灯盏花素对脓毒症性急性肾损伤保护作用的实验研究

目的观察灯盏花素对脓毒血症模型大鼠急性肾损伤的保护作用。方法清洁级Wistar雄性大鼠60只,随机分为假手术组、脓毒血症模型组和灯盏花素大、中、小剂量组,每组12只。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）复制大鼠脓毒血症模型。灯盏花大、中、小剂量组在造模后立即分别给予灯盏花素5、10、20mg/kg尾静脉注射。术后24h处死大鼠,下腔静脉取血测定肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）水平,采用酶联免疫法（ELISA）测定血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）、肾损伤分子1（KIM-1）的水平;摘取肾组织标本进行病理组织学观察,免疫印迹法检测肾脏NGAL和KIM-1蛋白含量。结果与脓毒血症组比较,灯盏花素大、中剂量组大鼠血清Scr、BUN、NGAL和KIM-1水平及肾组织NGAL和KIM-1蛋白表达水平均显著降低（P均〈0.05）;肾脏病理改变好转。灯盏花素小剂量组肾脏病理改变未见好转（P〉0.05）。结论灯盏花素可以显著改善脓毒血症模型大鼠肾组织损伤,降低血清NGAL和KIM-1水平及肾组织NGAL和KIM-1蛋白表达量,对脓毒血症所致急性肾损伤具有保护作用。     

大鼠急性肾损伤后自噬相关蛋白Beclin-1的表达

目的研究自噬相关蛋白Beclin-1在大鼠急性肾损伤伤后肾组织中的表达情况,并探讨其意义。方法选用24只雄性大鼠sD大鼠,体重250±30g,按随机数字表法分为两组,假手术组（Sham组）和缺血-再灌注组（I／R组）;各组于再灌注后12、24、48h3个相应时间点收获肾脏标本。HE染色观察肾脏病理变化,免疫组化法测定自噬相关蛋白Beclin-1的表达情况,透射电镜观察。肾脏组织自噬现象。结果与假手术组比较,大鼠急性肾损伤48h,肾小管细胞Beclin-1蛋白的表达最强（P〈0．05）,再灌注损伤后48h,自噬体数量显著增多,细胞内出现染色质块状边集,核形态不规则的明显凋亡现象。结论大鼠急性肾损伤后自噬相关蛋白Beclin-1的表达上调,说明大鼠肾急性。肾损伤后肾脏组组织自噬活性上调。     

阻断Pannexin-1 可减轻肾脏组织炎症细胞浸润和缓解顺铂诱导的急性肾损伤

目的探讨阻断pannexin-1在顺铂致急性肾损伤中的作用。方法将26只6~8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、顺 铂模型组、顺铂+Carbenoxolone 处理组。顺铂模型组、顺铂+Carbenoxolone 处理组予顺铂20 mg/kg 腹腔注射1 次,顺铂+ Carbenoxolone处理组于顺铂处理前30 min、处理后24、48 h分别腹腔注射Carbenoxolone 20 mg/kg,所有组于顺铂处理72 h处 死小鼠,留取血浆及肾组织样品进行下一步检测。RT-qPCR及Western blot 检测肾组织内pannexin-1 的表达水平;检测血浆 BUN、Scr水平评估肾功能;PAS 染色评估肾组织病理学改变;免疫组化检测肾损伤分子1（KIM-1）表达水平及RT-qPCR检测肾 损伤分子1与中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）mRNA水平评估肾小管损伤情况;免疫荧光检测肾组织F4/80+巨噬 细胞及CD4+ T细胞浸润水平;RT-qPCR及Western blot检测肾组织pannexin-1的mRNA及蛋白表达水平;用终浓度50 μmol/L 顺铂刺激人近端小管上皮细胞株HK-2 细胞4、6、12、18、24 h 构建体外顺铂致急性肾损伤模型;RT-qPCR及Western blot 检测 HK-2细胞pannexin-1的表达水平。结果与对照组相比,顺铂模型组肾组织pannexin-1蛋白水平及mRNA水平表达上调（P< 0.005）;体外实验结果显示,与对照组相比,顺铂模型组的pannexin-1蛋白水平及mRNA水平表达水平上调（P<0.005）;与顺铂 模型组相比,体内应用pannexin-1抑制剂Carbenoxolone处理后,可减轻顺铂所致的肾脏损伤,肾小管损伤程度明显减轻,顺铂+ Carbenoxolone处理组的血浆BUN、Scr水平回降（P<0.01）,肾组织KIM-1、NGAL表达减少（P<0.05）,肾组织浸润的F4/80+巨噬 细胞（P<0.01）及CD4+ T 细胞（P<0.05）减少。结论在顺铂所致急性肾损伤小鼠模型中,Pannexin-1 表达显著上调,阻断 pannexin-1减少炎症细胞浸润,可减轻肾损伤。     

