基于尿液代谢组学和生物网络分析整合策略研究益肾固络合剂治疗慢性肾小球肾炎作用机制

目的：基于尿液代谢组学和生物网络分析整合策略研究益肾固络合剂治疗慢性肾小球肾炎（CGN）的关键代谢途径和潜在靶点。方法：建立阳离子化牛血清白蛋白（C-BSA）诱导的CGN大鼠模型，采用超高效液相色谱-质谱联用（UPLC-MS）代谢组学筛选益肾固络合剂治疗CGN的尿液内源性代谢标志物和代谢途径。整合生物网络分析工具对益肾固络合剂调节的生物标志物进行网络分析，挖掘益肾固络合剂治疗CGN的生物功能和潜在靶点。结果：基于尿液代谢组学技术筛选出花生四烯酸等20个益肾固络合剂治疗CGN的内源性代谢标志物。对益肾固络合剂调控的关键内源性代谢物生物网络分析结果表明，花生四烯酸代谢是益肾固络合剂发挥治疗CGN作用的潜在关键通路，其代谢途径上的细胞色素P450 4A11（CYP4A11）等10个靶点为益肾固络合剂治疗CGN的潜在靶点。结论：本研究初步揭示了益肾固络合剂治疗CGN的作用机制，为益肾固络合剂临床推广应用提供科学理论依据。     

平消益肾合剂对糖尿病肾病大鼠的干预作用

目的研究平消益肾合剂对糖尿病肾病大鼠的干预作用。方法 10只大鼠作为空白对照组,采用右肾摘除+STZ+高质饮食三联法建立糖尿病肾病模型,将造模成功的大鼠分为模型组(15只)、阳性对照组(15只)、平消益肾合剂高剂量组(15只)、平消益肾合剂低剂量组(15只)。模型组给予蒸馏水灌胃,阳性对照组给予贝那普利灌胃,剂量为1.7mg/(kg·d),平消益肾合剂高、低剂量组以平消益肾合剂灌胃,剂量分别为6 g/(kg·d),0.6 g/(kg·d)。于术后1周、2周观察大鼠的一般状况。药物干预前后2周及实验结束后,监测所有大鼠的空腹血糖,并于试验结束后,检测所有大鼠的血肌酐、尿素氮、甘油三酯、胆固醇等指标。实验结束前1 d,收集大鼠24 h尿量、检测尿肌酐及尿蛋白。并取大鼠肾脏,计算肾脏系数。结果干预4周后,平消益肾合剂高剂量组与模型组比较,在血糖、Ccr、BUN、24 h尿蛋白、肾脏系数、TG、TC方面均有显著差异(P0.05或P0.01)。平消益肾合剂低剂量组与模型组比较,仅在血糖、Ccr、24 h尿蛋白、TG方面有显著性差异(P0.05)。结论平消益肾合剂能改善糖尿病肾病大鼠的血糖、TG、TC、Ccr、BUN、肾脏系数等指标,从而抑制肾脏损害。     

健脾益肾祛瘀化浊汤治疗慢性肾小球肾炎临床研究

目的:探讨健脾益肾祛瘀化浊汤治疗慢性肾小球肾炎(CGN)的临床效果。方法:选取80例CGN患者并运用随机数字表法分为两组,对照组患者给予常规西医治疗,观察组患者在对照组患者治疗基础上给予健脾益肾祛瘀化浊汤治疗,观察并记录两组患者的临床治疗效果,治疗前后24h尿蛋白、尿素氮、血肌酐情况以及不良反应发生情况。结果:经过治疗,观察组患者总有效率为97.50%,优于对照组的80.00%,差异具有统计学意义(P0.05)。两组患者治疗前24h尿蛋白、尿素氮、血肌酐水平比较差异无统计学意义(P0.05),治疗后均有所改善,观察组显著优于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:健脾益肾祛瘀化浊汤治疗CGN可有效改善患者临床症状,安全有效,值得临床推广应用。     

