神经内镜经蝶入路手术治疗垂体性库欣病的疗效分析

目的分析神经内镜经蝶入路手术治疗垂体性库欣病的临床疗效。方法回顾性分析2015年1月至2020年1月华中科技大学同济医学院附属协和医院神经外科收治的133例垂体性库欣病患者的临床资料。所有患者均采用神经内镜经蝶入路手术治疗。术后48 h复查垂体MRI,未发现肿瘤残留定义为完全切除。术后1~2 d和6个月均检测清晨外周血清皮质醇和24 h尿游离皮质醇水平,定期门诊随访临床症状、行影像学检查,以评估疗效。缓解标准参考《中国库欣病诊治专家共识(2015)》中的标准。结果133例患者均顺利完成手术。其中119例(89.5%)术后病理学结果为垂体腺瘤或增生,另14例(10.5%)为正常垂体组织。术后出现一过性尿崩症19例、永久性尿崩症2例、电解质紊乱21例、垂体功能低下32例、脑脊液漏4例、术区出血2例、颅内感染2例。术前MRI发现垂体腺瘤的101例患者肿瘤均完全切除,垂体微腺瘤患者术后即刻缓解率为90.1%(73/81),大腺瘤患者术后即刻缓解率为60.0%(12/20);32例术前MRI结果阴性的患者中,术中探查发现可疑垂体腺瘤患者(肿瘤均完全切除)的缓解比例为14/18,未发现肿瘤患者的缓解比例为6/14。患者的术后即刻总缓解率为78.9%(105/133)。133例患者的术后随访时间为(2.5±0.3)年(1~6年)。术后6个月随访时,术后未即刻缓解的28例患者中,8例患者达延迟缓解,4例经再次治疗缓解,16例未缓解。至末次随访,105例术后即刻缓解的患者中24例(22.9%)复发,复发时间为术后(2.7±0.4)年(0.5~6.0年),4例经治疗后再次达到缓解。结论神经内镜经蝶入路手术治疗垂体性库欣病疗效较好,但术后并发症较多且易复发。     

间变性胶质细胞瘤中免疫浸润核心基因ZAP70 与患者预后的相关性研究

摘要:目的 探索间变性胶质细胞瘤中有预后价值的免疫浸润相关基因。方法 下载 TCGA(TheCancerGenome Atlas)数据库中转录组数据,量化间变性胶质细胞瘤样本的免疫浸润情况,并分为低、中、高免疫浸润组,进而对组间的 差异基因进行分析,筛选出预后相关的核心基因ZAP70。研究ZAP70表达量与间变性胶质细胞瘤患者生存时间以及临 床特征的关系,利用免疫组织化学染色验证ZAP70在临床间变性胶质细胞瘤样本中的表达量与患者预后的关系。通过 GSEA(GeneSetEnrichmentAnalysis)富集分析了解ZAP70在间变性胶质细胞瘤中的相关功能通路。结果 TCGA 数 据库中236例间变性胶质细胞瘤样本被分为低、中、高3个免疫浸润组,低免疫浸润组的预后最佳,中免疫浸润组次之, 高免疫浸润组的预后最差。差异分析与单因素 Cox回归分析筛选出 ZAP70为间变性胶质细胞瘤免疫浸润相关的核心 基因。K-M 生存曲线显示,ZAP70高表达间变性胶质细胞瘤患者生存时间显著少于ZAP70低表达患者(P<0.05)。高 表达ZAP70与多种不良的临床特征相关。61例临床间变性胶质细胞瘤样本的免疫组化染色分析验证了高表达 ZAP70 预后不佳的趋势。GSEA 富集分析结果显示高表达 ZAP70与耐药、细胞粘附、细胞外基质反应及恶性通路激活相关。 在肿瘤免疫方面,ZAP70与白细胞迁移及固有免疫缺失相关。结论 ZAP70有望成为间变性胶质细胞瘤患者中预后不 佳亚群的诊断标记物及有效治疗靶点。     