促红细胞生成素衍生肽对顺铂诱导急性肾损伤的保护作用

目的 研究促红细胞生成素衍生肽HBSP对顺铂诱导急性肾损伤的保护作用以及作用机制。方法 65只健康雄性清洁级SD大鼠,随机分为对照组,顺铂组、EPO组、HBSP组。分布检测大鼠血肌酐、尿素、血常规以及肾小管上皮细胞凋亡、肾脏组织TNF-α、NF-κB表达水平、尿Kim-1、NGAL水平。结果 EPO组与HBSP组血肌酐和尿素、尿Kim-1与NGAL以及肾组织Tunel染色阳性百分比、免疫组化染色TNF-α、NF-κB肾脏表达水平较对照组升高,与顺铂组相比均显著下降。各组红细胞计数和血红蛋白与对照组比较差异无统计学意义。结论 HBSP对顺铂诱导的急性肾损伤具有保护作用,其机制可能与抑制炎性反应以及细胞凋亡有关。     

原发肾病综合征合并急性肾损伤患者尿液及肾组织中肾损伤因子1的表达及意义

目的分析原发肾病综合征合并急性肾损伤患者尿液及肾组织中肾损伤因子1(KIM-1)的表达及其意义。方法选取2010年1月至2012年6月大连大学附属中山医院诊治的52例原发肾病综合征患者(试验组)和同期50例健康体检者(对照组),检测两组受试者的KIM-1水平,探讨其与患者病理类型及尿毒氮等临床相关指标的关系。结果试验组患者的KIM-1水平显著高于对照组(P<0.05),且试验组患者尿液KIM-1水平与肾组织KIM-1、血β2微球蛋白、24 h尿蛋白定量、血肌酐和尿素氮呈显著正相关(r=0.281,P<0.05))。结论原发肾病综合征合并急性肾损伤患者尿液及肾组织中的KIM-1表达显著增高,可作为反映患者急性肾小管坏死的一个较为敏感的临床指标。     

