哮喘易感基因ORMDL3在哮喘小鼠中的表达及地塞米松的干预作用

目的:探讨哮喘易感基因ORMDL3在支气管哮喘发病时的表达及地塞米松的干预作用?方法:将30只健康清洁级雌性Balb/c小鼠随机分为3组:对照组?哮喘组(卵蛋白致敏)?地塞米松组(卵蛋白致敏,激发前腹腔注射地塞米松1 mg/kg进行干预),每组10只?称量和观察小鼠的体重增长趋势,对小鼠肺组织进行HE染色评价浸润情况,计数3组小鼠的外周血嗜酸性粒细胞,ELISA法检测对比3组小鼠血清白介素4(IL-4)的浓度变化,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测小鼠肺组织ORMDL3 mRNA水平表达?结果:哮喘组小鼠体重增长显著落后于其他两组(P < 0.05),地塞米松干预后能缓解生长迟滞,但仍低于对照组(P < 0.05)?病理组织学显示哮喘组小鼠肺组织见大量嗜酸性粒细胞浸润,黏膜下层和平滑肌增厚,管腔狭窄,地塞米松组小鼠肺组织改变较哮喘组为轻?哮喘组外周血嗜酸性粒细胞计数显著高于对照组和地塞米松组(P < 0.05),地塞米松组计数高于对照组(P < 0.05)?哮喘组小鼠的IL-4水平显著高于对照组(P < 0.05),经地塞米松干预后IL-4水平显著降低(P < 0.05),但仍高于对照组?哮喘组小鼠ORMDL3 mRNA的表达水平较对照组显著升高,地塞米松组小鼠ORMDL3 mRNA水平较哮喘组下降,但未达统计学意义(P > 0.05)?结论:卵清蛋白小鼠哮喘模型中ORMDL3的mRNA表达显著增高,地塞米松可下调ORMDL3的表达,但未达到统计学意义,其中的机制有待进一步的深入研究?     

精简平喘方不同制备方法对哮喘小鼠免疫功能影响

目的:探讨精简平喘方不同制备方法干预对哮喘小鼠免疫功能的影响。方法:以10%OVA/AL(OH)3致敏、5%OVA激发制成支气管哮喘小鼠模型,以精简平喘方的两种不同提取方法所得提取物为干预手段,于激发前开始给药,至激发结束取材。观察肺组织病理、外周血及BALF中EOS、Ig E,以及肺组织中IL-4、IFN-γ水平。结果:中药A(含挥发油)、B对哮喘模型小鼠EOS及总Ig E、肺组织IFN-γ、IL-4均有较为明显的干预作用,能够显著降低EOS、Ig E、IL-4,升高IFN-γ(均P0.05)。其中,低、中剂量中药A组对外周血EOS的降低作用优于同剂量中药B组(均P0.05),中药A高剂量优于低、中剂量组(均P0.05);中、高剂量中药A组对BALF中EOS的降低作用优于同剂量中药B组(均P0.05),中药A高剂量优于低、中剂量组(均P0.05);高剂量中药A组对外周血中Ig E的降低作用优于同剂量中药B组(P0.05),中药A高剂量优于低、中剂量组(均P0.05);中、高剂量中药A组对BALF中Ig E的降低作用优于同剂量中药B组(均P0.05),中药A高剂量优于低、中剂量组(均P0.05);中、高剂量中药A组对肺组织中IFN-γ的降低作用和IL-4的升高作用均优于同剂量中药B组(均P0.05),且优于中药A低、中剂量组(均P0.05)。结论:中药A、B对哮喘模型小鼠EOS及总Ig E、IFN-γ、IL-4均有较为明显的干预作用,能够显著调节上述指标,调节哮喘小鼠的免疫失衡。其中,中药A的干预效果总体优于中药B,以中、高剂量组优势更为突出。     

