黄芪桂枝五物汤对阳虚寒凝型骨关节炎大鼠免疫及瘀血状态的影响

目的:通过观察大鼠免疫及瘀血状态的变化从而研究黄芪桂枝五物汤对阳虚寒凝型骨关节炎大鼠的影响。方法:50只大鼠随机分为正常组,模型组,塞来昔布组(20.82 mg·kg~(-1)),黄芪桂枝五物汤7 d组和黄芪桂枝五物汤14 d组(30 g·kg~(-1))。除正常组外,各造模组大鼠分别采用冷固法加游泳、隔日给食及寒冷环境刺激的方法复制阳虚寒凝型骨关节炎模型。造模结束前最后2周,各给药组分别按6 m L·kg~(-1)给药,黄芪桂枝五物汤14 d组ig给药14 d,其余各给药组分别ig 7 d,正常组及模型组予生理盐水ig 7 d。ig结束后,分别观察各组大鼠一般状态;量取膝关节周长,计算膝关节肿胀度;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠下肢膝骨关节的病理变化;取大鼠血液,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清液肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素~(-1)β(IL~(-1)β),血浆前列腺素E2(PGE2),血栓素B2(TXB2),6-酮前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)含量,生化法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠关机肿胀度明显升高,胶原纤维增粗、血管翳及炎性细胞浸润较为明显,大鼠血清TNF-α,IL~(-1)β,SOD及6-keto-PGF1α水平明显降低,PGE2,TXB2水平,TXB2/6-keto-PGF1α明显升高(P0.05,P0.01);与模型组比较,黄芪桂枝五物汤使造模后大鼠毛色变得柔亮,尾部瘀痕减轻,双下肢活动轻微受限,减少大鼠跛行;关节肿胀度降低,胶原纤维增粗、血管翳及炎性细胞浸润程度减轻,黄芪桂枝五物汤给药后使TNF-α,IL~(-1)β,SOD及6-keto-PGF1α水平升高(P0.05),PGE2,TXB2水平,TXB2/6-keto-PGF1α降低(P0.05)。结论:黄芪桂枝五物汤对阳虚寒凝型骨关节炎疗效确切,黄芪桂枝五物汤的作用效果与用药时间有关,其作用机制与抗炎及改善机体瘀血状态有关,并有可能通过抗炎细胞因子的调节作用影响机体瘀血状态。     

黄芪桂枝五物汤对阳虚寒凝型骨关节炎大鼠免疫相关细胞因子的影响

目的:研究黄芪桂枝五物汤对阳虚寒凝型骨关节炎大鼠CD4~+/CD8`+及相关细胞因子的作用。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、塞来昔布组、黄芪桂枝五物汤7 d组和黄芪桂枝五物汤14 d组,每组10只。除正常组外,各组大鼠均予冷固法复合外界环境刺激的方法复制阳虚寒凝型骨关节炎模型,共6周。造模结束前,各给药组分别灌胃给药,黄芪桂枝五物汤7 d组或14 d组分别给药7 d或14 d(30 g·kg-1),塞来昔布组给药7 d(20.82 mg·kg-1),正常组及模型组予生理盐水灌胃7 d,至造模结束。造模结束后,免疫组化法检测各组大鼠膝关节软骨诱导型一氧化氮合酶(i NOS),Ⅱ型胶原及转化生长因子-β1(TGF-β1)表达,取大鼠血液流式细胞法检测CD4~+/CD8~+,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组大鼠血液中白细胞介素-4(IL-4),C-反应蛋白(CRP)及胰岛素生长因子(IGF),低氧诱导因子1α(HIF-1α)含量。结果:与正常组比较,模型组CD4~+及CD4~+/CD8~+降低(P0.05),各用药组与模型组比较,黄芪桂枝五物汤14 d组和塞来昔布组CD4+及CD4+/CD8+升高(P0.05)。与正常组比较,模型组IL-4,CRP,HIF-1α及i NOS表达升高(P0.05),Ⅱ型胶原及TGF-β表达降低(P0.05);与模型组比较,各用药组Ⅱ型胶原及TGF-β表达升高(P0.05),IL-4水平降低(P0.05),黄芪桂枝五物汤14 d组CRP,i NOS及HIF-1α表达降低(P0.05),塞来昔布组CRP及i NOS(P0.05);各用药组之间,与塞来昔布组比较,黄芪桂枝五物汤7 d组和14 d组Ⅱ型胶原表达降低(P0.05),黄芪桂枝五物汤7 d组i NOS表达升高(P0.05)。IGF水平在各组无显著性差别。结论:黄芪桂枝五物可以调节机体免疫低下状态,并通过调节细胞因子IL-4及下游细胞因子i NOS,HIF-1α,TGF-β1等细胞因子水平的变化,对骨关节炎软骨细胞起正向修复作用。     