Apelin在急性肾损伤中对肾小管上皮线粒体的保护作用

目的 探讨多肽Apelin在顺铂诱导的急性肾损伤中对肾小管上皮细胞线粒体的保护作用及相关机制。方法 体外培养人近端肾小管上皮细胞,给予含顺铂(5μmol/L)和(或)Apelin-13(1μmol/L)的培养基孵育。设立3个实验组:正常对照组、顺铂组、顺铂+Apelin组。RT-PCR检测线粒体去乙酰化酶Sirt3 mRNA表达量;Western blot法检测线粒体乙酰化蛋白水平,以及线粒体分裂蛋白Drp1、融合蛋白OPA1表达量。选取8周龄雄性野生型小鼠,一次性腹腔注射顺铂(20mg/kg)诱导AKI。从顺铂注射的次日起,每日腹腔注射Apelin-13(0.1μmol/kg)或0.9%氯化钠注射液进行干预。设立3个实验组,即正常对照组、顺铂+生理盐水组、顺铂+Apelin组。透射电镜观察近端肾小管上皮线粒体形态,ELISA试剂盒检测血浆肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平,以及尿液肾损伤分子-1(Kim-1)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)含量。结果 细胞实验观察到,与正常对照组比较,顺铂组Sirt3 mRNA表达降低(P<0.05),线粒体乙酰化蛋白水平升高(P<0.05)。线粒体分裂蛋白Drp1表达增多(P<0.05),线粒体融合蛋白OPA1表达减少(P<0.05)。而顺铂+Apelin组,上述标志物表达量的变化受到显著抑制(P均<0.05)。动物实验显示,对照组小鼠肾脏线粒体结构完整。顺铂+生理盐水组,线粒体数量减少,形态扭曲伴空泡变。顺铂+Apelin组,线粒体的病变程度轻于顺铂+生理盐水组。与正常对照组比较,顺铂+生理盐水组小鼠血浆Cr、BUN升高,尿液Kim-1、NGAL含量明显增加(P均<0.05)。顺铂+Apelin组与顺铂+生理盐水组比较,上述指标的水平有所降低(P均<0.05)。结论Apelin通过增加线粒体去乙酰化酶Sirt3的表达,维持线粒体稳态,从而减轻顺铂诱导的急性肾损伤。     

三七总皂苷对顺铂诱导肾损伤大鼠模型自噬蛋白LC3和Beclin1的影响

目的研究三七总皂苷（PNS）对顺铂诱导肾损伤大鼠肾组织中自噬相关蛋白LC3、Beclin1表达的影响。方法将36只雄性SD大鼠随机分为空白对照组,顺铂模型组,顺铂 PNS组,在给药24 h后处理动物,检测血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)和β-N-乙酰胺基葡萄糖苷酶(NAG)水平,利用透射电镜观察大鼠肾小管上皮细胞粒体形态及自噬体,通过Western blot检测自噬蛋白LC3和Beclin1蛋白的表达。结果大鼠暴露于顺铂24 h后,与空白对照组比较,顺铂模型组血清Cr、BUN显著升高（P<0.05）,尿NAG水平没有明显变化,电镜观察到自噬体出现,肾组织LC3和Beclin1蛋白表达显著升高（P<0.01）。与顺铂模型组比较,顺铂 PNS组血清Cr明显降低（P<0.05）,LC3和Beclin1蛋白表达显著升高（P<0.01）。结论PNS可能通过提高Beclin1的表达,增强肾组织的自噬而降低顺铂诱导的大鼠肾损害。      

缺血性急性肾损伤大鼠miR-214介导的HIF1α、KIM1信号通路作用机制

目的:探讨缺血性急性肾损伤(IAKI)大鼠miR-214介导的缺氧诱导因子l(HIFlα)、肾损伤分子1(KIMl)信号通路作用机制。方法:将48只大鼠分为假手术组、IAKI组和miR-214组,建立IAKI组和miR-214组IAKI大鼠模型,48 h后抽取3组大鼠眼眶静脉血并收集尿液,检测生化指标及KIM1表达,采用Masson’s Trichrome、TUNEL、免疫印迹及PCR检测肾组织病理、肾小管细胞凋亡及肾组织中HIF1α、KIM1蛋白及mRNA表达。结果:IAKI组大鼠血清中血清肌酸酐(Scr)、血尿素氮(BUN)和尿24 h三磷酸尿苷(UTP)表达高于假手术组(P<0.05),miR-214组大鼠血清中Scr、BUN、24 h UTP含量高于IAKI组(P<0.05);假手术组肾脏组织结构完整,肾小管和肾小球形态良好;IAKI组肾小球间质增多,肾间质增宽,炎症浸润严重,肾小管严重萎缩;miR-214组与IAKI组相比,肾小球硬度增加,肾小管周围组织炎症浸润更加严重。IAKI组大鼠肾小管细胞凋亡最为严重,凋亡程度明显高于假手术组;miR-214组与IAKI组相比肾小管细胞凋亡程度增加;IAKI组大鼠肾组织中HIF1α、KIM1蛋白以及mRNA表达高于假手术组(P<0.05),miR-214组与IAKI组相比肾组织HIF1α、KIM1蛋白及mRNA表达升高(P<0.05)。结论:miR-214升高会加快肾小管细胞凋亡,加重肾组织损伤,增加HIF1α、KIM1表达,进一步加重IAKI大鼠病情。     

