4HPR对人宫颈癌细胞凋亡的影响

目的 研究Ｎ-(4-羟基苯基)维生素甲酰胺（4HPR）对人宫颈癌细胞凋亡的影响。方法 应用光学显微镜、激光共聚焦显微镜、电子显微镜、荧光显微镜从细胞形态学方面观察4HPR对人宫颈癌细胞凋亡的影响;应用流式细胞仪、细胞DNA琼脂糖凝胶电泳法分析4HPR诱导人宫颈癌细胞凋亡的细胞特征、生物化学特征及凋亡细胞百分率。结果 电子显微镜和激光共聚焦显微镜镜下可见细胞固缩,核膜扭曲,核染色体聚集成块并靠近核膜等凋亡细胞特征;光学显微镜和荧光显微镜下可见凋亡小体;细胞DNA被降解,在琼脂糖凝胶电泳中呈现典型的“阶梯状”图谱;流式细胞仪检测结果显示二倍体核型的特征,在DNA直方图上,G1峰左侧出现亚二倍体细胞群的峰型;凋亡百分率结果显示4HPR可诱导宫颈癌细胞凋亡,且呈时间和浓度依赖性（P＜0.01）。结论 4HPR可诱导人宫颈癌细胞凋亡, 且呈时间和浓度依赖性。     

高温对体外培养大鼠海马锥体细胞凋亡的影响

目的：探讨高温下新生大鼠海马锥体神经元凋亡形态学及生物化学变化。方法：建立体外海马神经细胞培养模型，以37，40，42℃3种温度作为环境刺激因素，应用流式细胞仪，荧光染色，琼脂糖凝胶电泳和原位细胞凋亡检测试剂盒对其观察。结果：随作用温度升高细胞凋亡率及凋亡小体数增加，电泳呈现DNA Ladder表面，荧光显微镜观察能够看到凋亡体及其出芽现象，结论：高温能够诱导体外培养的大鼠海马锥体细胞发生凋亡，且不同温度诱导其凋亡的程度时程表现亦不同。     

枸杞多糖对K562白血病细胞抑制作用及凋亡的研究

目的 探讨枸杞多糖（LBP-X）诱导人类慢性髓系白血病K562细胞株凋亡。方法 用吖啶橙（AO）荧光染色观察细胞结构的变化，用MTT、比色法测定抑制率，琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测法分析细胞凋亡。结果 LBP-X可明显抑制K562细胞的生长，凋亡率呈时间和剂量依赖性。LBP-X作用48h后，荧光显微镜下可见细胞核不规则，浓缩成大小不等的团快，核碎裂呈新月形改变，琼脂糖凝胶电泳可见DNA梯带。流式细胞仪分析图上可见明显的凋亡。结论 LBP-X能诱导K562细胞的凋亡，并呈一定的时间浓度依赖关系。     

白屈菜红碱对人胃癌BGC823细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用

目的观察白屈菜红碱(che lerythrine)对人胃癌BGC 823细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法通过M TT实验检测白屈菜红碱对细胞生长的抑制率,AO/EB的荧光核染色观察细胞形态,DNA琼脂糖凝胶电泳及流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。结果M TT实验显示白屈菜红碱抑制BGC 823细胞的生长呈时间、浓度依赖的方式,显微镜下观察到AO/EB的荧光核染后凋亡的细胞,琼脂糖凝胶电泳出现DNA的片段化,在白屈菜红碱质量浓度为1.5、2.0、2.5μg/mL且培养24 h时,流式细胞仪可以检测到凋亡峰,且细胞被阻滞在S和G2/M期。结论白屈菜红碱能有效地诱导BGC 823细胞凋亡,而且其诱导的凋亡具有周期依赖性。     

C2-神经酰胺诱导肝癌细胞凋亡

目的 观察无血清条件下神经酰胺对人肝癌细胞SMMC-7721细胞凋亡的诱导作用。方法 采用AO-EB荧光染色、流式细胞术DNA倍体分析和DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡。结果 终浓度10μmol/L的C2-神经酰胺作用24h，可诱导无血清培养的SMMC-7721细胞发生凋亡，AO-EB染色可见典型的细胞凋亡表现，细胞核固缩、浓染、裂解，细胞质芽突脱落成为凋亡小体。经流式细胞仪检测可见典型的亚二倍体峰。DNA凝胶电泳呈现典型的180-200bp的DNA梯状条带。结论 C2-神经酰胺可诱导SMMC-7721细胞凋亡。     

