脑出血大鼠脑组织ROCK2与脑水肿、炎性损伤及细胞凋亡的关系

目的观察脑出血(ICH)大鼠脑水肿、炎性损伤及细胞凋亡的变化,探讨Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶2(ROCK2)是否与ICH后脑损伤相关。方法 60只大鼠采用自体不凝血注入法制备ICH模型,随机分为6组:假手术组、ICH 12h组、ICH 1d组、ICH 3d组、ICH 5d组、ICH 7d组。分别于相应时间点断头取脑,苏木精-伊红染色观察血肿形成及血肿周围组织炎性细胞浸润情况,并用干湿重法检测脑组织含水量,采用ELISA法检测脑组织IL-6、TNF-α水平,Western blot法检测血肿周围组织ROCK2、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达水平。结果大鼠ICH后12h、1d、3d血肿周围组织ROCK2蛋白表达与假手术组相比明显增高,差异有统计学意义(P0.05)。大鼠ICH后12h、1d、3d、5d、7d脑组织含水量、IL-6、TNF-α相对含量明显增高,与假手术组相比差异有统计学意义(P0.05)。大鼠ICH后12h、1d、3d、5d、7d血肿周围组织Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达与假手术组相比明显增高,差异有统计学意义(P0.05)。结论 ROCK2可能参与了ICH后脑水肿、炎性损伤及细胞凋亡等病理过程,可能为ICH的治疗提供新的靶点。     

三七总皂甙对脑出血大鼠的神经保护作用

目的探讨三七总皂甙对脑出血后血肿周围肿瘤坏死因子(TNF-α)表达以及神经元凋亡的影响。方法实验大鼠随机分为假手术组、模型组、三七总皂甙治疗组,采用自体血注射法制作脑出血模型,术后2 h七叶皂甙钠组腹腔注射三七总皂甙(3.0 mg/kg),另2组给予等量生理盐水,连续用药(1次/d)。给药后12h、24h、3d和7d分别用免疫组化法与TUNEL法检测肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达和神经元的凋亡情况。结果与假手术组比较,模型组TNF阳性细胞数以及凋亡的神经元明显增多(P<0.01);与模型组比较,七叶皂甙钠组血肿周围肿瘤坏死因子(TNF-α)表达与神经元的凋亡明显下降(P<0.01,P<0.05)。结论三七总皂甙对脑出血后神经元损伤具有保护作用,其机制可能与抑制TNF的表达、减少神经元的凋亡有关。     

β-七叶皂甙钠对脑出血大鼠的神经保护作用

目的探讨β-七叶皂甙钠对脑出血后血肿周围肿瘤坏死因子(TNF-α)表达及神经元凋亡的影响。方法实验大鼠随机分为假手术组、模型组、β-七叶皂甙钠治疗组,采用自体血注射法制作脑出血模型,术后2 h七叶皂甙钠组腹腔注射β-七叶皂甙钠(3.0 mg/kg),另2组给予等量生理盐水,连续用药(1次/d),给药后12 h、24 h、3 d和7 d分别用免疫组化法与TUNEL法检测肿瘤坏死因子的表达和神经元的凋亡情况。结果与假手术组比较,模型组TNF阳性细胞数以及凋亡的神经元明显增多(P<0.01);与模型组比较,七叶皂甙钠组血肿周围肿瘤坏死因子表达与神经元的凋亡明显下降(P<0.01,P<0.05)。结论β-七叶皂甙钠对脑出血后神经细胞损伤具有保护作用,其机制可能与抑制TNF的表达,减少神经元的凋亡有关。     

大鼠脑出血后细胞色素c表达和神经细胞凋亡的关系及牛磺酸熊去氧胆酸的干预作用

目的研究大鼠脑出血(ICH)后细胞色素c(cytc)表达和神经细胞凋亡的关系,探讨牛磺酸熊去氧胆酸(Tudca)的干预作用及其机制。方法用VII型胶原酶注入到大鼠右侧苍白球诱导ICH模型。用凋亡原位末端标记技术(TUNEL)和免疫组化方法检测血肿周围神经细胞凋亡和cytc表达的动态变化。透射电镜观察术后3d血肿周围神经元超微结构的变化。结果:ICH后6h cytc表达开始增加,1d达高峰,此后逐渐减少,7d时回落至假手术组水平。ICH后6h血肿周边组织可见TUNEL阳性细胞,3d达高峰,然后逐渐减少,7d、10d时仍见较多凋亡细胞。ICH后7d内cytc表达和神经细胞凋亡呈正相关(r=0.6357,P<0.01)。Tudca治疗组cytc和TUNEL阳性细胞数较模型组明显减少(P<0.05~0.01),神经元超微结构改变亦比模型组减轻。结论ICH后血肿周围神经细胞损伤有凋亡机制参与,cytc释放是神经细胞凋亡的一个关键事件,Tudca可以有效减轻脑出血后的细胞凋亡,其机制之一是抑制凋亡通路cytc的释放。     