地塞米松对急性过敏性哮喘小鼠肺AQP5表达的影响

目的 观察水通道蛋白5(AQP5)在急性过敏性哮喘小鼠肺组织的改变,以及地塞米松对其的影响,初步探讨AQP5在哮喘发病机制中的作用.方法 建立急性过敏性哮喘小鼠模型,并随机分为急性哮喘组、对照组和地塞米松治疗组,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中自细胞总数及分类计数、ELISA法测定IL-5和IFN-γ水平,RT-PCR和免疫组化法检测AQP5在肺组织的表达以及观察肺组织形态学的改变.结果 (1)哮喘组BALF中白细胞总数、嗜酸性粒细胞数和IL-5水平均高于对照组(P＜0.01),IFN-γ水平低于对照组(P＜0.01),治疗后白细胞总数、嗜酸性粒细胞数和IL-5水平均明显下降(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01),IFN-γ水平明显上升(P＜0.01);(2)哮喘组AQP5 mRNA水平明显高于对照组(P＜0.01),治疗后表达明显下降(P＜0.01);(3)哮喘组肺组织可见较弥漫的炎性改变,黏液分泌增多,血管壁水肿明显,血管周围有大量的炎症细胞渗出物,治疗组形态学改变明显减轻:AQP5表达于正常对照组的肺泡上皮细胞、呼吸道的表层柱状上皮细胞和黏膜下腺腺泡细胞的顶膜,哮喘组表达呈强阳性,地塞米松治疗后表达明显减弱.结论 AQP5在急性哮喘小鼠肺组织内过度表达,可能与黏液高分泌有关,地塞米松可以下调AQP5的表达,可明显减轻小鼠肺部的炎性、水肿和黏液高分泌的病理生理表现.     

芪仙汤对支气管哮喘小鼠肺组织FIZZ1 mRNA及蛋白表达的影响

目的:观察芪仙汤对哮喘小鼠肺组织中FIZZ1基因及蛋白表达水平的影响,探讨芪仙汤治疗哮喘的作用机制。方法:选用30只健康雌性BALB/c小鼠,采用随机数字表分为正常对照组(对照组)、支气管哮喘模型组(模型组)、芪仙汤治疗组(治疗组)。除对照组外均采用卵白蛋白(OVA)建立支气管哮喘小鼠模型。各组分别相应干预灌胃2周。从小鼠的一般情况、肺组织病理形态学(HE染色病理切片)指标评价支气管哮喘小鼠模型;采用RT-PCR检测肺组织FIZZ1基因mRNA表达水平,Western blot和免疫组化法检测肺组织FIZZ1蛋白表达水平。结果:HE染色结果显示,模型组小鼠肺组织较正常组嗜酸性粒细胞等炎症细胞浸润明显,气道壁及支气管平滑肌增厚明显;治疗组哮喘病理改变明显改善。RT-PCR、Western blotting、免疫组化结果均显示模型组FIZZ1表达水平显著高于对照组,治疗组小鼠肺组织中FIZZ1表达水平明显低于模型组,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:芪仙汤可能是通过下调小鼠肺组织FIZZ1表达起到治疗支气管哮喘的作用。     

