阿魏酸钠对SNP诱导的凋亡海马神经元NF-кB、par-4基因表达的影响

目的 探讨阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)对一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)引起的大鼠海马神经元凋亡及NF-кB P65、par-4基因表达的影响.方法 采用SD大鼠海马神经元原代培养,经终浓度分别为10、20、40、80、120、160 ìmol/L的SF预处理后,用50 ìmol/L的SNP处理24 h,采用MTT法检测细胞存活率,Hochest 33258荧光染色检测凋亡,Western blot及RT-PCR检测NF-кB P65、par-4基因表达.结果 不同剂量SF (10～160 ìmol/L)预处理6 h可显著提高神经元的存活率,减少SNP引起的核固缩、凝聚和碎裂现象;降低NF-кB P65、par-4 mRNA及蛋白的表达.结论 SF 抑制NO供体SNP诱导的海马神经元凋亡,其机制可能与降低促凋亡基因NF-кB P65、par-4表达有关.     

复方戒毒肽和激光对自愿戒毒者血清中一氧化氮、一氧化氮合酶和乙酰胆碱酯酶的影响

目的 观察复方戒毒肽和激光对自愿戒毒者血清中一氧化氮、一氧化氮合酶(nitric oxide synthetase，NOS)和乙酰胆碱酯酶(AChE)的影响，探讨复方戒毒肽和激光戒毒的机制。方法：30例自愿戒毒者随机分成3组，每组10例。Ⅰ组为单独服用复方戒毒肽组；Ⅱ组为激光治疗组；Ⅲ组为复方戒毒肽加激光治疗组。治疗前和治疗10d后测定血中一氧化氮、NOS和AChE的水平，用生化方法分析。结果：各组血中一氧化氮浓度治疗前后比较差异无显著性意义(P&;gt;0．05)。Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ组治疗后血中NOS活性分别是(13．34&;#177;5．50)（17．34&;#177;3．17)，（18．34&;#177;1．83)nkat／L，比治疗前（35．84&;#177;5．00)，(36．17&;#177;9．17)，(28．67&;#177;10．17)nkat／L明显下降，差异有显著性意义。Ⅰ，Ⅲ组血中AchE浓度治疗后分别是(23．17&;#177;2．67)，(28．59&;#177;3．63)mmol／L，与治疗前（15．00&;#177;5．62)，（15．63&;#177;6．41)mmol／L比显著增高，而Ⅱ组治疗前后比较差异无显著性意义(P&;gt;0．05)。结论：复方戒毒肽能降低患者血中NOS的含量和升高AChE的水平，激光能升高血中NOS的水平。     

林县互隔交链孢霉素B的分离纯化研究

在测定了林县互隔交链孢霉素A的化学结构并对其致突变作用研究的基础上,我们进一步对互隔交链孢霉261株产生的毒素B组份进行了分离纯化。经TLC和硅胶柱层析纯化,获得了互隔交链孢霉素B,在二氯甲烷:甲醇:水(55:4:4)中TLC,它的Rf值为0.10。它在长波紫外光下显示黄色荧光的特性表明:它是一种荧光活性物质。经美国威斯康辛大学朱繁生教授初步鉴别,认为它与Altenuene相同,互隔交链孢霉素B对大肠杆菌ND—160具有致突变作用。     

林县互隔交链孢霉素A的分离结构鉴定和致突变性研究

交链孢霉能够引起多种植物疾病,如烟草的棕色斑点症;土豆,西红柿的枯萎症;日本梨的黑点症等。其原因是由于交链孢霉能     

芦笋中抗癌成份的初步研究

我们用吸附层析和离子交换法从芦笋中已提取出了有效的抗癌成份。经初步鉴别表明:它们主要为皂草配质类和皂角甙类化合物。已有报告这类化合物在体外对癌细胞具有杀伤作用。并且它们在调节生理功能中也具有重要的药用价值。进一步的研究工作尚在进行中。     

N-(4-羧基苯基)维甲酰胺对交链孢醇单甲醚致突变性的抑制(摘要)

