川芎嗪对发育期大鼠惊厥性脑损伤海马ATP酶与脑含水量变化的影响

目的观察发育期大鼠反复惊厥后海马ATP酶与脑含水量的动态变化及川芎嗪干预对其的影响。方法162只20日龄健康sD大鼠随机分为3组：对照组、惊厥组及川芎嗪干预组。通过三氟乙醚反复吸入（连续6次，每天1次）制作发育期大鼠惊厥动物模型。取海马组织匀浆，检测各组动物反复惊厥后6h、1d、3d、7d海马组织中Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca2^＋-ATP酶的活性变化，同时观察脑含水量变化和光镜下海马区神经元病理改变。结果反复惊厥后6h、1d、3d海马Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-ATP酶的活性均较对照组显著降低（P＜0．01），伴随脑含水量显著升高（P＜0．01），第7天三者与对照组相比较差异均无统计学意义（P＞0、05）。脑含水量变化与海马Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-ATP酶的活性变化均呈显著负相关（前者r=-0．711，后者r=-0．673，P均＜0．01）。川芎嗪干预组海马神经元水肿、变性坏死明显减轻，各时间点Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-ATP酶的活性较惊厥组显著升高（P＜0．05或P＜0、01），脑含水量显著降低（P＜0．01）。结论Na^＋K^＋ATP酶、Ca^2＋-ATP酶的活性降低与惊厥性脑水肿和海马神经元迟发性损害密切相关，川芎嗪对发育期惊厥性脑损伤的保护作用可能与提高海马Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-ATP酶的活性有关。     

PAX2在紫癜性肾炎患儿肾组织的表达及其临床意义

【目的】探讨PAX2在紫癜性肾炎发生中的作用及临床意义.【方法】采用免疫组化法观察30例紫癜性肾炎肾活检组织PAX2的表达情况.【结果】①所有紫癜性肾炎肾病理切片均存在不同程度PAX2再表达,且其中肾远端小管表达明显高于近端小管（P〈0.05）,足细胞表达微弱,Ⅲa级和Ⅳa级未见足细胞表达.②表达密集部位的肾小管多呈现明显扩张或结构不完整表现.③PAX2在HSPN不同肾脏病理级别的表达积分,无论在近端小管,还是远端小管,各组间差别均无统计学意义.【结论】①紫癜性肾炎患儿肾组织存在PAX2胎儿期回归表达.②紫癜性肾炎PAX2再表达部位主要在肾小管,足细胞表达微弱,其表达程度可能与其病理损害有关.     

肾病综合征患儿肾组织P-糖蛋白170表达的研究

目的检测P-糖蛋白170(P-gp170)mRNA及蛋白在糖皮质激素(GC)敏感和耐药型肾病综合征(NS)患儿肾组织中的分布、表达变化,初探NS患儿肾组织P-gp170表达在GC耐药中的作用。方法2005-09—2006-04在中南大学湘雅二医院住院的初发特发性肾病(INS)患儿34例,按照GC对患儿的疗效分为GC敏感组(SSNS)和GC耐药组(SRNS),分别以免疫组织化学和原位杂交方法检测患儿肾组织P-gp170蛋白及mRNA的表达,6例正常肾组织为对照。结果正常对照组肾组织及NS患儿肾组织中均有P-gp170蛋白及mRNA的表达;正常对照组及NS患儿肾小球均无P-gp170蛋白及mRNA的表达,其蛋白及mRNA均主要表达于肾小管及肾间质,肾小管近端表达多于远端(P<0.01);免疫组化和原位杂交结果均显示SSNS阳性信号表达多于对照组,而SRNS又高于SSNS(P均<0.01);P-gp170蛋白与mRNA的表达成显著正相关(r=0.87,P<0.05)。结论肾脏本身即可合成、分泌P-gp170;P-gp170在正常肾小管的表达可能与某些代谢物质的转运有关;NS患儿肾小管P-gp170表达增高可能与NS本身的状态有关,或者是GC通过诱导P-gp170的表达增高而导致GC耐药;P-gp170表达上调可能为GC耐药的机制之一;检测肾组织P-gp170的表达水平有助于预测NS患儿GC反应差异性。     

