未成熟树突状细胞的制备及其免疫学特性

近年来,树突状细胞(dendritic cells,DCs)诱导免疫耐受成为研究的热点(1-2).成熟树突状细胞(mDCs)能激活T淋巴细胞诱导免疫应答,未成熟树突状细胞(imDCs)虽不能活化T淋巴细胞,但具有强大的抗原摄取及处理能力,可导致T淋巴细胞无能,利于免疫耐受的维持[3-4].借此特性可为同种异体复合组织移植(composite tissue allotransplantation,CTA)排斥反应寻求有效特异的防治新手段.本实验应用大鼠骨髓前体细胞在细胞因子的诱导下培养分离imDCs,进行CTA局部免疫耐受作用的模拟研究.     

骨髓间充质干细胞对急性肾损伤大鼠白细胞介素4、干扰素γ的影响

T淋巴细胞在缺血再灌注损伤(IRI)所致的急性肾小管坏死(ATN)的发生和发展中起着关键性作用[1,2],其机制尚未完全阐明.研究显示.Th1/Th2极向分化偏移导敛细胞因子失衡发挥着重要作用,以白细胞介素4(IL-4)、干扰素(IFN)γ为主导.IL-4能保护缺血组织、而IFN-γ则促进损伤发生[2].骨髓间充质干细胞(BMSC)具有调节T淋巴细胞分化功能[3,4].而有关BMSC对肾IRI动物模型IL-4与IFN-γ的影响尚未检索到相关报道.本研究采用大鼠肾IRI模型,观察BMSC对肾脏表达IL-4与IFN-γ的影响,旨在为BMSC治疗机制的阐明提供实验依据.     

1,25-二羟维生素D3的免疫调节作用与肾脏病的研究进展

1,25-二羟维生素D3[1,25-dihydmxyvitamin D3,1,25-(OH)2D3]是维生素D3的活性形式,是第二甾体类激素,它除了调节机体的钙和骨代谢外,还参与免疫系统的分化与调节.1,25-(OH)2D3是通过与它的特定受体-维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)相互作用来实现它的大部分基因效应的,抗原提呈细胞和T细胞是它作用的靶细胞,它的作用主要是诱导产生基因耐受性树突状细胞,抑制具有致病作用的T淋巴细胞,促进调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的增生.研究证实,1,25-( OH)2D3对多种自身免疫性疾病均有免疫调节作用,本文着重探讨其在肾脏病中的免疫调节作用.     

慢性肝损伤中骨髓间充质干细胞对α-平滑肌肌动蛋白的影响研究

骨髓间充质干细胞(BMSCs)已开始用于治疗肝病[1].有人认为BMSCs抑制肝纤维化[2],也有人认为它促进纤维化[3].本研究旨在探讨慢性肝损伤过程中,BMSCs对α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响.     

赛尼哌在肝移植中的应用

赛尼哌(Zenapax)是一种通过基因合成的人/小鼠嵌合体型单克隆抗体,由小鼠抗白介素-2受体(IL-2R)单克隆抗体的高变区取代人IgG的高变区构建而成[1,2].赛尼哌作为第一个人源化的单克隆抗体[3],可以特异性地抑制T淋巴细胞介导的免疫反应,是近年来使用的一种新型免疫抑制剂.在肾移植的应用中已取得了一定的经验.大多数的研究数据也是在肾移植的临床应用中取得的,肝移植应用的资料仍比较有限.本文就目前国内、外在肝移植方面的应用做一综述.     