三七总皂甙对脑出血大鼠的神经保护作用

目的 探讨三七总皂甙对脑出血后神经元凋亡的影响.方法 实验大鼠随机分为假手术组、模型组、三七总皂甙治疗组.采用自体血注射法制作脑出血模型,术后2h七叶皂甙钠组腹腔注射三七总皂甙(3.0mg/kg),另2组给予等量生理盐水,连续用药(1次/d),在给药后12h、24h、3d和7d,用TUNEL法检测神经元的凋亡情况.结果 与假手术组比较、模型组TNF阳性细胞数以及凋亡的神经元明显增多(P<0.01).结论 三七总皂甙对脑出血后神经细胞损伤具有保护作用,其机制可能与减少神经元的调亡有关.     

虾青素对小鼠蛛网膜下腔出血早期脑损伤的保护机制的研究

目的研究虾青素对小鼠蛛网膜下腔出血(SAH)早期脑损伤的保护机制。方法 ICR雄性小鼠采用随机数字法随机分为四组:蛛网膜下腔出血组、假手术组、蛛网膜下腔出血+溶剂组(DMSO)、蛛网膜下腔出血+虾青素组。通过建立小鼠视交叉注血方法建立蛛网膜下腔出血模型,于手术后24 h记录神经功能评分,并应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素脱氧尿嘧啶核苷酸缺口末端标记法(TUNEL)、western blot法检测脑组织中的NOX2蛋白含量、ELISA法检测TNF-a/IL-1β水平,干湿法检测脑组织中含水量。结果与对照组相比,SAH后小鼠神经功能损伤评分加重,脑水肿加重,脑组织中的NOX2蛋白及脑组织中凋亡阳性细胞数也显著增多,TNF-a/IL-1β值明显升高;应用虾青素干预以后,小鼠神经功能改善,脑组织凋亡阳性细胞明显减少。同时,虾青素能够降低SAH后小鼠脑组织中NOX2蛋白,TNF-a/IL-1β水平值也明显降低。结论虾青素对s AH后早期脑损伤(EBI)具有保护作用,其作用机制可能与其抗氧化性有关。     

Rho激酶抑制剂对脑出血大鼠的脑保护作用及其对eNOS表达水平的影响

目的观察Rho激酶抑制剂的脑保护作用及对eNOS表达水平的影响。方法 140只SD大鼠采用自体不凝动脉血注入法建立脑出血模型,并随机分为5组,即假手术组、脑出血(ICH)1 d组、脑出血(ICH)3 d组、法舒地尔(Fasudil)1 d组、法舒地尔(Fasudil)3 d组;按时间点断头取脑,取血肿周围组织,用干湿重法测量大鼠脑含水量,TUNEL荧光染色观察脑细胞凋亡情况,ELISA法检测脑组织中炎症因子TNF-α的表达水平,western blot法检测ROCK2和eNOS的表达水平变化。结果大鼠脑出血1、3 d组血肿周围组织ROCK2和eNOS蛋白表达水平、脑组织含水量、IL-6和TNF-α相对水平、凋亡细胞阳性率较假手术组明显增高(P0.05);法舒地尔1、3 d组血肿周围组织的ROCK2、eNOS蛋白表达水平、脑组织含水量、IL-6、TNF-α相对水平、凋亡细胞阳性率较脑出血1、3 d组明显降低(P0.05)。结论 Rho激酶抑制剂法舒地尔能够减轻脑出血大鼠的脑水肿、炎症反应和神经元凋亡,起到了一定的保护作用,其机制可能与eNOS有关。     