黄芪桂枝五物汤对膝骨关节炎大鼠软骨损伤及 NLRP3/Caspase1通路的影响

目的:探讨黄芪桂枝五物汤对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨损伤及核苷酸结合寡聚化结构域样受体3 (NLRP3)/天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase1)通路的影响。方法:将120只SD大鼠随机分成对照组、模型组、美洛昔康组、黄芪桂枝五物汤低、中、高剂量组。除对照组外,其余各组建立KOA软骨损伤模型。模型制备成功后对照组、模型组给予等体积的生理盐水;美洛昔康组给予40.0 mg/kg的美洛昔康溶液;黄芪桂枝五物汤低、中、高剂量组分别按20.0、40.0、80.0 mg/kg的剂量给予黄芪桂枝五物汤。实验结束后,进行大鼠关节炎症积分、KOA软骨Mankin's评分,测定机械痛阈(PWPT)及热刺激潜伏期(PWTL);测定膝关节软骨组织中NLRP3、Caspase1 mRNA及蛋白表达水平,白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平。结果:与对照组比较,模型组PWPT、PWTL降低(P0.05);关节炎症积分,Mankin's评分,NLRP3、Caspase1 mRNA及蛋白表达水平,IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白表达水平升高(P0.05)。与模型组比较,美洛昔康组和黄芪桂枝五物汤各剂量组PWPT、PWTL升高(P0.05);关节炎症积分,Mankin's评分,NLRP3、Caspase1 mRNA及蛋白表达水平,IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白表达水平降低(P0.05),且黄芪桂枝五物汤各剂量组存在明显的剂量-效应关系(P0.05)。与美洛昔康组比较,黄芪桂枝五物汤低、中剂量组PWPT、PWTL较低(P0.05);关节炎症积分,Mankin's评分,NLRP3、Caspase 1 mRNA及蛋白表达水平,IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白表达水平较高(P0.05);而黄芪桂枝五物汤高剂量组以上各指标差异无统计学意义(P0.05)。结论:黄芪桂枝五物汤能减轻KOA软骨损伤程度,其高剂量效果尤为明显;其机制与黄芪桂枝五物汤能降低炎症信号通路NLRP3、Caspase1 mRNA及蛋白的表达,进而抑制炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的表达有关。     

黄芪桂枝五物汤对胸痹阳虚寒凝证大鼠的心电图和血清酶的影响

目的观察黄芪桂枝五物汤对胸痹阳虚寒凝证大鼠的治疗作用。方法采用冰水游泳结合腹腔注射垂体后叶素的方法，建立胸痹阳虚寒凝证模型，观察各给药组注射垂体后叶素后不同时间点Ⅱ导联心电图T波变化以及血清乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸磷酸激酶（CPK）、大鼠血栓素B2（TXB2）和大鼠6－酮－前列腺素F1α（6-Keto-PGF1α）的变化。结果黄芪桂枝五物汤能明显对抗垂体后叶素引起的心电图变化，降低血清LDH、CPK的活性和TXB2的含量，提高6-Keto—PGF1α含量。结论黄芪桂枝五物汤对实验性胸痹阳虚寒凝证具有一定的治疗作用。     

黄芪桂枝五物汤对糖尿病周围神经病变大鼠模型AGEs/RAGE/NF-κB信号通路的影响

目的:研究黄芪桂枝五物汤对糖尿病周围神经病变大鼠模型晚期糖基化终产物(AGEs)/晚期糖基化终产物受体(RAGE)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响,探讨黄芪桂枝五物汤减轻糖尿病周围神经病变的作用机制。方法:以高脂饮食加腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导法,制作糖尿病周围神经病变大鼠模型。造模成功后,按照随机数字表法分成模型组、黄芪桂枝五物汤高、中、低剂量组、甲钴胺组,共5组,另设正常组,自第5周开始黄芪桂枝五物汤干预,采用黄芪桂枝五物汤高、中、低剂量组(19. 40,4. 85,2. 43 g·kg-1·d-1)连续灌胃12周;甲钴胺组采用甲钴胺0. 25 mg·kg-1·d-1灌胃。实验结束后,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测糖尿病周围神经病变大鼠血清白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测坐骨神经组织中RAGE,NF-κB p65 mRNA含量;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测坐骨神经组织中RAGE,NF-κB,磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)蛋白的表达变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清IL-1β,TNF-α含量,坐骨神经组织RAGE,NF-κB p65 mRNA含量,RAGE,NF-κB p65及p-NF-κB p65蛋白表达显著增加(P0. 01),p-NF-κB p65/NF-κB p65升高,p-NF-κB p65蛋白表达显著升高(P0. 01)。经黄芪桂枝五物汤干预后,与模型组比较,各给药组血清IL-1β,TNF-α含量,RAGE,NF-κB p65 mRNA含量,RAGE,NF-κB p65及p-NF-κB p65蛋白表达量均显著降低(P0. 01),黄芪桂枝五物汤高剂量组p-NF-κB p65/NF-κB p65显著降低(P0. 01),且呈剂量相关性,随黄芪桂枝五物剂量增加而效果明显。结论:黄芪桂枝五物汤可减轻糖尿病周围神经病变,其机制可能与阻断AGEs/RAGE/NF-κB信号通路中组织细胞表面RAGE的表达、抑制NF-κB激活及其引发TNF-α触发的氧化应激和过度炎症反应,从而避免细胞受损和功能紊乱有关。     