沉默信息调节因子1对慢性牙周炎模型大鼠肾损伤的影响

目的 探讨沉默信息调节因子1（SIRT1）在结扎诱导的慢性牙周炎模型大鼠肾损伤中的变化,阐明SIRT1对慢性牙周炎模型大鼠肾损伤的影响。 方法 20只大鼠随机分为对照组和牙周炎组,每组10只。采用结扎双侧上颌第一磨牙颈部建立大鼠牙周炎模型。肉眼观察2组大鼠牙龈色形质,检测并记录牙龈出血指数（BI）、牙周探诊深度（PD）和牙齿松动度（TM）,苏木素-伊红（HE）染色观察2组大鼠牙周组织病理形态表现,微型计算机断层成像（Micro-CT）评价2组大鼠牙槽骨吸收情况,HE和PAS染色观察2组大鼠肾组织病理形态表现,生化试剂盒检测2组大鼠肾脏功能指标和氧化应激水平,Western blotting法检测2组大鼠肾组织中肿瘤坏死因子α（TNF-α）和核因子κB（NF-κB） p65蛋白表达水平,实时荧光定量PCR（RT-qPCR）和免疫组织化学法检测2组大鼠肾组织中SIRT1和过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α（PGC-1α）mRNA及蛋白表达水平。 结果 牙周组织临床指标,与对照组比较,牙周炎组大鼠牙龈肿胀,质地松软,可探及深牙周袋,探诊易出血,牙齿出现不同程度松动。牙周组织HE染色和Micro-CT观察,与对照组比较,牙周炎组大鼠出现附着丧失,牙槽骨吸收。肾组织HE和PAS染色观察,与对照组比较,牙周炎组大鼠肾组织中肾小囊腔扩张,肾小球基底膜轻度增厚,肾小管上皮细胞脱落,刷状缘破坏。生化检测,2组大鼠肾脏功能指标比较差异无统计学意义（P>0.05）;与对照组比较,牙周炎组大鼠肾组织中总抗氧化状态（TAS）、锰-超氧化物歧化酶（Mn-SOD）和谷胱甘肽（GSH）水平降低（P<0.01）,丙二醛（MDA）水平升高（P<0.01）。Western blotting法检测,与对照组比较,牙周炎组大鼠肾组织中TNF-α和NF-κB p65蛋白表达水平升高（P<0.05或P<0.01）。RT-qPCR和免疫组织化学法检测,与对照组比较,牙周炎组大鼠肾组织中SIRT1和PGC-1α mRNA及蛋白表达水平降低（P<0.05或P<0.01）。 结论 慢性牙周炎模型大鼠肾组织中SIRT1表达下调,氧化应激水平升高,加重了慢性牙周炎大鼠肾组织损伤。     

