用HFCF-UF联合HPLC法测定血浆中万古霉素游离浓度

目的 建立人血浆中万古霉素游离浓度的测定方法,并用于临床治疗药物监测(TDM)。方法 采用中空纤维离心超滤(HFCF-UF)分离血浆中的游离万古霉素,HPLC法进行浓度测定。色谱柱：Diamonsil C18柱(150 mm×4.6 mm, 5μm);柱温：30℃;流动相：甲醇-0.05 mol·L^-1磷酸二氢钾缓冲液(pH 3.0)=17∶83(v∶v);流速：1.0 mL·min^-1;检测波长：236 nm;进样量：20μL;内标：去甲万古霉素。考察方法的专属性、线性关系、精密度、回收率、稳定性,并对患者的血浆样本进行测定。结果 人血浆中万古霉素游离浓度在0.25～50μg·mL^-1呈线性关系,标准曲线方程Y=2.77×10^-2X-8.00×10^-3(R²=0.994 9);日内和日间精密度的RSD值均小于10%,万古霉素的相对回收率和绝对回收率分别为95.10%～101.00%和88.41%～101.20%,内标绝对回收率96.51%;血浆样本反复冻...     

用液相色谱-串联质谱法测定人血浆中恩扎卢胺的浓度

目的 建立一种测定人血浆中恩扎卢胺浓度的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法。方法 用蛋白沉淀法对样品进行前处理。色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×50.0 mm, 1.7μm),流动相：100%水含2 mmol·L^-1醋酸铵和0.1%甲酸-100%甲醇含0.1%甲酸,流速：0.50 mL·min^-1,柱温：40℃,进样量：5.0μL。用电喷雾离子化源,正离子模式,多反应监测。考察该方法的专属性、标准曲线和定量下限、精密度与回收率、稀释效应、稳定性。结果 恩扎卢胺在50.0～1.0×10⁴ ng·mL^-1线性关系良好,标准曲线为y=4.06×10^-4x-3.64×10^-5(r=0.998 2),定量下限为50.0 ng·mL^-1,日内和日间相对标准偏差为1.8%～4.7%,稀释效应的相对标准偏差为4.1%,回收率可达90%以上。结论 本方法专属性强、灵敏度高,适用于恩扎卢胺的治疗药物监测和药代动力学研...     

用HPLC-MS/MS法同时测定患者血浆中吉非替尼、厄洛替尼、尼洛替尼和伊马替尼的浓度

目的 建立同时测定吉非替尼、厄洛替尼、尼洛替尼和伊马替尼血药浓度的高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)方法。方法 用乙腈沉淀蛋白法处理血浆样品,用Diamonsil C18色谱柱(150 mm×4.6 mm, 3.5μm)进行色谱分离,流动相为0.1%甲酸水(A)—0.1%甲酸乙腈(B);梯度洗脱,流速为0.7 mL·min^-1,柱温40℃,进样量3μL。以安罗替尼为内标,用电喷雾电离源,采用正电离模式,以多反应监测的方式进行扫描。考察该方法的专属性、标准曲线、定量下限、精密度、准确度、回收率、基质效应和稳定性。测定20例慢性粒细胞白血病(CML)患者伊马替尼和厄洛替尼的谷浓度及3例非小细胞肺癌(NSCLC)患者吉非替尼和厄洛替尼的谷浓度。结果 4种药物的标准曲线分别为吉非替尼：y=2.536×10^-3x+9.372×10^-3(线性范围20～2 000 ng·mL^-1,R²=0.996 6),厄洛替尼：y=3.573×10^-3x+7.406×10<...     

