病理性瘢痕中脂质过氧化产物和铜锌超氧化物歧化酶的变化

目的了解病理性瘢痕（增生性瘢痕与瘢痕疙瘩）中脂质过氧化产物和铜锌超氧化物歧化酶（copper，zinc-superoxide dismutase，CuZn-SOD）的变化。方法取2005年5月-2005年8月收治患者自愿捐献的标本。瘢痕疙瘩组10例，年龄16～35岁，平均病程2．2年；增生性瘢痕组10例，年龄17～32岁，平均病程8个月；正常皮肤组8例，年龄16～34岁。应用化学比色法测定3组标本中CuZn．SOD活力和丙二醛（malonaldehyde，MDA）含量，采用免疫组织化学方法观察CuZn-SOD蛋白在病理性瘢痕中的表达，并对其进行评分。结果正常皮肤组、增生性瘢痕组及瘢痕疙瘩组MDA含量分别为（0．8213±0．0864）、（1．1390±0．1067）、（1．1900±0．0748）nmol／mg prot；CuZn-SOD活力分别为（20．60±5．56）、（31．65±2．21）、（34．36±5．01）U／mg prot。增生性瘢痕组和瘢痕疙瘩组MDA含量与CuZn-SOD活力同正常皮肤组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；增生性瘢痕组及瘢痕疙瘩组间比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。免疫组织化学染色观察：3组表皮角质形成细胞和真皮成纤维细胞均有CuZn．SOD蛋白阳性表达。正常皮肤组、增生性瘢痕组及瘢痕疙瘩组在表皮角质形成细胞中免疫组织化学评分分别为（2．20±0．45）、（4．14±0．90）、（4．43±0．79）分；在真皮成纤维细胞中评分分别为（1．60±0．89）、（4．00±0．82）、（4．43±0．53）分。增生性瘢痕组和瘢痕疙瘩组CuZn-SOD蛋白表达与正常皮肤组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；增生性瘢痕组及瘢痕疙瘩组间比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论病理性瘢痕中脂质过氧化产物MDA含量增加，CuZn-SOD活力升高、表达增强。     

烧伤创面与糖尿病溃疡创面的比较

目的比较烧伤创面与糖尿病溃疡创面的差异，初步分析糖尿病患者溃疡创面难愈的机制。方法分别切取非糖尿病烧伤患者的足部创面（对照组）和糖尿病患者的足部溃疡创面（试验组）组织，行组织块培养。用酶联免疫吸附测定（ELISA）法、反转录-PCR法分别检测创面组织释放的成纤维细胞生长因子2（FGF2）、血管内皮生长因子（VEGF）蛋白质及其mRNA水平；免疫组织化学法检测创面微血管密度（MVD）的变化。人脐静脉内皮细胞分别在含5mmol／L葡萄糖的培养液（正常培养液组）、含30mmol／L葡萄糖的培养液（高糖组）、含30mmol／L甘露醇的培养液（甘露醇组）中培养7d，以ELISA法测定VEGF蛋白质水平。结果对照组患者FGF2、VEGF蛋白质水平分别为（59±3）ng／ml、（56±7）pg／ml，试验组2种蛋白质水平分别为（89±6）ng／ml、（108±5）pg／ml，组间比较差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01），mRNA比较结果与蛋白质相似；2组的MVD水平，差异亦有统计学意义（P〈0．05）。体外细胞培养时当培养液含FGF2，高糖组与正常培养液组的VEGF蛋白质水平相近（P〉0．05）；移去FGF2后2、5d，正常培养液组该指标明显高于高糖组（P〈0．05或P〈0．01）。结论糖尿病患者溃疡创面难愈与血管化受到抑制以及调控血管生长的因子低表达密切相关。     