实验性脑出血大鼠脑内Caspase-3mRNA的表达作用研究

目的动态观察实验性脑出血大鼠脑内血肿周围神经细胞凋亡情况和Caspas-3蛋白及mRNA表达水平的变化,探讨脑H{血后血肿周围神经细胞损伤机制。方法健康雄性Wistar大鼠随机分为生理盐水对照组、假手术组和脑出血模型组,分为术后3h,6h,12h,24h,48h,3d,5d,7d共8个时相点,采用尾状核注射自体非抗凝动脉血复制大鼠脑出血模型,术后制作冰冻切片,对切片进行TUNEL染色,以及Caspase-5免疫组化和原位杂交染色,之后利用图像分析仪,观察阳性细胞数。结果脑出血后3h血肿周围尚无凋亡细胞出现,6h有凋亡发生,以后逐渐增多,3d达高峰后逐渐下降,生理盐水对照组仅有少量TUNEL阳性细胞。假手术组及生理盐水对照组3h无Caspase-3蛋白和mRNA表达,生理盐水对照组6h以后有少量表达,脑出血模型组在6hCaspase-3蛋白和mRNA开始表达,3d时Caspase-3的蛋白达到高峰,5d以后逐渐下降,24hCaspase-3mRNA表达达高峰,5d以后逐渐下降。脑出血后血肿周围脑组织Caspase-3蛋白的表达与TUNEL阳性细胞数呈正相关（r=0．515,P〈0．05）;Caspase-3蛋白表达与mRNA表达呈正相关（r=0．625,P〈0．05）。结论脑出血后血肿周围神经细胞损伤有凋亡机制参与,在出血后6h发生凋亡,第3天达高峰。Caspase-3的表达在Caspase-5蛋白水平变化趋势与脑m血后细胞凋亡的趋势一致,Caspase-3的mRNA水平的表达高峰时间先于Caspase-3蛋白的表达及凋亡的发生,提示Caspase-3的表达决定脑出血后细胞凋亡的发生,在脑出血后细胞凋亡中起促进作用。     

抑制ERK1/2对大鼠弥漫性脑损伤后细胞凋亡的影响

目的 探讨抑制细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）对大鼠弥漫性脑损伤（DBI）后脑组织细胞凋亡的影响。方法 按随机数字表法将228只成年SD大鼠随机分为假手术组（n=12）、DBI组（n=72）、阻滞剂组（n=72）、对照组（n=72）,后三组按动物处死时间分为30 min、3 h、24 h、48 h、72 h和7 d六个亚组,每亚组12只。参照Mamarou自由落体方法制作重型DBI模型。阻滞剂组损伤后尾静脉注射ERK1/2特异性阻滞剂U0126（0.05 mg/kg）,对照组注射等量溶剂二甲基亚砜。免疫印迹法法检测脑组织磷酸化ERK1/2（pERK1/2）的表达水平,免疫组化法检测Caspase-3表达,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果 伤后30 min,脑组织pERK1/2表达水平显著增高（P<0.05）,并持续高水平表达至72 h,伤后7 d与假手术组无统计学差异（P>0.05）。伤后3 h,脑组织Caspase-3表达水平和细胞凋亡率均明显增高,72 h达到高峰,伤后7 d仍明显高于假手术组（P<0.05）。伤后30 min、3 h、24 h、48 h、72 h和7 d,阻滞剂组脑组织Caspase-3表达水平和细胞凋亡率均明显低于DBI组和对照组（P<0.05）,而DBI组和对照组均无统计学差异（P>0.05）。结论 阻滞ERK1/2通路,可显著抑制DBI大鼠脑组织Caspase-3的表达,降低细胞凋亡率。     

亚低温对大鼠急性脑缺血再灌注损伤后脑组织半胱氨酸蛋白酶-12表达及神经元凋亡的影响

目的 观察亚低温对大鼠急性脑缺血再灌注损伤后脑组织半胱氨酸蛋白酶( caspase) - 12表达及神经元凋亡的影响.方法 56只大鼠随机分为正常组、假手术组、缺血组和亚低温组;后两组再分为再灌注3h、6h、12h、24h、72 h及7d6个亚组.应用线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞局灶性脑缺血(2 h)再灌注模型;亚低温组于缺血30 min实施病灶侧头部亚低温4h.各组大鼠在相应时点处死前行神经功能缺损评分(NDS);脑组织切片行HE、免疫组化及原位末端标记法(TUNEL)染色观察病理改变、caspase-12表达及神经元凋亡.结果 正常组及假手术组脑组织均未见明显病理改变及caspase-12和TUNEL阳性细胞.缺血组可见明显的脑梗死灶,大量神经元坏死及消失;亚低温组梗死灶较小,可见神经元固缩.与缺血组比较,亚低温组各时间点亚组NDS明显降低,脑组织caspase-12及TUNEL阳性细胞数明显减少(均P＜0.05).结论 急性脑缺血再灌注损伤后亚低温治疗可抑制脑组织caspase-12表达,减少神经元凋亡及神经功能的损害.     