加味黄芪桂枝五物汤对急性痛风性关节炎大鼠NLRP3、IL-33和TGF-β1表达的影响

目的观察加味黄芪桂枝五物汤对急性痛风性关节炎大鼠NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、白细胞介素-33(IL-33)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法选择60只健康SPF级SD大鼠作为研究对象,随机选择15只作为正常组,右踝关节腔注射生理盐水;余45只采用右踝关节腔内注射微晶型尿酸钠溶液诱导建立急性痛风性关节炎模型后随机分为秋水仙碱组、中药组和模型组,各15只。秋水仙碱组、中药组和模型组大鼠分别在模型建立成功后24 h以灌胃给药方式接受秋水仙碱、加味黄芪桂枝五物汤和生理盐水,连续给药3 d。观察各组大鼠模型建立前24 h、模型建立后24 h、给药后24 h踝关节肿胀情况以及血清NLRP3、IL-33和TGF-β1水平。结果与正常组比较,秋水仙碱组、中药组和模型组大鼠建模后24 h和给药结束后24 h右踝关节肿胀度都显著增加(P 0.05);4组大鼠给药结束后24 h右踝关节肿胀度均显著低于建模后24 h(P 0.05)。秋水仙碱组、中药组和模型组大鼠给药结束后24 h右踝关节肿胀度两两比较,差异具有统计学意义(P 0.05),模型组最大,中药组最小。建模后24 h秋水仙碱组、中药组和模型组NLRP3 mRNA、血清IL-33和TGF-β1水平均显著高于正常组(P 0.05),但秋水仙碱组、中药组和模型组两两比较差异均无统计学意义(P 0.05)。秋水仙碱组和中药组大鼠给药结束后24 h的NLRP3 mRNA和血清IL-33水平均较建模后24 h显著降低(P 0.05),且中药组NLRP3 m RNA和血清IL-33水平显著低于秋水仙碱组(P 0.05)。模型组大鼠给药结束后24 h的NLRP3 mRNA和血清IL-33水平均较建模后24 h无显著变化(P 0.05),均显著高于秋水仙碱组和中药组(P 0.05)。中药组大鼠给药结束后24 h的血清TGF-β1水平显著升高(P 0.05),且显著高于同时间秋水仙碱组和模型组(P 0.05)。秋水仙碱组和模型组大鼠给药结束后24 h的血清TGF-β1水平较建模后24 h无显著变化(P 0.05)。结论加味黄芪桂枝五物汤可通过下调NLRP3表达抑制炎性反应,并上调保护性细胞因子TGF-β1表达等机制改善急性痛风性关节炎大鼠关节肿胀,其效果优于秋水仙碱。     

从免疫角度探讨黄芪桂枝五物汤对小鼠衰老皮肤瘙痒模型的影响

目的:研究黄芪桂枝五物汤对小鼠衰老皮肤瘙痒的作用,并从免疫学角度探讨衰老皮肤瘙痒的发病机制。方法:昆明种小鼠84只,随机分为7组,每组12只,分别为正常组,皮肤衰老组,皮肤衰老瘙痒模型组,苯海拉明组(0.65 mg·kg~(-1)),黄芪桂枝五物汤低、中、高剂量组(3.25,6.5,13 g·kg~(-1)),除正常组外,其余各组采用D-半乳糖125 mg·kg~(-1)连续颈背部皮下注射42 d建立皮肤衰老小鼠模型,在此基础上,行尾静脉注射右旋糖酐注射液1.25 mg·kg~(-1),复制出衰老皮肤瘙痒模型。观察黄芪桂枝五物汤ig给药7 d后对小鼠皮肤瘙痒反应的瘙痒潜伏时间及瘙痒次数。酶联免疫吸附法测定血清白细胞介素1β(IL~(-1)β),IL-4,蛋白酶激活受体-2(PAR-2),P物质(SP),显微镜下计数肥大细胞数目。结果:与正常组比较,皮肤瘙痒组及皮肤衰老瘙痒模型组瘙痒潜伏时间降低,及瘙痒次数明显升高,小鼠血清IL~(-1)β,PAR-2,P物质表达明显升高,PAR-2含量明显降低(P0.05);黄芪桂枝五物汤能明显延长衰老皮肤瘙痒小鼠瘙痒潜伏搔抓时间(P0.05),减轻皮肤瘙痒小鼠搔抓次数(P0.05)。用药后,各用药组小鼠血清IL~(-1)β,PAR-2,P物质表达较衰老皮肤瘙痒模型组降低(P0.05),IL-4水平较衰老皮肤瘙痒模型组显著升高(P0.05),肥大细胞较衰老皮肤瘙痒模型组显著性减少(P0.05)。结论:黄芪桂枝五物汤对衰老皮肤瘙痒模型作用显著,其减轻皮肤瘙痒的作用与调节免疫失衡状态有关。     