TNP-470联合化疗抑制胶质母细胞瘤的实验研究

目的 探讨TNP-470联合化疗药物卡氮芥(BCNU)对人U-251胶质母细胞瘤细胞裸鼠皮下移植瘤生长的作用.方法 将人U-251胶质母细胞瘤细胞株注射至裸鼠皮下,第7天荷瘤裸鼠随机分为4组:TNP-470治疗组、BCNU治疗组、TNP-470和BCNU联合治疗组、对照组.测体质量及肿瘤大小,以山羊抗小鼠CD105多克隆抗体免疫组化染色计数肿瘤微血管密度(MVD).结果 治疗后第21天联合治疗组移植瘤体积[(108.93±17.63)mm3]明显小于TNP-470治疗组[(576.10±114.29)mm3]及BCNU治疗组[(473.01±48.04)mm3](P均＜0.01);各治疗组移植瘤体积均小于对照组[(1512.61±470.25)mm3](P均＜0.01);TNP-470治疗组与BCNU治疗组间移植瘤体积差异无统计学意义(P＞0.05).治疗后第21天联合治疗组的抑瘤率(92.80%±11.37%)显著高于TNP-470治疗组(61.91%±6.29%)和BCNU治疗组(68.73%±9.65%)(P均＜0.01),TNP-470治疗组与BCNU治疗组间抑瘤率无统计学意义(P＞0.05).联合治疗组移植瘤MVD[(4.23 4±0.83)个/视野]明显低于TNP470治疗组[(5.70±0.85)个/视野]和BCNU治疗组[(8.60±0.87)个/视野](P均＜0.05);TNP-470治疗组移植瘤MVD显著低于BCNU治疗组(P＜0.05);各治疗组移植瘤MVD均较对照组[(11.32±1.50)个/视野]显著降低(P均＜0.05).结论 TNP-470联合化疗药物BCNU对人U-251胶质母细胞瘤细胞裸鼠皮下移植瘤的生长有显著抑制作用.     

免疫磁珠法分离、培养人脑胶质瘤干细胞

目的建立免疫磁珠法分离，并培养人脑胶质瘤干细胞的方法。方法将术中取得的脑胶质瘤标本，通过剪切、消化和吹打成单细胞悬液，筛网过滤，免疫磁珠分选试剂盒分选出CD133^＋细胞，用神经干细胞无血清培养法培养出具有单细胞克隆能力的细胞球，取第3代进行诱导分化，分化前后用免疫细胞荧光化学方法鉴定肿瘤干细胞及分化后细胞。结果免疫磁珠分选出的CD133^＋细胞，可悬浮生长并形成神经干细胞样细胞球，有较强的增殖能力，干细胞标志物巢蛋白（nestin）阳性，分化后细胞表达神经元小管相关蛋白β-3（β-tubulin3）和星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白质（GFAP）特异性抗原，而巢蛋白、CD133^＋阴性，并具有肿瘤的核型。结论免疫磁珠分选法可避免原代培养中众多细胞混杂生长的发生，能够从大量肿瘤细胞中分离出只占极少比例的肿瘤干细胞，细胞结合磁珠后在体外可以长期培养和传代，进一步证实了肿瘤干细胞的存在，并为胶质瘤干细胞的研究奠定基础。     

Ephrin-B2在人胶质瘤中的表达及意义

目的探讨Ephrin-B2基因在人胶质瘤中的表达规律及意义。方法分别用免疫组织化学和Western印迹法检测4例正常脑组织和21例人脑胶质瘤中Ephrin-B2基因的表达。结果Western印迹法检测显示,人正常脑组织中未见Ephrin-B2基因明显表达不同病理级别胶质瘤组织均有不同程度,Ephrin-B2蛋白表达,Ⅲ级、Ⅳ级表达较强,分别与Ⅰ、Ⅱ级比较,差异均有显著性(P<0.01),Ⅲ级与Ⅳ级之间以及Ⅰ与Ⅱ级之间比较,差异无显著性(P>0.05)。免疫组化检测显示,Ephrin-B2蛋白除在肿瘤细胞中有表达外在各级别胶质瘤中血管内皮细胞表达呈强阳性结论。Ephrin-B2在胶质瘤发生、发展和血管生成中可能有重要作用。     

GDNF基因修饰的骨髓基质干细胞分泌物对多巴胺能神经元的营养作用

目的:克隆GDNF基因并修饰骨髓基质干细胞,观察该工程细胞分泌物对多巴胺能神经元的营养作用。方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法从新生小鼠大脑皮层细胞克隆出GDNFcDNA片断,以pECPP-Cl为载体导入骨髓基质干细胞,制备稳定表达GDNF基因的MSCs工程细胞,收集并浓缩MSCs和GDNF’基因修饰的MSCs工程细胞的条件培养液,通过MTT、倒置显微镜和免疫组织化学的方法观察MSCs和GDNF基因修饰的MSCs工程细胞分泌物对多巴胺能神经元的营养作用。结果:MSCs和GDNF基因修饰的MSC工程细胞分泌物均能促进多巴胺能神经元的存活和生长,MSCs工程细胞作用更强。结论:成功构建了GDNF基因修饰的MSCs工程细胞,该细胞对多巴胺能神经元有明显营养保护作用,在帕金森病治疗中可能有重要价值。     

