间歇性低氧预适应对力竭运动大鼠心肌自噬蛋白表达及相关通路的影响

目的 探讨间歇性低氧预适应对力竭运动大鼠心肌自噬相关蛋白表达及单磷酸激活蛋白激酶（AMPK）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/不协调51样自噬激活激酶1(ULK1)信号通路的影响。 方法 60只SD大鼠随机分为空白组（Blank组）、对照组（Control组）、EE组、EE+1wIH组和EE+3wIH组，EE+1wIH组和EE+3wIH组大鼠在构建EE模型前分别给予1w和3w的IH预处理，除空白组外其余组大鼠进行游泳训练，且EE组、EE+1wIH组和EE+3wIH组构建EE模型；ELISA法检测各组大鼠血浆心肌肌钙蛋白I (cTnI)水平，铬变素2R（C-2R）染色检测大鼠心肌缺血缺氧情况，TUNEL法检测细胞凋亡，电镜下观察心肌组织内自噬小体数量，免疫组化检测抗体微管相关蛋白1轻链3 Ⅱ (LC 3 Ⅱ)和Beclin 1蛋白表达，Western blot检测蛋白表达水平AMPK-mTOR-ULK1信号通路蛋白的表达。 结果 在Blank组中，所有心肌细胞的边界清晰，并且呈均匀的绿色染色；在Control组中，心肌细胞边界清晰，仅有少量红染散在组织中；在EE组中，部分心肌细胞的边界不清晰，心肌细胞以红色为主，少数呈绿色，说明大部分的心肌细胞都不同程度地受到缺血和缺氧的影响。EE+1wIH组和EE+3wIH组红染心肌细胞数明显低于EE组。与Blank组相比，EE组血浆cTnI水平、C-2R平均光密度（MOD）、心肌细胞凋亡率、心肌组织自噬数量、Beclin1、LC3 II、p-AMPK、ULK1蛋白明显升高，p-mTOR蛋白明显降低（P<0.05），与EE组相比，EE+1wIH组和EE+3wIH组上述指标均有明显改善（P<0.05）。 结论 EE可导致大鼠心肌自噬水平明显升高，而IH可能通过调控AMPK-mTOR-ULK1信号通路改善EE诱导的大鼠心肌细胞的自噬水平。     

C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白13通过单磷酸腺苷激活的蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶点复合物通路对高糖诱导的大鼠原代肝窦内皮细胞自噬功能影响的研究

目的 探讨C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白13(CTRP13)通过单磷酸腺苷激活的蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶点复合物（AMPK/mTOR）通路对高糖诱导的大鼠原代肝窦内皮细胞（rLSECs）自噬功能的影响。方法 分离、鉴定、培养rLSECs,分为正常对照（NC）组、高糖（HG）组、HG+LV-CTRP13组、HG+慢病毒空载体（LV-Con）组（HG+LV-Con）,构建CTRP13慢病毒过表达载体（LV-CTRP13）及慢病毒空载体（LV-Con）并转染r LSECs,分别使用AMPK抑制剂Compound C、mTOR抑制剂Torin1、自噬抑制剂3MA干预,分为HG+LV-Con+Compound C组、HG+LV-CTRP13+Compound C组、HG+LV-Con+Torin1组、HG+LV-CTRP13+Torin1组、HG+LV-Con+3MA、HG+LV-CTRP13+3MA组。透射电子显微镜观察自噬小体,qRT-PCR、Western blot法检测各组CTRP13、自噬相关蛋白Beclin1、人微管相关蛋白轻链3II(LC3II)、人质膜膜泡关联蛋白（PLVAP）...     

腺苷酸激活蛋白激酶对缺氧H9c2心肌细胞线粒体自噬及细胞凋亡的影响

目的 探讨腺苷酸激活蛋白激酶[adenosine 5’-monophosphate(AMP)-activated protein kinase,AMPK]对缺氧H9c2心肌细胞线粒体自噬及细胞凋亡的影响及可能机制。方法 实验分为对照组、模型组、AMPK特异性阻断剂（Compound C）组和AMPK激活剂5-氨基咪唑-4-甲酰胺核苷酸转甲酰酶（5-amino-4-imidazolecarboxamide riboside,AICAR）组，采用免疫荧光染色检测线粒体自噬水平；Rhodamine-123和mitotracker双染色及线粒体膜电位检测试剂盒检测线粒体膜电位变化；磷脂结合蛋白V(AnnexinⅤ)-碘化丙啶（propidium iodide,PI）染色检测细胞凋亡率；Western blot检测AMPK、p-AMPK蛋白表达。结果 免疫荧光染色结果显示，与对照组、模型组或Compound C组相比，AICAR组心肌细胞自噬体数增加，差异有统计学意义（P<0.05）。线粒体膜电位变化结果显示，与模型组或Compound C组相比，AICAR组心肌细胞膜电位正常的线粒体比例...     