金水宝片对顺铂所致大鼠急性肾损伤的保护作用及机制

考察金水宝片对顺铂诱导大鼠急性肾损伤的防治作用及机制。分别采用单次腹腔注射顺铂5 mg/kg和连续5 d静脉注射顺铂2 mg/kg诱导大鼠急性肾损伤模型。观察大鼠急性肾损伤模型分别经预防性或治疗性给予金水宝片后的肾功能的变化,给药结束后进行肾脏组织病理学检查,并检测肾脏肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和活性氧(ROS)的含量、半胱天冬酶3(Caspase 3)活性以及t-p38、p-p38、Bax及Bcl-2的蛋白表达。结果显示,金水宝片预防性给药和治疗性给药均能显著抑制顺铂诱导的大鼠急性肾损伤模型的血清尿素氮(BUN)和肌酐(CRE)水平的上升,显著增加肾脏肌酐清除率,显著改善肾小管变性和炎症浸润,且预防性给药的起效时间较治疗性给药缩短。同时两种给药方式均能显著降低肾脏TNF-α、ROS含量以及Caspase 3活性。Western blot结果显示,金水宝片能显著减少肾脏中p-p38、t-p38的蛋白表达,显著增大Bcl-2/Bax比值。研究结果表明,金水宝预防性给药和治疗性给药均能通过改善肾功能和肾脏组织病理变化,以达到对顺铂所致急性肾损伤的防治作用,且其作用机制可能与金水宝抑制TNF-α,抑制ROS-p38MAPK-Caspase 3通路,进而抑制细胞凋亡有关。     

肾损伤分子-1对于脓毒症相关肾损伤的早期预测价值

目的观察脓毒症患者肾损伤分子-1(kidney injury molecule-1,KIM-1)的浓度,探讨KIM-1是否对脓毒症相关肾损伤具有早期预测价值。方法选取自2007年10月至2008年10月在首都医科大学附属北京朝阳医院急诊抢救室收治的脓毒症患者176例,另有50例健康者为对照组。分别检测KIM-1、血β2-微球蛋白(beta 2-microglobulin,β2-MG)。随访28天,记录急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)的发生率及病死率。结果随访28天,51例患者出现AKI,AKI发生率29%。脓毒症患者KIM-1浓度显著高于对照组(P<0.05);全部患者按KIM-1浓度五分位分组,随着KIM-1浓度升高,AKI发病率升高;Logistic回归分析得到KIM-1是预测肌酐升高的独立危险因素,(OR:1.416,95%CI:1.155-1.737)。KIM-1是预测急性肾损伤的指标,ROC曲线下面积为0.879。结论 KIM-1在肾损伤早期浓度升高,并与急性肾损伤的严重程度有一定的关系,KIM-1是脓毒症相关肾损伤的预测因子。     

内毒素致大鼠急性肾损伤早期NGAL和KIM-1的变化

目的研究中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）和肾损伤分子-1（KIM-1）在内毒素（LPS）致大鼠急性肾损伤（AKI）早期的表达变化。方法健康雄性Wistar大鼠32只随机分为4组。正常对照组（NC）：经尾静脉注射1ml生理盐水;LPS2、4、6h组：LPS剂量为5mg/kg体重,生理盐水稀释至1ml尾静脉注射,复制AKI模型。造模后在各时间点,ELISA法测大鼠血清和尿液中NGAL的含量及尿液中KIM-1的含量,除蛋白法测定血肌酐（SCr）值并比较各组大鼠光镜下肾脏的病理改变。结果与NC组Scr比较：LPS2h组略升高（P〉0.05）,LPS4、6h组显著升高（P〈0.01）;LPS2、4、6h组血清和尿液中NGAL及尿液中KIM-1的水平均明显高于NC组（P〈0.01）,与LPS2h组相比,LPS4h组血清和尿液中NGAL升高幅度小（P〉0.05）,而尿液中KIM-1显著性升高（P〈0.01）;光镜下,NC组肾组织结构正常,LPS2、4、6h组肾组织出现不同程度的病理改变。结论 NGAL和KIM-1在AKI早期即出现升高,可作为AKI的早期诊断指标,并且KIM-1有明显的时间依赖性,可作为病情监测指标。     

