不同电针刺激对SAMP8小鼠学习记忆能力及大脑皮层APP、ApoE mRNA表达的影响

目的：探讨脉冲电针和音乐电针治疗阿尔茨海默病（AD）的可能作用机制,并比较两种电针的疗效差异。方法：将SAMP8小鼠随机分为模型组、脉冲电针组和音乐电针组,SAMR1小鼠作为正常组。两电针组均给予电针百会穴、印堂穴20min后,点刺水沟穴。治疗结束后,以Morris水迷宫测定小鼠学习记忆能力,实时荧光定量PCR法测定小鼠大脑皮层中APP、ApoE mRNA表达量。结果：与模型组比较,音乐电针组、脉冲电针组逃避潜伏期分别在第4天、第5天明显下降（P〈0．05）,目标象限游泳时间均增加（P〈0．05）;脉冲电针组、音乐电针组大脑皮层APP mRNA表达量均显著下降（P〈0．05）。结论：脉冲电针和音乐电针均可改善SAPM8小鼠学习记忆能力;脉冲电针和音乐电针可能通过下调APP mRNA表达发挥抗痴呆作用。     

“通督启神”法两种电针对APP/PS1小鼠额叶皮层小胶质细胞TNF-α表达的影响

目的：观察“通督启神”法不同电针对APP/PS1 小鼠学习记忆能力及额叶皮层MG与TNF-α表达的影响,探讨不同电针治疗AD的疗效差异及其作用机制。方法：APP/PS1小鼠随机分为模型组、脉冲电针组和音乐电针组,C57BL/6小鼠为正常对照组,每组8只。先取“人中”点刺,后取“百会”、“印堂”二穴,连接脉冲电针及音乐电针,留针20min。正常对照组与模型组同样方法束缚20min。治疗15天后,用Morris水迷宫检测小鼠的行为学变化,免疫组化观察小鼠额叶皮层小胶质细胞活化情况,Western Blot检测小鼠额叶皮层TNF-α的表达含量。结果：“通督启神”法不同电针均可显著改善APP/PS1小鼠的学习记忆能力（P<0.05）,降低AD小鼠额叶皮层小胶质细胞标记物Iba-1的表达（P<0.05）及TNF-α蛋白的表达（P<0.05）,且音乐电针组均优于脉冲电针组（P<0.05）。结论：“通督启神”法不同电针可有效改善APP/PS1小鼠学习记忆能力,抑制小胶质细胞活化、减少TNF-α的分泌,且音乐电针在改善额叶皮层炎性反应方面优于脉冲电针,对AD有更好的治疗效果。     

电针足三里对AD小鼠大脑皮层APP和Aβ表达的影响

目的:探究电针足三里对老年痴呆小鼠大脑皮层β-淀粉样肽前体蛋白(APP)及β-淀粉样肽蛋白(Aβ)表达的影响。方法:将快速老化小鼠SAMP8随机分为模型组、电针组和非穴组,并设同源SAMR1小鼠作为对照组。电针组给予足三里电针干预,非穴组针刺双侧固定非穴位点。应用免疫组织化学SABC法观察各组小鼠大脑皮层APP及Aβ的表达情况。结果:SAMP8大脑皮层内APP和Aβ蛋白呈较高表达的状态,电针治疗后明显下调,与模型组、非穴组相比,差异有统计学意义(P0.01);而非穴组与模型组相比,各指标差异无统计学意义(P0.05)。结论:电针足三里能有效改善AD,其机制可能与其下调AD小鼠大脑皮层APP及Aβ蛋白水平的表达有关。     