Adiponectin 通过FoxO1信号通路减轻阿霉素细胞毒性的作用机制研究

目的 阐明FoxO1在脂联素（Adiponectin,APN）减轻阿霉素（Doxorubicin,DOX）心肌细胞毒性中的作用及机制。 方法 将分离的乳鼠心肌原代细胞（Neonatal rat cardiomyocytes, nrCMs）随机分为对照组（CON）、APN处理组（APN）、DOX损伤组（DOX）、APN保护组（APN-DOX）、DOX损伤+Scramble siRNA组（DOX-Scramble siRNA）、DOX-FoxO1 siRNA组、APN-DOX-Scramble siRNA组、APN-DOX-FoxO1 siRNA组。以CCK-8试剂盒检测细胞活力、ATP检测试剂盒检测线粒体ATP生成、ROS检测试剂盒检测ROS生成量、Western blot检测自噬标志蛋白的表达情况。 结果 DOX处理后较CON组,细胞活力显著降低（P<0.05）,线粒体ATP生成受到抑制,同时ROS生成量显著增加,自噬被显著激活（P<0.05）;APN预处理可通过抑制自噬而显著降低DOX诱导的心肌细胞毒性（P<0.05）,APN可通过上调phospho-FoxO1的表达而抑制自噬的激活,从而保护nrCMs细胞免受DOX诱导的心肌细胞毒性损伤,APN的心肌保护作用可被FoxO1 siRNA而抑制,如自噬过程的激活及ATP生成受到抑制,同时ROS生成量显著增加。 结论 APN通过上调FoxO1磷酸化水平,抑制自噬,进而缓解DOX引起的心肌细胞毒性。     

钠尿肽嵌合体CNAAC抗大鼠缺血/再灌注心肌损伤的作用

目的 探讨钠尿肽嵌合体C_NAA_C在抗缺血/再灌注（ischemia/reperfusion, I/R）心肌损伤中的作用及可能机制。 方法 将SD大鼠随机分为三组,即假手术组（Sham组）、缺血/再灌注组（I/R组）、缺血/再灌注+C_NAA_C组（I/R+C_NAA_C组）,缺血30 min,再灌注120 min。再灌注结束后观察并检测各组大鼠心肌组织结构、心肌细胞超微结构、心肌细胞凋亡、体液因子和相关蛋白表达的变化。 结果 与Sham组相比,I/R组大鼠心肌细胞出现肿胀、炎性浸润,心肌线粒体分裂增加,细胞色素C的表达、心肌细胞凋亡增多（P<0.01）,心肌梗死面积、血清LDH、CK-MB和cTnT的水平显著增加（P<0.01）,心肌PI3K、磷酸化Akt（Ser473）表达显著减少（P<0.01）;与I/R组相比,I/R+C_NAA_C组大鼠心肌细胞炎性浸润减少、心肌排列整齐,心肌线粒体分裂被抑制,细胞色素C的表达、心肌细胞凋亡减少（P<0.01）,心肌梗死面积降低（P<0.01）,血清中LDH、CK-MB、cTnT的水平下降（P<0.01）,心肌PI3K、磷酸化Akt的表达显著增加（P<0.01）。 结论 C_NAA_C具有上调PI3K/Akt信号通路以及明显改善心肌缺血/再灌注大鼠心肌损伤的作用。     