中药方剂Ⅰ号对小鼠前列腺细胞碱性成纤维细胞生长因子以及转化生长因子-β1表达的影响

目的观察中药方剂Ⅰ号对小鼠前列腺增生的治疗效果及其对前列腺细胞碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和转化生长因子-β1（TGF-β1）表达的影响。方法对尿生殖窦植入诱发的前列腺增生小鼠分别以NS、中药方剂Ⅰ号每天6g／kg体重和保列治0．1mg／kg体重灌胃后，测定各组小鼠前列腺重量并检测前列腺细胞bFGF及TGF-β1表达的变化。结果中药方剂Ⅰ号组前列腺湿重为（85．60±17．97）mg，较阴性对照组及保列治组[分别为（146．10±10．47）mg，（104．63±19．60）mg]显著减轻（P〈0．01）；中药方剂Ⅰ号组bFGF和TGF一[31的表达量分别为（4．39±0．66）％、（4．14±0．40）％，明显低于阴性对照组[分别为（4．84±0．51）％、（4．56±0．48）％，P〈0．05]。结论中药方剂Ⅰ号对小鼠前列腺增生有明显治疗作用，其作用机制可能是通过调节前列腺细胞生长因子，从而抑制或减缓前列腺增生的发生。     

利用IGF-1基因敲除鼠乳腺癌模型研究IGF-1对血管生成的影响

目的探讨在低血清胰岛素样生长因子-1（IGF-1）水平与正常IGF-1水平的小鼠乳腺癌模型中应用血管生长抑制剂——人参皂甙（GS）Rg3后，IGF-1对血管生成的影响。方法应用7，12-二甲基苯蒽（DMBA）诱导肝脏特异性IGF-1基因敲除鼠（IAD鼠）及对照鼠建立原发乳腺癌模型，应用GSRg3进行干预治疗，利用免疫组化法检测乳腺癌组织中血管内皮生长因子（VEGF）和Ⅷ因子相关抗原（F8-RAg）表达水平，同时利用基因芯片技术检测小鼠乳腺癌及正常乳腺组织中相关基因的表达情况。结果LID鼠乳腺癌的发生率低于对照鼠（P〈0．05）；LID鼠乳腺癌组织中VEGF表达水平与微血管密度均低于对照组（P〈0．05）。LID鼠乳腺癌组织中IGF-1、成纤维细胞生长因子（FGF）1、肝细胞生长因子（HGF）和转化生长因子（TGF）-β1基因较对照组上调，成纤维细胞生长因子受体（FGFR）-2、血小板源性生长因子（PDGF）-A和PDGF-B基因较对照组下调；应用GSRg3后，LID鼠乳腺癌组织中VEGFa、表皮生长因子（EGF）、表皮生长因子受体（EGFR）、PDGF—A和FGFR-2基因较对照组上调，而IGF1和TGF-β1基因较对照组下调。结论IGF1促进小鼠乳腺癌的发生、发展，且与血管生长密切相关。血管生长抑制剂可能通过IGF-1及TGF-β1发挥抗肿瘤作用。     

损伤后肌腱及粘连组织中五种生长因子基因的表达及意义

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、胰岛素样生长因子（IGF-1）、转化生长因子-β（TGF-β）、血小板源性生长因子-β（PDGF-β）和血管内皮细胞生长因子（VEGF）五种生长因子在肌腱及粘连组织中的基因表达差别。方法取20只Leghorn鸡，制作肌腱损伤粘连模型，术后8周分别取损伤部位肌腱及粘连组织，提取mRNA，进行RT-PCR反应和电泳。对电泳上基因表达条带做密度测定，并进行统计学分析。结果bFGF、IGF-1和TGF-β基因在粘连组织中的相对表达量分别为0．29±0．06，0．51±0．14和0．27±0．04，在肌腱组织中的相对表达量分别为0．96±0．13，3．14±0．86和9．02±0．68。此三种生长因子基因在修复肌腱组织中的表达量均大于粘连组织中的表达量，差异有统计学意义（P〈0．05）。PDGF-β和VEGF基因仅在粘连组织中有部分样本表达，且表达量很少。结论bFGF、IGF-1和TGF-β基因在损伤后的肌腱组织中的表达强于粘连组织，PDGF-β和VEGF基因仅在粘连组织中有微弱表达。     