盆腔消症灌肠液对模型动物血浆血栓素和6-酮前列腺素的影响

目的:盆腔消症灌肠液对模型动物血浆TXB2和6-keto-PGF1α的影响。方法:采用苯酚胶浆制作致炎模型,分别设空白对照组、模型对照组、阳性药物对照组(相当于生药0.405g/kg体重)、盆腔消症灌肠液高剂量组(相当于生药1.171g/kg体重)、盆腔消症灌肠液低剂量组(相当于生药0.585g/kg体重),造模2周后,连续灌肠给药14d,心脏取血,采用放射免疫法测定血浆中TXB2、6-keto-PGF1α的含量。结果:模型组大鼠血浆TXB2含量及TXB2/6-keto-PGF1α比值显著高于空白组(P<0.01)、6-keto-PGF1α含量显著低于空白组(P<0.01);盆腔消症灌肠液高剂量组大鼠血浆TXB2含量及TXB/6-keto-PGF1α比值显著低于模型组(P<0.01)、6-keto-PGF1α含量显著高于模型组(P<0.01)。结论:盆腔消症灌肠液可以通过降低模型大鼠血浆TXB2含量及TXB2/6-keto-PGF1α比值、提高模型大鼠6-keto-PGF1α含量,显著改善模型大鼠的血瘀状态,对慢性盆腔炎的治疗有一定意义     

蒲黄、蒲黄炭与五灵脂配伍对血瘀模型大鼠血小板参数的影响

目的:考察蒲黄、蒲黄炭分别与五灵脂配伍对血瘀模型大鼠血小板参数的影响。方法:以云南白药为阳性药,空白组与模型组灌胃0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液,云南白药组与生品复方、炭品复方高(7.2 g·kg-1)、中(3.6 g·kg-1)、低(1.8 g·kg-1)剂量组灌胃相应的药物,连续给药7 d,第7天给药后皮下注射肾上腺素加冰水浸泡,复制大鼠急性血瘀模型,采用Born比浊法测定盐酸肾上腺素(ADP)诱导的血小板聚集率,采用ELISA法测定血淤模型大鼠血浆中TXB2、6-keto-PGF1α水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠血小板聚集率显著提高(P0.01),TXB2显著增加(P0.01),6-keto-PGF1α显著减少(P0.01)。与模型组比较,阳性药可显著抑制血瘀模型大鼠血小板聚集率(P0.01),使TXB2显著减少(P0.01),6-keto-PGF1α显著增加(P0.01);生品复方高、中、低剂量组可显著抑制血瘀模型大鼠血小板聚集率(P0.01,P0.05);炭品复方高剂量组可显著促进血瘀模型大鼠血小板聚集率(P0.01);生品复方高、中、低剂量组,炭品复方中、低剂量组均能使血瘀模型大鼠TXB2显著减少,6-keto-PGF1α显著增加(P0.01,P0.05)。与相同剂量下蒲黄炭品复方比较,蒲黄生品复方使血瘀模型大鼠TXB2显著减少,6-keto-PGF1α显著增加(P0.01,P0.05)。结论:蒲黄生品复方高、中、低剂量组,炭品复方低剂量组均可抑制血瘀模型大鼠的血小板聚集率,改善血浆中TXB2、6-keto-PGF1水平,从而表现出一定的活血作用,且相同剂量下生品复方作用优于炭品复方。炭品复方中、高剂量组可提高血瘀模型大鼠的血小板聚集率,这与蒲黄生品行血,炒炭后活血作用减弱的传统炮制理论相符合,为蒲黄在临床上的生熟异用提供了一定的参考。     