青藤碱对脓毒血症模型大鼠急性肾损伤的保护作用

目的 探讨青藤碱(SIN)对脓毒血症大鼠急性肾损伤的保护作用。方法将SD大鼠75只随机均分为假手术组、脓毒血症模型组和SIN小、中、大剂量组,建模,术后24 h采用ELISA法测定血清、尿液中性粒细胞明胶相关脂质转运蛋白(NGAL)、肾损伤分子1(KIM-1)水平及血降钙素原(PCT)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)浓度,并对结果进行统计分析。结果和脓毒血症模型组相比,SIN大、中剂量组NGAL和KIM-1均显著降低;SIN大、中、小剂量组PCT均较脓毒血症组显著降低,而BUN及Scr均显著低于模型组;SIN大剂量组肾脏病理明显改善。结论SIN有效降低血清和尿液NGAL和KIM-1,降低血清PCT、BUN和Scr浓度,对脓毒血症所致的急性肾损伤起到一定保护作用。     

周期素依赖性激酶抑制剂p18~(INK4C)在急性肾损伤中的表达受血红素加氧酶1调控

目的初步探讨周期素依赖性激酶抑制剂p18INK4C(p18)在急性肾损伤(AKI)中的肾保护作用机制。方法利用血红素加氧酶(HO)-1的化学诱导剂(hemin)和抑制剂(锌原卟啉,ZnPP)观察在顺铂诱导的小鼠肾脏上皮细胞(TCMK-1)损伤中HO-1与p18之间的关系。利用p18基因敲除鼠,观察p18基因缺失对于顺铂诱导的HO-1表达的影响。结果在顺铂诱导的AKI小鼠肾组织及损伤的TCMK-1细胞中,p18、HO-1的mRNA和蛋白表达均明显上调(P值均<0.05),HO-1的诱导表达峰值先于p18上调峰值。在无血清培养的TCMK-1细胞中,HO-1诱导剂hemin与细胞共同孵育后明显上调TCMK-1细胞中HO-1和p18蛋白的表达(P值均<0.05)。相反,HO-1抑制剂ZnPP与顺铂共同孵育TCMK-1后的第8和16小时,ZnPP不仅抑制了顺铂诱导的HO-1蛋白表达的上调,而且使p18的表达受到明显抑制。p18-/-与p18+/+小鼠肾组织中HO-1蛋白表达基线值的差异无统计学意义(P>0.05),顺铂注射后第3天,p18-/-与p18+/+小鼠肾组织中HO-1蛋白的诱导表达量的差异亦无统计学意义(P>...     

Trps1在大鼠肾脏缺血再灌注损伤修复过程中的表达及意义

目的观察大鼠缺血再灌注损伤肾组织Trps1的表达变化及其与肾组织病变的关系,探讨Trps1在肾脏修复再生中的作用。方法 42只雄性SD大鼠分为假手术组、缺血再灌注组。经腹正中切口分离大鼠双侧肾蒂,用无损动脉夹夹闭60 min后恢复灌注,假手术组仅暴露肾蒂不夹闭。于再灌注后1、3、7、14、21 d取大鼠动脉血及肾组织标本,采用自动生化分析仪检测大鼠血肌酐、尿素氮水平,PAS染色检测肾组织损伤情况,免疫组化和Western blot检测肾组织Tprs1表达变化。结果假手术组大鼠血肌酐和尿素氮分别为(30.12±2.95)μmol/L、(5.89±0.67)mmol/L。与假手术组相比,大鼠肾脏缺血再灌注后1、3、7 d血肌酐[(319.25±25.49)、(338.20±22.70)、(216.07±18.54)μmol/L]及尿素氮[(33.53±8.06)、(78.05±7.13)、(42.61±11.87)mmol/L]显著升高(P<0.05),14、21 d血肌酐[(33.33±6.46)、(32.06±8.74)μmol/L]及尿素氮[(6.02±1.27)、(6.93±3.28)mmol/L]与假手术组相比无显著差异(P>0.05)。PAS染色显示肾组织在再灌注1 d时即出现损伤,3 d时损伤最重,7 d时损伤开始修复,至第21天修复完全。免疫组化及Western blot显示,假手术组Trps1主要在皮质肾小管上皮细胞表达,缺血再灌注后1 d肾组织Trps1表达显著下降(P<0.05),3 d仅见微弱表达(P<0.05),7、14 d表达开始上升,但仍有显著差异(P<0.05),21 d与假手术组水平无显著差异(P>0.05)。相关性分析显示Trps1表达变化与肾小管急性损伤评分呈负相关(r=-0.81,P<0.05)。结论 Trps1在AKI肾脏损伤修复期表达上调,与肾组织损伤指标呈负相关,提示其可能具有促进肾脏修复再生的作用。     