丁苯酞预处理对脑缺血再灌注大鼠CHOP及Caspase-3的影响

目的观察丁苯酞预处理对脑缺血再灌注大鼠的保护作用。方法 72只健康SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组及丁苯酞预处理组,每组按再灌注6h、12h、24h分3个亚组各8只。采用Zea Longa法制备大鼠脑缺血再灌注模型,假手术组不插入线栓,丁苯酞预处理组给予丁苯酞50mg/(kg·d)灌胃,共5d,其他2组给予等量生理盐水替代。免疫组化法分别检测脑组织CHOP及Caspase-3的动态表达。结果与假手术组比较,缺血再灌注组的CHOP、Caspase-3在6h升高,24h达峰(P0.01);丁苯酞预处理组24hCHOP、Caspase-3阳性表达低于缺血再灌注组(P0.05)。结论丁苯酞预处理可下调CHOP、Caspase-3的表达,抑制IRE1介导的内质网应激及其后的凋亡信号通路,有效减少神经细胞凋亡。     

虾青素对小鼠蛛网膜下腔出血早期脑损伤的保护机制的研究

目的 研究虾青素对小鼠蛛网膜下腔出血（SAH）早期脑损伤的保护机制。方法 ICR雄性小鼠采用随机数字法随机分为四组：蛛网膜下腔出血组、假手术组、蛛网膜下腔出血+溶剂组（DMSO）、蛛网膜下腔出血+虾青素组。通过建立小鼠视交叉注血方法建立蛛网膜下腔出血模型，于手术后24 h记录神经功能评分，并应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素脱氧尿嘧啶核苷酸缺口末端标记法（TUNEL）、western blot法检测脑组织中的NOX2蛋白含量、ELISA法检测TNF-a/IL-1β水平，干湿法检测脑组织中含水量。结果 与对照组相比，SAH后小鼠神经功能损伤评分加重，脑水肿加重，脑组织中的NOX2蛋白及脑组织中凋亡阳性细胞数也显著增多，TNF-a/IL-1β值明显升高；应用虾青素干预以后，小鼠神经功能改善，脑组织凋亡阳性细胞明显减少。同时，虾青素能够降低SAH后小鼠脑组织中NOX2蛋白，TNF-a/IL-1β水平值也明显降低。结论 虾青素对sAH后早期脑损伤（EBI）具有保护作用，其作用机制可能与其抗氧化性有关。     

脑出血后血肿周围神经细胞凋亡与CasPase-3表达关系的实验研究

目的 研究脑出血后不同时期血肿周围神经细胞凋亡情况和Caspas-3蛋白表达，探讨脑出血后血肿周围神经细胞损伤机制。方法 用立体定向二次注入法向成年大鼠右尾核壳区注射自体动脉血60μl，制成大鼠脑内血肿模型，用相同方法注射等量无活性石蜡油作对照，于脑出血后4h，6h，ld，3d，5d，10d不同时间点断头，取脑，采用原位末端标记法(TUNEL法)和免疫组化法进行动态形态学观察，了解脑出血后不同阶段血肿周围神经细胞凋亡和Caspase-3蛋白的表达。结果 脑出血后4h血肿周围尚无凋亡细胞出现，6h有凋亡发生，以后随时间逐渐增多，3d达高峰后逐渐下降，10d仍可见凋亡细胞。在HE染色中病理改变明显的部位凋亡细胞比较集中，无改变的部位也有凋亡细胞存在。脑出血后6h血肿周围神经细胞Caspase-3开始表达，3d达高峰后逐渐恢复，对照组仅有少量TUNEL阳性细胞及Caspase-3阳性表达细胞。结论 脑出血后血肿周围神经细胞损伤有凋亡机制参与，在出血后6h发生凋亡，第3d达高峰，Caspase-3表达时相变化与血肿周围神经细胞凋亡相一致，Caspase-3表达增加与血肿周围神经细胞凋亡有关。     