金丝桃苷对H9C2细胞缺血再灌注损伤的作用机制

目的探讨金丝桃苷对H9C2细胞缺血再灌注损伤的作用及可能机制。方法采用H9C2细胞模拟缺血再灌注模型,缺血液培养45min,再恢复正常达尔伯克改良伊格尔培养液培养4h。将H9C2细胞随机分为对照组,金丝桃苷组,缺血再灌注组,金丝桃苷处理+缺血再灌注组(联合组)。光镜观察细胞形态变化,CCK-8法检测细胞活力,Western blot检测磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)蛋白水平,自噬相关蛋白LC3Ⅱ、Beclin1和P62以及凋亡相关蛋白裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase-3)活性水平,TUNEL染色观察凋亡变化。结果金丝桃苷组与对照组各项指标比较,差异无统计学意义(P0.05)。与对照组比较,缺血再灌注组凋亡指数、caspase-3活性、LC3Ⅱ和Beclin1明显增高,细胞活力、磷酸化AMPK、磷酸化mTOR和P62蛋白明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。与缺血再灌注组比较,联合组细胞活力、磷酸化AMPK、磷酸化mTOR和P62蛋白明显增高,凋亡指数、caspase-3活性、LC3Ⅱ和Beclin1明显降低[(11.7±2.8)%vs(27.6±4.5)%,1.4±0.1 vs 2.1±0.3,1.35±0.04 vs 2.17±0.07,1.30±0.18 vs 2.20±0.20,P0.05]。结论金丝桃苷通过激活AMPK/mTOR信号降低自噬减轻H9C2细胞缺血再灌注损伤。     

二十碳五烯酸抑制棕榈酸诱导的乳鼠心肌细胞凋亡及机制

目的 探讨二十碳五烯酸(Eicosapentaenoic Acid，EPA)对棕榈酸（palimitate，PAL）诱导的乳鼠心肌细胞凋亡的影响及其机制。方法 以PAL诱导的乳鼠心肌细胞为模型，分为对照组、PAL组、EPA+PAL组、EPA+PAL+Compound C组；采用MTT法检测细胞存活率，TUNEL化学染色检测细胞凋亡率，Western blot检测乳鼠心肌细胞cleaved caspase 3、动力相关蛋白(Dynamin-related protein,Drp)1表达水平和腺苷酸活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase,AMPK）的磷酸化水平。结果 不同浓度PAL刺激细胞24 h，与对照组相比，400 μmol/L PAL诱导后细胞活性显著降低，凋亡率明显增加（P<0.05），凋亡相关蛋白cleaved caspase-3活性上调(P<0.05)，同时AMPK磷酸化水平降低(P<0.05)，Drp1表达增加(P<0.05)。但50 μmol/L EPA处理却通过激活AMPK磷酸化，抑制Drp1的表达，进而逆转PAL诱导的细胞凋亡（P<0.05）。AMPK阻断剂Compound C则通过抑制AMPK，激活Drp1活性，增加凋亡相关蛋白cleaved caspase 3的活性，从而削弱了EPA抵抗PAL诱导的细胞凋亡（P<0.05）。结论 EPA可通过激活AMPK，减少Drp1表达水平，从而抑制PAL诱导的乳鼠心肌细胞凋亡，这些结果为深入认识EPA的心肌保护作用提供了新的实验依据。     

红景天苷可通过抑制线粒体氧化应激减轻模拟失重大鼠脑动脉的炎性反应

目的 探讨红景天苷（SAL）是否会通过抑制线粒体的氧化应激,从而恢复模拟失重大鼠脑动脉的炎性反应。 方法 利用尾部悬吊方法建立大鼠模拟失重模型,将24只成年雄性Sprague-Dawley 大鼠随机分为4组:对照（CON）组、对照+红景天苷（CON+SAL）组、尾部悬吊（SUS）组和尾部悬吊+红景天苷（SUS +SAL）组,每组6只（n=6）。尾吊1周后,免疫荧光法检测脑动脉内白细胞介素-1β（IL-1β）和线粒体内SOD（SOD2）的荧光强度,实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测脑动脉内白细胞介素-1β（IL-1β）的mRNA水平变化,免疫印迹法（Western Blot）检测脑动脉内白细胞介素-1β（IL-1β）和脑动脉线粒体内超氧化物歧化酶（SOD2）的蛋白表达,共聚焦显微镜下观测MitoSOX染色的急性分离脑动脉平滑肌细胞线粒体内活性氧（ROS）含量。 结果 与CON组相比,SUS组脑动脉中IL-1β染色荧光强度和蛋白表达显著增加（均P<0.01）,mRNA水平增加（P<0.05）,提示SUS可导致脑动脉炎性增强;而SAL干预可降低SUS大鼠脑动脉中IL-1β染色荧光强度和蛋白表达（均P<0.01）。与CON组相比,急性分离的SUS组脑动脉平滑肌细胞内ROS染色荧光强度显著增加（P<0.01）,SOD2染色荧光强度和蛋白表达显著增加（P<0.01）;而SAL干预可降低急性分离的SUS大鼠脑动脉平滑肌细胞内ROS和SOD2染色荧光强度（P均<0.05）以及降低SOD2蛋白表达（P<0.01）。 结论 SAL可减轻模拟失重大鼠脑动脉中的炎性反应,其机制可能与抑制线粒体内氧化应激损伤有关。     