平喘Ⅰ号对支气管哮喘小鼠气道重塑中SDF-1及CXCR4表达的影响

目的研究平喘Ⅰ号调节基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及其受体CXCR4在支气管哮喘小鼠肺内表达变化及影响。方法 72只雌性BALB/C小鼠按数字随机分为正常对照组、模型对照组、布地奈德组、平喘Ⅰ号低剂量组、中剂量组、高剂量组,共6组,每组12只。通过卵清蛋白(OVA)致敏和激发复制支气管小鼠哮喘模型,然后分别予生理盐水、布地奈德药物及中药平喘Ⅰ号低、中、高剂量干预。取小鼠肺组织,通过病理切片观察,图像分析软件测定支气管壁厚度(Wat)和平滑肌厚度(Wam),采用实时定量PCR测定小鼠肺组织中SDF-1 mRNA及CXCR4 m RNA的含量,通过免疫印迹法检测肺组织中SDF-1及CXCR4的蛋白表达水平,采用线性相关分析技术测量了SDF-1与CXCR4的相关性。结果 SDF-1及CXCR4的表达水平在正常对照组中较低,在模型对照组中表达水平明显增高(P均0.01)。与模型对照组比较,平喘Ⅰ号各剂量组和布地奈德组中SDF-1及CXCR4的表达水平均明显降低(P0.01或P0.05);其中布地奈德组表达水平低于平喘Ⅰ号低剂量和中剂量组(P0.05或P0.01),而中药高剂量组的表达水平低于布地奈德组(P0.05)。结论在支气管哮喘气道炎症及其气道重塑过程中,SDF-1及其受体CXCR4两者相互作用,干预其重塑过程。平喘Ⅰ号通过影响SDF-1及CXCR4在肺内的表达而干预哮喘气道重塑,达到缓解哮喘症状的作用。     

白细胞介素-17对哮喘小鼠嗜酸性粒细胞的影响

目的探讨白细胞介素-17(IL-17)及其抗体对哮喘小鼠肺中嗜酸性粒细胞(EO S)的影响。方法随机将60只Balb/c雌性小鼠分为健康组(A)、对照组(B)、哮喘组(C)、IL-17抗体组(D)及IL-17组(E)各12只。A组不做特殊处理,B、C、D、E组采用卵蛋白致敏和激发的方法,建立哮喘模型并给予相应干预;采用HE染色肺组织病理切片观察炎性细胞浸润,采用ELISA法检测小鼠肺组织匀浆上清液中嗜酸性粒细胞趋化因子(Eotax in-1)。结果 C、D、E组小鼠气道炎症以EO S和中性粒细胞浸润为主,B组变化较轻,A组正常;Eotax in-1浓度从高到低依次为C、D、E、B、A组(P<0.05),其差异有统计学意义。结论外源性IL-17能够减少激发状态下哮喘小鼠肺中EO S的浸润。     

哮喘小鼠肺组织中基质细胞衍生因子1的表达及布地奈德雾化液的干预作用

目的探讨哮喘小鼠肺组织中基质细胞衍生因子1（SDF-1）的表达及布地奈德雾化液干预的影响。方法清洁级雌性昆明小鼠30只,随机分为对照组、哮喘组和布地奈德雾化液干预组,每组10只。建立卵白蛋白致敏的哮喘小鼠模型并用布地奈德雾化液进行干预,用免疫组织化学方法检测各组小鼠肺组织中SDF-1的表达,分别用HE染色和Wright-Giemsa染色方法对各组小鼠气道及支气管肺泡灌洗液（BALF）中炎症细胞情况进行评估。结果 SDF-1在对照组中呈低表达（0.21±0.02）,在哮喘组中表达明显增加（0.48±0.03）,使用布地奈德雾化液进行干预后SDF-1表达明显降低（0.29±0.01）,差异有统计学意义（P〈0.01）。哮喘组气道炎症细胞浸润程度明显高于对照组,干预后降低;哮喘组中BALF中炎细胞总数及嗜酸粒细胞、淋巴细胞、中性粒细胞计数均高于对照组,布地奈德雾化液干预后炎性细胞总数及各分类计数均降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论SDF-1在哮喘小鼠气道炎症细胞募集中可能有重要作用,布地奈德雾化液减轻哮喘小鼠气道炎症可能与降低SDF-1的表达有关。     