用HPLC-MS/MS法同时测定人血浆中左氧氟沙星和头孢他啶的浓度

目的 建立超高液相色谱串联质谱同时测定人血浆中左氧氟沙星和头孢他啶浓度的方法。方法 用甲醇沉淀蛋白后,以环丙沙星为内标,色谱柱：Agilent Zorbax Eclipse Plus C18(2.1 mm×100.0 mm, 1.8μm),流动相∶水(含0.1%甲酸)-乙腈(含0.1%甲酸)=90∶10,等度洗脱,流速：0.2 mL·min^-1,柱温：40℃,进样量：1μL。电喷雾离子源,多离子反应监测,正离子扫描模式进行检测。考察该方法的专属性、标准曲线和定量下限、精密度与回收率、基质效应及稳定性。结果 血浆样品中左氧氟沙星在0.05～25.72μg·mL^-1线性关系良好,标准曲线为y=4.53x+0.02(r=0.999 6),定量下限为0.05μg·mL^-1;头孢他啶在0.21～107.25μg·mL^-1线性关系良好,标准曲线为y=0.40x+0.02(r=0.999 7),定量下限为0.21μg·mL^-1;2种药物的平均提取回收率均在88.66%～108.21%,日内和...     

高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中瑞舒伐他汀的浓度

目的建立HPLC-MS/MS方法定量测定人血浆中瑞舒伐他汀浓度。方法用液液萃取法处理血浆,以瑞舒伐他汀-D6为内标,色谱柱:ThermoHypersI I GOLD柱(2.1 mm×100 mm,3.0μm),柱温:40℃,流动相:甲醇-0.1%甲酸+5 mmol·L^-1甲酸铵水溶液,等度洗脱,流速:0.35 mL·min^-1。用正离子扫描,多反应监测方式(MRM)测定样品中药物的质量浓度。考察该方法的专属性、标准曲线与定量下限、精密度与准确度、回收率、基质效应和稳定性。结果血浆样品中瑞舒伐他汀回归方程为y=3.29×10^-1x-3.46×10^-3(r=0.998 8),瑞舒伐他汀在0.05~25.00 ng·mL^-1内线性关系良好,定量下限为0.05 ng·mL^-1。日内、日间精密度的RSD均<15%,平均回收率>95%,稳定性较好。结论本方法简便快速、特异性强、灵敏准确,适用于人体血浆中瑞舒伐他汀浓度的测定。     

HPLC-MS/MS法测定新生儿血浆中奥美拉唑的浓度

目的建立一种测定新生儿血浆中奥美拉唑浓度的HPLC-MS/MS法。方法新生儿血浆样品用乙腈沉降蛋白后,以兰索拉唑为内标,色谱柱为C18(4. 6 mm×150. 0 mm,3. 5μm),流动相为乙腈-水(0. 1%甲酸)=85∶15,流速为0. 3 m L·min^-1,柱温为35℃,进样量为10μL。用电喷雾离子化源,正离子方式,多反应监测(MRM)扫描方式进行监测。考察该方法的专属性、标准曲线与定量下限、精密度与回收率,以及稳定性。结果血浆中奥美拉唑的浓度在5～4000 ng·m L^-1内线性关系良好,标准曲线为y=1. 20×10^-3x+2. 06×10^-2(r=0. 998 7),定量下限为5 ng·m L^-1。批内、批间RSD均小于15%,相对偏差为-7. 36%～3. 62%,提取回收率为77. 94%～93. 12%,无明显的基质效应。结论该方法简便快速,灵敏度好,准确度高,专属性强,适用于新生儿血浆中奥美拉唑浓度的测定。     

HPLC法快速测定万古霉素和去甲万古霉素的血药浓度

目的建立快速测定人血清中万古霉素和去甲万古霉素浓度的HPLC法。方法以Hypersil BDS-C₁₈（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱为分析柱,流动相:磷酸二氢钾缓冲液（pH 3.2）-甲醇（86:14,V/V）,流速1 mL·min^-1,检测波长236nm,柱温35℃,进样量20μL,万古霉素和去甲万古霉素互为内标;血清样品经10%三氯醋酸沉淀蛋白离心后进行色谱分析。结果本法万古霉素和去甲万古霉素均在2～100 mg·L^-1间线性关系良好,两者平均回收率均为95%～105%,日内及日间RSD均<5%。结论本法操作简便、快速、准确,适用于临床血药浓度测定及人体药动学研究。     