转化生长因子-β1差异性诱导CD4+和CD8+T细胞表达转录因子FOXP3的研究

目的 研究CD4+T细胞和CD8+T细胞被转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导表达转录因子FOXP3的差异性.方法 给予CD4+T细胞和CD8+T细胞抗T细胞受体(TCR)刺激的同时,加入TGF-β1培养4d后,通过胞内细胞因子染色,分析二者被诱导表达FOXP3的情况.同时通过CFSE标记实验检测被TGF-β1诱导表达FOXP3的淋巴细胞的增殖情况;通过annexin V流式染色检测TGF-β1对于T淋巴细胞凋亡的影响.结果 相对于CD8+T淋巴细胞,TGF-β1主要诱导CD4+T淋巴细胞阳性表达FOXP3[外周血单个核细胞(PBMC):29.66±3.624比7.430±0.643;癌旁组织浸润淋巴细胞(NIL):31.74±2.612比8.637±1.146].被TGF-β1诱导表达FOXP3的淋巴细胞增殖活跃(94.39±1.179),受到活化刺激后依旧能够有效分泌干扰素-γ(IFN-γ)效应细胞因子(39.58±1.611).TGF-β1能够有效降低CD8+T淋巴细胞活化后的细胞凋亡率(25.39±2.158比9.320±0.3219).结论 与肝癌患者FOXP3表达阳性的淋巴细胞＞95％(97.15±0.3807,n=10)集中在CD4+T淋巴细胞的结果一致,TGF-β1优先选择性诱导CD4+T细胞表达FOXP3.与天然Treg(调节性T细胞)低增殖活性和低细胞因子分泌活性不同,被TGF β1阳性诱导表达FOXP3的T细胞依旧具有活跃的细胞增殖和分泌IFN γ效应细胞因子的功能.CD8+T淋巴细胞相对于CD4+T淋巴细胞,更易发生活化后细胞凋亡,而TGF-β1能够有效降低这种细胞凋亡率.     

赛尼哌在肝移植中的应用

赛尼哌(Zenapax)是一种通过基因合成的人/小鼠嵌合体型单克隆抗体,由小鼠抗白介素-2受体(IL-2R)单克隆抗体的高变区取代人IgG的高变区构建而成[1,2].赛尼哌作为第一个人源化的单克隆抗体[3],可以特异性地抑制T淋巴细胞介导的免疫反应,是近年来使用的一种新型免疫抑制剂.在肾移植的应用中已取得了一定的经验.大多数的研究数据也是在肾移植的临床应用中取得的,肝移植应用的资料仍比较有限.本文就目前国内、外在肝移植方面的应用做一综述.     

白细胞介素-8及其与肾脏疾病的关系

白细胞介素-8(Interleukin-8,IL-8)是20世纪80年代后期发现并命名的一种新的细胞因子.IL-8由多种细胞产生,包括外周血淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞等,近来发现肾脏系膜细胞、内皮细胞及肾小管上皮细胞也可产生[1,2].IL-8对T淋巴细胞、中性粒细胞、嗜碱性粒细胞有趋化作用,是趋化因子中活性最强的一种[3],IL-8对T细胞的定位分布、淋巴细胞再循环、炎症或白细胞积聚有重大意义.IL-8参与多种炎症疾患的发病过程[3～6].IL-8作为一种炎症趋化因子,其在肾脏疾病中的作用开始引起重视.     

苦碟子对青春前期大鼠睾丸扭转复位后生殖细胞B淋巴细胞/白血病-2/bcl-2相关X蛋白蛋白表达的影响

睾丸扭转是常见的急症,多数患者生育力会受到影响[1].近年来,实验研究证实睾丸扭转复位存在1种缺血再灌注损伤(IRI)[2].苦碟子注射液的主要成分是腺苷和黄酮类物质,我们的前期研究表明,苦碟子注射液对青春前期大鼠睾丸扭转复位后的IRI有保护作用[3].我们建立动物模型,观察苦碟子对睾丸扭转复位后B淋巴细胞/白血病-2(bcl-2)/bcl-2相关X蛋白(bax)蛋白表达的影响,探讨其保护机制.     

无能T淋巴细胞的建立及其免疫生物学特性的研究

目的探讨体外诱导T淋巴细胞无能的条件,并分析无能T淋巴细胞的免疫生物学特性。方法以Wistar大鼠的脾细胞为刺激细胞,SD大鼠的脾细胞为反应细胞,进行混合淋巴细胞反应(MLR),分别单独或联合加入剂量不等的抗B71单克隆抗体(抗B71单抗)、抗B72单克隆抗体(抗B72单抗),制备无能T淋巴细胞。将无能T淋巴细胞和刺激细胞混合,分别加入抗CD3单克隆抗体、刀豆蛋白(ConA)及白细胞介素2(IL2),分析各种情况下无能T淋巴细胞的增殖情况;将刺激细胞与同种异体SD大鼠脾细胞混合,分别加入不同数量的无能T淋巴细胞,分析SD大鼠淋巴细胞的增殖情况。结果单独应用抗B71单抗或抗B72单抗,对淋巴细胞增殖的抑制作用不明显,而将二者联用,能明显阻断T淋巴细胞增殖;ConA及IL2能使无能T淋巴细胞增殖,而抗CD3单克隆抗体不能使无能T淋巴细胞发生增殖;无能T淋巴细胞对同种异体T淋巴细胞的增殖也产生抑制作用,该效应具有抗原特异性。结论联合抗B71单抗和抗B72单抗可诱导T淋巴细胞无能;无能T淋巴细胞在体外呈免疫无反应性,并能抑制同种异体T淋巴细胞的增殖,该抑制作用具有抗原特异性。     

