丹参素在大鼠皮肤组织中分布的动力学研究

目的:研究大鼠静脉注射复方丹参液后丹参素在皮肤中的分布动力学。方法:采用液液萃取法对血清和皮肤样品进行预处理,以对羟基苯甲酸为内标,甲醇-1%冰醋酸(8∶92)为流动相,用高效液相色谱法于280 nm处检测,保留时间和光谱图进行定性分析。结果:大鼠静脉注射复方丹参液后在血清和皮肤中检测到丹参素,用所建立的方法绘制了其经时血药浓度和皮肤组织中的药浓度表格。结论:大鼠静脉注射复方丹参液后,丹参素可在皮肤中快速分布,其动力学类型属一室模型。     

丹参成分在Caco-2细胞中吸收的研究

目的建立改良的Caco-2细胞模型研究丹参中的可吸收成分,并用在体动物模型验证。方法HPLC-MS方法测定加入丹参水提取物的Caco-2细胞破碎液中的丹参成分,并与大鼠在体灌流给药后血浆中的成分相比较。结果加药Caco-2细胞破碎液中检测到丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、丹酚酸D、紫草酸、迷迭香酸、丹酚酸B7种丹参的成分,给药后大鼠血浆中检测到丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、丹酚酸D、紫草酸、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A共8种丹参的成分。结论细胞破碎液中检测的成分为丹参在Caco-2细胞中有吸收的成分,本方法可作为研究中药吸收的新方法。     

复方丹参制剂有效成分及大鼠在体肠吸收比较研究

目的:以复方丹参片与滴丸为代表,从有效成分及其大鼠在体肠吸收等方面进行比较研究,为临床优选药物提供科学根据。方法:以HPLC法检测复方丹参片与滴丸中丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B、丹参酮ⅡA、隐丹参酮、人参皂苷Rg1和Rb1的含量;采用大鼠肠灌流试验观察片剂与滴丸中丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B的肠吸收情况。结果:每次服药滴丸仅原儿茶醛的服药摄入量高于片剂,其余6种有效成分均低于片剂。原儿茶醛的肠吸收较完全,丹参素和丹酚酸B的肠吸收不显著。十二指肠是这三种成分的主要吸收部位。片剂与滴丸中原儿茶醛在不同肠段的吸收存在差异。结论:复方丹参片与滴丸中有效成分的每次服药摄入量差异明显,且部分成分的大鼠肠吸收特征存在一定的差别。     

丹参中丹参素和原儿茶醛的微波提取工艺研究

目的:优选微波法提取丹参中有效成分丹参素和原儿茶醛的工艺条件。方法:以正交设计法,以水为溶剂,考察了微波功率、微波辐射时间及料液比3个因素,每个因素3个水平,选择正交设计表,用HPLC法测定丹参素和原儿茶醛,并以其含量作为评价指标。结果:在微波功率320瓦,微波辐射时间为30分钟,料液比为1∶30时丹参素和原儿茶醛的提取率最高。结论:优化的条件经试验验证,表明工艺条件稳定可行。     

单向灌流法研究丹参提取物中丹参素和原儿茶醛大鼠肠吸收特性

目的研究丹参提取物中丹参素和原儿茶醛的大鼠在体肠吸收动力学特征。方法采用大鼠在体肠单向灌流装置,并用质量法校正灌流液体积,考察灌流液体积流量、灌流液pH值、胆管结扎、丹参提取物质量浓度、吸收部位以及P-糖蛋白(P-gp)对丹参素和原儿茶醛吸收的影响,以HPLC法分别测定丹参素和原儿茶醛。结果在灌流体积流量0.2～0.8 mL/min,随着灌流体积流量的增大,丹参素和原儿茶醛的吸收速率常数(Ka)和表观吸收系数(Papp)均呈线性增大;在考察pH值为7.4、6.8、5.5时,供试液的pH值对丹参素和原儿茶醛的吸收有显著影响(P<0.05),丹参素和原儿茶醛的Ka和Papp均随pH值的降低而升高,pH 5.5和pH 6.8的吸收无显著差异,而pH 5.5与pH 7.4吸收有显著差异(P<0.05);胆管结扎组与不结扎组的丹参素和原儿茶醛的Ka和Papp均无显著差异;在不同吸收部位,丹参素的Ka和Papp分别按照十二指肠、空肠、回肠和结肠的顺序依次下降,原儿茶醛则下降趋势不明显,全肠段都有很好的吸收;在丹参提取物质量浓度0.8、1.5、2.2 mg/mL时小肠中丹参素的Ka和Papp随质量浓度升高而降低,而原儿茶醛吸收参数则无明显变化;含P-gp抑制剂组与不含P-gp抑制剂组相比,丹参素和原儿茶醛的Ka和Papp均无显著差异。结论灌流体积流量对丹参素和原儿茶醛的吸收有显著影响;随着pH值的降低,丹参素和原儿茶醛的吸收增加;胆管结扎与否对吸收没有显著影响;丹参素和原儿茶醛在整个肠段都有一定吸收,丹参素在肠上端吸收要比下端好;随着丹参提取物质量浓度的增大,原儿茶醛的Ka和Papp无明显变化,故其在肠道的吸收呈一级动力学过程,推测其吸收机制为被动扩散;而丹参素的Ka和Papp有明显减小的趋势,推测其吸收机制除被动扩散外,还可能有主动吸收或易化扩散;丹参素和原儿茶醛均不受P-gp的外排吸收影响。     