高温对体外培养大鼠海马锥体细胞凋亡的影响

目的探讨高温下新生大鼠海马锥体神经元凋亡形态学及生物化学变化。方法建立体外海马神经细胞培养模型,以37、40、42 ℃3种温度作为环境刺激因素,应用流式细胞仪、荧光染色、琼脂糖凝胶电泳和原位细胞凋亡检测试剂盒对其观察。结果随作用温度升高细胞凋亡率及凋亡小体数增加,电泳呈现DNA Ladder表现,荧光显微镜观察能够看到凋亡小体及其出芽现象。结论高温能够诱导体外培养的大鼠海马锥体细胞发生凋亡,且不同温度诱导其凋亡的程度及时程表现亦不同。     

氧化苦参碱对人白血病K562细胞株凋亡作用的研究

目的探讨氧化苦参碱（Oxymatrine,Oxy）对人慢性粒细胞白血病（CML）K562细胞凋亡的影响。方法用Oxy处理K562细胞,MTT法检测药物对细胞的抑制作用;荧光显微镜及透射电镜观察细胞形态变化;流式细胞仪分析细胞DNA含量变化及凋亡细胞的比例,琼脂糖凝胶电泳技术观察DNA降解。结果 Oxy能够抑制K562细胞生长,对K562细胞的IC50约为2.33mg.mL-1。Oxy作用后的K562细胞呈现凋亡形态学改变,流式细胞仪可在2倍体前检测到凋亡峰,凋亡细胞比例为7.03%～54.99%,琼脂糖凝胶电泳呈现出细胞凋亡特征性的DNA梯状带。结论 Oxy能够诱导K562细胞发生凋亡。     

4HPR诱导Hela细胞凋亡

目的：实验结果证明４ＨＰＲ对Ｈｅｌａ细胞具有较强的抑制作用，本文从细胞凋亡角度研究４ＨＰＲ抑制Ｈｅｌａ细胞生长的机理。方法：采用电子显微镜、细胞ＤＮＡ琼旨糖凝胶电泳、流式细胞仪等方法，分析４ＨＰＲ诱导Ｈｅｌａ细胞凋亡的形态学、生化学及细胞生物学改变特征。结果：电子显微镜下：细胞固缩、核膜扭曲、核染色体聚集成块并靠近核膜；细胞ＤＮＡ被降解，在１．５％琼脂糖凝胶电泳上出现典型的阶梯状图谱（ＤＮＡ Ｉａ     

雷公藤多甙对肾性蛋白尿患者外周血单个核细胞作用的研究

通过琼脂糖凝胶电泳,ＨＥ染色和流式细胞仪检测用雷公藤多甙治疗肾性蛋白尿患者２周后外周血单个核细胞的凋亡情况。经治疗后患者外周血单个核细胞在形态上出现典型的细胞核固缩,碎裂,琼脂糖凝胶电泳显现特征性的“梯状”带,流式细胞仪上出现亚二倍体峰,提示雷公藤多甙的诱导肾脏蛋白尿患者外周血单相核细胞的凋亡。     

雷公藤多甙对肾性蛋白尿患者外周血单个核细胞作用的研究

通过琼脂糖凝胶电泳, Ｈ Ｅ 染色和流式细胞仪检测用雷公藤多甙治疗肾性蛋白尿患者 ２ 周后外周血单个核细胞的凋亡情况。经治疗后患者外周血单个核细胞在形态上出现典型的细胞核固缩、碎裂,琼脂糖凝胶电泳显现特征性的“梯状”带,流式细胞仪上出现亚二倍体峰。提示雷公藤多甙能诱导肾性蛋白尿患者外周血单个核细胞的凋亡。     

酸性肽对硝普钠诱导体外培养SD大鼠海马神经细胞凋亡的保护作用

目的:观察不同剂量酸性肽(AP)对NO供体硝普钠(SNP)诱导的大鼠海马神经细胞凋亡的影响.方法:分离培养新生SD大鼠海马神经细胞,用终浓度为50 μmol/L的SNP诱导海马神经细胞凋亡.实验共设空白对照组、SNP处理组和AP实验组,AP实验组分别加入浓度为0.037 5、0.075 0、0.150 0 g/L的AP与SNP共培养24 h后,通过细胞形态学观察、MTT测定、吖啶橙荧光染色及DNA琼脂糖凝胶电泳等方法检测细胞凋亡情况及细胞存活率.结果:SNP处理组海马神经细胞存活率降低至58.9%±4.5%,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01).3个AP实验组海马神经细胞存活率均高于SNP处理组(P<0.05或0.01).SNP组凋亡细胞的形态学改变及细胞核固缩、核碎裂现象明显,DNA琼脂糖凝胶电泳图谱具有DNA ladder;各AP实验组凋亡细胞形态学改变不明显,DNA琼脂糖凝胶电泳图谱没有DNA ladder出现.结论:AP对SNP诱导的海马神经细胞凋亡具有保护作用.     