桑白皮对肾源性水肿大鼠的代谢组学研究

目的运用代谢组学方法研究肾源性水肿大鼠体内的代谢网络及桑白皮对其干预作用。方法检测各组大鼠的血肌酐、尿素氮、白蛋白和尿蛋白水平;利用UPLC-QTOF-MS检测大鼠尿液中代谢产物的变化,通过主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)筛选出潜在生物标志物;对生物标志物水平量化处理后,应用Me V软件进行热度图绘制和聚类分析。结果模型大鼠的血肌酐、尿素氮和尿蛋白水平显著升高,白蛋白水平显著降低,并表现出明显的氨基酸代谢亢进。由41个与模型相关的生物标志物富集得到了7条显著受到干扰的代谢途径:苯丙氨酸代谢,嘧啶代谢,精氨酸与脯氨酸代谢,甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢,泛酸和辅酶A生物合成,色氨酸代谢,半胱氨酸和蛋氨酸代谢。经桑白皮干预后,模型大鼠的各项生化指标及多数生物标志物水平均有回调趋势,即代谢紊乱、肾功能损伤和水肿情况均有所改善。结论肾源性水肿模型的发病机理与氨基酸分解代谢加速有关,桑白皮可通过调节相应代谢而对模型产生干预作用。     

益肾化湿颗粒治疗慢性肾小球肾炎的Meta分析

目的:评价益肾化湿颗粒治疗慢性肾小球肾炎(CGN)的有效性。方法:检索中国期刊全文数据库(CNKI)、中国生物医学文献数据库(CBM)、万方资源数据库、维普期刊数据库、Medline、Embase、Cochrane、Pubmed图书馆中关于益肾化湿颗粒随机和半随机对照试验,并手工检索相关杂志,由研究者独立进行筛选和资料提取后,依据Cochrane Handbook 5.1.0偏倚风险评估工具评价纳入研究质量,应用Revman 5.2软件进行Meta分析。结果:纳入11篇文献,共1303例患者,试验组669例,对照组634例。Meta分析结果显示,与对照组相比,益肾化湿颗粒可以提高CGN患者的总有效率,显著改善慢性肾小球肾炎患者的症状和体征,显著减少CGN患者的24h尿蛋白总量,同时也可降低CGN患者的血肌酐和尿素氮。结论:与对照组相比,益肾化湿颗粒能明显降低CGN患者的24h尿蛋白,血肌酐和尿素氮。     

益肾通络方对C-BSA肾病综合征大鼠模型的整体治疗作用

目的:观察益肾通络方对阳离子牛血清白蛋白(C-BSA)大鼠模型的整体治疗作用。方法:采用C-BSA复制肾病综合征大鼠模型,随机分为3组,即模型组,肾炎四味片组,益肾通络方组,每组各10只,并以10只同批正常大鼠为正常组。分别测定大鼠24h尿蛋白,血清白蛋白,血肌酐,血尿素氮;观察大鼠肾组织病理形态,测定面积比。结果:益肾通络方组24h尿蛋白含量、血清肌酐、血尿素氮下降(P<0.01);血清白蛋白提高(P<0.01);肾脏病理损害均有不同程度减轻,面积比减少(P<0.01);其作用优于模型组和肾炎四味片组(P<0.05,P<0.01)。结论:益肾通络方对肾病综合征大鼠有良好的治疗作用,能改善相关蛋白,改善肾功能,减轻肾脏病理损害。     

消渴颗粒剂对糖尿病肾病大鼠肾功能的影响

糖尿病肾病(diabetic nephropathy DN)是糖尿病最常见的并发症之一,是糖尿病患者主要致死的原因.而尿蛋白及血清肌酐、尿素氮的异常则是糖尿病肾病肾功能损害的主要临床表现.尿蛋白测定是反映肾小球滤过功能的常用指标,肌酐是肌酸的代谢产物,绝大部分由肾小球滤过排除体外.尿素氮是体内蛋白质的代谢产物,主要由肾脏排泄.当肾小球滤过功能受损时,血中肌酐和尿素氮含量必将上升.因此,本实验观察了糖尿病肾病大鼠血糖及尿蛋白及血肌酐、尿素氮的动态变化,以及消渴颗粒剂对糖尿病肾病大鼠血糖及尿蛋白及血肌酐、尿素氮的影响.     

三黄益肾胶囊对糖尿病大鼠肾组织NO及NOS的影响

目的:探讨三黄益肾胶囊对糖尿病大鼠肾组织NO及NOS的影响。方法:采用链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型,随机分为糖尿病模型组、三黄益肾胶囊低、中、高剂量治疗组,每组10只,取10只正常大鼠为正常对照组。第8周末测定血糖、血肌酐、尿素氮、肾质/体质量比、24 h尿蛋白定量,测定干预后各组大鼠肾组织匀浆NO和NOS含量。结果:三黄益肾胶囊低、中、高剂量组大鼠血糖与模型组比较,差异均无统计学意义(P0.05);三黄益肾胶囊低、中、高剂量组大鼠血肌酐、尿素氮、肾质/体质量和24 h尿蛋白定量明显低于模型组(P0.05)。三黄益肾胶囊低、中、高剂量组、模型组大鼠肾脏组织匀浆NO和NOS均低于正常对照组(P0.05);三黄益肾胶囊中、高剂量组大鼠肾脏组织匀浆NO和NOS均高于模型组(P0.05)。结论:三黄益肾胶囊可降低糖尿病大鼠血肌酐、尿素氮及24 h尿蛋白水平,升高糖尿病大鼠肾组织匀浆NO及NOS含量,对糖尿病肾病具有保护作用。     