长链非编码RNA SNHG15可通过靶向miR-24-3p/Atg12减轻缺氧诱导的心肌细胞损伤

目的 探讨长链非编码RNA （lnc RNA） 小核仁RNA宿主基因15（SNHG15）通过miR-24-3p/Atg12对缺氧诱导的心肌细胞损伤的影响。 方法 采用RT-qPCR检测 SNHG15和miR-24-3p在缺氧诱导的心肌细胞中表达,细胞设为对照组、缺氧组、缺氧+si-SNHG15组、缺氧+si-NC组、缺氧+miR-24-3p inh组、缺氧+inh-NC组、si-SNHG15+miR-24-3p inh组。采用MTT法、流式细胞术、Caspase-3试剂盒和Transwell法检测SNHG15和miR-24-3p对心肌细胞增殖、凋亡和迁移的影响,目的基因预测与筛选、荧光素酶报告基因检测验证SNHG15和miR-24-3p下游目的基因,Western blot检测Atg12蛋白及相关自噬基因的表达。 结果 随着过氧化氢处理持续时间的延长,心肌细胞内SNHG15水平明显升高,miR-24-3p水平明显降低,且呈时间依赖性（P<0.05）;与对照组相比,缺氧组细胞活力、迁移和侵袭性明显降低（P<0.05）,Caspase-3活性和细胞凋亡率均明显增加（P<0.05） ;与缺氧组相比,缺氧+si-SNHG15组细胞活力、迁移和侵袭性明显升高（P<0.05）,Caspase-3活性和细胞凋亡率均明显降低（P<0.05） ;miR-24-3p与SNHG15呈负相关,通过在线软件预测miR24-3p与SNHG15、Atg12可能的靶点,并用荧光素酶检测,结果显示,miR-24-3p与SNHG15、Atg12存在靶向调控关系;与缺氧组相比,缺氧+miR-24-3p inh组细胞活力、迁移和侵袭性明显降低（P<0.05）,Caspase-3活性和凋亡率明显升高（P<0.05）;与缺氧+miR-24-3p inh组相比,si-SNHG15+miR-24-3p inh组细胞活力、迁移和侵袭性明显升高（P<0.05）,Caspase-3活性和凋亡率明显降低（P<0.05）;与对照组相比,缺氧组Atg12、LC3蛋白的表达明显上调,p62表达明显下调（P<0.05）;与缺氧组相比,缺氧+miR-24-3p inh组Atg12蛋白和LC3表达均明显上调,p62表达明显下调（P<0.05）,与缺氧+miR-24-3p inh组相比,si-SNHG15+miR-24-3p inh组Atg12蛋白和LC3表达均明显下调,p62表达明显上调（P<0.05）。 结论 lnc RNA SNHG15可以通过调控miR-24-3p/Atg12轴来调控心肌细胞的增殖,减轻缺氧诱导的心肌细胞损伤。     

Pyr1-apelin-13对大鼠心肌成纤维细胞AMPK/mTOR自噬信号和氧化应激损伤的影响

目的探讨Pyr¹-apelin-13对于大鼠心肌成纤维细胞自噬和氧化应激的影响及其作用机制。方法提取新生大鼠心肌成纤维细胞(CFs),给与血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),Pyr¹-apelin-13,雷帕霉素干预,使用Western blot法和免疫荧光技术检测自噬信号分子,使用DHE法检测氧自由基生成,观察Pyr¹-apelin-13在AMPK/mTOR通路中的作用。结果在体外培养的CFs细胞中,AngⅡ刺激通过上调P62和磷酸化mTOR抑制自噬水平,伴有LC3II、Beclin-1和磷酸化AMPK降低及氧化应激水平增高;而Pyr¹-apelin-13或雷帕霉素干预后逆转AngⅡ介导的自噬下调,表现为LC3II/I、Beclin-1和磷酸化AMPK水平上升,P62表达和磷酸化mTOR下降,细胞氧化应激损伤减轻。结论Pyr¹-apelin-13可通过调控大鼠心肌成纤维细胞AMPK/mTOR自噬信号发挥其抗氧化和促自噬的细胞保护功效。     

