移植不同人工真皮支架对猪Ⅲ度烧伤创面血管化及瘢痕形成的影响

目的 了解移植3种人工真皮支架对Ⅲ度烧伤创面血管化及其瘢痕形成的影响.方法 采用随机数字表法将18只广西巴马小型猪分成壳聚糖支架组、磺化羧甲基壳聚糖支架组、ADM支架组,每组6只,在每只猪背部制作Ⅲ度烫伤(下称烧伤)创面4或8个,共96个.伤后48 h切痂后,前2组创面分别移植胶原-壳聚糖/硅橡胶双层人工皮、胶原-磺化羧甲基壳聚糖/硅橡胶双层人工皮,ADM支架组创面移植ADM,每组创面24个;剩余24个创面作为油纱对照组,直接覆盖油纱.于支架移植或油纱覆盖后l、2、3、4周(“4周”指植入支架或覆盖油纱后2周+移植表皮后2周),观察各组创面的大体情况;取创面中央部位组织,采用生物素-链霉亲和素-过氧化物酶染色法观察CD31、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、TGF-β1、TGF-β3表达阳性的血管或细胞,并计数.对数据行单因素方差分析和LSD检验. 结果(1)大体观察可见,磺化羧甲基壳聚糖支架组创面血管化程度明显优于其余3组.(2)移植或覆盖后1～3周各组创面组织CD31阳性血管数持续增多,第4周时3个支架组均减少.各时相点4组间比较,F值分别为24.005、38.822、25.274、3.856,P＜0.05或P＜0.01;磺化羧甲基壳聚糖支架组l～3周明显多于其余3组(P值均小于0.05).(3)移植后1～3周,3个支架组创面组织α-SMA阳性血管数均持续增多,4周时下降;油纱对照组覆盖后1～4周持续增多.各时相点4组间比较,F值分别为22 637、28.087、62.651、18.055,P值均小于0.01.磺化羧甲基壳聚糖支架组各时相点均明显多于其余3组(P值均小于0.05).(4)移植或覆盖后1～4周每400倍视野下TGF-β1阳性细胞数:壳聚糖支架组分别为(127±8)、(167±19)、(170±18)、(144±10)个,磺化羧甲基壳聚糖支架组为(171±17)、(207±25)、(130±30)、(69±16)个,ADM支架组为(106±8)、(159±17)、(171±11)、(145±11)个,油纱对照组为(100±20)、(150±18)、(200±14)、(172±20)个;各时相点4组间比较,F值分别为29 675、9.503、13 107、54.515,P值均小于0.01.1、2周时磺化羧甲基壳聚糖支架组明显高于其余3组(P值均小于0.05),3、4周时其表达量下降,明显低于其余3组(P值均小于0 05).(5)移植或覆盖后1～3周,各组创面组织每400倍视野下TGF-β3阳性细胞数持续增多,4周时下降或继续升高;各时相点4组间比较,F值分别为140.612、945 850、714.037、119.147,P值均小于0.01.磺化羧甲基壳聚糖支架组各时相点明显高于其余3组(P值均小于0 05). 结论 胶原-磺化羧甲基壳聚糖真皮支架在烧伤创面愈合过程中可快速诱导血管生成和成熟,有利于创面早期修复和抑制瘢痕增生.     

生物合成与细胞凋亡在胶原-壳聚糖真皮支架修复创面中的作用和机制

目的 探讨胶原一壳聚糖真皮支架在修复全层皮肤缺损的生物合成和细胞凋亡机制,并明确支架植入修复创面与无支架植入的瘢痕修复创面的区别.方法 将胶原-壳聚糖,硅橡胶双层人工真皮支架移植于猪全层皮肤缺损创面,对植入后1、2、3周及植入支架2周加植表皮后2周的创面和修复情况进行观察.同时,通过免疫组织化学、末端脱氧核苷酸介导的生物素化的脱氧尿嘧啶DNA切口末端标记、天狼猩红染色方法,对不同时间的创面的TGF-β1.的表达、细胞凋亡发生情况以及支架自身胶原替代进行检测和观察.以不植入支架的创面为对照.结果 ①实验组创面与正常肉芽组织不同.②TGF-β1在实验组表达高峰在支架植入后1、2周,3-4周持续下降;在对照组中,1～3周的创面持续升高,4周下降.组问比较,1、2周实验组明显高于相应对照组,3、4周实验组明显低于相应对照组.③实验组植入支架后2-4周,细胞凋亡持续增多;对照组3-4周创面细胞凋亡持续增多.组间比较,l周两者差异无统计学意义,2-4周实验组显著高于相应对照组.④天狼猩红染色观察:实验组1周,自身胶原已开始合成,2-3周基本完成支架自身胶原替代.结论 胶原-壳聚糖真皮支架在伤口愈合中有明显作用,其修复创面的机制与自然的肉芽或瘢痕修复不同.     

增殖瘢痕成纤维细胞接触后增殖及生物合成特性对异常瘢痕形成的机理

目的 为明确不同异常瘢痕成纤维细胞在体外完全接触后其增殖活性及生物全成功能的特性。方法 以瘢痕疙瘩、增生性瘢痕和正常皮肤（各6例）为材料，通过细胞培养、免疫组织化学及分子生物学等方法，对不同成纤维细胞在细胞接触及未接触时通过检测增殖细胞核内抗原、P16、Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及前胶原基因表达对成纤维细胞的增殖、抑制及生物合成进行了研究。结果 瘢痕疙瘩成纤维细胞接触表现为细胞交叉重叠及较高的增殖活性及旺盛的生物合成功能，提示其失去了接触性抑制及密度抑制。皮肤成纤维细胞接触后则增殖及生物合成功能明显下降。增生性瘢痕成纤维细胞接触后表现为旺盛的生物合成功能，但其增殖活性处于瘢痕疙瘩和正常皮肤成纤维细胞之间。结论 不同瘢痕成纤维细胞接触后增殖及生物合成的特性可能是形成不同瘢痕的机理之一。     