脾气虚证代谢综合征大鼠血清脂质代谢生物标志物代谢组学研究

目的:通过脾气虚证代谢综合征大鼠血清样本脂质代谢物进行非靶标脂质组学分析,寻找脾气虚证代谢综合征早期诊断相关的特征性脂质生物标志物,探索其微观物质基础。方法:将30只大鼠随机分为正常组、模型组,每组15只。模型组通过劳倦加饮食不节法造模。运用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪联用技术(UPLC/Q-TOF-MS)检测模型组和正常组生物样本血清的代谢轨迹,采用主成分分析(PCA)和偏最小二乘方判别分析(PLS-DA)寻找各组代谢物差异,筛选潜在内源性标志物。结果:潜在生物标志物主要有溶血磷脂酰胆碱、2-羟基丁酸、棕榈酸、油酸、硬脂酸、亚油酸、花生四烯酸等。结论:脾气虚证代谢综合征大鼠模型存在明显脂质代谢紊乱,游离脂肪酸是脂质代谢中最活跃的成分。     

益肾散结法对UUO大鼠肾脏间质纤维化的影响

目的:观察益肾散结法中药制剂对单侧输尿管梗阻(UUO)模型大鼠肾脏间质纤维化的影响。方法:将72只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、治疗组和对照组,采用单侧输尿管结扎复制大鼠肾脏间质纤维化模型,治疗组予益肾散结法中药制剂-肾复康Ⅱ号胶囊颗粒405mg/(kg·d)灌胃,对照组以百令胶囊颗粒270mg/(kg·d)灌胃,假手术组及模型组每天同时间以等体积的生理盐水灌胃,分别于给药后7、14、21d观察各组大鼠血清肌酐、尿素氮及肾脏病理改变。结果:治疗组大鼠血清肌酐、血尿素氮与模型组比较明显降低,肾组织病理改变程度较模型组显著减轻。结论:益肾散结法及其制剂能保护肾功能、对抗肾脏间质纤维化的发生。     

紫蓟益肾颗粒对IgA肾病模型大鼠的治疗作用

目的观察紫蓟益肾颗粒对IgA肾病大鼠的治疗作用。方法建立大鼠IgA肾病模型,并分别给予紫蓟益肾颗粒和肾炎康复片治疗,观察各组大鼠尿蛋白、尿红细胞计数、血清肌酐、血清尿素氮和肾小球的病理改变。结果紫蓟益肾颗粒能明显降低模型大鼠的蛋白尿、血尿、血清肌酐和尿素氮的含量,减轻肾小球的病理改变。结论紫蓟益肾颗粒对IgA肾病模型大鼠具有治疗作用。     

柴黄益肾方对大鼠慢性肾损害的改善作用

目的研究柴黄益肾方对5/6结扎肾动脉大鼠慢性肾损害的作用.方法实验大鼠随机分为假手术组、模型组、蒙诺对照组、柴黄益肾方小剂量组(0.55 g/kg)、中剂量组(1.1 g/kg)和大剂量组(2.2 g/kg),利用结扎5/6肾动脉加高蛋白饲料喂养诱导慢性肾损害大鼠模型,观察大鼠24 h尿蛋白定量、血清总蛋白、血清白蛋白、血清胆固醇、三酰甘油、血清尿素氮、血清肌酐等血清生化学指标,对肾组织进行病理组织学观察并对损害程度进行评分,探讨柴黄益肾方对蛋白尿、肾小球硬化及肾间质纤维化的治疗作用.结果柴黄益肾方能明显抑制大量尿蛋白,提升血清总蛋白和白蛋白含量,降低胆固醇及三酰甘油含量,降低血清尿素氮,改善肾脏病理损伤.结论柴黄益肾方能减轻由肾动脉结扎诱导的肾组织损伤,改善肾功能和纠正脂蛋白代谢紊乱.     