丹参制剂中原儿茶醛及丹参素的同时定量分析

目的：对复方丹参含片及滴丸中的原儿茶醛及丹参素同时进行了定量测定。方法：采用高效液相法。结果：复方丹参含片５次测定平均回收率丹参素为１００．４７％,ＲＳＤ为１．０８％,原儿茶醛为９９．２７％,ＲＳＤ为１．２２％。在丹参滴丸中３次测定的平均回收率丹参素为１００．４０％,ＲＳＤ为０．６５％,原儿茶醛为９８．４７％,ＲＳＤ为１．７６％。结论：方法简便、快速,两峰分离良好。     

高效液相色谱法测定丹红注射液中丹参水溶性成分的含量

目的建立反相高效液相色谱法测定丹红注射液中丹参素、原儿茶醛、丹参酚酸B等水溶性成分的含量。方法以标准品丹参素、原儿茶醛、丹参酚酸B为内标,色谱柱:Krom asilC18柱(4.6×20 mm,5μm);流动相:流动相A:水-二甲基甲酰胺-冰醋酸(90∶4∶2),流动相B:甲醇。梯度洗脱;流速:1.0 m l/m in;检测波长:281 nm。结果丹参素加样回收率为97.59%~101.66%,RSD为1.50%(n=6);原儿茶醛加样回收率为97.19%~101.25%,RSD为1.90%,(n=6);丹参酚酸B加样回收率为100.39%~102.11%,RSD为0.6%,(n=6)。结论实验结果表明,该方法操作简便,重现性好,可作为样品的检测方法。     

HPLC法比较不同血液样品中丹参素和原儿茶醛的含量

目的比较丹参注射液不同血液样品中丹参素和原儿茶醛的含量。方法制备丹参注射液不同处理方法和不同剂量含药血浆及血清，运用HPLC法检测其丹参素和原儿茶醛含量。结果各剂量合药血浆中丹参素和原儿茶醛含量采用乙酸乙酯提取法回收率均高于水浴提取法；各含药血浆组中丹参素和原儿茶醛含量均高于其血清组；且6．0、4．8、4．0g／kg剂量血浆组丹参素含量明显高于与同剂量血清组（P〈0．05）；60、4.8g／kg剂量血浆组原儿茶醛含量明显高于与同剂量血清组（P〈0．05）。结论丹参素和原儿茶醛血液样品分析宜采用乙酸乙酯提取法和血浆样品.     

HPLC法测定肾康灵颗粒中丹参素和原儿茶醛的含量

目的:建立梯度洗脱测定肾康灵颗粒中丹参素、原儿茶醛含量的HPLC法。方法:Hypersil ODSCl8柱,流动相甲醇-1%冰醋酸溶液,线性梯度洗脱:0～8 min(5∶95),8～11 min(6∶94～5∶95),11～20 min(5∶95);流速1 mL.min-1;检测波长280 nm。结果:在此色谱条件下2种成分可完全分离。丹参素、原儿茶醛的线性范围分别为0.050 4～0.504μg(r=0.999 8),0.109 0～1.090μg(r=0.999 9)。丹参素、原儿茶醛在肾康灵颗粒中的平均回收率分别为98.40%,98.85%,RSD 1.2%,0.87%。结论:该方法简便、准确、快速,可同时测定肾康灵颗粒中丹参素、原儿茶醛的含量。     