增生性瘢痕水泡液β转化生长因子的变化及意义

目的 研究早期瘢痕组织β转化生长因子（transforming growth factor β,TGF-β）的变化,以探索TGF-β在增生性瘢痕形成中的作用,并利用瘢痕水泡液作为研究增生性瘢痕的新途径.方法 采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测大面积深度烧伤患者愈合后瘢痕增生早期（≤90 d）的水泡液和血液TGF-β1的含量,动态监测瘢痕早期组织TGF-β1的变化,并与正常皮肤组织水泡液和血液对照.结果 大面积深度烧伤愈合后瘢痕形成早期患者血液和正常皮肤水泡液TGF-β1的含量与正常人血液比较无升高.均低于本试剂盒最低可检测阈值（15.6 pg/L,P〉0.01）;增生性瘢痕水泡液TGF-β1含量显著高于其血液和正常皮肤水泡液（P均〈0.01）,而且瘢痕增生早期（1～3个月）组织TGF-β1逐渐升高（P〈0.01）.结论 瘢痕形成早期组织TGF-β含量增高可能是瘢痕增生的重要因素;瘢痕水泡液可作为研究增生性瘢痕的新途径.     

periostin在过度增生性瘢痕的表达及其与TGF-β1和受体的相关性

目的检测periostin在过度增生性瘢痕中的表达，研究其与TGF-β1和受体的相关性，探讨periostin与瘢痕过度增生的关系。方法采用RT-PCR法检测瘢痕疙瘩、增生性瘢痕、正常皮肤组织中periostin、TGF-β1，及其受体Ⅰ、Ⅱ的mRNA表达，Western blot法检测periostin的蛋白表达。结果在基因水平，periostin在瘢痕疙瘩的表达高于正常皮肤，TGF-β1在瘢痕疙瘩的表达高于增生性瘢痕和正常皮肤，TGF-βRⅠ在瘢痕疙瘩的表达高于增生性瘢痕和正常皮肤，上述差异有统计学意义（P〈0．01）；TGF-βRⅡ的表达在3组间差异无统计学意义。在蛋白水平，periostin在瘢痕疙瘩和增生性瘢痕的表达均高于正常皮肤（P〈0．05）。periostin和TGF-β1的表达呈正相关（P〈0．01）。结论periostin在瘢痕疙瘩组织中表达增高，是瘢痕相关基因；其在瘢痕疙瘩形成中可能发挥重要作用，该作用与TGF-β1密切相关。     

国外美容医学最新动态

整形美容 1苯丙酸诺龙和follistatin的失衡影响人烧伤后皮肤增生性瘢痕的发生 增生性瘢痕是皮肤损伤后的病变，其特征是在烧伤或创伤后皮肤持续性炎症和纤维性增生。在此过程中，细胞因子、生长因子，如TGF-β等的改变起着重要作用。Activin A（苯丙酸诺龙A）是TGF-β家族成员之一，与TGF-β共同参与相同的细胞内Smad信号通路。     

高压氧对兔耳增生性瘢痕形成的影响

目的：探讨高压氧（Hyperbaric oxygenation,HBO）对兔耳增生性瘢痕形成及对血管内皮生长因子（VEGF）、转化生长因子β1（TGFβ1）表达的影响。方法：选取20只新西兰大白兔建立兔耳瘢痕模型,每耳6个创面,随机分成实验组和对照组2组,每组10只,共120个创面,实验组术后立即给予HBO处理,对照组处于常压环境中。术后第29天切取瘢痕组织,测量瘢痕增生指数（hypertrophic index,HI）,并用HE染色观察瘢痕形态学变化,免疫组织化学方法检测TGFβ1及VEGF的表达。结果：实验组HI值明显低于对照组（P〈0．01）;HE染色结果示实验组成纤维细胞数目较对照组明显减少（P〈0．01）;免疫组织化学检测结果示实验组VEGF、TGFβ1的表达量较对照组显著降低（P〈0．01）。结论：HBO可降低VEGF、TGFβ1的表达,对兔耳增生性瘢痕有明显抑制作用。     