UPLC-MS/MS方法对肾痹汤干预慢性尿酸性肾病大鼠的血清代谢组学研究

目的:对肾痹汤干预慢性尿酸性肾病(CUAN)模型大鼠的血清代谢轮廓进行系统研究,在代谢组学水平上揭示肾痹汤干预CUAN的分子机制。方法:采用腺嘌呤联合乙胺丁醇诱导CUAN模型,模型成功后给予肾痹汤进行干预,对疗效进行评价,并取正常组、模型组、肾痹汤组和别嘌醇组大鼠血清进行代谢组学分析。结果:模型组大鼠血尿酸(SUA)、血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)值显著升高,超高效液相色谱-质谱联用(UPLCMS/MS)血清代谢组学分析鉴定了13种潜在的病理标志物,包含前列腺素E2、α-亚麻酸、雌二醇等9种下调代谢产物,和乳糖神经酰胺(d18∶1/12∶0)等4种上调代谢产物;经肾痹汤干预后,模型大鼠的上述生化指标及生物标志物水平均有回调趋势。结论:CUAN大鼠体内存在花生四烯酸代谢、类固醇激素生物合成、α-亚麻酸代谢及鞘脂代谢的紊乱,肾痹汤可能通过调节紊乱的上述代谢途径,延缓CUAN的进展,保护残存肾功能。     

丹红注射液对大鼠肾病综合征模型影响的实验研究

目的 观察丹红注射液对大鼠肾病综合征模型的影响.方法 Wistar大鼠30只随机分为3组:正常组、模型组、丹红注射液组(治疗组).除正常组外其余两组用盐酸阿霉素(ADR)按6.5mg/kg尾静脉注射复制肾病综合征大鼠模型.治疗组大鼠每日2mL/kg给丹红浓缩注射液,用药8周.观察大鼠24h尿蛋白、血清白蛋白、胆固醇、甘油三酯、血清肌酐、尿素氮及肾组织病理学变化.结果 注射盐酸阿霉素2周肾病综合征模型制成.丹红注射液治疗可减少模型大鼠尿蛋白排泄,且可使血白蛋白升高,使血胆固醇、甘油三酯及血清肌酐、尿素氮降低,使肾脏的组织病理学损害减轻.结论 丹红注射液对大鼠肾病综合征模型有治疗作用.     

益肾活血汤治疗慢性肾炎35例临床观察

目的:观察自拟益肾活血汤治疗慢性肾炎(CGN)的临床疗效。方法:将72例患者随机分为2组各36例,至疗程结束时,治疗组失访1例,对照组失访2例。对照组34例予常规西医治疗,治疗组35例在对照组治疗基础上服用益肾活血汤治疗。2组患者均予低盐、低脂饮食,治疗2月为1疗程,1疗程后观察疗效。结果:治疗组总有效率为91.4%,对照组为70.6%,2组比较,差异有显著性意义(P0.05)。2组治疗后24h尿蛋白定量、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)与治疗前比较,差异均有非常显著性意义(P0.01);2组治疗后以上各指标比较,差异均有显著性意义(P0.05),治疗组疗效优于对照组。结论:益肾活血汤治疗CGN具有改善症状、减少尿蛋白、保护肾功能的作用,对CGN疗效显著。     

通络益肾滋阴方对糖尿病肾病大鼠疗效的实验研究

目的:观察通络益肾滋阴方对糖尿病肾病大鼠的疗效.方法:采用单肾切除术 STZ腹腔注射复制糖尿病肾病大鼠模型.分为正常对照组、病理对照组、通络益肾滋阴方治疗组、西药治疗组(洛汀新 糖适平),观察各组大鼠治疗前后一般情况,空腹血糖,24 h尿蛋白定量,肾脏肥大指数,肾功能、肾脏病理等指标的变化.结果:经通络益肾滋阴方治疗70 d后,大鼠一般状况较病理对照组改善较好,体重增加明显(P<0.05);空腹血糖、肾肥大指数、24 h尿蛋白定量、血清尿素氮、肌酐均明显降低(P<0.01).通络益肾滋阴方治疗组与西药治疗组相比,在降低血糖方面,西药组优于通络益肾滋阴方治疗组(P<0.05),在其他指标方面无明显差异.肾脏病理变化也较病理组改善较好.结论:通络益肾滋阴方能延缓糖尿病肾病的病理进展,对糖尿病肾病有一定的治疗效果.     