脑出血大鼠血肿周围白介素-10的表达及其与脑水肿的相关性

目的 探讨脑出血(ICH)大鼠血肿周围白介素-10(IL-10)的表达及其与脑水肿的相关性.方法 130只SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组和ICH组;应用肝素化Ⅶ型胶原酶建立大鼠ICH模型;制模后12 h、24 h、48 h、72 h、7 d及14 d应用Bederson量表评定神经功能缺损程度,干/湿重法测定脑组织含水量,免疫组化方法检测脑组织血肿周围IL-10的表达.结果 (1)ICH组大鼠神经功能缺损评分与脑组织含水量均在ICH 12 h升高,48 h达高峰,7 d后恢复正常.(2)ICH组脑组织IL-10表达ICH 12 h明显升高,14 d达高峰,各时间点间均显著高于正常对照组和假手术组(P＜0.05～0.01).(3)ICH组神经功能缺损评分与脑组织含水量呈正相关(r=0.761,P＜0.01),脑组织IL-10表达与脑组织含水量、神经功能缺损评分呈负相关(r=-0.65,-0.753,均P＜0.01).结论 ICH大鼠血肿周围脑组织IL-10表达逐渐升高,可能参与了ICH后减轻脑水肿、促进神经功能恢复的脑保护作用.     

地塞米松对大鼠脑出血后血肿周围细胞凋亡及半胱氨酸蛋白酶mRNA表达的影响

目的 探讨地塞米松对大鼠脑出血(ICH)后血肿周围细胞凋亡及半胱氨酸蛋白酶(caspase-3)mRNA表达的影响.方法 采用自体血注入法制作大鼠ICH模型;将制模成功的大鼠分为ICH组和地塞米松治疗组(治疗组),另设假手术组,每组40只;各组大鼠分别在造模后6 h、12 h、24 h、72 h断头取脑组织行TUNEL染色及RT-PCR法检测caspase-3 mRNA的表达.结果 与假手术组相比, ICH组和治疗组从6 h开始出现凋亡细胞,12～72 h逐渐增加(均P<0.01);与ICH组比较,治疗组12～72 h细胞凋亡数明显增多(均P<0.01),各时间点caspase-3 mRNA的表达均明显高于ICH组(均P<0.01). 结论 地塞米松可加重ICH后血肿周围细胞凋亡,应用地塞米松治疗ICH应慎重.     

同型半胱氨酸对大鼠脑出血后血肿周围细胞凋亡及Caspase-3表达的影响

目的本实验通过观察同型半胱氨酸(Hcy)对脑出血模型大鼠血肿周围神经细胞凋亡和Caspase-3的表达的影响,探讨实验性脑出血后Hcy的损伤作用及其机制,并为预防及治疗脑出血提供实验理论基础。方法应用立体定向技术制备脑出血模型,Hcy组于术后30min予血肿同侧颅内直接注射Hcy,固定后连续切片作TUNEL染色和Caspase-3免疫组化染色,数据用SPSS13.0统计分析。结果假手术组偶可见TUNEL细胞表达,Caspase-3少量表达;脑出血组6h血肿周边组织出现TUNEL阳性细胞,72h达高峰,Caspase-3在脑出血后6h表达开始增高,24h达到高峰,应用Hcy干预后自12h起各时间点TUNEL细胞和Caspase-3表达均较ICH组增加(P<0.05),以各自高峰时间最为显著(P<0.05),但未能改变TUNEL细胞和Caspase-3表达的高峰时间。结论脑出血后血肿周围细胞凋亡与Caspase-3表达有关,Caspase-3介导了细胞凋亡的发生。Hcy能够促进脑出血后的细胞凋亡,可能与诱导Caspase-3表达有关,进一步证实Hcy为脑血管疾病的独立危险因素之一。     

异丙酚介导的RhoA/ROCK2信号通路对脑缺血再灌注后神经炎症、细胞凋亡和脑梗死的作用

目的 探讨异丙酚对脑缺血再灌注大鼠神经炎症、细胞凋亡和脑梗死的作用与保护机制。方法 将30只SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、脑缺血再灌注(I/R)组和异丙酚(Propofol)组,Sham组与I/R组使用水合氯醛(300 mg/kg)麻醉,异丙酚组应用异丙酚(60mg/kg)麻醉; 大脑中动脉闭塞造模2 h后恢复血供,24 h后进行神经功能缺损评分,取脑组织进行TTC染色、炎性细胞因子水平检测、免疫组化、Western blot实验。结果 I/R组大鼠神经功能受损,缺血侧梗死严重; Western Blot检测显示RhoA/ROCK2蛋白表达增加,Caspase-3蛋白剪切增加; 免疫组化显示Iba1激活,GFAP活化,即神经炎症反应增加。此外,Nissl小体减少,TUNEL阳性细胞数增加,即神经元凋亡增加; 异丙酚组RhoA/ROCK2蛋白表达水平、Caspase-3蛋白剪切显著降低,神经炎症反应减轻与神经元凋亡减少,神经功能缺损评分降低与脑梗死面积减少。结论 异丙酚可能通过抑制RhoA/ROCK2信号通路来减轻脑中神经炎症反应和减少神经元凋亡,从而改善神经功能与脑部梗死情况。     