EGFP在EGFP/GDNF融合基因修饰骨髓基质干细胞中的示踪作用

目的探索增强型绿色荧光蛋白(EGFP)能否作为标记基因追踪胶质源性神经生长因子(GDNF)基因修饰的骨髓基质干细胞(MSC)在体内外的存活、生长、分化和表达外源目的基因的情况.方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法从新生小鼠大脑皮质细胞克隆出GDNF cDNA片断,连入pEGFP-C1载体,构建表达EGFP和GDNF融合蛋白的质粒并转染MSC,将稳定表达EGFP-GDNF基因的细胞株植入小鼠纹状体.用荧光显微镜和免疫组织化学的方法在体内外观察MSC.结果成功制备EGFP-GDNF融合基因修饰的MSC工程细胞,免疫组织化学方法检测显示GDNF呈强阳性,在体内外MSC工程细胞均发出明亮的绿色荧光,并且绿色荧光可反映细胞形态学变化.结论在EGFP-GDNF融合基因修饰的MSC工程细胞中EGFP可作为标记基因同时标记GDNF和MSC.     

胶质瘤组织中CD105与Ki-67表达的相关性

目的探讨胶质瘤组织中CD105与Ki-67表达的相关性。方法对58例胶质瘤和10例正常脑组织标本采用免疫组织化学方法检测CD105和Ki-67蛋白表达情况,并分析其相关性。结果①正常脑组织CD105蛋白表达阴性,而各级胶质瘤组织均有CD105蛋白阳性表达。高倍视野(×200倍)下Ⅰ～Ⅳ级胶质瘤组织CD105标染的微血管密度(CD105-MVD)分别为(6.33±2.97)个/视野、(10.69±2.88)个/视野、(19.13±5.14)个/视野和(25.13±5.51)个/视野,随病理分级提高逐渐增高(r=0.834,P<0.01),且不同级别胶质瘤间差异显著(P<0.01)。②Ⅰ～Ⅳ级胶质瘤组织Ki-67标记指数(Ki-67LI)分别为(4.20±1.30)%、(5.32±2.08)%、(9.88±3.24)%和(22.25±6.68)%,随病理分级升高逐渐增高(r=0.872,P<0.01),与正常脑组织比均有显著性差异(P<0.01)。除Ⅰ、Ⅱ级胶质瘤间无明显差异(P>0.05)外,其他各级别胶质瘤间均相差显著(P<0.01)。③CD105-MVD与Ki-67LI呈显著正相关(r=0.699,P<0.01)。结论胶质瘤组织中CD105-MVD与Ki-67LI有显著相关性,提示其可作为判断胶质瘤恶性程度的指标。     

3D打印技术在神经外科的应用研究进展

正随着打印技术的不断成熟,3D打印技术在医学领域被广泛应用,并显示出巨大优势~([1～3])。本文就3D打印技术在神经外科的应用研究进展进行综述。1 3D打印技术目前,打印技术主要分四种。一是熔融沉积(fused deposition modeling,FDM)技术,通过加压喷头沉积热敏材料来重建物体。虽然现行的FDM技     

胶质瘤U251细胞及其干细胞抗凋亡与多重耐药基因的关系

目的利用培养成功的U251胶质瘤干细胞,探讨其抗凋亡和耐药基因的表达差异。方法WST-8法检测胶质瘤干细胞增殖活性,实时荧光定量RT-PCR技术检测Livin、Livinα、Livinβ、Survivin和MRP1、MRP3 mRNA的表达。结果单层培养的U251细胞比胶质瘤干细胞表现出更强的增殖活性;U251胶质瘤干细胞Livin、Livinα、Livinβ、Survivin和MRP-1 mRNA表达量较U251单层培养细胞表达量都有不同程度的升高,而MRP-3 mRNA表达量降低。结论U251胶质瘤干细胞抗凋亡和MRP-1 mRNA表达量较U251单层培养细胞表达量有不同程度的升高,提示胶质瘤干细胞比较其同源的肿瘤细胞具有更强的耐药性,这可能是肿瘤耐药的机制。