PAX2在肾小管上皮细胞转分化中的作用

目的 揭示核转录因子（PAX2）在肾小管上皮细胞转分化过程中的可能作用。方法 38例病例组肾组织按间质病变程度分为轻、中、重3组，其中轻度病变15例，中度病变11例，重度病变12例；对照组为5例外伤后肾切除组织。采用免疫组化法评定肾组织PAX2的表达率和肾小管上皮细胞转分化率。对肾间质病变轻、中、重3组组内肾小管上皮细胞转分化率、PAX2表达率作方差分析，对PAX2表达量与肾小管上皮细胞转分化率作相关分析。结果 正常对照组肾小管上皮细胞只表达角蛋白（CK），不表达平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及PAX2。病例组肾间质病变轻、中、重3组肾小管上皮细胞均不同程度表达α-SMA及PAX2；不同肾间质病变组，肾小管上皮细胞转分化率及PAX2表达量差异均有统计学意义。相关分析表明，PAX2表达量和肾小管上皮细胞转分化率呈正相关（r=0．886，P〈0．05）。结论 PAX2回归表达可能导致肾小管上皮细胞转分化。     

黄芪对实验性IgA肾病大鼠肾小管问质损害及NF-κB MCP-1表达的影响

目的 观察黄芪对实验性IgA肾病大鼠肾间质损害及肾组织核转录因子-KB(NF-kB)、单核细胞趋化蛋白(MCP-1)表达的影响,探讨黄芪防治IgA肾病肾小管问质损害的作用机制.方法 28只DD大鼠分为模型组、干预组、对照组3组.模型组和干预组复制IgA肾病模型,干预组给予黄芪颗粒剂口服,并以正常SD大鼠为对照组.应用全自动生化分析仪检测尿红细胞、24h尿蛋白定量、尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性;应用免疫荧光法检测肾组织冰冻切片IgA免疫复合物沉积情况,利用免疫组织化学方法,观察大鼠肾组织NF-kBp65,MCP-1表达的影响;半定量评分法计算病理积分以观察肾脏病理损害程度.结果 ①干预组大鼠的尿红细胞、尿蛋白、尿NAG酶含量较模型组明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01);②模型组大鼠肾组织NF-kB、MCP-1的表达与干预组、对照组相比均明显增高(P＜0.01),差异有统计学意义;③干预组大鼠肾脏病理评分较模型组明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 黄芪能减轻模型组大鼠的尿红细胞数、尿蛋白和尿NAG酶活性;能减轻IgA肾病模型大鼠肾小管间质病理损害,其减轻肾小管间质损害作用可能与下调NF-kB,MCP-1表达有关.     

成人与少儿乙型肝炎病毒相关性肾炎的临床病理分析

目的 比较成人与少儿HBV-GN的HBV抗原、免疫荧光、组化及病理分型，探讨二之间的异同。方法将经肾活检确诊为HBV-GN患按年龄分为成人组与少儿组，分析二组的临床、病理特点。结果临床表现成人组以蛋白尿(19例)和肾病综合征(17例)为主，少儿组则以肾病综合征为主。当血清中HBsAg、HBcAb阳性时，少儿组的病理类型以膜性肾病(MN)和系膜增生型肾小球肾炎(MsPGN)为主(58．8％)，其比例明显高于成人组(40％)，少儿组免疫荧光呈“满堂亮”及肾组织中HBsAg、HBeAg、HBcAg三项均为阳性的比例(82％)明显高于成人组(64．7％)。结论在HBV-GN患中，肾活检组织的免疫荧光大多表现为“满堂亮”(70．2％)。膜性肾病患肾组织HBV抗原的检出和免疫荧光“满堂亮”的现象明显高于其它类型的HBV-GN。少儿的HBV-GN主要以MN为主，而成人的病理分型逐渐多样化。     

儿茶素清除(O-·2)与·OH的能力

目的:研究儿茶素直接捕获O.-2与.OH的能力。方法:利用微弱化学发光法检测儿茶素对O2.-与.OH的清除能力;利用自旋捕集技术验证儿茶素对O2.-与.OH的清除能力。结果:儿茶素清除O2.-与.OH的IC50分别为6.16,0.59μg/mL,明显优于甘草提取物、迷迭香提取物、葡萄籽提取物、虎杖提取物及银杏叶提取物。结论:供试的几种重要天然植物抗氧化剂中,儿茶素对O2.-与.OH的清除能力最强。     