“通督启神”法电针对APP/PS1双转基因小鼠大脑皮层HIF-1α、BNIP3表达的影响

目的：观察“通督启神”法电针对阿尔茨海默病（AD）模型小鼠空间学习记忆能力和大脑皮层HIF-1α、BNIP3表达的影响，探讨其治疗AD的作用机制。方法：30只6月龄APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、电针组、电针+抑制剂组，用10只相同遗传北京的C57BL/6小鼠作为正常对照组。采用Morris水迷宫观察各组小鼠行为学变化；免疫组化DAB染色方法观察各组小鼠大脑皮层HIF-1α、BNIP3、Beclin1表达情况；Western blot检测各组小鼠大脑皮层HIF-1α、BNIP3、Beclin1、PI3K的表达含量。结果：在隐蔽平台实验中，电针组逃避潜伏期低于模型组（P＜0.05）和电针+抑制剂组（P＞0.05），电针+抑制剂组较模型组有下降趋势（P＞0.05）；在空间探索实验中，电针组目标象限进入次数和游泳距离明显大于模型组和电针+抑制剂组，电针+抑制剂组较模型组有上升趋势（P＞0.05）；免疫组化DAB染色结果表明，电针组HIF-1α、BNIP3表达高于模型组和电针+抑制剂组（P＜0.05），电针+抑制剂组较模型组有上升趋势（P＞0.05）；WesternBlot检测结果表明，电针组HIF-1α、BNIP3表达均高于模型组和电针+抑制剂组（P＜0.05），电针+抑制剂组较模型组相比有上升趋势（P＞0.05）。结论：“通督启神”法电针能够提高APP/PS1小鼠的空间学习记忆能力，并增加大脑皮层HIF-1α、BNIP3的表达，可能与增加线粒体自噬机制相关。     

电针对APP/PS1小鼠行为学及大脑皮层Klotho基因表达的影响

本研究通过观察APP/PS1小鼠大脑皮层Klotho基因的表达及其空间学习记忆能力,探讨电针治疗阿尔兹海默病（AD）的机理。方法：APP/PS1双转基因小鼠,随机分为模型组、电针组（百会穴、印堂穴、人中穴）,以C57BL/6野生型小鼠作为对照组;采用Morris水迷宫进行空间记忆行为学测试,以免疫组化法观察皮层Klotho蛋白表达趋势,real-timePCR技术检测大脑皮层Klotho mRNA表达水平。结果：与对照组相比,模型组逃避潜伏时间增加、平台穿越次数、平台象限游泳路程减少;与模型组相比,电针组逃避潜伏时间明显减少。与正常组相比,模型组大脑皮层Klotho mRNA表达减少;与模型组相比,电针组Klotho mRNA表达增加。Real time PCR结果与免疫组化所示表达趋势一致。结论：电针可提高APP/PS1小鼠的空间记忆能力,其机制可能与上调Klotho mRNA表达有关。     

电针联合二甲双胍对APP/PS1小鼠认知功能和老年斑的影响

目的:比较分析电针、二甲双胍和二者联合对APP/PS1小鼠认知功能的影响,探索一种更优的治疗方式。方法:将3月龄雄性APP/PS1小鼠随机分为模型组、药物组、电针组和针药联合组,每组6只;另选取6只同月龄雄性野生C57小鼠作为对照组。电针组选取"百会""肾俞"穴行电针干预,15 min/次,1次/d,每周休息1 d;药物组予二甲双胍300 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃治疗;针药联合组行药物和电针共同干预,均连续干预4周。采用Morris水迷宫实验检测小鼠认知功能,HE染色观察大脑皮层及海马神经元形态,免疫组织化学法观察大脑皮层及海马老年斑(SPs),Western blot法检测大脑皮层及海马中与SPs形成密切相关的β-分泌酶(BACE1)和胰岛素降解酶(IDE)的表达。结果:与对照组相比,模型组小鼠逃避潜伏期延长(P0.01),穿越原平台次数减少(P0.01),大脑皮层及海马神经元排列紊乱,形态不完整,SPs数量明显增加(P0.01),BACE1蛋白表达明显升高(P0.01),IDE蛋白表达明显降低(P0.01)。与模型组相比,药物组、电针组和针药联合组小鼠逃避潜伏期缩短(P0.01),穿越原平台次数增加(P0.01),海马神经元形态、数量、排列改善,大脑皮层及海马区SPs数量减少(P0.01),BACE1蛋白表达降低(P0.01),IDE蛋白表达升高(P0.01)。与药物组和电针组相比,针药联合组小鼠认知功能、大脑皮层及海马区SPs的数量、BACE1和IDE蛋白表达等的变化更显著(P0.01)。结论:针药联合治疗改善AD小鼠的认知功能及SPs的效果更好,可能与调节BACE1和IDE生成过程有关。     