PTEN基因诱导人脑胶质瘤SHG-44细胞凋亡及bcl-2表达下调

目的 探讨PTEN基因对人脑胶质瘤SHG－44细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2表达的影响，阐明PTEN基因抑制肿瘤细胞增殖的机制。方法PTEN基因体外转染SHG－44细胞，筛选阳性细胞克隆，以原位杂、免疫组化方法检测PTEN基因的表达情况；采用透射电镜、流式细胞仪和核DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞的凋亡情况；以免疫荧光法检测bcl-2基因的表达。结果 PTEN基因转染的SHG－44细胞有PTEN蛋白的表达。透射电镜下可见转染PTEN基因后细胞核染色质浓缩边集、胞质浓缩、核破裂及凋亡小体形成等典型的凋亡表现；流式细胞仪显示细胞周期从G1期到S期发生抑制，并且在G1期峰前出现一明显的凋亡峰（15．9％）；细胞核DNA琼脂糖凝胶电泳呈现凋亡细胞特有的梯状条带；bcl-2的表达也显著下调。结论 PTEN基因可诱导SHG－44细胞凋亡，并下调bcl-2蛋白的表达，这可能是PTEN基因抑制肿瘤细胞增殖的分子机制之一。     

阿魏酸钠对一氧化碳供体硝普钠诱导的海马神经元凋亡的保护作用

目的 探讨阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)对NO供体硝普钠(SNP)引起的大鼠海马神经元凋亡的影响.方法 采用MTT比色分析测细胞存活率,Hoechst 33258荧光染色及DNA琼脂糖凝胶电泳分析等方法 检测凋亡.结果 不同剂量SF(10～160 μmol/mL)预处理海马神经元6h可剂量依赖地对抗SNP引起的神经元凋亡,提高神经元的存活率;减少SNP引起的核固缩、凝聚和碎裂现象;DNA凝胶电泳图谱未见典型的"梯子状"改变.结论 SF对NO供体SNP诱导的海马神经元凋亡具有明显的保护作用.     

多巴胺对PC12细胞凋亡的诱导作用

目的 研究外源性多巴胺对多巴胺能神经元的毒性作用,方法 采用体外培养的PC12细胞为模型,以终浓度0.45mmol/L的多巴胺对细胞进行诱导。结果 在透射电镜下可见培养的PC12细胞核染色质明显固缩、断裂,原位末端标记技术显示胞核内散在分布断裂DNA片段,流式细胞仪检测到DNA周期中G0-G1期前出现明显的亚二倍体峰,琼脂糖凝胶电泳呈现典型的“梯状”带等细胞凋亡的特征性改变。结论 外源性DA可诱导PC12细胞凋亡。     

体外瞬时转染野生型PTEN过表达对乳腺癌MCF-7细胞的影响

目的：研究野生型FTEN基因过表达对乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用。方法：应用携带野生型FTEN的真核表达载体pEGFP-C1-FTEN,以脂质体介导的方法体外瞬时转染乳腺癌MCF-7细胞,利用流式细胞术检测抗凋亡蛋白bcl-2的表达,通过相差显微镜、细胞生长曲线、MTT、DNA琼脂糖凝胶电泳等方法,观察FTEN基因过表达对MCF-7细胞生物学特性的影响。结果：荧光显微镜观察、免疫细胞化学和RT-PCR检测证实,转柒后MCF-7细胞中PTEN呈高水平表达;相差显微镜观察到MCF-7／FTEN细胞出现典型的凋亡形态学改变;细胞生长曲线低平;流式细胞检测显示,G-期细胞比例比空载体组增加14.79％,并出现凋亡峰;DNA琼脂糖凝胶电泳可见梯状条带;同时还检测到转染PTEN后细胞bcl-2表达下降。结论：外源性FTEN基因过表达可显著抑制MCF-7细胞的周期进程并诱导细胞凋亡。     

维生素A诱导Shope肿瘤细胞凋亡

目的：探讨维生素Ａ抑制Ｓｈｏｐｅ肿瘤细胞生长的机理。方法：电镜观察Ｓｈｏｐｅ肿瘤细胞凋亡的形态学改变；琼脂糖凝胶电泳进行ＤＮＡ片段化；流式细胞仪检测凋亡细胞的百分比。结果：电镜下可见ＶＡ诱导的Ｓｈｏｐｅ肿瘤细胞变小，细胞浆固缩，染色质聚集并靠近核膜，在１．５％琼脂糖凝胶电泳中，Ｓｈｏｐｅ肿瘤细胞ＤＮＡ呈现明显的阶梯状图谱。流式细胞仪检测经１０＾－５ＭＶＡ作用２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ后，凋亡细胞百分比     