黄芪桂枝五物汤对胶原诱导型关节炎大鼠的作用机制研究

目的:探讨黄芪桂枝五物汤对胶原诱导型关节炎大鼠的作用机制。方法:选用Wistar大鼠60只,随机分为6组:正常组,模型组,治疗组(HGW低剂量、中剂量、高剂量),阳性对照组(枸橼酸托法替尼),以牛Ⅱ型胶原加弗氏完全佐剂建立胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠模型,测定大鼠经治疗30天后血液流变性;用酶联法测定血清IL-1β、GM-CSF、IL-3的变化。结果:与正常组相比,模型组大鼠造模4周后在30/s、1/s切变率下的全血黏度、200/s血浆黏度、红细胞聚集指数及血清IL-1β均显著升高(P﹤0.01),血清GM-CSF和IL-3显著降低(P﹤0.01);与模型组比较,黄芪桂枝五物汤中、高剂量组在全血黏度、IL-1β水平均显著降低(P﹤0.01或P﹤0.05),GM-CSF、IL-3水平均显著升高(P﹤0.01);与低剂量组比较,中、高剂量组及CP690550组在200/s、30/s切变率下的全血黏度、红细胞聚集指数水平均显著降低(P﹤0.05),高剂量组在GM-CSF水平与低剂量组之间有显著性差异(P﹤0.05),以200/s切变率下的血浆黏度水平来看,高剂量组治疗效果优于低剂量组。结论:黄芪桂枝五物汤能够改善CIA大鼠关节的炎症反应,其作用机制可能是通过改善血液循环而达到降低炎症反应的,且与剂量有一定关系。     

肾康灵对阿霉素肾病大鼠血栓素B2和6-酮-前列腺素F1α的影响

目的:观察益肾活血中药肾康灵对阿霉素肾病(AN)大鼠的干预作用及与血栓素A2(TXA2)和前列腺环素(PGI2)等的关系.方法:用阿霉素(ADR)诱导大鼠制作类似人类肾病模型,用强的松及肾康灵治疗,观察各组给药前后血液、尿液血栓素B2(TXB2)和6-酮-前列腺素1α(6-keto-PGF1α)及肾脏病理形态学等变化.结果:AN大鼠给药前尿蛋白显著增多,血清白蛋白(Alb)显著下降,胆固醇(Ch)和甘油三酯(TG)、血及尿TXB2和TXB2/6-keto-PGF1α比值显著升高,肾脏病理损害明显加重.给药后用药组大鼠上述指标都明显改善(P＜0.05或P＜0.01),血浆TXB2与尿蛋白呈中度负相关(r=0.644),与血浆6-keto-PGF1α呈中度正相关(r=0.52);尿液TXB2与尿液6-keto-PGF1α呈高度负相关(r=-0.737),肾脏病理损害明显减轻.结论:尾静脉注射ADR可以成功造成人类肾病病理模型,其临床表现和实验指标改变类似于中医的"肾虚血瘀"病变,TXB2和6-keto-PGF1α可作为中医肾虚血瘀证诊断和益肾活血法应用的客观指标,用益肾活血中药肾康灵能显著改善AN大鼠的肾虚血瘀证表现.     

茜草炭不同提取物对子宫出血模型大鼠影响的比较研究

目的:观察茜草炭不同提取物对子宫出血模型大鼠的影响,筛选茜草炭止血作用的最佳提取方式。方法:空白组与其余各组分别灌胃给予0.5%CMC-Na、戊酸雌二醇(2.5 mg·kg~(-1)),连续灌胃3周,以宫血宁为阳性药,对照组及模型组静脉滴注羧甲基纤维素钠(CMC-Na),其他各组静脉滴注给予相应的治疗药物,观察茜草炭醇提物、复合提取物、醇提后水提物以及水煎物对子宫出血模型大鼠血液流变学、血小板系统以及纤溶系统的影响。结果:与空白组比较,模型组大鼠低切变率下的全血黏度降低(P<0.05),TT、PT、APTT显著延长(P<0.05、0.01),FIB、6-keto-PGF1α含量显著增加(P<0.01),TXB2和6-keto-PGF1α/TXB2显著降低(P<0.05、0.01)。与模型组比较,茜草炭复合提取物可显著升高各切变率下全血黏度(P<0.05、0.01),水煎物显著提高低切变率下全血黏度(P<0.05);醇提物、复合提取物和醇提后水提物显著缩短TT、PT、APTT(P<0.05、0.01),水煎物显著降低APTT(P<0.05),醇提物和复合提取物显著增加FIB含量(P<0.05),复合提取物和醇提后水提物显著降低6-keto-PGF1α含量(P<0.05、0.01),显著升高TXB2含量(P<0.05),复合提取物显著升高6-keto-PGF1α/TXB2比值(P<0.05),复合提取物有效缓解子宫内膜增厚、出血现象。结论:茜草炭复合提取物止血作用强于茜草炭其他提取物,即复合提取法为茜草炭止血作用的最佳提取方式。     