TGF-β1和CTGF在病理性瘢痕中的表达及意义

目的研究转化生长因子β1（TGF-β1）及结缔组织生长因子（CTGF）在病理性瘢痕组织中的表达，并探讨其在病理性瘢痕发病机制中的作用。方法应用免疫组化技术检测19例瘢痕疙瘩患者（为A组）、32例增生性瘢痕患者（为B组）及15例正常皮肤组织（为C组）中，TGF-β1和CTGF两种因子的表达，并进行统计学分析。结果在A、B组中TGF-β1和CTGF均呈高表达，与C组比较，其差异有统计学意义（P〈0．01），但A、B两组之间比较，其差异无统计学意义（P〉0．05）。结论TGF-β1和CTGF对病理性瘢痕的形成可能起到促进作用。     

靶向血管治疗增生性瘢痕的实验研究

目的 探讨靶向血管治疗烧伤后增生性瘢痕的可行性和方法。方法 通过建立增生性瘢痕的裸鼠移植模型，使用不同剂量血管内皮生长因子(VEGF)的单克隆抗体，进行瘢痕内注射治疗，观察瘢痕Ⅰ型、Ⅲ型胶原和血管的量以及其超微结构的变化。结果 靶向血管治疗3周后，增生性瘢痕的体积明显减小，瘢痕胶原、血管明显减少，瘢痕内大量成纤维细胞坏死、凋亡，代之成熟的纤维细胞，失去了典型增生性瘢痕的特征。结论 血管内皮生长因子可能对增生性瘢痕中的大量血管新生起支持作用，大量血管对增生性瘢痕的胶原合成可能起着促进作用，针对VEGF的靶向血管治疗可能是治疗增生性瘢痕的的一种有意义的方法。     

病理性瘢痕中结缔组织生长因子基因的表达

目的　探讨结缔组织生长因子在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩发病机制中的作用。　方法　分别留取正常皮肤 5例、增生性瘢痕 15例和瘢痕疙瘩 7例组织标本 ,测定组织中羟脯氨酸含量 ,通过逆转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)和图像定量分析 ,检测组织中结缔组织生长因子基因表达水平。　结果　正常皮肤、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中羟脯氨酸含量分别为 (2 6 .5 2± 4 .10 )、(84 .10± 1.76 )和 (92 .38± 2 .0 4 )μg/ mg,后两者与前者比较差异有统计学意义 (P<0 .0 1) ;正常皮肤、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中结缔组织生长因子 m RNA指数分别为 0 .0 9± 0 .2 5、0 .78± 0 .6 3和0 .84± 0 .0 4 ,后两者与前者比较差异有统计学意义 (P<0 .0 1)。　结论　结缔组织生长因子在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩纤维化进程中可能起着促进作用。     

FGFR1在增生性瘢痕和正常皮肤中的表达

目的　研究FGFR1在增生性瘢痕和正常皮肤中表达的差异。方法　用免疫组织化学、Western -blot、流式细胞仪分析等方法检测FGFR1在增生性瘢痕和正常皮肤组织及相关细胞中的表达差异以及在成纤维细胞中的亚细胞分布状况。结果　FGFR1阳性细胞主要存在于角质形成细胞、汗腺、皮脂腺、血管内皮细胞及成纤维细胞等 ,细胞爬片观察到阳性颗粒主要位于细胞核 ,细胞浆中不如细胞核中明显。FGFR1在单个细胞中的表达量无明显差异。结论　FGFR1在增生性瘢痕和正常皮肤中表达无差异     

