶 (AST) (P<0 .0 5、0 .0 1)水平 ,以大蒜素 2 2 mg/ kg组作用明显 ,而秋水仙碱对肝功能没有明显的改善作用 (P>0 .0 5 )。大蒜素均能明显降低血清甘油三酯 (TG)、胆固醇 (TC)水平 ,提高血清白蛋白 (AL B)含量。病理学检查结果 ,大蒜素组肝细胞的坏死、空泡变性、出血及脂肪沉积较模型组和秋水仙碱组明显减轻 ,炎症细胞明显减少。电镜检查结果显示 ,大蒜素 11mg/ kg组肝细胞坏死、自溶较模型组明显减轻 ,大蒜素 2 2 mg/ kg组肝细胞接近正常。结论　大蒜素对 DMN所致肝损伤具有保护作用。     

针刺对实验性脑出血大鼠脑组织bFGF表达的影响

目的:探讨急性脑出血后碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的动态表达及针刺的干预作用。方法:选取健康的雄性Wistar大鼠96只,随机分为模型组、模型加针刺组(针刺组)、模型加忆立福组(西药组)3组。每组又分为6h、24h、48h、72h和168h 5个时相点,每个时相点有6只大鼠,制备脑出血大鼠模型,采用Western免疫印迹技术观察头穴针刺治疗对脑出血bFGF的表达水平。结果:针刺组大鼠脑内bFGF蛋白表达在不同时相点均有显著上调,与模型组比较,均有显著性差异(P0.01),具有统计学意义。结论:上调脑内bFGF可能是有关针刺治疗脑出血一个机制,针刺可能通过使血肿周围脑组织内bFGF蛋白水平增加,从而减轻神经元损伤并促进神经修复与再生。