不同电针对快速老龄化痴呆小鼠行为学和海马星形胶质细胞的影响

目的：探讨音乐电针和脉冲电针对快速老龄化（SAMP8）小鼠行为学和海马星形胶质细胞的影响,对比观察其抗痴呆的作用机制。方法：8月龄雄性SAMP8小鼠共30只,随机分为模型组,音乐电针组,脉冲电针组（n=10）,以同源的正常老化（SAMR1）小鼠为空白组（n=10）,选取“百会”、“印堂”、“人中”,每天针刺干预1次,共15天。采用Morris水迷宫观察各组小鼠学习记忆能力变化,运用免疫组化法观察海马GFAP的表达, Western blot检测海马GFAP的蛋白水平。结果：Morris水迷宫提示：与空白组相比,模型组的逃避潜伏期延长 （P < 0.01）,空间探索实验游泳距离增长（P < 0.01）;与模型组相比,音乐电针组和脉冲电针组逃避潜伏期缩短（P < 0.01,P < 0.05）,游泳路程缩短（均P < 0.05）。免疫组化结果：与空白组相比,模型组海马CA1区GFAP平均光密度明显增多（P < 0.01）;与模型组相比,音乐电针组和脉冲电针组海马CA1区GFAP平均光密度均明显降低（均P < 0.01）,且音乐电针组GFAP平均光密度低于脉冲电针组（P < 0.05）。Western blot检测：与空白组相 比,模型组海马GFAP蛋白表达明显增多（P < 0.01）;与模型组相比,音乐电针组和脉冲电针组GFAP蛋白表达有明显变浅和下降趋势（均P < 0.05）;音乐电针组GFAP蛋白表达明显低于脉冲电针组（P < 0.05）。结论：音乐电针和脉冲电针均可改善SAMP8小鼠学习记忆能力,降低GFAP的表达,可能与其减轻神经炎性反应、改善凋亡,最终达到保护神经元的机制有关,且音乐电针有优于脉冲电针的趋势。     

电针足三里干预快速老化痴呆鼠大脑APP及Aβ蛋白表达的实验研究

目的：研究电针足三里穴对快速老化痴呆鼠（SAMP8）海马中β-淀粉样肽前体蛋白（APP）及β-淀粉样肽蛋白（Aβ）表达水平的影响,探讨电针足三里防治老年性痴呆（Alzheimer’s disease,AD）的作用机制。方法：将18只SAMP8随机分为三组：模型组、电针组及非穴组,每组各6只,并设正常对照组（SAMR1）。电针足三里干预结束后,应用免疫组化的方法检测各组小鼠海马中APP及Aβ蛋白的表达情况。结果：电针组APP及Aβ蛋白的表达水平下调,明显低于模型组及非穴组（P〈0.05）;而模型组与非穴组间APP及Aβ蛋白的表达水平差异无显著性（P〉0.05）。结论：电针足三里可降低SAMP8脑部APP及Aβ蛋白的表达水平,从而抑制老年斑及神经原纤维缠结形成,改善痴呆鼠的智能状态,这可能是针刺足三里治疗改善AD的重要机制。     