肺炎链球菌3型多糖对支气管哮喘小鼠气道炎症及Treg/Th17细胞的影响

目的观察肺炎链球菌3型多糖(T3P)对支气管哮喘小鼠气道炎症以及Treg/Th17细胞的影响,探讨T3P对哮喘小鼠的免疫调节作用。方法 BALB/c小鼠随机分成对照组、哮喘组和T3P组,每组8只。哮喘组以卵清蛋白(OVA)致敏、气道激发建立哮喘模型,对照组以PBS代替,T3P组在OVA致敏前皮下注射T3P进行干预。观察小鼠肺组织病理改变,对支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞计数及分类,ELISA法检测血清OVA特异性IgE(OVA-IgE)以及BALF中白介素4(IL-4)、干扰素γ(IFN-γ)、IL-10、IL-17浓度,实时荧光定量PCR法检测肺组织中转录因子Foxp3和RORγt mRNA表达水平,流式细胞术检测Treg和Th17细胞占CD4~+细胞百分比。结果 T3P组小鼠肺组织炎症反应程度弱于哮喘组,血清OVA-IgE,BALF中细胞总数、嗜酸粒细胞比例以及IL-4、IL-17浓度均低于哮喘组(P<0.05),IFN-γ、IL-10浓度高于哮喘组(P<0.05),小鼠肺组织Foxp3 mRNA表达水平及Treg占CD4~+细胞百分比均高于哮喘组(P<0.05),RORγt mRNA表达水平和Th17细胞占CD4~+细胞百分比均低于哮喘组(P<0.05)。哮喘组和T3P组小鼠肺组织Foxp3-mRNA/RORγt-mRNA比值及Treg/Th17细胞比例与BALF中嗜酸粒细胞数量呈负相关。结论 T3P可以通过抑制过敏原特异性IgE表达调节Th1/Th2、Treg/Th17细胞平衡,抑制气道炎症。     

益气化痰中药复方对COPD小鼠黏液高分泌及肺通气功能相关性研究

目的通过检测不同剂量益气化痰中药对慢性阻塞性肺疾病(COPD)小鼠肺通气功能、肺组织中黏蛋白5ac(Muc5ac)及水通道蛋白-5(AQP-5)表达的影响,进一步探讨肺组织中Muc5ac和AQP-5表达与肺功能的相关性。方法将小鼠随机分成6组,分别是正常组,模型组,低、中、高剂量中药组,地塞米松组,每组10只。香烟烟熏方法建立慢性阻塞性肺疾病小鼠模型,给药后分别观察小鼠肺功能(PIF、PEF和MV值)以及肺组织Muc5ac及AQP-5表达的变化。结果与正常组比较,模型组吸气峰流速(Peak Inspiratory Flow,PIF)、呼气峰流量(Peak Expiratory Flow,PEF)及每分钟通气量(Minute Volume,MV)显著降低(P0.01)。与模型组比较,低、中、高剂量中药组的PIF、PEF和MV显著升高(P0.01);地塞米松组PIF、PEF和MV差异无统计学意义(P0.05)。与正常组比较,模型组的肺组织中Muc5ac的蛋白表达显著升高(P0.01),AQP-5的蛋白表达显著下降(P0.01);与模型组比较,低、中、高剂量中药组及地塞米松组的肺组织中Muc5ac蛋白表达显著下降(P0.01)。低、中、高剂量中药组及地塞米松组的肺组织中AQP-5蛋白表达显著升高(P0.01)。肺组织中Muc5ac蛋白表达与小鼠PIF、PEF和MV均呈负相关(r分别为-0.197 5,-0.300 8,-0.403 8,P0.05),肺组织中AQP5蛋白表达与小鼠PIF、PEF和MV均呈正相关(r分别为0.956 3,0.971 3,0.935 5,P0.01)。结论益气化痰中药复方能够改善COPD小鼠的肺通气功能,影响小鼠肺组织中Muc5ac和AQP-5的蛋白表达。     