活血胶囊中丹参素和原儿茶醛的含量测定

目的制定活血胶囊中丹参素和原儿茶醛的含量测定方法。方法采用HPLC法,以丹参素和原儿茶醛为对照品,检测波长为280nm,甲醇-0.5%醋酸水溶液(22∶78)为流动相。结果丹参素在0.421～3.364μg范围、原儿茶醛在0.212～1.699μg范围有良好的线性关系,样品平均加样回收率丹参素和原儿茶醛分别为100.05%和99.39%,RSD分别为3.07%和1.62%。结论本法结果准确,精密度及重现性较好,可作为该制剂的质量控制方法。     

丹参中丹参素、原儿茶醛来源的初步研究

目的：考察丹参药材中丹参素和原儿茶醛的来源。方法：以丹参素、原儿茶醛为指标成分，用高效液相色谱法测定其含量；采用液相色谱与多级质谱联用法鉴定丹酚酸。结果：丹参素、原儿茶醛并非丹参固有成分，随煎煮时间增加而增加，而丹酚酸B随煎煮时间增加而减少。结论：丹参素、原儿茶醛是丹酚酸B的降解产物。     

利用聚多巴胺制备丹参注射液缓释制剂的研究

目的:利用聚多巴胺(PDA)对丹参注射液中多成分进行负载,构建丹参注射液(SMI)缓释制剂(PDA-SMI)。方法:建立丹参注射液的原儿茶醛、迷迭香酸和丹酚酸B3种成分的分析方法并进行含量测定;制备PDA,在pH值2.5的条件下对SMI进行负载,制备PDA-SMI;对PDA-SMI体外释放行为进行考察。结果:SMI中原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B的浓度分别为0.344、0.214、0.262 mg/mL;PDA-SMI对原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B的载药量分别为8.59%,15.90%和20.57%;PDA-SMI中原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B体外累计释放率分别为84.05%,77.57%和63.12%。结论:PDA可以负载SMI的多种成分,载药量较高,并具有良好的缓释效应。     

Pharmacokinetics of phenolic compounds of Danshen extract in rat blood and brain by microdialysis sampling

Aim of the study

To evaluate the pharmacokinetics of phenolic compounds after oral administration of Danshen extract in rat brain.

Materials and methods

Blood and brain microdialysis probes were inserted into jugular vein and cerebral cortex of rat under anesthesia and perfused with ringer's solution at the rate of 2.0 and 0.8 μL/min, respectively. Blank microdialysates were collected after 2 h post-implantation equilibrium time. Danshen extract (danshensu 40 mg/kg BW, protocatechuic aldehyde 149 mg/kg BW, and salvianolic acid B 50 mg/kg BW) was administrated intragastrically, and then blood and brain microdialysates were collected at 15 and 30 min time intervals for 4 h, respectively. The concentrations of phenolic compounds were determined by high-performance liquid chromatography coupled with chemiluminescence detection. Pharmacokinetic parameters were estimated using non-compartmental methods.

Results

Danshensu and protocatechuic acid could be detected in both blood and brain microdialysates, while protocatechuic aldehyde and salvianolic acid B were not detected. Brain-to-blood (AUC_brain/AUC_blood) distribution ratio were 0.25 ± 0.04 and 0.09 ± 0.02 for danshensu and protocatechuic acid, respectively.

Conclusions

Danshensu can readily permeate the blood brain barrier after oral administration of Danshen extract, and protocatechuic acid is a potential oxidative metabolite of protocatechuic aldehyde.     