音乐电针和脉冲电针对快速老龄化SAMP8小鼠行为学和血清Aβ蛋白的影响

目的：对比观察音乐电针和脉冲电针对快速老龄化SAMP8小鼠血清Aβ1-40和Aβ1-42蛋白的影响,探讨不同电针治疗老年性痴呆的作用机制。方法：8月龄雄性SAMR1和SAMP8小鼠共70只,随机分为7组,即：正常组,模型组,音乐组,音乐电针组,电针组,非穴位组和药物组,每组10只。采用Mirrors水迷宫观察各组小鼠的学习记忆能力;采用酶联免疫法检测小鼠血清Aβ1-40和Aβ1-42的表达。结果：与正常组相比,模型组的逃避潜伏期和游泳距离明显延长（P〈0.01）;与模型组相比,音乐电针组、脉冲电针组和药物组的逃避潜伏期和游泳距离明显缩短（P〈0.05）。与正常组相比,模型组血清Aβ1-40和Aβ1-42的含量明显升高（P〈0.01）;与模型组相比,脉冲电针组和药物组的Aβ1-40和Aβ1-42的含量降低（P〈0.05）;音乐电针组Aβ1-40和Aβ1-42的含量明显降低（P〈0.01）。结论：音乐电针和脉冲电针均能够改善SAMP8小鼠的学习记忆功能,具有一定的抗老年性痴呆的功能;但音乐电针在降低Aβ蛋白方面优于脉冲电针,这可能是音乐电针发挥其治疗作用的途径之一。     

基于“肾脑相济”理论的电针疗法对痴呆小鼠脑内β-淀粉样蛋白及中性内肽酶表达的影响

目的:探讨基于"肾脑相济"理论的电针疗法对快速老化SAMP 8小鼠大脑颞叶皮层β-淀粉样蛋白(Aβ)含量及中性内肽酶(NEP)表达的影响,探讨电针治疗阿尔茨海默病(AD)的可能机制。方法:将8月龄雄性快速老化SAMP 8小鼠随机分为模型组、电针组、美金刚组,每组6只。使用同月龄正常老化SAMR 1小鼠6只作为对照组。电针组电针小鼠"百会""肾俞""太溪"穴,每次15min,每日1次,治疗8周,美金刚组予美金刚灌胃(20mg·kg-1·d-1),连续8周。采用ELISA法、免疫组织化学法、Western blot法观察小鼠大脑颞叶皮层内Aβ含量和NEP的表达水平。结果:与对照组比较,模型组小鼠大脑颞叶皮层内Aβ1-40和Aβ1-42含量明显增高,NEP表达水平明显下降(P0.05);与模型组比较,电针组和美金刚组小鼠大脑颞叶皮层内Aβ1-40和Aβ1-42含量明显下降,NEP表达水平明显上升(P0.05);电针组与美金刚组各指标比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:"肾脑相济"电针疗法对SAMP 8小鼠大脑颞叶皮层中NEP表达有较好的调控作用,能抑制脑内Aβ的生成,从而防治AD。     

二苯乙烯苷对SAMP8小鼠学习记忆能力的改善作用

目的:探讨二苯乙烯苷(TSG)对老年痴呆模型SAMP8鼠学习记忆能力的影响。方法:6月龄SAMP8鼠50只,随机均分为SAMP8空白组,阳性药石杉碱甲对照组,高、中、低TSG组;6月龄SAMR1鼠10只为正常对照组。各组分别灌胃相应药物45d后,采用Morris水迷宫方法,以逃避潜伏期、原平台象限停留时间等指标观察其行为学改变。结果:SAMR1组和TSG组在试验中逃避潜伏期明显短于SAMP8空白组(P<0.05)。平台象限的停留时间和穿越原平台次数在探索试验中明显多于SAMP8空白组(P<0.05)。可视平台试验结果各组无差异。结论:TSG能提高SAMP8鼠的学习记忆能力。     

电针对血管性痴呆大鼠血清、脑组织中乙酰胆碱酯酶活性及学习记忆能力的影响

目的:观察电针中冲、涌泉穴对VD大鼠血清、脑组织中乙酰胆碱酯酶(AchE)活性及学习记忆能力的影响。方法:四血管阻断法制作VD大鼠模型,将VD大鼠随机分为模型组、电针组和西药组。采用跳台试验检测学习记忆能力;采用ELISA法测定AchE活性。结果:电针组大鼠跳台反应期时间比模型组缩短(P<0.05);电针组大鼠脑组织和血清中AchE活性显著低于模型组(P<0.01)。结论:电针能改善VD大鼠血清和脑组织中AchE活性,从而提高VD大鼠学习记忆能力。     