茜草炭抗雌二醇致大鼠出血倾向的活性部位研究

目的:考察茜草炭各极性部位对子宫出血模型大鼠的止血作用。方法:空白组与其余各组分别灌胃给予0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)、戊酸雌二醇(2.5 mg·kg~(-1)),连续灌胃3周,以宫血宁为阳性药,对照组及模型组灌胃(ig)CMC-Na,阳性组、石油醚提取物组、乙酸乙酯提取物组、正丁醇提取物组和萃取剩余部位组分别ig相应的治疗药物,观察茜草炭各极性部位对子宫出血模型大鼠血液流变学、组织形态学、血小板系统和凝血系统的影响。结果:与空白组比较,模型组大鼠各切变率下的全血黏度降低(P0.01),TT、PT、APTT延长(P0.05、0.01),FIB、6-keto-PGF1α含量与ADP%升高(P0.01),6-keto-PGF1α/TXB2比值升高(P0.01),TXB2含量降低(P0.01)。与模型组比较,乙酸乙酯提取物组和正丁醇提取物组能显著改善模型大鼠全血黏度(P0.05,P0.01),缩短TT、PT、APTT(P0.05,P0.01),减低FIB、6-keto-PGF1α含量(P0.05,P0.01),乙酸乙酯提取物组显著升高TXB2含量(P0.05);石油醚提取物组和萃取剩余部位组均与ADP%具有改善模型大鼠全血黏度、缩短TT、APTT与PT,降低FIB和ADP%,降低TXB2含量与6-keto-PGF1α含量的趋势。结论:茜草炭乙酸乙酯提取物和石油醚提取物主要通过降低全血黏度、改善凝血功能以及促进血小板聚集功能发挥止血作用,为茜草炭止血有效部位。     

补阳还五汤及有效部位生物碱和苷对动脉血栓形成大鼠血浆血栓素A2、前列环素的影响

目的:探讨补阳还五汤及其有效部位生物碱和苷对大鼠动脉血栓形成及血浆血栓素A2(TXA2)和前列环素(PGI2)的影响.方法:对颈总动脉血栓模型大鼠分别给予补阳还五汤原方、生物碱、苷、低分子肝素和抵克利得,比较各组动脉血栓重量和血浆TXB2、6-keto-PGF1α的变化.结果:模型组可形成闭塞性血栓,TXB2升高(P＜0.05),6-kcto-PGF1α降低(P＜0.05).各药均可使血栓重量减轻.原方可使6-keto-PGF1α升高(P＜0.05),而对TXB2无显著影响.生物碱可降低TXB2(P＜0.05),升高6-keto-PGF1α(P＜0.05).苷、低分子肝素和抵克利得对TXB2和6-keto-PGF1α均无显著影响.结论:补阳还五汤原方、生物碱、苷、低分子肝素和抵克利得均有抗血栓作用.原方的作用与促进PGI2合成有关;生物碱的作用与抑制TXA2合成、促进PGI2合成有关.而苷、低分子肝素和抵克利得不是通过调节TXA2和PGI2合成发挥作用的.     

黄芪桂枝五物汤对糖尿病大鼠周围神经组织Trx及Txnip表达的影响

目的:研究黄芪桂枝五物汤对STZ大鼠坐骨神经Trx及Txnip表达的影响,初步探讨黄芪桂枝五物汤治疗糖尿病周围神经病变(DPN)的机制。方法:将链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠随机分为模型组、给药组,另取正常大鼠为对照组。8周后,采用Western blot法及实时荧光定量PCR法测定大鼠坐骨神经中Trx与Txnip表达。结果:Western bolt法显示模型组大鼠坐骨神经Txnip表达明显高于对照组(P0.01),给药组低于模型组(P0.01)。实时定量PCR法显示模型组大鼠坐骨神经Txnip表达明显高于对照组(P0.01),给药组低于模型组(P0.01)但高于对照组。而大鼠坐骨神经Trx表达中模型组明显低于对照组(P0.01),给药组高于模型组(P0.01)但低于对照组。结论:DPN大鼠坐骨神经存在Txnip系统异常,黄芪桂枝五物汤治疗糖尿病周围神经病变,其作用机制与抑制Txnip表达,提高Trx表达有关。     

美藤果油对高脂血症大鼠血脂的影响及对血管内皮细胞的保护作用

目的:研究美藤果油对高脂血症模型大鼠血脂的影响及对血管内皮细胞的保护作用。方法:采用高脂饲料喂食复制大鼠高脂血症模型,以美藤果油灌胃给药4周,检测大鼠血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、内皮素1(ET-1)、一氧化氮(NO)、血栓烷素B2(TXB2)、6酮前列腺素(6-keto-PGF1a)的含量。结果:美藤果油能明显降低大鼠血清中TC、TG、LDL-C(P<0.01或P<0.05),对HDL-C含量影响不显著;美藤果油能明显降低血清中ET-1含量(P<0.01或P<0.05),显著升高NO的含量(P<0.001),对TXB2和6-keto-PGF1α含量影响不显著;美藤果油能恢复NO/ET-1和6-keto-PGF1α/TXB2的比值(P<0.01或P<0.05)。结论:美藤果油具有调节高脂血症模型大鼠血脂的作用,并可通过调节ET-1、NO的含量,恢复NO/ET-1和6-keto-PGF1α/TXB2的比值产生保护血管内皮细胞的作用。     