Kuppel因子4调节人乳腺癌细胞对小白菊内酯敏感性的影响

小白菊内酯(PN)是中药野生甘菊(艾菊属银胶菊)的主要提取成分,它是倍半萜烯内酯的主要成分[1].近年来研究结果显示,PN在多种肿瘤中发挥抗癌作用[2-4].Kuppel因子4(KLF4)锌指转录因子在正常组织的细胞增殖、凋亡、组织内稳态和生长抑制等多种过程中起着重要的作用[5].Akaogi等[6]研究结果显示KLF4抑制乳腺癌的生长,在乳腺癌细胞中以抑癌基因发挥作用.我们以人乳腺癌细胞为研究对象,探讨KLF4基因对PN抗乳腺癌细胞敏感性的影响及其机制.     

肿瘤坏死因子受体超家族成员调节效应性T淋巴细胞和调节性T淋巴细胞功能在器官移植中的研究进展

T淋巴细胞介导的免疫反应在移植排斥反应中占有关键地位.根据T淋巴细胞活化的"双信号"系统学说.T淋巴细胞活化除了需要其抗原受体(TCR)和主要组织相容性复合体(MHC)抗原肽提供激活的第一信号外,还必需提供第二信号给共刺激信号分子,如果对T淋巴细胞的共刺激信号分子进行干预会诱导选择性的T淋巴细胞耐受,减少移植物抗宿主病(GVHD)的发生,提高移植受者的存活率.近年来发现了许多T淋巴细胞共刺激信号通路,构成了一张复杂的免疫调节网络,许多共信号分子不仅可以调节效应性T淋巴细胞(effector T cell,Teff)的活化,还可以作用于调节性T淋巴细胞(regulatory T cell,Treg).调节Teff和Treg之间的平衡对于控制移植后的免疫反应有着非常重要的作用[1].     

根据可溶性CD30水平预测肾移植后急性排斥反应

CD30为Ⅰ型跨膜糖蛋白,属于肿瘤坏死因子受体(TNFR)超家族中的一员[1].CD30+ T淋巴细胞活化后,其CD30分子细胞外部分被蛋白酶切断,形成相对分子质量为85 000的可溶性CD30分子(sCD30)[2].最近的研究表明,术前及术后血清sCD30水平高的肾移植受者,其急性排斥反应的发生率较高,移植肾预后较差[3-7].本研究检测了231例肾移植受者术前及术后血清sCD30的水平,以探讨依据血清sCD30水平预测急性排斥反应的可能性.     

高迁移率族蛋白B1诱导的树突状细胞对T淋巴细胞增殖及功能性极化的影响

目的 观察高迁移率族蛋白B1(HMGB1)诱导的树突状细胞(DCs)对大鼠脾T淋巴细胞增殖反应及功能性极化的影响,并探讨其作用机制.方法 分离正常Wistar大鼠脾脏DC后置于24孔培养板(1×106/孔),采用1 ms/L的HMGB1刺激48 h,DC与脾T淋巴细胞的细胞比例分别为1:50、1:100、1:150、1:200混合,于共同作用后3、5 d观察脾T淋巴细胞增殖及功能性极化的情况.结果 DC与T淋巴细胞以1:50、1:100、1:150、1:200的比例相互作用,脾T淋巴细胞对丝裂原刺激的增殖反应均明显增强、上清液中干扰素(IFN)-γ含量显著升高和白细胞介素(IL)-4含量明显降低(P《0.01),其中细胞比例1:150组最为明显.脾T淋巴细胞对丝裂原刺激的增殖反应增强、IFN-γ含量增加和IL-4含量降低均以第3天最为显著[分别为(0.646±0.028)、(268.08±14.07)、(6.16±0.59)ng/L,P值均《0.01].结论 HMGB1诱导的DC使脾T淋巴细胞对丝裂原刺激的增殖反应明显增强,并促进T淋巴细胞向Th1功能性极化.     