糖肾合剂对早期糖尿病肾病大鼠足细胞Nephrin、podocin表达的影响

目的:探讨糖肾合剂对早期糖尿病肾病大鼠足细胞Nephrin、Podocin的调节作用及其对肾脏的保护机制。方法:22只SD大鼠采用高糖高脂饲料联合1%链脲佐菌素以35mg/kg腹腔注射的方法复制糖尿病大鼠模型,17只造模成功的大鼠随机为模型组8只,糖肾组9只,另取8只大鼠作为正常组。予药物干预8周后检测大鼠体重、24小时尿蛋白定量、血清肌酐、尿素氮及血浆白蛋白等生化指标。肾脏做病理切片观察结构改变。用Western blotting法和PCR法测定肾组织中Nephrin、podocin蛋白及NephrinmRNA、podocinmRNA的表达水平。结果:糖肾合剂干预后大鼠24小时尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮明显降低(P0.05),血浆白蛋白显著升高(P0.05);病理减轻;Nephrin、Podocin蛋白及NephrinRNA、PodocinmRNA表达升高(P0.05)。结论:糖肾合剂保护肾脏的机制可能与上调肾脏足细胞上的Nephrin、podocin的表达有关。     

益肾散结复方及其拆方对阿霉素肾病大鼠肾脏组织的影响研究

摘 要 目的:探讨益肾散结复方及其拆方对阿霉素肾病大鼠肾脏组织的影响研究。方法:取健康清洁级SD大鼠70只，随机分为正常对照组、模型对照组、阳性药物对照组、温肾益精化瘀组、滋阴益肾化瘀组、益气化瘀组及全方组。除正常对照组外，其他组建立阿霉素肾病模型。造模成功后，阳性药物对照组给予盐酸贝那普利灌胃；温肾益精化瘀组、滋阴益肾化瘀组、益气化瘀组及全方组给予相应药物连续灌胃，正常对照组与模型对照组，给予等量的0.9%氯化钠溶液灌胃，达疗程后，测定大鼠尿蛋白定量及血清中尿素氮、血肌酐、胆固醇、甘油三酯的浓度，观察电镜下肾脏组织的形态学改变。结果:与模型对照组比较，益肾散结复方全方组及拆方组均能调节脂代谢紊乱、控制蛋白尿、改善肾功能、修复肾脏组织。其中，全方组在控制蛋白尿，改善血清胆固醇、血清甘油三酯、血尿素氮、血肌酐、修复肾脏组织方面显著优于阳性药物对照组。结论:益肾散结复方全方组及拆方组均能有效调节脂代谢紊乱、控制蛋白尿、改善肾功能、修复肾脏组织，为进一步开展细胞实验奠定基础。     

益肾化浊注射液对实验性慢性肾衰的影响

目的 :研究益肾化浊注射液的抗慢性肾衰作用。方法 :用 5 /6大鼠肾切除方法制成动物慢性肾衰模型 ,以给药前及给药后 4周、8周大鼠血尿素氮、血肌酐、内生肌酐清除率、尿蛋白、血甘油三脂、胆固醇为观察指标进行实验研究。结果 :益肾化浊注射液可明显降低 5 /6肾切除大鼠血肌酐、血尿素氮、尿蛋白 ,提高内生肌酐清除率。该药还有降低血甘油三脂、胆固醇的作用。结论 :益肾化浊注射液对慢性肾衰大鼠肾功能具有明显改善作用     

消渴平合剂对STZ诱导的糖尿病肾病大鼠肾功能及血清TNF-α和IL-6的影响研究

目的:观察消渴平合剂对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病肾病(DN)大鼠肾功能及血清TNF-α和IL-6的影响,探讨其对DN的防治作用及机制。方法:复制DN大鼠模型,随机分为正常组,模型组、厄贝沙坦组和消渴平合剂高、中、低剂量组。12周时处死大鼠,观察各组大鼠24 h尿蛋白变化情况,检测血清尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、甘油三酯(TG),血清中TNF-α和IL-6的水平。结果:消渴平合剂可以改善DN大鼠的一般状况,与模型组比较,消渴平合剂高、中剂量组24h尿蛋白定量、BUN、Scr、TG含量显著降低(P0.01),高剂量组与厄贝沙坦组无显著差异(P0.05);消渴平合剂高、中剂量组及厄贝沙坦组血清TNF-α和IL-6含量均较模型组下调(P0.01),消渴平合剂高剂量组与厄贝沙坦组比较无显著性差异(P0.05)。结论:消渴平合剂可用于治疗糖尿病肾病,其机制可能与抑制DN大鼠肾脏TNF-α和IL-6的激活有关。