"肾脑相济"电针对阿尔茨海默病模型小鼠行为学及IL-1β、TNF-α表达的影响

目的观察"肾脑相济"电针对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠行为学和大脑皮质炎性因子白细胞介素-1β(IL-1b)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响,探究"肾脑相济"电针疗法治疗阿尔茨海默病的作用机理。方法将7月龄雄性SAMP8小鼠随机分成模型组、西药组和电针组,每组6只;将SAMR1小鼠作为对照组。西药组给予盐酸多?哌齐灌胃,电针组电针百会、肾俞和三阴交。采用Morris水迷宫观察小鼠行为学,应用免疫组化法、Western Blot法测定大脑皮质区IL-1b、TNF-α的阳性细胞数和蛋白表达。结果与对照组比较,模型组小鼠学习记忆能力明显下降,IL-1b、TNF-α的表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,西药组和电针组小鼠学习记忆能力增强,IL-1b、TNF-α的表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);与西药组比较,电针组小鼠学习记忆能力及IL-1b、TNF-α的表达变化不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。结论"肾脑相济"电针疗法可以改善SAMP8模型小鼠的学习和记忆能力,降低大脑皮质区IL-1b、TNF-α的含量,从而对阿尔茨海默病达到治疗效果。     

地黄饮子对快速老化小鼠SAMP8学习记忆能力及海马神经元结构的影响

目的研究地黄饮子对快速老化小鼠P8(SAMP8)学习记忆能力及海马组织病理形态的影响,探讨其治疗老年性痴呆的药效及作用机制。方法运用小鼠跳台行为学实验检测地黄饮子对SAMP8小鼠的学习记忆能力的影响;HE染色和电镜观察检测SAMP8小鼠海马形态结构和超微结构。结果模型组SAMP8小鼠跳台实验潜伏期缩短(第1天208.19±65.42,第2天254.76±48.99),与空白组SAMR1小鼠(第1天248.17±27.59,第2天296.35±3.17)比较有非常和/或显著差异(P<0.05,P<0.01)。给药后,地黄饮子组潜伏期(第1天277.06±7.86,第2天295.36±5.17)与模型组(第1天208.19±65.42,第2天254.76±48.99)比较非常显著性延长(P<0.01)。相同组的第2天潜伏期与第1天比较,除模型组以外,其他各组均非常显著延长(P<0.01)。模型组与空白组比较,伴有海马锥体细胞形态结构、超微结构的改变。给药后,地黄饮子减轻SAMP8小鼠的海马病理损伤状况。结论地黄饮子对SAMP8小鼠的学习记忆能力有改善作用。     

电针对APP/PS1转基因AD鼠Morris水迷宫学习记忆及脑皮层Aβ水平的影响

目的：探讨电针对5月龄APP/PS1转基因AD模型鼠学习记忆行为学及脑皮层Aβ水平的影响。方法：20只APP/PS1转基因阳性雄鼠随机分为模型组、电针组,每组各10只,APP/PS1转基因阴性雄鼠10只为对照组,电针组针刺＂百会＂、＂涌泉＂后接电针仪,疏密波,每次针刺持续15 min,隔日1次;对照组、模型组以相同方法用鼠袋束缚15 min,隔日1次,3组都持续5周,以Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,用免疫组化方法检测脑皮层Aβ1-40、Aβ1-42的表达。结果：3组间的逃避潜伏期差异有统计学意义（P〈0.05）,电针组与模型组之间的差异有统计学意义（P〈0.05）。免疫组化电针组Aβ1-40、Aβ1-42的表达降低。结论：电针或许通过减少Aβ的生成来提高APP/PS1双转基因小鼠的学习记忆能力。     