盐酸青藤碱对体外培养的系膜增生性肾炎患者外周血淋巴细胞相关因子表达的调节作用

盐酸青藤碱(SN)是从中药青风藤中提取的生物碱单体,用于慢性肾炎的治疗已有10多年的成功经验,但其机制依然不清.我们曾发现SN可有效控制非IgA系膜增生性肾炎(MsPGN)患者蛋白尿,不良反应小[1].T-bet是新发现的Th1特异性转录因子[2],GATA-3是Th2特异的转录因子[3].本研究观察SN对MsPGN患者外周淋巴细胞T-bet、GATA-3及Th1、Th2细胞因子表达的影响,探讨SN治疗MsPGN的机制.     

糖皮质激素治疗儿童支气管哮喘的护理进展

儿童支气管哮喘是儿童期最常见的慢性肺部疾病[1],是由多种细胞和细胞组分共同参与的气道慢性炎症性疾病[2].其病因复杂,受遗传和环境双重因素的影响[3].哮喘可在婴幼儿时期发病,且近年来发病率又有增加趋势,尤其是婴幼儿哮喘发病率明显上升[4].目前主治疗方法是吸入糖皮质激素抗炎,并提倡联合用药,即吸人糖皮质激素和β2-受体激动剂[5].该疗法大大减少了糖皮质激素治疗哮喘病的副作用[6].糖皮质激素(GCS)是目前治疗支气管哮喘的抗炎药物中,特别是吸人型糖皮质激素是目前最有效的,也是最常用的抗炎首选药[7-8].它可使微小血管收缩、减少炎症渗出、降低支气管痉挛症状、降低气道高反应性等[9-10].常用的有二丙酸倍氯米松(BDP)、布地奈德(BUD)和氟替卡松(FP).在临床治疗过程中,由于支气管哮喘病情易反复、激素治疗费用贵、疗程长、吸入有一定的技术、担心副作用等多种因素的影响,支气管哮喘患儿及家属往往存在广泛的心理问题.因些在临床护理中通过对激素治疗的患儿加强护理,既保证用药的疗效,也提高患儿治疗的依从性,维持病情稳定.现将糖皮质激素治疗儿童支气管哮喘的护理综述如下.     

盐酸青藤碱对体外培养的系膜增生性肾炎患者外周血淋巴细胞相关因子表达的调节作用

盐酸青藤碱(SN)是从中药青风藤中提取的生物碱单体,用于慢性肾炎的治疗已有10多年的成功经验,但其机制依然不清.我们曾发现SN可有效控制非IgA系膜增生性肾炎(MsPGN)患者蛋白尿,不良反应小[1].T-bet是新发现的Th1特异性转录因子[2],GATA-3是Th2特异的转录因子[3].本研究观察SN对MsPGN患者外周淋巴细胞T-bet、GATA-3及Th1、Th2细胞因子表达的影响,探讨SN治疗MsPGN的机制.     

落新妇甙诱导小鼠心脏移植体外排斥反应中活化T细胞凋亡

众多研究结果显示,T淋巴细胞在器官移植急性排斥反应中起核心作用。T淋巴细胞必须在其达到活化状态后才能发挥免疫效应,因此目前许多免疫抑制剂都是通过阻止T淋巴细胞活化而发挥抗急性排斥效应的。最近有文献报道,中药落新妇甙能使经植物血凝素激活的T淋巴细胞发生凋亡[1] ,并且能使肝炎动物肝脏周围浸润的活化T细胞发生凋亡,从而保护肝脏免受损害[2 ] 。落新妇甙是否对移植排斥反应中活化T淋巴细胞也有此作用?能否抑制移植排斥反应?本研究旨在通过小鼠心脏移植急性排斥反应体外模型[3 ] ,探讨落新妇甙对小鼠心脏移植体外排斥反应的影响…     

盐酸青藤碱对体外培养的系膜增生性肾炎患者外周血淋巴细胞相关因子表达的调节作用

盐酸青藤碱(SN)是从中药青风藤中提取的生物碱单体,用于慢性肾炎的治疗已有10多年的成功经验,但其机制依然不清.我们曾发现SN可有效控制非IgA系膜增生性肾炎(MsPGN)患者蛋白尿,不良反应小[1].T-bet是新发现的Th1特异性转录因子[2],GATA-3是Th2特异的转录因子[3].本研究观察SN对MsPGN患者外周淋巴细胞T-bet、GATA-3及Th1、Th2细胞因子表达的影响,探讨SN治疗MsPGN的机制.     

Roux-Y胃转流术治疗2型糖尿病及病态肥胖现状

最近几年,Roux-Y胃转流术(Roux-Y gastric bypass,RYGB)对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)的治疗作用引起了人们的极大关注 [1-3].