罗沙司他对急性高原低氧心脏功能适应的作用及其机制

目的 探讨PHD2抑制剂罗沙司他对模拟海拔5 000 m高原低氧环境小鼠心脏功能适应的作用及其机制。 方法 40只雄性C57BL/6J小鼠随机分为4组:常氧组、罗沙司他（100 mg/kg）+常氧组、低氧组、罗沙司他（100 mg/kg）+低氧组。低氧组小鼠置于ProOx-810L动物低压氧舱内饲养7 d;常氧组于常压常氧环境饲养。应用超声心动图、血常规、血生化综合评价高原低氧环境下小鼠心脏功能变化,Western Blotting分析HIF-1α和HIF-2α的表达水平。 结果 高原低氧暴露下,小鼠体质量增长显著减缓,罗沙司他对高原低氧暴露下的小鼠没有明显的毒副作用。高原低氧7 d后小鼠左室舒张末期内径（LVIDd）显著减小（P<0.05）,罗沙司他可增加LVIDd（P<0.05）,提高心脏适应能力。高原低氧导致红细胞生成素（EPO）明显升高,红细胞计数（RBC）、血红蛋白（Hb）和红细胞压积（Hct）增加（P<0.01）,该效应可被罗沙司他进一步增强[RBC（P<0.01）、Hb（P<0.01）和Hct（P<0.05）]。与常氧组比较,高原低氧可以显著增加小鼠心肌HIF-1α（P<0.05）、HIF-2α（P<0.01）和PHD2的蛋白表达水平（P<0.01）,此效应可被罗沙司他进一步增强[HIF-1α（P<0.01）、HIF-2α（P<0.01）和PHD2（P<0.05）]。低氧条件下心肌损伤相关的血清乳酸脱氢酶（LDH）水平显著增高（P<0.01）,罗沙司他可降低LDH水平,减轻低氧对心肌的损伤（P<0.01）。 结论 罗沙司他可通过抑制PHD2活性上调HIF-1α和HIF-2α的蛋白水平,同时减轻心肌损伤,进而促进高原低氧环境下小鼠心脏功能的适应。     

一种增强缺氧耐力的新大鼠模型

目的 探究一种新的快速提高缺氧耐力的大鼠模型。 方法 采用小动物低压舱模拟不同的气压高度,观察SD大鼠4500 m适应10 h,返回地面1 h,然后在7620 m停留24 h后的存活率;同时观察SD大鼠在禁食24 h、48 h和72 h后,在7620 m停留24 h后的存活率,并检测禁食72 h大鼠心肌的自噬通量。 结果 4500 m缺氧预适应可以提高7620 m停留24h大鼠的存活率（P < 0.05）;禁食24 h、48 h和72 h大鼠,在7620 m停留24h的存活率明显提高（P < 0.01）;禁食24 h联合4500 m预适应可使大鼠7620 m停留24h的存活率达到100%（P < 0.01）。此外,鼠龄影响7620 m停留24h的存活率,鼠龄较小的大鼠存活率更高（P < 0.01）。Western blot检测结果提示,禁食72 h大鼠心肌Beclin-1表达增加（P < 0.01）,LC3-II与LC3-I之比增加（P < 0.01）,p62蛋白表达降低（P < 0.01）,表明心肌自噬通量增高。 结论 禁食预处理可作为快速提高缺氧耐力的一种新型大鼠模型,心肌自噬增强与缺氧耐力提高的因果关系有待进一步研究。     