肝硬化患者急性肾损伤的分期与临床疗效的关系

目的 探讨肝硬化初发急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)患者的AKI分期与补液扩容为主的综合治疗的疗效关系,探讨AKI分期与尿肾损伤分子-1(kidney injury molecule-1,KIM-1)水平的关系.方法 2014年9月至2017年1月收治肝硬化合并新发AKI患者61例,分为AKI 1期及2～3期,停用利尿剂、血管扩张剂及肾毒性药物,给予补液扩容为主的综合治疗48 h,评价初发AKI时、治疗48 h两个时间点的疗效;采用ELISA方法检测尿KIM-1,分析AKI分期与疗效、尿KIM-1的关系.结果 61例肝硬化初发AKI患者,AKI 1期47例,2～3期14例;治疗48 h后,AKI 1期治疗有效率高于AKI 2～3期(63.8％ vs.28.6％,P＜0.05);相同AKI分期患者治疗48 h前后血BUN、SCr和尿KIM-1的差异均有统计学意义(P＜0.05).AKI 1期患者对扩容治疗的疗效优于2～3期.AKI 1期患者扩容治疗前后,尿KIM-1水平的差异无统计学意义(Z=-0.310,P=0.766);AKI 2～3期患者扩容治疗前后,尿KIM-1水平的差异无统计学意义(Z=-0.392,P=0.696).结论 肝硬化初发AKI患者的分期越高,尿KIM-1水平越高;扩容治疗无效组尿KIM-1水平高于有效组.     

肾损伤因子-1在脂多糖诱导的HK-2细胞炎症反应中的作用

目的：分析肾损伤因子-1（KIM-1）在脂多糖（LPS）诱导HK-2细胞炎症模型中的表达并探讨其可能参与的生物学进程。方法：LPS刺激人肾小管上皮HK-2细胞诱导细胞炎症模型,CCK-8比色法分析LPS对HK-2细胞株体外生长的抑制作用;RT-PCR和Western blot实验分析KIM-1在正常组和LPS诱导组中的表达差异;设计siRNA靶向干扰KIM-1基因的表达,分析其对LPS诱导下HK-2细胞生长抑制作用的影响;Hoechst33342/PI双染法分析LPS诱导下对照组和siRNA干扰组细胞凋亡的影响。结果：50、100 μg/mL终浓度的LPS处理24 h和48 h后能抑制HK-2细胞增殖,与对照组比差异有统计学意义（P＜0.05）;KIM-1和IL-6基因和蛋白表达水平在LPS处理组中较对照组明显上调,且具有浓度依赖性,差异有统计学意义（P＜0.05）;LPS处理组中Hoechst33342染色阳性细胞比例明显高于对照组;siRNA转染组中KIM-1和IL-6基因和蛋白表达水平均明显低于siRNA-NC组,在LPS作用下siRNA转染组HK-2细胞增殖率明显高于siRNA-NC组,差异有统计学意义（P＜0.05）;在siRNA转染组中,Hoechst33342染色强度均低于siRNA-NC组,提示靶向KIM-1基因siRNA转染可以抑制LPS诱导的细胞凋亡作用。结论：LPS可以诱导HK-2细胞增殖受抑和凋亡,并且上调KIM-1和IL-6基因表达;KIM-1可能通过调节细胞凋亡和生长抑制过程参与细胞炎症反应。