增生性瘢痕中磷酸化P38丝裂原活化蛋白激酶和c-Jun蛋白的表达特征及其与瘢痕形成的关系

目的观察磷酸化P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)和c-Jun蛋白在增生性瘢痕组织中的表达特征及其影响瘢痕形成和成熟的机制. 方法取16例住院的增生性瘢痕患者的瘢痕组织,并将其分为生长活跃期组(形成时间在1年以内,含1年者)、生长稳定期组,每组各8例;另取正常皮肤8例.所有取材均未经任何治疗.用免疫组织化学方法和常规病理技术检测磷酸化P38MAPK和c-Jun 两种蛋白,在增生性瘢痕组织和正常皮肤组织中的表达和分布规律. 结果正常皮肤组织中,磷酸化P38MAPK主要分布于表皮基底层细胞的胞浆和胞核内,c-Jun蛋白则主要定位于表皮细胞和内皮细胞中,两种蛋白的阳性细胞率分别为21.3%±3.6%和33.4%±3.5%.在处于生长活跃期的增生性瘢痕组织中,磷酸化P38MAPK和c-Jun的阳性信号主要定位于表皮细胞和部分成纤维细胞内,阳性细胞率分别上升至69.5%±3.3%和59.6%±4.3%,明显高于正常皮肤组织(P＜0.01);而在成熟稳定的增生性瘢痕中,两种蛋白表达有所下降,但仍高于正常皮肤组织. 结论增生性瘢痕的形成和成熟可能与激活P38MAPK信号传递通路,影响c-Jun蛋白表达有关.     

血管内皮生长因子抗体靶向血管治疗对增生性瘢痕Ⅰ型胶原蛋白表达的影响

目的观察血管内皮生长因子(VEGF)抗体靶向血管治疗对人增生性瘢痕Ⅰ型胶原蛋白在裸鼠体内表达的影响。方法将1％TBSA深Ⅱ度创面愈合后的增生性瘢痕组织块(取自1例女性烧伤患者)植入48只BALA／C裸鼠肩胛部皮下,建立裸鼠增生性瘢痕移植模型。术后3周,将裸鼠分为大剂量组、中剂量组、小剂量组及对照组,每组12只,分别用0．01 mol／L灭菌磷酸盐缓冲液(PBS)稀释的15、10、5μg／ml VEGF单克隆抗体200μl以及等量、同浓度的PBS进行瘢痕内直接注射,每周2次,持续3周。术后45 d,测量各组裸鼠瘢痕组织的大小,计算体积;以HE染色行组织学观察;采用逆转录聚合酶链反应与蛋白质印迹法分析瘢痕组织Ⅰ型前胶原蛋白mRNA和Ⅰ型胶原蛋白的表达。结果大剂量组、中剂量组、小剂量组瘢痕体积分别为(55．3±4．1)、(67．9±5．7)、(78．9±5．5)mm3;与对照组(85．0±7．3)mm3比较,大剂量组、中剂量组瘢痕体积明显变小(P< 0．05)。大剂量组、中剂量组血管和成纤维细胞较少,胶原纤维减少,排列较整齐。与对照组比较,大剂量组和中剂量组Ⅰ型前胶原蛋白mRNA和Ⅰ型胶原蛋白表达明显降低;小剂量组与之接近。结论VEGF抗体靶向血管治疗可抑制增生性瘢痕血管形成、胶原表达及瘢痕生长。     

Enhancement of ischemic flap survival by prefabrication with transfer of exogenous PDGF gene