白介素-17A在哮喘小鼠中的表达及意义

目的 初步探讨哮喘小鼠中血清白介素(IL)-17A的水平及在肺、脾及胸腺组织中的表达情况.方法 28只BALB/c雌性SPF级小鼠随机分为正常对照组(A组)和哮喘模型组(B组),各14只;观察两组小鼠气道病理改变及BALF中细胞比例变化:采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测两组小鼠血清IL-17A水平及肺、脾和胸腺组织匀浆预孵后的表达情况.结果 B组小鼠气道炎症以嗜酸性粒细胞及嗜中性粒细胞浸润为主,而A组无此变化.B组外周血及肺、脾、胸腺组织匀浆中IL-17A的水平显著增高,与A组比较差异有显著性(P<0.01).B组肺组织中IL-17A水平与BALF中嗜中性粒细胞(r=0.693.P=0.040)和嗜酸性粒细胞旱正相关(r=733,P=0.030).结论 IL-17A在哮喘小鼠血清及肺、脾及胸腺组织中高表达,IL-17A可能足参与支气管哮喘急性发作的主要细胞因子之一,在哮喘中的作用可能与其促进中性粒细胞及嗜酸性粒细胞在气道内聚集有关.     

锌营养状态对哮喘小鼠气道组织IL-12、NF-κB表达的影响

目的:探讨不同锌含量饮食对哮喘小鼠气道组织IL-12,NF-κB表达的影响.方法:建立进食低锌、正常锌、高锌饲料的哮喘小鼠模型.48只BALB/c小鼠,随机分为6组,每组8只.A组为正常饲料喂养+生理盐水激发;B组为高锌饲料喂养+卵清蛋白(OVA)激发;C组为高锌饲料配对喂养+OVA激发;D组为正常饲料喂养+OVA激发...     

呼吸道合胞病毒感染对卵白蛋白诱导哮喘小鼠气道高反应性的影响

目的观察呼吸道合胞病毒（RSV）感染对卵白蛋白（OVA）诱导的哮喘小鼠气道高反应性动态变化的影响。方法将60只BALB/c小鼠按不同时相随机分成10组,每组6只,分别为：磷酸盐缓冲液（PBS）对照组（A组）,OVA组[按测定气道反应性时点（实验第21、25、29、33 d）不同,分为B1、B2、B3、B4组],OVA/RSV组（按上述相同时点分为C1、C2、C3、C4组）,以及地塞米松处理组（D组）。采用OVA腹腔注射致敏、结合OVA持续雾化吸入及RSV滴鼻激发的方法复制哮喘动物模型。动物体描箱法测定呼气相肺阻力（RL）和胸肺动态顺应性（CTL）在不同时点的动态变化。HE染色及过碘酸雪夫（PAS）染色观察小鼠气道炎症及气道上皮杯状细胞增生变化。结果当乙酰胆碱（Ach）激发浓度大于5 g/L时,C1组RL显著高于B1组,而CTL明显低于B1组（P均〈0.05）,并且上述效应较B1组（OVA激发后2 d）明显延长,分别延长到OVA激发后6 d（C2组）、10 d（C3组）。D组RL显著低于,而CTL明显高于C1组（P均〈0.05）,气道炎症亦较C1组明显减轻。结论 OVA致敏条件下RSV感染可显著增加气道阻力,降低胸肺动态顺应性,且恢复时间较单纯OVA致敏小鼠明显延长（分别延长6 d,10 d）。提示OVA致敏条件下RSV感染导致气道病变加重,且小气道病变可能是气道高反应性增高、持续时间延长的关键因素。     