用HPLC-MS/MS法检测多发性骨髓瘤患者血浆中来那度胺的浓度

目的 建立高效液相色谱-质谱(HPLC-MS/MS)法测定多发性骨髓瘤患者血浆中来那度胺的浓度。方法 以¹³C 5-来那度胺为内标,血浆样本使用80%乙腈(含0.1%甲酸)沉淀蛋白。用Waters Atlantis^? HILIC silica色谱柱(5μm, 2.1 mm×150.0 mm)进行分离,流动相为5 mmol·L^-1甲酸铵水溶液(0.1%甲酸)/乙腈(0.1%甲酸),梯度洗脱的方式,流速0.3 mL·min^-1,柱温40℃,分析时间6 min。用电喷雾离子源(ESI),正离子模式,多反应监测(MRM)扫描方式。来那度胺监测分析离子对为m/z 260.1→149.1,内标监测离子对m/z 265.1→149.1。结果 来那度胺在1～1 000 ng·mL^-1线性关系良好,相关系数>0.997,批内、批间精密度分别在11.5%和11.8%以内,批内、批间准确度分别为98.8%～108.9%和95.5%～105.0%。用本方法对33例临床患者的血浆浓度进行了检测分析...     

UHPLC-MS/MS测定人血浆中依匹哌唑浓度及其生物等效性研究

目的 建立简便灵敏的超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry,UHPLC-MS/MS)测定人血浆中依匹哌唑浓度,并应用于2种片剂的生物等效性研究。方法 采用Waters Acquity UPLC BEH C₁₈色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈-甲醇(50∶50,含0.1%甲酸)(B)梯度洗脱,流速0.4 mL·min^–1,进样量为2μL,柱温40℃,以正离子MRM模式测定依匹哌唑(m/z 434.2→273.2)的浓度,依匹哌唑-d₈(m/z 442.4→281.3)作为内标,离子源为ESI源。血浆样本加入内标,加入甲醇后进行蛋白沉淀,取上清液稀释后进样检测。结果 依匹哌唑在0.2～50 ng·mL^–1呈线性关系,定量下限为0.2 ng·mL^–1,质控样品批内、批间精密度CV≤5.0%,准确度相对偏差在标示值–1.7...     

LC-MS/MS法同时测定人血浆中万古霉素和去甲万古霉素的质量浓度

目的建立一种简单、快速的同时测定人血浆中万古霉素和去甲万古霉素质量浓度的LC-MS/MS方法。方法以利奈唑胺为内标,血浆经高氯酸沉淀蛋白,加入2倍量水,离心,上清液用二氯甲烷萃取后进样分析;色谱柱为Hypersil GOLD aQ,1mL·L-1甲酸水溶液-甲醇梯度洗脱,流速为0.3mL·min-1;离子源为可加热电喷雾离子源,正离子检测,扫描方式为选择反应监测(SRM),万古霉素、去甲万古霉素和利奈唑胺的检测离子对分别为m/z725.7→144.2,m/z718.3→144.2和m/z338.3→296.0。结果各样品分析时间均为8min,血浆中万古霉素和去甲万古霉素的质量浓度在0.01～10μg·mL-1范围内线性关系良好,最低定量限均为10ng·mL-1,两药测定的日内和日间精密度RSD值小于15%,日内和日间相对误差在±15%以内。万古霉素和去甲万古霉素的提取回收率分别为74.16%～76.79%和73.01%～81.11%,基质效应分别为98.86%～108.69%和95.97%～109.64%。万古霉素和去甲万古霉素血浆样品在冻融、室温下保存24h和-80℃保存1个月的条件下稳定。结论建立的LC-MS/MS分析方法简便、快速、灵敏、准确,可同时测定人血浆中万古霉素和去甲万古霉素的质量浓度,并用于临床血药质量浓度的监测。     