电针对慢性应激抑郁大鼠血清6酮前列腺素F1α、血栓素B2、P-选择素水平的影响

目的通过实验证明电针抗抑郁治疗是否会对慢性应激抑郁大鼠血浆中的6-ketoPGF1α、TXB2、P-selectin产生影响,并与药物治疗的效果相比较,从而进一步阐明抑郁症影响心血管疾病的相关的病理、生理学机制。方法成年雄性健康SD大鼠80只,饲养1周后通过开野实验将水平运动和垂直运动不足30次或超过120只的大鼠剔除,剩余32只随机分为空白组、模型组、药物组和电针组,每组8只。给予不可预知的应激刺激21天制作慢性不可预测应激抑郁模型。药物组灌胃给予百忧解,电针组取"百会""印堂"穴平刺进针进行刺激。22天后行开野实验、糖水消耗实验并断头取血,采用ELISA法测定血浆6-keto-PGF1α、TXB2、P-selectin含量,采用高效液相色谱法检测海马和皮层组织中5-HT、DA、NE的含量。结果造模后各组大鼠间相对糖水消耗量、水平运动和垂直运动结果均有显著性差异(P0.05),模型组大鼠水平运动及垂直运动格数均显著低于空白组(P0.05),电针组大鼠运动格数显著高于模型组(P0.05)。各组大鼠海马组织中5-HT、DA、NE含量均有显著差异(P0.05),其中模型组5-HT、DA、NE含量均显著低于空白组(P0.05),药物组和电针组大鼠5-HT、DA、NE含量均显著高于模型组(P0.05)。各组大鼠血浆中6-keto-PGF1α、TXB2、P-selectin含量均有统计学差异(P0.05),其中药物组及电针组大鼠血浆中6-keto-PGF1α含量均显著高于模型组(P0.05),TXB2、P-selectin含量均显著低于模型组(P0.05)。结论电针治疗具有抗抑郁效果,可有效改善慢性应激抑郁大鼠的行为能力及海马组织中5-HT、DA、NE含量水平,并使其血浆中的6-keto-PGF1α含量升高,TXB2、P-selectin含量降低,进一步提示抑郁症可能通过影响6-keto-PGF1α/TXB2、P-selectin水平引起血小板活化,从而影响心血管疾病的发生及预后。     

黄芪桂枝五物汤对神经病理性疼痛大鼠脊髓CX3CR1表达的影响

目的研究黄芪桂枝五物汤对神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用及对脊髓背角和背根节中脊髓小胶质细胞趋化因子受体1(CX3CR1)表达的影响。方法将50只SD大鼠随机分为模型组、黄芪桂枝五物汤高剂量组、黄芪桂枝五物汤中剂量组、黄芪桂枝五物汤低剂量组、塞来昔布组,每组10只。所有大鼠均建立坐骨神经慢性缩窄性损伤神经病理性疼痛模型,术后模型组给予生理盐水10 mL/kg灌胃,黄芪桂枝五物汤高、中、低剂量组分别给予黄芪桂枝五物汤0.2 mL/kg、0.1 mL/kg、0.05 mL/kg灌胃,塞来昔布组给予塞来昔布30 mg/kg灌胃,均1次/d,连续14 d。分别在造模前及术后3,5,7,14 d采用热刺痛仪测定各组大鼠的热缩足反射潜伏期,用免疫组化法检测各组大鼠脊髓背角和背根节中CX3CR1表达情况,用荧光定量PCR法和Western blot法分别检测脊髓背角和背根节中CX3CR1 mRNA和蛋白的相对表达量。结果术后3 d各组大鼠热缩足反射潜伏期均较术前1 d明显缩短(P均<0.05),但模型组和塞来昔布组术后各时间段比较差异无统计学意义(P均>0.05);黄芪桂枝五物汤低、中剂量组从术后7 d开始、黄芪桂枝五物汤高剂量组从术后3 d开始热缩足反射潜伏期均明显长于模型组(P均<0.05)。免疫组化显示黄芪桂枝五物汤各剂量组脊髓背角和背根节中CX3CR1阳性细胞均显著少于模型组和塞来昔布组(P均<0.05),且黄芪桂枝五物汤高剂量组均明显少于黄芪桂枝五物汤低、中剂量组(P均<0.05),黄芪桂枝五物汤低、中剂量组间比较差异无统计学意义(P均>0.05)。模型组和塞来昔布组脊髓背角和背根节中CX3CR1 mRNA和蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P均>0.05);黄芪桂枝五物汤各剂量组脊髓背角和背根节中CX3CR1 mRNA和蛋白相对表达量均显著低于模型组和塞来昔布组(P均<0.05),且黄芪桂枝五物汤高剂量组均明显低于黄芪桂枝五物汤低、中剂量组(P均<0.05),黄芪桂枝五物汤低、中剂量组间比较差异无统计学意义(P均>0.05)。结论黄芪桂枝五物汤对神经病理性疼痛模型大鼠具有显著镇痛作用,其可能通过调控脊髓背角和背根节CX3CR1的表达发挥作用,且呈一定剂量依赖性。     