辛伐他汀对肥胖哮喘小鼠气道炎症的作用及其机制

目的  探讨辛伐他汀对肥胖哮喘小鼠气道炎症的作用及其机制。方法  将60只C57BL/6J小鼠随机分为空白对照组、肥胖哮喘组、地塞米松治疗组和辛伐他汀治疗组。其中,肥胖哮喘组、地塞米松治疗组、辛伐他汀治疗组小鼠采用卵蛋白致敏、激发的方法和高脂饮食诱导建立肥胖哮喘模型。地塞米松治疗组每日给予地塞米松（0.5 mg/kg）饮水干预,辛伐他汀治疗组每日给予辛伐他汀（40 mg/kg）饮水干预,其余两组正常饮水。治疗4周后,计数存活小鼠,采外周血生化分析仪测定血糖、血脂、肝功能水平;收集支气管肺泡灌洗液,计数支气管肺泡灌洗液中白细胞总数及各炎症细胞所占比例;肺病理切片观察小鼠气道炎症和结构变化。结果  肥胖哮喘组、地塞米松治疗组、辛伐他汀治疗组气道炎症评分、回抽收集灌洗液中白细胞总数及中性粒细胞百分比、血清总胆固醇水平均较空白对照组升高,其中辛伐他汀治疗组上述指标较肥胖哮喘组、地塞米松治疗组下降,差异有统计学意义（P <0.05）。且总胆固醇水平与支气管肺泡灌洗液中中性粒细胞百分比呈正相关（r =0.724,P =0.020）。结论  辛伐他汀治疗可以减轻肥胖哮喘的气道炎症,改善哮喘病情,这一作用与其降低血脂水平有一定关系。

     

nAChRα7在条件免疫反应治疗小鼠支气管哮喘中的作用机制

目的探讨nAChRα7在条件免疫反应治疗小鼠支气管哮喘中的作用机制。方法选4～6周龄的雌性BALB/C小鼠,用卵清蛋白（OVA）腹膜下注射致敏,OVA雾化吸入激发,建立支气管哮喘模型,健康对照组用PBS给予相同处理。将模型小鼠随机分为7组,每组15只。A组：CIR1组;B组：CIR2组;C组：常规治疗组;D组：常规治疗减量组;E组：单纯声音刺激组;F组：单纯糖精水刺激组;G组：空白对照组。以上7组每天给予哮喘激发1次,各治疗组在治疗间隔1?h后给予激发。健康对照组为H组,用PBS激发20周。治疗20周后,用流式细胞技术检测CD4+ T细胞胞膜上烟碱型乙酰胆碱受体alpha7（nAChRα7）与胞浆内IL 4、IFN γ表达量,分析nAChRα7与IL 4、IFN γ的相关性。结果①A、B、C组与G组比较,CD4+ T淋巴细胞表达nAChRα7、IL 4明显降低（P＜0.01）,IFN γ增高（P＜0.01）;各因子在A、B及C组之间差异无统计学意义（P＞0.05）。nAChRα7与IL 4表达呈正相关（r=0.76,P＜0.01）,与IFN γ表达呈负相关（r=-0.69,P＜0.01）;②D、E、F、G组与H组相比,气道上皮增厚,管腔狭窄,管壁周围有大量炎症细胞浸润;A、B、C组经治疗后气道上皮及炎性浸润明显改善。结论以声音或糖精水为条件刺激,以普米克令舒加万托林雾化吸入为非条件刺激建立起的条件免疫反应,通过下调CD4+ T淋巴细胞上nAChRα7的表达,调节CD4+ T淋巴细胞的免疫功能,缓解小鼠支气管哮喘。     

白细胞介素17抗体对哮喘小鼠中性粒细胞的影响

目的观察白细胞介素17（IL 17）抗体对哮喘小鼠中性粒细胞（PMN）的影响。方法 随机将40只雄性昆明小鼠分为对照组(A组)、哮喘组（B组）、IL 17抗体组（C组）、地塞米松组(D组) ,每组10只,采用卵蛋白致敏和激发方法建立哮喘模型并给予相应治疗,对血PMN分离纯化检测凋亡率;采用支气管肺泡灌洗液(BALF) 进行细胞分类计数,肺组织病理切片ＨＥ染色观察炎性细胞浸润;采用免疫组化法检测中性粒细胞髓过氧化物酶（MPO）表达水平。结果C组外周血PMN凋亡率明显高于B组,BALF中Neu计数及肺组织免疫组化MPO阳性细胞数明显低于B组;D组外周血PMN凋亡率及BALF中Neu计数与B组差异无统计学意义,肺组织免疫组化MPO阳性细胞数明显高于B组。结论IL 17抗体有利于缓解哮喘小鼠PMN引起的炎症反应。     