用HPLC-MS/MS法同时测定人血浆中9种镇静催眠类药物浓度及其临床应用

目的 建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法并验证同时检测人血浆中9种镇静催眠类药物浓度的方法,并进行临床应用的初步探索。方法 人血浆样品经乙腈沉淀蛋白后,用高效液相色谱-串联质谱仪测定。经Agilent Poroshell 120 EC-C18 (2.1 mm×50.0 mm, 2.7μm)色谱柱分离,以乙腈-水(0.1%甲酸)为流动相等度洗脱。流速：0.3 mL·min^-1,柱温：20℃,进样量：5μL,采用电喷雾离子源,正离子模式,多重离子监测法进行测定。考察该方法的专属性、标准曲线与最低定量限、精密度与回收率、基质效应、稳定性和稀释效应。结果 空白人血浆中内源性物质对待测物及内标的测定不产生干扰,专属性良好。艾司唑仑、阿普唑仑、奥沙西泮、氯硝西泮、劳拉西泮、三唑仑、咪达唑仑、地西泮和唑吡坦质量浓度分别在18～1 800、4.5～450、25～2 500、3.5～350、25～2 500、1.5～150、5.5～550、35～3 500和4～400 ng·mL^-1线性关系良好,相关系数r²均大于0.9...     

高效液相色谱法测定人血浆中利奈唑胺浓度

目的建立高效液相色谱测定人血浆中利奈唑胺(唑烷酮类抗菌药)浓度的方法。方法用Zorbax SB-C18色谱柱,内标为头孢拉宗,流动相为乙腈-水(含0.1%甲酸)(20∶80,v/v),流速为1.0 mL.min-1。结果利奈唑胺的线性范围为0.2～25.0μg.mL-1,定量下限为0.2μg.mL-1,日内、日间精密度均≤3.8%,提取回收率为82.2%～101.4%。结论本方法灵敏、准确、快速,可用于人血浆中利奈唑胺浓度的测定和药代动力学研究。     

LC-MS/MS法检测中原汉族心房颤动患者达比加群血药浓度个体差异的研究

目的通过高效液相色谱质谱联用（LC-MS/MS）法考察中原汉族心房颤动患者达比加群稳态血药浓度个体差异。方法人血浆样品用甲醇沉淀蛋白后,色谱柱为UItimate XB-C₈（3.0 mm×250 mm）,以0.1%甲酸水（A）,0.1%甲酸乙腈溶液（B）为流动相梯度洗脱,流速为0.3 m L·min^-1,柱温为30℃,用电喷雾离子化源,正离子方式,多反应监测（MRM）扫描方式进行监测,用于定量分析的离子反应分别为m/z 472.2（母离子）→m/z 289.0/324.1 （达比加群）,m/z 436.0（母离子）→m/z 145.1/230.9 （内标利伐沙班）。考察其专属性、标准曲线与定量下限、精密度与回收率、基质效应和稳定性。结果血浆中达比加群的标准曲线方程为y=0.26x+1.76×10^-2（R²=0.992 3,w=1/x²）,在2～500ng·m L^-1线性关系良好,定量下限为2 ng·m L^-1;定量下限准确度范围在86...     

LC-MS/MS法检测中原汉族心房颤动患者达比加群血药浓度个体差异的研究

目的通过高效液相色谱质谱联用（LC-MS/MS）法考察中原汉族心房颤动患者达比加群稳态血药浓度个体差异。方法人血浆样品用甲醇沉淀蛋白后,色谱柱为UItimate XB-C₈（3.0 mm×250 mm）,以0.1%甲酸水（A）,0.1%甲酸乙腈溶液（B）为流动相梯度洗脱,流速为0.3 m L·min^-1,柱温为30℃,用电喷雾离子化源,正离子方式,多反应监测（MRM）扫描方式进行监测,用于定量分析的离子反应分别为m/z 472.2（母离子）→m/z 289.0/324.1 （达比加群）,m/z 436.0（母离子）→m/z 145.1/230.9 （内标利伐沙班）。考察其专属性、标准曲线与定量下限、精密度与回收率、基质效应和稳定性。结果血浆中达比加群的标准曲线方程为y=0.26x+1.76×10^-2（R²=0.992 3,w=1/x²）,在2～500ng·m L^-1线性关系良好,定量下限为2 ng·m L^-1;定量下限准确度范围在86...     