Treatment of skin flaps by means of gene therapy has been introduced recently as a novel approach to enhance viability of ischemic skin flaps. Transfer of the platelet-derived growth factor (PDGF) to enhance survival of the ischemic skin flap has not been explored. In this study, the authors investigated the effect of the transfer of the PDGF cDNA on survival and vascularity of the ischemic random flap in a rat model, and compared the effects of PDGF gene therapy to those of vascular endothelial growth factor (VEGF) gene therapy. A total of 45 adult Sprague-Dawley rats were randomly divided into four groups. The PDGF gene therapy group (n=10) received the plasmid containing the PDGF cDNA with liposome injected to the dermis of the flap. A saline control group (n=10) received physiologic saline only, and the vector control group (n=10) received liposome plus vector without the PDGF gene segment. In the fourth group (n=15), the VEGF gene was transferred to the flap. Seven days later, a dorsal random flap including the injection area was raised. One rat each from the saline and vector control groups died during the study period and were excluded. The viability of the flap and vascularity within the flaps were assessed 7 days after flap elevation. The PDGF plasmid-treated flaps had significantly greater survival area (60.8+/-7.8 percent) compared with the flaps treated with saline (52.3+/-5.0 percent) and those treated with liposome and vector (50.7+/-5.9 percent). PDGF gene therapy had effects on survival of the flap similar to VEGF gene therapy (57.6+/-5.2 percent, after transfer of VEGF cDNA). Neovascularization with the flap tissues was confirmed by immunohistochemical staining of von Willebrand factor, a marker specific for angiogenesis. The number of newly-formed blood vessels in the transgenic flaps was significantly greater than that of the vessels in the flaps receiving the saline. The findings of this study indicate that transfer of the PDGF cDNA effectively enhances neovascularization of the ischemic skin flap and increases the viability of the flap, and transfer of the PDGF gene is as efficient as transfer of the VEGF gene in improving viability of the skin flap. This study suggests that PDGF gene therapy may be a novel strategy for the treatment of ischemic skin flaps.     

Angiogenesis and proliferation of endothelial cells in hypertrophic and nodular port-wine stain

BackgroundPort-wine stain (PWS) has been classified not as the hyperplasia of cells, but rather, as an expansion of malformed vessels. However, previous studies have reported upregulated expression of proangiogenic factors in PWS. Several studies have indicated that the pathology exhibits proliferation of numerous endothelial cells in hypertrophic/nodular PWS. This study aimed to determine the expression of vascular epithelial growth factor (VEGF), matrix metalloproteinase-9 (MMP-9), angiopoietin-2 (ANG-2), and basic fibroblast growth factor (bFGF) in hypertrophic PWS.MethodsImmunohistochemistry was used to analyze skin samples from 33 patients with hypertrophic PWS. Expression levels of VEGF, MMP-9, ANG-2, and bFGF in hypertrophic PWS were determined by multiplying the intensity by the percentage of immunoreactive cells. Immunoreactivity scores were classified as follows: negative (0), low (1), moderate (2, 3, and 4), or high (6).ResultsBased on pathological characteristics, hypertrophic PWS was divided into vascular malformation and pyogenic granuloma (PG) types. VEGF, MMP-9, ANG-2, and bFGF were significantly activated in the blood vessels of PG-type PWS samples compared with their counterparts in blood vessels of vascular malformation-type PWS samples and controls. PG-type hypertrophic PWS, which exhibited proliferation of endothelial cells, showed the strongest activation.ConclusionThe exuberant proliferation of endothelial cells in PG-type hypertrophic PWS may be associated with the regulation of proangiogenic factors during development. These proangiogenic factors that function in the angiogenesis and proliferation of endothelial cells may play an important role in the pathogenesis and progression of PWS. Furthermore, these factors may be dynamic and behave differently in various types of hypertrophic PWS.     

康宁克通或干扰素局部注射对瘢痕PDGF BB基因表达影响

目的 明确康宁克通和干扰素α－２b对增生性瘢痕成纤维细胞的抑制是否通过ＰＤＧＦ途 径。方法 对６例增生性瘢痕同一个体分区域同时局部注射康宁克通或干扰素α－２b后３ 天及７天的ＰＤＧＦ ＢＢ ｍＲＮＡ原位表达进行了观察。结果 ①康宁克通或干扰素α－２b在局部注射后７天的ＰＤＧＦ ＢＢ ｍＲＮＡ表达强度比未注射区均明显减少（Ｐ〈０．０１）,但局部注射后３天表达强度与未注射区相比均无显著性差异（Ｐ〉０．０５）