甘草酸二胺通过上调水通道蛋白5减轻小鼠急性肺损伤肺水肿的实验研究

目的 探讨甘草酸二胺对于急性肺损伤状态下水通道蛋白5 (AQP-5)的调节作用及相关机制。 方法 30只SPF级雄性BALB/c小鼠被随机分为3组,即Control组 (对照组)、LPS组 (模型组)和LPS+DG组 (治疗组),每组10只。通过HE染色观察肺组织病理学改变,并进行肺损伤评分;使用湿/干比 (W/D)分析肺水肿程度;RT-PCR和Western blot对AQP-5的表达进行测量;Western blot测定总核因子-κB p65 (total NF-κB p65) 和磷酸化-NF-κB p65 (p-NF-κB p65)蛋白表达。 结果 小鼠气道内注射LPS 72 h后,肺损伤评分和肺组织W/D比值增加,AQP-5表达水平下降,p-NF-κB p65水平增加,差异有统计学意义 (P均P均<0.05)。 结论 甘草酸二胺可以有效的减轻LPS诱导的小鼠急性肺损伤 (ALI)导致的肺水肿,其机制可能与甘草酸二胺抑制NF-κB p65的活化,上调AQP-5的表达有关。     

CpG ODN对哮喘小鼠肺组织FcεRⅠ、FcγRⅡb表达的影响

目的观察CpGODN对哮喘小鼠肺组织FcaRI、FcTRIIb表达的影响,探讨其诱导免疫耐受的相关机制。方法将48只清洁级雄性Balb／c小鼠随机分为正常对照组（A组）、哮喘组（B组）、地塞米松（DXM）治疗组（C组）、CpGODN治疗组（D组）,每组12只。以卵白蛋白（OVA）作用建立小鼠哮喘模型。收集支气管肺泡灌洗液（bronchialalveolarlavagefluid,BALF）计数细胞总数并分类,取肺组织作病理,反转录一聚合酶链反应（RT—PCR）法测定肺组织中FcεRⅠ、FcγRⅡbmRNA的表达。结果（1）电镜观察肺组织超微结构：B组显示支气管及血管周围有较多炎性细胞浸润,肺泡隔内嗜酸粒细胞浸润,c组和D组与B组相比明显减轻。（2）BALF中炎症细胞表达变化：与B组相比,C组、D组BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞（eosino—phil,EOS）绝对值以及EOS占细胞总数的百分比（EOS％）均显著减少（P〈0．01）。（3）RT—PCR结果：C组、D组FcεRⅠ mR—NA表达均显著低于B组（P〈0．01）,C组、D组FcγRⅡb mRNA表达均显著高于B组（P〈0．01）。（4）相关分析：小鼠肺组织FcεRⅠ和FcγRⅡb表达呈显著负相关（P〈0．01,n=40）。结论CpGODN能降低哮喘小鼠肺组织FcεRⅠ的表达,增加FcγRⅡb的表达,具有改善气道炎症和诱导免疫耐受的作用。     

桑白皮水提取物对哮喘模型小鼠支气管肺泡灌洗液中炎性细胞的影响

[目的]探讨桑白皮水提取物对哮喘模型小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中炎性细胞计数的影响,并观察在活体内桑白皮水提取物的抗过敏作用.[方法]将BALB/C小鼠随机分成5个组,即正常对照组（A组）、模型对照组（B组）、致敏前桑白皮水提取物处理组（C组）、激发前桑白皮水提取物处理组（D组）和致敏及激发前桑白皮水提取物处理组（E组）.B组用OVA诱导制作哮喘模型,C,D,E组分别在致敏前、激发前、致敏及激发前1h经呼吸道行雾化吸入给予桑白皮水提取物（1g/L）.第24天处死各组小鼠后取BALF,利用Diff-quik染色液检测嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和巨噬细胞的数量.[结果]桑白皮水提取物对OVA诱导的小鼠哮喘模型BALF中嗜酸性粒细胞、淋巴细胞及中性粒细胞计数的增多均有明显的抑制作用.[结论]桑白皮水提取物可抑制OVA诱导的小鼠哮喘模型BALF中的炎性细胞增多.     

