葛根芩连汤降低TNF-α水平改善小鼠溃疡性结肠炎的机制研究

目的 探究葛根芩连汤对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠溃疡性结肠炎(UC)的抗炎作用。方法 34只SPF级C57BL/6小鼠按随机数字表法分为空白组8只、模型组10只、柳氮磺吡啶组(260mg/kg)8只和葛根芩连汤组(390mg/kg)8只。除空白组外,其余各组小鼠自由饮用2.5% DSS建立UC小鼠模型,建模成功后,柳氮磺吡啶组、葛根芩连汤组小鼠每天给予相应药物灌胃,其余组给予等体积(10ml/kg)生理盐水。每天观察小鼠体质量、大便性状、神态等一般情况的变化,并参照疾病活动指数(DAI)表进行评分。实验结束时采集结肠组织标本,采用苏木素-伊红(HE)染色观察各组小鼠结肠组织病理改变进行结肠组织学评分,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测小鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)浓度。 结果 与空白组比较,模型组小鼠体质量明显下降,出现腹泻、血便,DAI评分[(1.43±0.47)分比(0.00±0.00)分,P<0.05]、组织学评分[(6.80±3.99)分比(0.00±0.00)分,P<0.05]、血清中IL-1β[(49.14±18.52)pg/mL比(28.7±5.68)pg/mL,P<0.05]和TNF-α[(405.77±82.06)pg/mL比(295.32±60.93)pg/mL,P<0.05]浓度显著上升,结肠明显缩短[(5.40±0.41)cm比(7.07±0.61)cm,P<0.05]。经葛根芩连汤干预后,葛根芩连汤组与模型组相比小鼠体质量、大便情况等明显改善,DAI评分[(1.24±0.92)分比(1.43±0.47)分,P>0.05]、组织学评分[(5.00±4.93)分比(6.80±3.99)分,P>0.05]、血清TNF-α[(362.36±71.37)pg/mL比(405.77±82.06)pg/mL,P<0.05]、IL-1β[(46.73±10.02)pg/mL比(49.14±18.52)pg/mL,P>0.05]浓度降低,结肠组织形态和长度改善[(5.60±0.54)cm比(5.40±0.41)cm,P>0.05],与柳氮磺吡啶组小鼠之间无统计学差异(P>0.05)。 结论 葛根芩连汤能一定程度改善DSS诱导的UC小鼠结肠组织病理情况,其机制可能与下调炎性因子TNF-α的表达有关。     

姜黄素对溃疡性结肠炎模型小鼠结肠组织TNF-α、IL-1β、IL-10表达的影响

目的观察姜黄素对溃疡性结肠炎(UC)模型小鼠结肠组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素10(IL-10)表达的影响,探讨其治疗UC的可能作用机制。方法SPF级健康雄性BALB/c小鼠60只,随机分为正常对照组、模型组、姜黄素组、柳氮磺胺吡啶(SASP)组,各15只。采用右旋葡聚糖硫酸钠(DSS)法复制UC小鼠模型,腹腔注射相应药物,连续7天。观察小鼠一般生理状态,疾病活动度指数(DAI)评分。末次给药后处死小鼠,行结肠大体形态损伤指数(CMDI)评分,组织切片染色,光镜下观察结肠组织的病理学变化并评估组织损伤指数(TDI)。ELISA法检测小鼠结肠组织促炎因子TNF-α、IL-1β和抗炎因子IL-10表达水平。结果(1)模型组小鼠大体形态、组织病理均符合溃疡性结肠炎特点。(2)各组DAI评分比较:SASP组[(0.51±0.40)分]、姜黄素组[(0.52±0.36)分]与模型组[(1.38±0.61)分]比较,P0.01。(3)各组CMDI评分比较:SASP组[(2.14±0.92)分]、姜黄素组[(2.19±1.10)分]与模型组[(3.83±1.44)分]比较,P0.01。(4)各组TDI评分比较:SASP组[(5.48±1.01)分]、姜黄素组[(6.48±1.03)分]与模型组[(8.89±0.88)分]比较,P0.01。(5)各组小鼠结肠组织TNF-α、IL-1β及IL-10含量比较:SASP组[(126.75±6.16)pg/m L、(157.51±20.43)pg/m L、(156.33±16.51)pg/m L]、姜黄素组[(254.83±28.29)pg/m L、(236.83±25.21)pg/m L、(136.66±16.49)pg/m L]与模型组[(418.19±41.67)pg/m L、(401.11±35.32)pg/m L、(33.96±6.68)pg/m L]比较,P0.01。结论姜黄素可以显著改善UC小鼠症状、病理形态,上调小鼠结肠组织IL-10表达水平,抑制TNF-α、IL-1β表达水平,达到对UC的抗炎作用。     