姜黄素对快速老化小鼠学习与记忆功能及海马Ca2+/CaMKⅡ水平的影响

目的 探讨不同浓度的姜黄素对快速老化小鼠（senescence-accelerated mouse, SAM）学习与记忆的影响和可能的机制。 方法 将小鼠随机分为SAMR1正常对照组, SAMP8模型对照组, SAMP8+溶剂（花生油）对照组以及SAMP8+低 、中、高浓度姜黄素处理组,灌胃持续25天。实验结束次日,通过Morris水迷宫测试各组小鼠学习和记忆成绩的变化;测定各组小鼠海马组织［Ca2+］i浓度;通过Western blot和RT-PCR观测Ca2+/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（calmodulin-dependent protein kinase Ⅱ, CaMKⅡ）和钙调蛋白（calmodulin, CaM）mRNA在海马组织的表达情况。 结果 SAMP8模型对照组小鼠隐蔽平台的逃避潜伏期明显延长;海马组织［Ca2+］i明显增高;海马膜中CaMKⅡ表达量降低;海马组织CaM mRNA的水平明显降低（P<0.05, P<0.01）。经中、高浓度姜黄素处理的SAMP8小鼠隐蔽平台的逃避潜伏期显著缩短（P<0.01）。经低、中和高浓度姜黄素处理的SAMP8组小鼠海马组织［Ca2+］i均明显降低;海马组织膜中CaMKⅡ表达量均明显增加;海马组织CaM mRNA水平均明显增高（P<0.05, P<0.01）。     

不同电针对SAMP8模型小鼠血清MDA含量、SOD活力及行为学影响

目的观察音乐电针和脉冲电针对快速老化小鼠P8亚系（SAMP8）血清MDA含量及SOD活性的影响。方法将实验动物随机分为5组,即模型组、音乐电针组、药物组、脉冲电针组、空白组。模型组和空白组不予以治疗;音乐电针组和脉冲电针都配相同穴位进行相应针刺治疗;药物组予盐酸多奈哌齐灌胃。治疗15d后用Morris水迷宫检测各组小鼠学习记忆能力;测定血清SOD活力和MDA含量。结果模型组的逃避潜伏期时间大于空白组（P〈0．01）;而两电针组和药物组与模型组比较,逃避潜伏期时间明显减少（P〈0．01）。模型组血清MDA含量明显高于空白组（P〈0．01）,SOD活力明显低于空白组（P〈0．01）;而电针组和药物组MDA含量明显低于模型组（P〈0．01）,SOD活力明显高于模型组（P〈0．01）。音乐电针组疗效优于脉冲电针组（P〈0．05）。结论不同电针均能够改善SAMP8小鼠的学习记忆功能．可以升高小鼠血清SOD水平,降低MDA水平,而音乐电针疗效略优于脉冲电针。提示音乐电针治疗效果更好。     

“补肾活血”针刺法对老年性痴呆模型SAMP8小鼠学习记忆能力和脑组织AChE活性的影响

目的观察“补肾活血”针刺法对老年痴呆模型SAMP8小鼠学习记忆能力和脑组织AChE活性的影响。方法选取8月龄SAMP8小鼠20只,随机分为针刺组10只,SAMP8空白对照组10只,另选取10只8月龄的SAMR1小鼠为SAMR1对照组。疗程结束后评定疗效,测各组小鼠的学习记忆能力及脑组织中AchE含量。结果与SAMR1组比较,SAMP8空白对照组小鼠在隐蔽平台试验中表现出明显的学习记忆障碍,逃避潜伏期显著延长（P〈0．05）,针刺组逃避潜伏期较SAMP8空白对照组显著缩短（P〈0．05）;探索试验巾针刺组原平台象限的停留时间和穿越原平台次数明显多于SAMP8空白对照组（P〈0．05）,与SAMR1对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）;针刺组针刺后脑组织AChE活性较SAMP8空白对照组显著性降低（P〈0．05）,与SAMR1对照组比较差异无统计学差异（P〉0．05）。结论“补肾活血”针刺法能有效提高AD小鼠学习记忆能力,这种作用可能是通过抑制脑组织AChE活性实现的。