高糖对缺氧/复氧乳鼠心肌细胞GLP-1受体表达影响及机制研究

目的 探索高糖对缺氧/复氧（H/R）乳鼠心肌细胞胰高血糖样肽-1受体（GLP-1R）表达的影响及其分子机制。 方法 培养乳鼠心肌细胞建立高糖H/R损伤模型,随机将心肌细胞分为对照（正常血糖）组、正常血糖＋H/R组、正常血糖＋GLP-1激动剂（Exentin-4）处理组、高糖组、高糖＋H/R组、高糖＋H/R＋Exentin-4处理组。Western blot观察高糖H/R后GLP-1R表达变化情况。RT-PCR和Western blot观察各组细胞H/R损伤的氧化应激标志物NOX4、p22phox表达变化;Western blot检测高糖条件下蛋白激酶C（PKC）表达,并观察PKC激动剂PMA和或PKC抑制剂Go 6983处理后GLP-1R表达及NOX4、p22phox表达变化。 结果 正常血糖条件下,H/R后心肌细胞氧化应激加重（P<0.05）,Exendin-4降低氧化应激损伤（P<0.05）;与正常血糖H/R组相比,高糖H/R组氧化应激损伤加重（P<0.05）,而Exendin-4对高糖条件下抗氧化应激作用无明显改善。与正常血糖组相比,高糖组PKC表达升高（P<0.05）,参与心肌细胞GLP-1R表达下降,抑制PKC活性可部分恢复Exendin-4高糖条件下抗氧化应激作用（P<0.05）。 结论 高糖条件下GLP-1R表达下降,PKC参与其表达下降,抑制PKC活性可部分恢复Exendin-4高糖条件下抗氧化应激作用。     

右美托咪定对心肌收缩蛋白表达的影响

目的 研究右美托咪定(DEX)对心肌细胞收缩相关蛋白表达的影响及其分子机制。 方法 在50 ml/L浓度氧环境下培养H9C2细胞,建立心肌低氧损伤模型。实验分为对照组、低氧组、低氧+DEX (0.01 μmol/ml、1 μmol/ml、100 μmol/ml)组。除对照组培养在正常细胞环境中外,其余四组培养在低氧环境下,且其中三组按要求添加相应浓度的DEX。细胞存活率和细胞凋亡水平分别采用MTT法和流式细胞仪进行检测,采用ELISA试剂盒检测细胞培养液中心肌酶谱蛋白cTnI、LDH和CK-MB的漏出量,Western blot法检测H9C2细胞中titin、β-MHC、PI3K、Akt、p-PI3K、p-Akt蛋白表达。 结果 低氧条件成功诱导心肌细胞缺氧损伤。低氧组细胞较对照组存活率低、凋亡增加、细胞培养液中cTnI、LDH和CK-MB蛋白水平增加;低氧+ DEX (0.01 μmol/ml、1 μmol/ml、100 μmol/ml)组较低氧组,细胞存活率增加、凋亡减少,cTnI、LDH和CK-MB蛋白水平降低,p-PI3K和p-Akt蛋白表达增加,β-MHC和titin蛋白表达降低,且随着DEX剂量增加,变化更显著。 结论 在低氧损伤心肌细胞中,DEX能抑制收缩相关蛋白表达,可能与PI3K/Akt信号通路有关,是否与激活PI3K/Akt信号通络相关,还有待进一步研究。     

禁食大鼠可能经抑制mTOR减低心肌摄取葡萄糖

目的 确定禁食降低心肌摄取葡萄糖的动态变化过程，探寻禁食降低大鼠心肌摄取葡萄糖能力的可能机制，为阐明禁食提高缺氧耐力作用奠定基础。 方法 测量不同禁食时间和恢复饮食组雄性SD大鼠体质量、血糖和血酮水平；采用M型超声心动图测量SD大鼠禁食后及恢复饮食后心脏泵血功能；对各组SD大鼠行18F-FDG PET/CT显像，定量观测心肌FDG摄取；检测不同葡萄糖浓度培养心肌细胞的mTOR和AMPK表达与活性。 结果 SD大鼠体质量随禁食时间延长显著下降，并在恢复饮食24 h后恢复至接近禁食前水平；禁食24 h血糖显著降低， 48 h达稳定水平，相反，禁食24 h血酮显著升高，在48 h达稳定水平；在恢复饮食24h后，血糖与血酮均恢复至正常水平。禁食各时间点及恢复饮食后心脏泵血功能均无明显改变。PET/CT显示心肌18F-FDG摄取（SUV ratio）在禁食24 h后显著减低，并在正常饮食24h后恢复。降低培养心肌细胞的葡萄糖浓度，mTOR和AMPK的蛋白表达水平未见改变，但是，mTOR活性降低，AMPK活性增加。 结论 禁食引起低血糖可直接降低mTOR活性，另一方面，低血糖通过激活AMPK，间接抑制mTOR 活性，可能进而抑制心肌对18F -FDG摄取。     