二白连地汤对溃疡性结肠炎大鼠免疫机能的影响

目的:探讨二白连地汤对溃疡性结肠炎免疫机能的影响。方法:用葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium DSS)造模,随机分组处理,分别观察各组大鼠体重和大便性状,采用疾病活动指数(DAI)对动物状态进行评分,观察其结肠形态及病理学变化并进行评分,测定大鼠血清TNF-α、IL-10的水平。结果:模型组大鼠DAI评分、结肠形态及病理学评分明显高于正常组,血清TNF-α升高、IL-10下降。SASP组及二白连地汤组DAI评分、结肠形态及病理学评分明显低于模型组,血清TNF-α下降、IL-10升高。SASP组与二白连地汤组DAI评分、结肠形态及病理学评分,血清TNF-α、IL-10均无显著性差异。结论:二白连地汤可抑制UC大鼠TNF-α水平,提高IL-10水平,有利于炎症的消除和组织修复,能有效治疗UC。     

核因子κB小干扰RNA对葡聚糖硫酸钠诱导小鼠结肠炎的影响

目的 探讨核因子κB小干扰RNA(siRNA)对葡聚糖硫酸钠(DSS)小鼠结肠炎的影响,为寻找治疗溃疡性结肠炎(UC)的新药提供实验依据.方法 36只BALB/C小鼠随机分为4组(每组9只):正常对照组、核因子κB siRNA组、错义siRNA组、DSS模型组.每日观察各组小鼠的体重、活动、大便性状和便血情况以评估小鼠的疾病活动情况;对小鼠结肠组织进行大体及组织形态学观察;免疫组织化学染色观察核因子κB p65在结肠黏膜内的表达;酶联免疫吸附法(ELISA)测定结肠黏膜组织中肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量.结果 (1)核因子κB siRNA组小鼠的DAI评分[(2.31±0.26)分]和组织学评分[(2.19±0.77)分]明显低于错义siRNA组[(3.42±0.67)分和(4.65±1.53)分]及DSS模型组[(3.73±0.55)分和(4.47±1.52)分,均P<0.05].(2)核因子κBsiRNA组小鼠结肠黏膜核因子κB p65的阳性表达及结肠黏膜组织内TNF-α含最[(266±35)pg/ml]明显低于错义siRNA组[(412±51)pg/ml]和DSS模型组[(449±44)pg/ml,均P<0.05].结论 核因子κB p65 siRNA对小鼠DSS结肠炎有一定的治疗作用,核因子κB p65 siRNA有望成为一种新型的治疗UC的基因药物.     

柚皮素对自身免疫性肝炎模型小鼠保护作用及TRAF6/JNK信号通路的影响

目的探讨柚皮素对自身免疫性肝炎(AIH)模型小鼠保护作用及肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)/c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路的影响。方法将72只雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为阴性对照组,模型组,柚皮素低(30mg/kg)、中(60mg/kg)、高(120mg/kg)剂量组和阳性对照组(2mg/kg),每组12只。阴性对照组尾静脉注射等量生理盐水,其余各组小鼠一次性尾静脉注射刀豆球蛋白A(ConA)(12mg/kg)制备AIH模型。注射完毕之后,柚皮素低、中、高剂量组和阳性对照组分别灌胃相应药物,阴性对照组和模型组灌胃等量生理盐水,每天1次,持续给予5天。末次灌胃24h后,采用全自动生化分析仪检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠肝组织病理学改变,酶联免疫吸附(ELISA)检测小鼠肝组织白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,蛋白免疫印迹法检测小鼠肝组织TRAF6、JNK、磷酸化JNK(p-JNK)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)水平。结果阴性对照组小鼠肝脏结构未见明显异常;模型组小鼠见大片肝细胞坏死区域,肝索排列紊乱,同时伴有炎性细胞浸润;柚皮素各剂量组和阳性对照组病理改变较模型组减轻,且柚皮素高剂量组与阳性对照组只存在轻度肝细胞坏死。与阴性对照组比较,模型组小鼠血清ALT[(134.82±13.60)U/L比(27.16±4.81)U/L,P0.05]、AST[(156.07±19.81)U/L比(20.49±3.62)U/L,P0.05],肝组织IL-6[(417.26±59.48)pg/mL比(102.18±18.62)pg/mL,P0.05]、TNF-α[(355.22±50.12)pg/mL比(62.17±6.07)pg/mL,P0.05]、TRAF6[(1.08±0.28)比(0.36±0.02),P0.05]、p-JNK[(0.94±0.14)比(0.38±0.02),P0.05]和Bax[(1.24±0.25)比(0.30±0.05),P0.05]蛋白水平增加,Bcl-2[(0.43±0.04)比(1.05±0.21),P0.05]和Bcl-2/Bax[(0.35±0.07)比(3.50±0.45),P0.05]水平降低;与模型组比较,柚皮素低、中、高剂量组和阳性对照组小鼠血清ALT[(119.45±11.72)U/L、(83.29±9.53)U/L、(52.13±9.14)U/L、(54.65±10.63)U/L比(134.82±13.60)U/L,P均0.05]、AST [(122.82±16.53)U/L、(86.51±9.48)U/L、(42.64±7.35)U/L、(46.82±8.27)U/L比(156.07±19.81)U/L,P均0.05],肝组织IL-6[(364.34±41.77)pg/mL、(307.13±37.43)pg/mL、(248.29±32.18)pg/mL、(253.17±34.90)pg/mL比(417.26±59.48)pg/mL,P均0.05]、TNF-α[(293.57±37.68)pg/mL、(240.94±27.49)pg/mL、(153.82±19.92)pg/mL、(149.56±18.08)pg/mL比(355.22±50.12)pg/mL,P均0.05]、TRAF6[(0.86±0.13)、(0.71±0.10)、(0.52±0.07)、(0.49±0.06)比(1.08±0.28),P均0.05]、p-JNK[(0.78±0.11)、(0.64±0.09)、(0.50±0.08)、(0.46±0.07)比(0.94±0.14),P均0.05]和Bax[(1.10±0.19)、(0.95±0.18)、(0.43±0.05)、(0.40±0.12)比(1.24±0.25),P均0.05]蛋白水平降低,Bcl-2[(0.52±0.07)、(0.60±0.10)、(0.73±0.13)、(0.71±0.15)比(0.43±0.04),P均0.05]和Bcl-2/Bax[(0.47±0.04)、(0.63±0.08)、(1.70±0.21)、(1.78±0.38)比(0.35±0.07),P均0.05]水平增加,柚皮素各剂量组之间呈剂量效应关系(P0.05);各组小鼠肝组织JNK蛋白水平变化不显著(P0.05);柚皮素高剂量组与阳性对照组作用相似(P0.05)。结论柚皮素可能通过抑制TRAF6/JNK信号通路,减轻AIH模型小鼠肝脏炎症反应,对AIH模型小鼠肝脏具有保护作用。     