瘢痕疙瘩和正常皮肤成纤维细胞对白介素-1β和白介素-6的反应

目的研究瘢痕疙瘩浸润、增生、老化3个不同部位的成纤维细胞性状。方法以6例瘢痕疙瘩为标本,6例正常皮肤为对照,通过细胞培养的疗法研究了瘢痕疙瘩3个不同部位和正常皮肤的成纤维细胞对白介素-1β(IL-1β)(200U/ml)和白介素-6(IL-6)(100U/ml)的反应。结果 IL-1β抑制瘢痕疙瘩增生部成纤维细胞而剌激正常皮肤的成纤维细胞,对浸润及老化部成纤维细胞无明显影响。IL-6抑制所有的成纤维细胞。结论瘢痕疙瘩不同部位和正常皮肤的成纤维细胞对 IL-1β和 IL-6的反应不尽相同。     

地塞米松对大鼠应激性溃疡的影响

长期以来,许多学者认为糖皮质激素可引起胃粘膜屏障破坏而诱发胃十二指肠溃疡,而应激状态下的危重病人的治疗又经常需用糖皮质激素.为此,本文观察了地塞米松对束缚水浸法大鼠应激性胃粘膜损伤的影响,以探讨地塞米松在应激性溃疡中的作用.     

硅胶乳房假体的硅胶、囊壁分别移植的实验研究

应用硅胶植放兔体内，经过１个月、６个月和１２个月，检查白细胞总数、嗜酸细胞总数、ＩｇＥ、ＣＩＣ、红细胞免疫。组织学行光镜和电镜观察。发现术后ＩｇＥ、ＣＩＣ降低，术后１个月可见大量炎性细胞浸润，６个月后植入硅胶周围有层包膜形成。电镜观察见线粒体较大，结构不清、脊少或破坏，卫星细胞核结构不清，见大量粗面内织网，局部肌纤维间隙增大，有杂乱纤维存在，此处线粒体较多，体积增大，脊破坏消失。同时应用硅胶囊片植入，检查除形态学外的以上项目，结果无统计学意义。提示硅胶植入体内，可能引起免疫功能失调。     

干扰素a-2b对增生性瘢痕HLA-DR和CD1a分子的影响

目的:探讨干扰素a-2b对增生性瘢痕HLA-DR和CD1α。分子的作用。方法 利用免疫组织化学方法检测6例增生性瘢痕（HS）和6例正常皮肤HLA-DR和CD1α分子的分布及密度,观察干扰素a-2b治疗后HS HLA-DR和CD1α分子的变化。结果:（1）HS组织表皮HLA-DR LC的数量806.67±101.72个//mm2和表皮CD1α LC的数量700.00±108.82个/mm2明显高于正常皮肤510.00±45.07个/mm2,521.24±57.87个/mm（P<0.05）。（2）HS组织HLA-DR分子在角质形成细胞和成纤维细胞中异常出现。（3）于扰素a-2b治疗3d时HS表皮HLA-DR LC及CD1α LC的数量分别为283.34±73.12个/mm2,220.00±83.92个/mm2,7d时516±49.67个/mm2,589.10±108.82个/mm2,干扰素a-2b治疗后HS表皮HLA-DR LC及CD1αLC的数量明显降低（P<0.05）。结论:（1）HLA-DR和CD1α分子数量的增加提示HS和K局部组织可能处于高兔疫应答状态;（2）干扰素a-2b可能通过抑制HLA-DR和CD1α分子降低HS高免疫应答的状态。     

Role of HLA-DR and CD1a molecules in pathogenesis of hypertrophic scarring and keloids

ＴｈｅｓｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓｗｅｒｅｉｎｔｅｎｄｅｄｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｐａｔｈｏｇｅｎｅｔｉｃｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆａｂｎｏｒｍａｌｓｃａｒｓｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｓｔｕｄｙｏｆｃｈａｎｇｅｓｉｎＨＬＡ ＤＲａｎｄＣＤ1ａｍｏｌｅｃｕｌｅｓｉｎｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｉｃｓｃａｒｒｉｎｇａｎｄｋｅｌｏｉｄｓ Ａｔｔｈｅｓａｍｅｔｉｍｅ,ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｔｒｉａｍｃｉｎｏｌｏｎｅａｃｅｔｏｎｉｄｅｏｎＨＬＡ ＤＲａｎｄＣＤ1ａｍｏｌｅｃｕｌｅｓｉｎＨＳｗｅｒｅａｌｓｏａｎａｌｙｚｅ…     

瘢痕疙瘩和正常皮肤成纤维细胞对白介素1β和白介素6的反应

目的研究瘢痕疙瘩浸润、增生、老化３个不同部位的成纤维细胞性状。方法以６例瘢痕疙瘩为标本，６例正常皮肤为对照，通过细胞培养的方法研究了瘢痕疙瘩３个不同部位和正常皮肤的成纤维细胞对白介素－１β（ＩＬ－１β）（２００Ｕ／ｍｌ）和白介素－６（ＩＬ－６）（１００Ｕ／ｍｌ）的反应。结果ＩＬ－１β抑制瘢痕疙瘩增生部成纤维细胞而刺激正常皮肤的成纤维细胞，对浸润及老化部成纤维细胞无明显影响。ＩＬ－６抑制所有的成纤维细胞。结论瘢痕疙瘩不同部位和正常皮肤的成纤维细胞对ＩＬ－１β和ＩＬ－６的反应不尽相同。