大鼠胚胎后肾间充质细胞体外标记的方法

背景:干细胞移植为慢性肾脏病的治疗提供了新的视角,特异性标记干细胞并体内示踪是这一领域研究的基础,目前尚无一种公认的适用于所有细胞的标记方法.目的:观察DAPI及绿色荧光蛋白标记细胞在阿霉素肾病大鼠体内的定位及分化,探讨便捷的大鼠胚胎后肾间充质细胞的体外标记方法.设计、时间及地点:分组对比观察,于2007-04/12在中南大学湘雅二医院完成.材料:清洁级雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠60只,体质量180～220 g,用于制备阿霉素肾病大鼠模型.方法:分别将DAPI、DAPI体外标记后肾间充质细胞、绿色荧光蛋白体外标记后肾间充质细胞,通过尾静脉注入阿霉素肾病大鼠体内:于细胞移植后1,3,5周行肾组织冰冻切片,观察DAPI及绿色荧光蛋白荧光分布,并ABC免疫酶染色法检测肾组织中绿色荧光蛋白表达.主要观察指标:比较DAPI及绿色荧光蛋白两种不同方法标记后肾间充质细胞在阿霉素慢性肾病大鼠肾内的定植情况,以及绿色荧光蛋白标记细胞不同时间点移植在肾内的定植改变.结果:①DAPI标记细胞及单纯DAPI尾静脉注射后1周,均可在肾小管上皮细胞中观察到DAPI阳性细胞,至移植后5周仍可观察到,但随时间延长荧光有减弱趋势.②绿色荧光蛋白标记细胞移植后1周,可在肾小管上皮细胞中观察到绿色荧光蛋白阳性细胞,至移植后5周仍可观察到,荧光无明显减弱.③ABC免疫酶染色法检测,显示绿色荧光蛋白阳性细胞主要表达于近端肾小管中,肾小球系膜区亦可观察到少最表达:绿色荧光蛋白阳性产物主要表达于胞浆.绿色荧光蛋白表达半定量评分显示,标记细胞的早期应用阳性率大于晚期应用者,且随观察时间延长,阳性率有升高趋势.结论;后肾间充质细胞的脂质体感染法绿色荧光蛋白标记是一便捷,有效的体外标记、示踪方法,适于移植细胞的短期内示踪、观察.     

后肾间充质细胞移植治疗大鼠慢性阿霉素肾病

目的 探讨大鼠胚胎后肾间充质细胞（MMC）尾静脉移植对慢性阿霉素（ADR）肾病大鼠的治疗作用。 方法 90只雌性SD大鼠被随机分为阿霉素肾病组（n=40,间隔3周2次尾静脉注射阿霉素0.25 mg/100 g）、MMC移植组（n=40,于第2次阿霉素注射后8周,尾静脉注射5×106～7×106 MMC）、对照组（n=10）。于细胞移植后第8周杀鼠,留取肾组织行病理学分析;免疫组织化学检测肾组织Ⅳ型胶原、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）的表达;Western印迹及RT-PCR分别对MMP-2、MMP-9的蛋白及基因表达进行半定量检测。 结果 MMC移植组和阿霉素肾病组肾小管损伤指数及肾小球硬化面积差异无统计学意义（P > 0.05）。与阿霉素肾病组比较,细胞移植组肾组织Ⅳ型胶原沉积减少,MMP-2蛋白及基因表达下调,MMP-9蛋白及基因表达升高,差异均有统计学意义（均P < 0.05）。 结论 MMC移植对阿霉素大鼠肾组织纤维化有潜在的治疗作用,MMP降解途径的激活可能在其中发挥了作用。     

婴幼儿227例肾穿刺及临床病理学特点

目的 分析婴幼儿肾脏疾病临床病理的特点及婴幼儿肾穿刺安全进行的方法和意义.方法 对临床诊断为肾脏疾病的227例婴幼儿进行经皮肾穿刺活检,肾脏病理组织分别进行光镜、免疫荧光和电镜观察.光镜标本做苏木精-伊红(HE)、过碘酸雪夫反应(PAS)、六胺银(PASM)和Masson染色,免疫荧光检测其肾组织中的IgG、IgM、IgA、C3、C4、C1q、Fibrin,204例标本同时行电镜检查.结果 所有患儿肾穿刺均获成功,术后无明显并发症.有肾穿刺适应证的227例婴幼儿肾脏疾病中最常见的是肾病综合征(38.3%)、孤立性血尿(37.0%)和急性肾炎综合征(9.3%),继发性肾脏疾病相对较少(5.3%).肾脏病理类型中最常见的是系膜增生性肾小球肾炎(62.6%)、IgA肾病(8.4%)和局灶节段性肾小球硬化(5.7%).87例肾病综合征病理类型最常见的是系膜增生性肾小球肾炎(50例)、微小病变(11例)和局灶节段性肾小球硬化(9例);84例孤立性血尿病理类型最常见的是系膜增生性肾小球肾炎(68例)和IgA肾病(9例).结论 在不盲目扩大适应证的基础上,安全有效地进行婴幼儿肾穿刺,可以提高婴幼儿肾脏疾病的诊治水平.