旋毛虫感染对过敏性哮喘小鼠IL-4及IL-5的影响

目的通过研究旋毛虫感染鼠在过敏性哮喘发病时血清及支气管肺泡灌洗液中IL-4和IL-5的水平变化．探讨旋毛虫感染对过敏性哮喘的作用。方法取雌性、8周龄BALB／C小鼠20只,随机分为4组．A组为空白对照组,B组为单纯过敏性哮喘组,C组为感染旋毛虫后哮喘组,D组为单纯感染旋毛虫组。C、D组小鼠经灌胃法感染旋毛虫囊包幼虫200—300条;4周后,以卵清白蛋白（OVA）分别对B、C组小鼠进行致敏激发,建立过敏性哮喘模型;8周后,取小鼠血清、肺泡灌洗液,用ELISA法检测IL-4和IL．5水平。结果血清中A、B、C、D组小鼠IL-4水平分别为（136．4948±31．1670）、（209．8004±21．5652）、（162．7892±17．6829）、（182．7092±12．0841）pg／L;IL-5水平分别为（7．3101±1．8600）、（15．9997±2．28208）、（9．2411±1．7280）、（11．4135±2．10776）ng／L;与B组比较,C组小鼠IL-4、IL-5水平均降低,差异有统计学意义（P〈0．05）。肺泡灌洗液中A、B、c、D组小鼠IL．4水平分别为（169．1636±9．9997）、（232．9076＋17．9501）、（172．3508＋-19．1895）、（193．0676＋-16．5708）pg／L;IL-5水平分别为（12．8618±1．7799）、（23．8460±5．507）、（15．7560±4．5419）、（20．3440±3．9713）ng／L;与B组比较,C组小鼠IL-4、IL-5水平降低,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论旋毛虫感染对过敏性哮喘小鼠IL-4、IL-5的表达有抑制作用。     

CRTH2受体拮抗剂缓解大鼠哮喘模型气道炎症

目的:通过对大鼠哮喘模型嗜酸性粒细胞(EOS)上DP1/CRTH2受体及细胞因子变化的分析,研究DP1/CRTH2拮抗剂对大鼠哮喘模型气道炎症的影响和机制.方法:40只雄性SD清洁级大鼠,随机分为正常对照组、哮喘组、CRTH2拮抗剂BAYu3405应用组、DP1受体拮抗剂BWA868C应用组,每组10只.用卵白蛋白(OVA)雾化诱喘.放射配体分析其外周血EOS上的PGD_(2)受体;ELISA测定大鼠血中IL-4和IL-5及IFN-γ水平;肺组织病理切片,HE染色镜检.结果:CRTH2拮抗剂BAYu3405应用组大鼠支气管壁EOS浸润显著减少,血清IFN-γ水平显著增高,(IL-4)、IL-5水平显著低于哮喘组和DP1受体拮抗剂BWA868C应用组(P<0.01);在肺泡灌洗液中EOS计数较哮喘组和DP1受体拮抗剂BWA868C应用组显著减少(P<0.01),外周血EOS计数与哮喘组和DP1受体拮抗剂BWA868C应用组相似,较正常对照组显著增加(P<0.01).与正常对照组相比,哮喘组、CRTH2拮抗剂BAYu3405应用组和DP1受体拮抗剂BWA868C应用组外周血EOS上DP总结合和CRTH2受体结合容量显著增加(P<0.01),DP1无显著性差异(P>0.05).结论:CRTH2受体(DP2)拮抗剂能缓解大鼠哮喘模型气道炎症,减少气道中EOS浸润,可能与CRTH2受体拮抗剂能通过拮抗EOS上增高的CRTH2结合容量,降低IL-4、IL-5和增高IFN-γ水平有关,DP1拮抗剂BWA868C对大鼠哮喘模型气道炎症无显著改善作用.