互隔交链孢霉在食管癌高发区林县粮食中污染严重,交链孢醇单中醚(Alternariol Monomethyl Ether,AME)是互隔交链孢霉提取物分用纯化获得的一种有效成份,为该霉菌的主要代谢产物之一。实验证明在不加s-9时,AME诱发了6-巯基鸟嘌呤抗性(6-TG~r)的V_(79)细胞突受,具有直按致突变性,可能对食管癌发病起一定作用。     

酸性肽对体外培养大鼠星形胶质细胞增殖的影响

目的:观察酸性肽对体外培养的大鼠星形胶质细胞增殖的影响.方法:SD大鼠来源的星形胶质细胞经传代纯化后分为5组培养:无血清组、体积分数20%的胎牛血清对照组和低、中及高剂量酸性肽组(分别给予37.5、75.0及150.0 mg/L酸性肽),作用24、48及72 h后,收集星形胶质细胞及上清液,计算细胞存活率,并采用日立7170全自动生化分析仪测定上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量.另取细胞,同上分组后培养72 h.采用MTT法观察细胞增殖情况,计算细胞增殖率.结果:培养24、48和72 h后,5组细胞存活率及上清液中LDH含量差异均有统计学意义(细胞存活率F＝149.381、58.817和119.135,LDH含量F＝1 247.644、2 381.877和1 102.340,P均<0.001);5组不同时间点间细胞存活率及上清液中LDH含量差异均有统计学意义(细胞存活率F＝62.777、50.993、10.555、38.874和21.742,LDH含量F＝775.762、222.799、184.471、59.806和135.954,P均<0.001).培养72 h后,5组细胞增殖率相比,差异有统计学意义(F＝137.416,P<0.001).与相同时间点的无血清组和胎牛血清对照组相比,酸性肽各组细胞存活率和增殖率均升高,上清液中LDH含量均降低(P均<0.05).结论:酸性肽对体外培养的大鼠星形胶质细胞的增殖具有一定的营养和保护作用.     

人表皮生长因子慢病毒载体的构建及表达

目的:构建人表皮生长因子(hEGF)慢病毒(LV)载体.方法:酶切并收集pcDNA 3.1-hEGF载体中的hEGF目的基因片段,克隆进入含有绿色荧光蛋白(GFP)基因的慢病毒载体内,将所得重组体LV-GFP-hEGF与辅助载体pA8.2和pVSVG共同转染人胚肾293T细胞,进行病毒包装.收集上清液,按按10-1～10-7倍比稀释后培养,检测病毒滴度;裂解细胞,进行Western Blot分析.结果:PCR扩增、HindⅢ酶切鉴定及测序结果均证实LV-GFP-hEGF构建成功.将LV-GFP-hEGF转染293T细胞,紫外光下检测可见绿色荧光;LV滴度达5×108TU/mL,转染效率＞75%,Western Blot证实转染细胞町表达hEGF.结论:成功构建了含有GFP报告基因的hEGF慢病毒载体,包装后的慢病毒可在293T细胞内高效表达.     

酵母双杂交系统检测SK2与RyR2蛋白的相互作用

目的:探讨小电导Ca2+激活K+(SK)通道亚型SK2通道与肌浆网(RyR)2蛋白的相互作用.方法:经PCR扩增及酶切鉴定,构建含有SK2和RyR2目的基因片段的酵母表达载体pGBKT7-SK2和pGADT7-RyR2.pG-BKT7-SK2与pGADT7-RyR2经电转化法转化酵母宿主AH109,X-α-Gal/3A...     

灵芝对肝癌干细胞糖代谢和标志物蛋白的影响

目的:探讨灵芝对人肝癌干细胞糖代谢及标志物CD133蛋白的影响。方法:培养人肝癌SMMC7721细胞并用灵芝L08处理,用MTT法测定细胞的成活率,用试剂盒法测定己糖激酶活性,用Western Blot法测定CD133蛋白的水平。结果:灵芝L08处理人肝癌SMMC7721细胞后,细胞的成活率及己糖激酶活性都有所降低。同时,肝癌干细胞的CD133蛋白水平也降低。结论:灵芝L08能抑制人肝癌细胞的增殖、细胞中己糖激酶的活性和CD133蛋白水平。