预先电针对实验性类痛经模型大鼠血浆血栓素B2及6-酮-前列腺素F_(1α)的影响

目的:观察电针预先介入对实验性类痛经大鼠血浆血栓素2(TXB2)及6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的影响,初步探讨经穴调控胞宫疼痛的特异性。方法:SD大鼠随机分为盐水组、模型组、三阴交组、血海组、悬钟组、非穴组。采用苯甲酸雌二醇和缩宫素制备类痛经模型。电针组给予电针20min,每日1次,连续3d,盐水组和模型组不予电针处理。末次电针后观察大鼠扭体反应,并检测血浆TXB2、6-keto-PGF1α的含量。结果:与盐水组比较,模型组扭体潜伏期显著缩短(P0.01),扭体评分显著增高(P0.05),血浆TXB2含量、TXB2/6-keto-PGF1α比值均显著升高(P0.05);与模型组比较,三阴交组TXB2/6-keto-PGF1α比值显著降低(P0.05);各电针组之间比较,三阴交组的扭体评分较血海组、非穴组显著降低(P0.05)。结论:预先电针三阴交穴可能通过调节血浆TXB2/6-keto-PGF1α的失衡,改善血管内环境,缓解平滑肌的痉挛状态,进而缓解胞宫疼痛,血海穴、悬钟穴、非穴的调节作用不明显,推测三阴交穴具有调控胞宫疼痛的相对特异性。     

崇明苦草水提物治疗早孕流产大鼠产后恶露不绝作用及机制研究北大核心CSCD

目的:研究崇明苦草水提物对早孕流产大鼠产后恶露不绝治疗作用及机制。方法:采用米非司酮12.4 mg/kg和米索前列醇0.13 mg/kg建立早孕流产大鼠模型,并将造模大鼠随机分为模型对照组、崇明苦草水提物1、2、4 g/kg组和阳性对照益母草膏3 mL/kg组,受孕大鼠正常生产作为正常对照组。连续给药7 d后,运用紫外分光光度法测定给药期间子宫出血量;血液流变仪检测血流变学变化;测定活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)和纤维蛋白原(FIB)等凝血四项指标;HE染色法观察子宫组织病理学变化;免疫组化染色CD34检测子宫微血管密度(MVD);ELISA法测定血浆血栓素(TXB2)和6-酮前列腺素(6-keto-PGF1α)含量,Westren Blot法和RT-PCR法检测子宫组织血管内皮生长因子(VEGF)蛋白和mRNA表达。结果:与正常对照组相比,模型对照组大鼠子宫出血量显著增多,子宫内膜损伤显著,全血黏度和血浆黏度显著上升,APTT、PT、TT显著延长(P<0.01),而FIB含量显著降低(P<0.01),大鼠子宫宫腔黏膜上皮不完整、黏膜有皱襞或宫腔中有脱落物,内膜明显增厚,子宫中MVD显著减少(P<0.01),血浆TXB2含量显著降低(P<0.01),而6-keto-PGF1α含量显著升高(P<0.01);TXB2/6-keto-PGF1α的浓度分数显著降低(P<0.01),子宫组织Vegf mRNA和蛋白表达显著上调(P<0.01);与模型对照组相比,崇明苦草水提物2、4 g/kg组子宫出血量明显减少,全血黏度降低,凝血时间缩短(P<0.05或P<0.01),而FIB含量明显升高(P<0.05或P<0.01),残留的蜕膜组织和绒毛减少,子宫内膜修复较好,MVD明显增加(P<0.05或P<0.01),血浆中TXB2含量明显升高,6-keto-PGF1α的含量明显降低(P<0.05),TXB2/6-keto-PGF1α的浓度分数明显增加(P<0.05或P<0.01);崇明苦草水提物各组均明显下调子宫组织VEGF蛋白表达(P<0.05或P<0.01);4 g/kg组子宫组织中Vegf mRNA过度表达显著下调(P<0.01)。结论:崇明苦草水提物显著改善产后恶露不绝,其功能与促进子宫内膜修复,加速止血,减少淤血形成相关。