RNA干扰GMF-β基因对脑梗死小鼠海马组织神经元凋亡及炎症水平的影响

目的探讨RNA干扰GMF-β基因对脑梗死小鼠海马组织神经元凋亡及炎症水平的影响.方法选择SPF级小鼠40只,将小鼠随机分为假手术组、模型组、control-shRNA组、GMF-βshRNA组,每组10只.建模后进行小鼠神经功能缺损评分;qRT-PCR检测小鼠脑组织GMF-β基因的mRNA表达水平;TTC染色法测定小鼠脑梗死体积;TUNEL法测定小鼠脑组织神经元凋亡;ELISA法检测小鼠脑组织及血清中TNF-c、IL-6表达水平.结果与假手术组相比,模型组和control-shRNA组小鼠神经损伤明显,神经行为学评分显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组和control-shRNA组相比,GMF-βshRNA组小鼠神经损伤明显改善,神经行为学评分显著降低(P<0.05).与假手术组相比,模型组小鼠脑梗死体积、脑组织神经元凋亡细胞数、脑组织及血清中TNF-α、IL-6表达水平均显著升高(均P<0.05);抑制GMF-β的表达后,小鼠神经行为学评分、脑梗死体积、脑组织神经元凋亡细胞数、脑组织及血清中TNF-α、IL-6表达水平均显著减少(P<0.05),神经损伤明显改善.结论抑制GMF-β的表达可通过降低脑梗死小鼠脑海马组织梗死体积、神经元凋亡水平及机体炎症水平,从而改善脑梗死小鼠脑组织损伤.     

家犬实验陛脑出血后血肿周围脑代谢的微透析监测

目的研究脑出血（intracerebral hemorrhage,ICH）后继发脑损伤的机制。方法雄性成年家犬12只,随机分为ICH组（n=6）和生理盐水对照组（n=6）,ICH组于额叶注入非抗凝自体动脉血,对照组动物在相同部位注入等量生理盐水。在模型制备后2h、6h、24h、3d、7d、14d进行血肿周围脑组织间液微透析,监测葡萄糖、乳酸、丙酮酸、甘油和谷氨酸浓度。结果ICH组葡萄糖浓度无显著变化;乳酸浓度在注血后24h和3d升高;丙酮酸浓度在注血后6h、24h和3d升高;甘油浓度在注血后24h升高：谷氨酸浓度在注血后升高,3d达到高峰,至14d明显高于对照组和基础值。结论ICH后血肿周围脑组织代谢变化提示存在“生化半暗带”区域,兴奋性氨基酸的聚集可能是加重和维持继发性脑损伤的重要因素。     

褪黑素对脑出血大鼠的脑保护作用及机制

目的探讨褪黑素对脑出血(ICH)后大鼠脑组织神经细胞超微结构、氧化应激及促炎症因子表达的影响及机制。方法 SD大鼠130只随机分为正常组、假手术组、ICH模型组(模型组)、褪黑素干预组(褪黑素组),除正常组外,各组随机分为12 h、1 d、2 d、4 d、7 d共5个时间点亚组;采用透射电镜技术观察神经细胞超微结构;黄嘌呤氧化法和硫代巴比妥酸比色法测定脑组织超氧化物岐化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量;免疫组化法检测核转录因子-κB(NF-κB)p65阳性细胞表达;Western blot法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达。结果 ICH后模型组神经元肿胀、核膜结构不清、细胞器减少,线粒体肿胀、空泡化,可见类似凋亡的细胞核,同一时间点褪黑素组神经元及线粒体超微结构病理改变轻微。与正常组和假手术组比较,模型组ICH后12 h~4 d时SOD活性明显降低,MDA含量明显升高(均P0.05);与模型组比较,褪黑素组MDA含量显著降低,SOD活性升高(均P0.05);ICH后模型组NF-κBp65阳性细胞表达和TNF-α蛋白表达高于正常组(均P0.05)。ICH后不同时间点褪黑素组NF-κB p65阳性细胞及TNF-α蛋白表达水平显著低于模型组(均P0.05)。结论褪黑素可减轻ICH大鼠神经细胞超微结构损伤及氧化应激水平,褪黑素的神经保护机制可能与其抑制ICH后炎症反应相关。