Mst1敲除减轻高脂饮食诱发的心肌线粒体动力学紊乱

目的 探讨哺乳动物STE20样激酶1（Mst1）基因敲除是否可以减轻高脂饮食导致的心肌线粒体动力学紊乱并探究其机制。 方法 C57BL/6小鼠（WT）和Mst1基因敲除小鼠（Mst1-/-）(C57BL/6背景)随机分为正常饮食（Normal diet,ND）组和高脂饮食（High-fat diet,HFD）组,连续喂养16w后,检测各组小鼠体质量、心脏重量/胫骨长度和空腹血脂水平,超声心动图评估心脏功能,HE染色及透射电镜观察心肌肥厚和线粒体形态,心肌柠檬酸合酶(CS)活性和ATP含量评价线粒体功能,Western blot检测线粒体动力学相关蛋白的表达水平。 结果 与ND+WT组相比,HFD+WT组小鼠出现肥胖、高血脂、心肌肥厚和心脏舒张功能障碍,同时线粒体分裂增多、形态明显受损,心肌CS活性、ATP含量均降低,线粒体分裂蛋白Drp1、Fis1的表达明显上调（P<0.05）,融合蛋白Mfn2的表达明显下调（P<0.05）;与HFD+WT组相比,HFD+Mst1-/-组小鼠心脏舒张功能、线粒体形态与功能的损伤明显减轻,Drp1表达明显下调（P<0.05）,Mfn2表达明显上调（P<0.05）。 结论 Mst1基因敲除可以通过抑制线粒体分裂,促进线粒体融合,以维持线粒体动力学稳定,从而减轻脂毒性相关心肌损害。     

ATF3转录调控HSP110对低氧诱导的肺动脉平滑肌细胞自噬和增殖的影响

目的 探讨ATF3调控HSP110表达对低氧刺激下人肺动脉平滑肌细胞增殖及自噬的影响。 方法 体外培养人肺动脉平滑肌细胞，单独感染ATF3沉默腺病毒或共感染HSP110过表达腺病毒，48 h后加入自噬激活剂雷帕霉素预处理3 h，建立缺氧细胞模型，24 h后，CCK-8法检测细胞增殖能力，流式细胞术分析细胞凋亡，Real-time PCR检测ATF3、HSP110 mRNA的表达，Western blot检测ATF3、HSP110、LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、p62蛋白的表达，免疫荧光观察LC3斑点形成，荧光素酶报告系统鉴定ATF3对HSP110的调控作用。 结果 缺氧组ATF3和HSP110的表达显著增加（P<0.01），ATF3沉默后，细胞增殖能力下降，凋亡率增加（P<0.01），同时自噬蛋白LC3 Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1的表达及LC3荧光斑点显著减少(P<0.01)，自噬降解底物p62的表达明显增加(P<0.01)，而加入雷帕霉素或共感染HSP110过表达腺病毒后，ATF3沉默对细胞增殖和自噬的抑制作用显著减弱(P<0.01)。双荧光素酶报告基因检测结果显示，ATF3可上调HSP110启动子活性。 结论 ATF3调控HSP110表达增加而促进人肺动脉平滑肌细胞增殖，其机制可能与介导细胞自噬有关。     

石蒜碱对败血症心肌损伤的防护作用及机制

目的 探究石蒜碱对盲肠结扎穿孔术（CLP）诱导的小鼠败血症心肌损伤的防护作用及其机制。 方法 BALB/c雄性小鼠随机分为假手术组、模型组和石蒜碱防护组。模型组和石蒜碱防护组通过CLP构建败血症心肌损伤模型。石蒜碱防护组给予石蒜碱,假手术组和模型组给予同等体积的DMSO。检测小鼠败血症评分、肛温、血常规、血生化、心功能、心肌组织结构和炎症因子的表达。 结果 与模型组相比,石蒜碱防护组小鼠败血症评分降低,肛温升高（P<0.05）;石蒜碱防护组WBC、LYM、PLT数量显著增多,RBC数量显著减少（P<0.05）;石蒜碱防护组LDH、AST、BUN水平显著降低,ALB水平显著升高（P<0.05）;石蒜碱防护组SV、CO、LVEDV值显著升高（P<0.05）;石蒜碱防护组小鼠心肌组织结构相对完整;石蒜碱防护组小鼠心肌组织中TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA的表达水平显著降低（P<0.05）。 结论 石蒜碱对败血症损伤的心肌在产生抗炎作用的同时还具有心肌防护作用。