UPLC-MS/MS法检测大鼠血浆中新利司他杂质A的含量及其在药代动力学中的应用

目的:建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)检测大鼠血浆内新利司他杂质A(2-[[(十六烷氧基)羰基]氨基]-5-甲基苯甲酸)含量的方法以及该方法在药代动力学中的应用。方法:大鼠含药血浆以奥利司他为内标,用乙腈沉淀蛋白,10 000 r·min^-1离心10 min,吸取上清液150μL,加入四氢呋喃10μL,混匀后进样分析。采用Hypersil GOLD(50 mm×2.1 mm, 1.9μm)色谱柱,以0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水(82∶18)为流动相,流速为0.5 mL·min^-1,柱温为30℃;质量检测器使用ESI离子源,正离子模式检测,待测物杂质A及内标奥利司他用于定量的母→子离子对分别为m/z 420.3→160.3、m/z 496.4→319.3。结果:新利司他杂质A质量浓度在0.020 0～10.0 mg·L^-1范围内呈良好的线性关系。稳定性、准确度的RE均在0.1%～6.3%范围内,精密度、回收率、基质效应的RSD均在3.8%以下。在大鼠灌胃低(20 mg·kg^-1     

HPLC-ESI-MS/MS同时测定癫痫患儿血浆中丙戊酸、苯巴比妥和托吡酯的药物浓度

目的建立基于高效液相色谱串联质谱技术(HPLC-ESI-MS/MS)同时测定癫痫患儿血浆中丙戊酸、苯巴比妥和托吡酯浓度的方法,用于癫痫患儿的血药浓度监测及结果分析。方法样品用有机溶剂沉淀蛋白法进行前处理,分别以丙戊酸-D6、托吡酯-D12、苯巴比妥-D5为内标,采用Phenomenex Kinetex^?EVO C₁₈色谱柱(2.1 mm×50 mm,2.6μm),以0.07%甲酸-1 mmol乙酸铵-水(A)和甲醇(B)作为流动相进行梯度洗脱,流速为0.5 mL·min^-1。质谱检测系统采用电喷雾离子源负离子模式,多离子反应监测模式扫描。考察该方法的专属性、定量下限(LLOQ)、标准曲线、残留效应、稀释效应、准确度、精密度、基质效应和稳定性。结果丙戊酸在0.6～120μg·mL^-1线性关系良好(r=0.998 9),LLOQ为0.6μg·mL^-1;苯巴比妥在0.25～50μg·mL^-1线性关系良好(r=0.999 1),LLOQ为0.25μg·mL     

液相色谱-质谱法测定替考拉宁在重症感染患者血浆中的浓度

目的建立液相色谱-质谱联用法(LC-MS/MS)测定人血浆中替考拉宁的浓度。方法人血浆样品用甲醇沉淀蛋白后,选用Agilent Eclipse Plus C_18(2.1 mm×100 mm,3.5μm)色谱柱,以甲醇-10 mmol·L^-1醋酸铵溶液(均含0.1%甲酸)85∶15为流动相,流速为0.25 m L·min^-1,柱温为25~℃,用电喷雾离子化源,正离子方式,多反应监测(MRM)扫描方式进行监测,用于定量分析的离子反应分别为m/z 1880.1→m/z 1563.0(替考拉宁)和m/z 748.8→m/z158.1(内标克拉霉素)。考察其专属性、标准曲线与定量下限、精密度与回收率、基质效应和稳定性。结果血浆中替考拉宁的标准曲线方程为y=1.63×10^-2x-2.95×10^-3(r=0.996 3),在0.10~20.00μg·m L^-1内线性关系良好,定量下限为0.10μg·m L^-1;质控样品的准确度在93.56%~105.12%;日内、日间RSD均小于15%;提取回收率80.32%~88.28%。基质效应为91.78%~108.56%。结论该方法快速、灵敏、准确,专属性强,重复性好,适用于人血浆中替考拉宁浓度的测定,可应用于替考拉宁的血药浓度检测和药物动力学研究。     