半边莲通过钙信号诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

观察半边莲通过影响胞内游离钙离子浓度进而诱导人肝癌细胞HepG2发生凋亡。通过荧光分光光度法检测胞内游离钙离子浓度,并采用AO-EB荧光染色、流式细胞术和DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡。结果显示半边莲可提高HepG2细胞胞内游离钙离子浓度,与对照组相比,差异显著(P<0.01),且荧光染色、流式细胞术和DNA琼脂糖凝胶电泳的结果表明经半边莲处理过的肝癌细胞出现典型的凋亡特征。结论:半边莲可通过提高肝癌细胞胞内游离钙离子浓度诱导癌细胞凋亡     

NS398诱导人骨肉瘤细胞MG-63凋亡及对bcl-2蛋白表达的影响

目的研究环加氧酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）抑制剂NS398抑制人骨肉瘤细胞MG-63增殖及诱导其凋亡的效应和机制。方法MTT比色法观察NS398的细胞毒性作用及其浓度依赖性；透射电子显微镜观察细胞凋亡的形态学变化；琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞DNA Ladder形成。流式细胞仪检测细胞凋亡率及与NS398作用时间的关系；Western blot测定bcl-2蛋白表达。结果不同浓度（0.1～100μmol／L）NS398均可使细胞生长受到抑制；电镜显示细胞呈典型的凋亡形态学变化；琼脂糖凝胶电泳显示凋亡细胞DNA Ladder形成；流式细胞术检测证实细胞凋亡率与NS398作用时间呈明显相关。Western blot检测显示随着NS398作用时间延长，可不同程度地降低bcl-2蛋白表达。结论NS398能抑制人MG-63细胞增殖，诱导细胞凋亡，其作用机制可能与调控bcl-2蛋白表达有关。     

TGF-β1诱导鼠肝细胞凋亡信号转导机制的研究

目的：本研究旨在明确转化生长因子β1(TGF-β1)诱导鼠肝细胞凋亡与caspase-3及caspase-8的关系。方法：通过50％CCl4腹腔注射，用8W时间诱发BALB／c小鼠形成肝硬化模型。应用改良的胶原酶原位灌注法分离小鼠的肝细胞。为检测TGF-β1(5ng／ml)诱导的凋亡，利用1．5％的琼脂糖凝胶电泳观察：DNA梯形条带，应用DNA荧光染料Hoechst 33342对正常肝细胞进行了染色，并在荧光显微镜下观察比较caspase-3和caspase-8在TGF-β1诱导的凋亡中的作用。结果：胶原酶原位二步灌流法分离肝细胞活率为95．2％。正常肝细胞予以TGF-β1处理后，应用1．5％的琼脂糖凝胶电泳可以发现具有凋亡特征的梯形条带。硬化肝细胞则很少出现梯形条带。经TGF-β1处理的鼠正常肝细胞应用Hoechst染色发现，其凋亡率明显高于未处理组，分别为58．76％和18．03％，两组具有明显的差别。但凋亡可以被caspase-3和caspase-8抑制剂阻止。结论：硬化肝细胞不能象正常肝细胞那样发生TGF-β1诱导的凋亡，提示硬化肝细胞的抑制性生长调控机制已受损。TGF-β1通过caspase-8和caspase-3的活化诱导鼠肝细胞产生凋亡。     

D-氨基葡萄糖衍生物抗人肝癌HepG2的研究

目的研究D-葡萄糖衍生物对人肝癌HepG2细胞生长增殖的影响．进而探讨D-葡萄糖衍生物诱导HepG2细胞捌亡的作用。方法用不同浓度的D-葡萄糖衍生物处理HepG2，采用MTT法测定其对HepG2细胞生长增殖的抑制作用，通过透射电镜、流式细胞术和DNA琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞的形态结构及其对HepG2细胞诱导凋亡的效应。结果D-氮基葡萄栅衍生物能抑制HepG2细胞的生长增殖。并呈一定的浓度、时间依赖性；D-氨基葡萄糖衍生物能诱导肝癌细胞凋亡．透射电镜可见肝癌细胞出现典型的凋亡细胞形态学改变．DNA琼脂糖凝胶电泳呈现典型的DNA梯形条带图谱，流式细胞仪检测出现典型的亚二倍体凋亡峰。结论D-氨基葡萄糖衍生物在体外可显著抑制人肝癌细胞株生长。其作用机制主要是诱导肿瘤细胞凋亡。