HPLC同时测定丹参水溶性3组分的含量

 目的建立RP-HPLC同时测定丹参水提物中丹参素、原儿茶醛和丹参酚酸B的含量。方法ODS Hypersil(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,1%醋酸溶液和甲醇采用梯度洗脱,检测波长281nm,流速1.0mL·min^-1。结果丹参水提物中的杂质对3组成分的测定无干扰,3组成分在各自的线性范围内:丹参素5.2～26.0mg·L^-1;原儿茶醛2.6～13.0mg·L^-1;丹参酚酸B 9.0～45.0mg·L^-1内均呈良好的线性关系(r>0.999),平均加样回收率、精密度、重现性和稳定性均符合有关规定。结论本方法操作简便,结果准确,可以作为控制丹参内在质量的方法。     

金属离子对丹参酮ⅡA和原儿茶醛生物合成的影响

目的:研究金属离子对丹参不定根生长和丹参酮ⅡA、原儿茶醛含量的影响。方法:利用组织培养技术培养丹参不定根,并用HPLC测定Fe²⁺,Cu²⁺,Zn²⁺,Mn²⁺,Mg²⁺不同含量处理时丹参酮Ⅱ_A和原儿茶醛的含量。结果:基本MS培养基的Fe²⁺和Mn²⁺含量即可满足不定根生长,较高含量的Cu²⁺和Mg²⁺促进不定根增殖,zn²⁺对丹参不定根生长的影响并不十分显著。Cu²⁺和Zn²⁺抑制原儿茶醛合成,适量的Fe²⁺和Mg²⁺可以促进原儿茶醛的合成,而较高含量的Mn²⁺更利于原儿茶醛的合成。低含量的Cu²⁺,Zn²⁺,Mg²⁺以及较高含量的Fe²⁺和Mn²⁺促进丹参酮ⅡA的合成。结论:金属离子对丹参不定根生长和次生代谢物合成有显著影响。     

原儿茶醛的药理研究进展

对原儿茶醛近30年来药理活性及其作用机制、毒性方面的研究文献进行总结,为含有原儿茶醛的相关中药合理应用和新药质量标准的制定提供参考。原儿茶醛是常用中药丹参水溶性成分丹酚酸B降解的主要产物之一,具有抗动脉粥样硬化、保护心肌、抗血栓形成、神经保护、抗脓血、抗病毒、抗纤维化等广泛的药理活性,其作用机制已逐渐深入;但亦有一定的心脏毒性。目前处方含有丹参的心脑血管新药开发是一大热点,工艺优化和质量标准应兼顾原儿茶醛药理活性和毒性,从而提高丹参制剂治疗缺血性心脏病的疗效,避免不必要的毒副作用发生。     

复方丹参泡腾性渗透泵片的制备及释药机制研究

目的:根据冠心病发病的特点制备复方丹参泡腾性渗透泵片用于其防治,考察其体外释药特性并探明其释药机制.方法:复方丹参药物因含有酚羟基和羧基的酚酸类和三萜皂苷类成分而呈弱酸性,直接加入碳酸氢钠形成泡腾剂,以氯化钠、甘露醇为促渗剂,以HPMC为阻滞剂制得片芯,外包含致孔剂的醋酸纤维素膜制得渗透泵片,利用片芯渗透压的变化研究其释放机制.结果:5种有效成分丹参素、原儿茶醛、人参皂苷Rg_1,Rb_1,三七皂苷R_1以相近的释药规律释药,在渗透压和泡腾作用的共同作用下,药物能够在12 h内以零级速率完全释放药物.结论:成功制得12 h恒速释放的复方丹参泡腾性渗透泵片并阐明其释药机制,为冠心病防治药物和中药新剂型的开发提供思路.     

毛细管电泳-场强放大堆积技术测定白花丹参中的水溶性有效成分

目的:利用高效毛细管电泳-场强放大柱内堆积技术分离测定白花丹参中的水溶性有效成分原儿茶醛,原儿茶酸,丹参素,迷迭香酸和丹酚酸B.方法:采用未涂层熔融石英毛细管柱(75 μm×50.2 cm,40 cm),以含15%甲醇的20 mmol·L-1硼砂(pH 10.0)为运行缓冲液,分离电压28 kV,柱温25℃,检测波长210 nm.进样前压力进水3.4 kPa;电动进样-8kV×3 s.结果:原儿茶醛的线性范围是3.0～60.0 mg·L-1(R2=0.9996);原儿茶酸,丹参素,迷迭香酸,丹酚酸B的线性范围均为1.0～20.0 mg·L-1(R2=0.9991,0.9994,0.9989,0.9998),检测限分别为0.55,0.40,0.25,0.32,0.38μg·L-1,富集倍数高,灵敏度高;将此方法应用于实际样品测定,回收率为97.31%～99.81%.结论:该方法简单、快速、准确、灵敏度高,可用于白花丹参的质量控制.