用UPLC-MS/MS法定量检测大鼠血浆中司美格鲁肽含量及其药代动力学研究

目的 建立雄性SD大鼠血浆中司美格鲁肽的定量方法,并应用于司美格鲁肽注射液在大鼠体内单次给药和多次给药的药代动力学研究。方法 采用超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用技术(UPLC-MS/MS)对大鼠血浆中司美格鲁肽含量进行测定。样品预处理：血浆样品100μL经甲醇-乙腈(3∶7)沉淀后取上清液使用Oasis MAXμElution 96孔板进行固相萃取(SPE);色谱条件：采用Waters CSH^TM C18色谱柱(130?,2.1 mm×50 mm, 1.7μm),5%乙腈水溶液(含0.1%甲酸)为A相,95%乙腈水溶液(含0.1%甲酸)为B相进行洗脱,流速为0.6 mL·min^-1,进样体积为10μL;质谱条件：采用电喷雾离子源正离子(ESI⁺)模式,司美格鲁肽和内标利拉鲁肽的多反应监测(MRM)离子通道为m/z 1 029.3→m/z 1 238.2和m/z 938.6→m/z 1 064.4。最后,在大鼠体内进行司美格鲁肽单次和多次给药的药代动力学研究。结果 建立了一种快速且稳健的大鼠血浆中司美格鲁肽含量检测方法...     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中阿雷地平及其主要代谢产物的浓度

目的建立高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS/MS)定量测定人血浆中阿雷地平及其主要代谢产物羟基阿雷地平的浓度。方法人血浆样品用液液萃取法处理,用Kinetex C₁₈柱(4. 6 mm×100 mm,2. 6μm)色谱柱,以纯水-乙腈溶液为流动相,流速为0. 5 mL·min^-1,用电喷雾离子化源,负离子方式,多反应监测(MRM)扫描方式进行监测。考察该方法的专属性、标准曲线与定量下限、精密度与回收率、基质效应和稳定性。结果血浆中阿雷地平的标准曲线方程为y=4. 45×10^-1x+6. 6×10^-3(r=0. 998 2),在0. 02～10μg·L^-1线性关系良好,定量下限为0. 02μg·L^-1;羟基阿雷地平的标准曲线方程为y=9. 82×10^-1x+1. 70×10^-3(r=0. 996 7),在0. 2～100μg·L^-1线性关系良好,定量下限为0. 2μg·L^-1。2种化合物的日内、日间RSD均<10%,提取回收率为91. 78%～97. 97%,无明显的基质效应。结论本法快速、准确、灵敏度高、重现性好,适用于人体血浆中阿雷地平、羟基阿雷地平浓度的测定,可用于阿雷地平、羟基阿雷地平的药代动力学研究。     

抗MRSA药物性别差异性药品不良反应信号的检测和分析

目的:挖掘和评价抗MRSA抗生素性别差异性药品不良反应信号(ADR),为不同性别患者临床合理用药提供参考。方法:调取美国FDA不良事件报告系统(FAERS)数据库2004年1月1日-2016年12月31日接收的万古霉素、利奈唑胺、达托霉素、替考拉宁药品不良事件(ADE)报告,采用报告比值比(ROR)数据挖掘方法对前述药品进行性别差异性ADR信号挖掘。结果:提取FAERS数据库信息得到ADE报告万古霉素3827例、利奈唑胺6 372例、达托霉素3 454例、替考拉宁1 413例,经ROR法检测,分别得到性别差异性ADR信号3,11,6,9个。统计学分析发现,女性患者各药品ADE上报数均小于男性患者,但女性ADR信号数量及强度均高于男性。对于女性患者,万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁易发重症药疹及其相关ADR,如万古霉素(ROR=3.12;P=2.21×10_-17)与利奈唑胺(ROR=2.62;P=8.28×10_-5)诱发的药物超敏反应,替考拉宁诱发的毒性表皮坏死松解症(ROR=5.21;P=1.46×10(-6))、史-约综合征(ROR=4.54;P=6.80×10^-6)等。对于男性患者,万古霉素未见ADR信号,利奈唑胺与达托霉素出现肾功能受损信号。结论:万古霉素、利奈唑胺、达托霉素、替考拉宁存在性别差异性ADR信号,临床医务人员应提高对抗MRSA抗生素不良反应性别差异性的认识,避免发生严重不良反应。