葛根芩连结肠定位胶囊对溃疡性结肠炎大鼠疾病活动指数和结肠黏膜损伤指数的影响

目的 在传统葛根芩连方基础上设计制备葛根芩连结肠定位释药胶囊并对其治疗溃疡性结肠炎的效果进行评价。方法 优化处方制得葛根芩连结肠定位胶囊并进行质量评价。采用2,4,6-三硝基苯磺酸复制溃疡性结肠炎大鼠模型,将模型复制成功的大鼠分成5组,即模型组、阳性对照组、葛根芩连简方组、葛根芩连全方组、葛根芩连简方结肠定位胶囊组,持续给药1周后比较给药后疾病活动指数（disease activity index, DAI）和结肠黏膜损伤指数（colonic mucosal damage index,CMDI）。结果 与模型组比较,葛根芩连简方和全方组DAI、CMDI均显著降低（P<0.05）;葛根芩连简方、全方组DAI、CMDI比较,差异均无统计学意义（P>0.05）;葛根芩连简方结肠定位胶囊组DAI、CMDI均显著低于葛根芩连简方和全方组（P＜0.05）。结论 葛根芩连简方结肠定位胶囊可提高葛根芩连汤原方治疗溃疡性结肠炎的疗效。     

栀子苷对溃疡性结肠炎模型大鼠的抗炎作用及AMPK/MLCK信号通路的影响

目的探讨栀子苷对溃疡性结肠炎模型大鼠的抗炎作用及腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)/肌球蛋白轻链激酶(MLCK)信号通路的影响。方法 90只SD大鼠按随机数字表法分成对照组、模型组、柳氮磺胺吡啶组(300mg/kg)、栀子苷低、高剂量组(40、80mg/kg),每组18只。2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导制备溃疡性结肠炎模型大鼠,建模成功后,各组大鼠给予相应药物灌胃4周,对照组及模型组给予等体积生理盐水。测定各组大鼠结肠黏膜损伤指数、疾病活动指数(DAI)评分、大体形态损伤评分,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法及蛋白免疫印迹(Western blot)法测定大鼠结肠组织AMPK、MLCK mRNA和蛋白水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定结肠组织白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果与对照组比较,模型组结肠黏膜损伤指数([3.69±0.23)分比(0.00±0.00)分,P0.05]、DAI评分([2.69±0.25)分比(0.00±0.00)分,P0.05]、大体形态损伤评分([2.26±0.21)分比(0.00±0.00)分,P0.05]、结肠组织MLCK mRNA([3.89±0.26)比(0.89±0.16),P0.05]和蛋白表达([1.15±0.12)比(0.31±0.07),P0.05]、IL-2([654.74±24.54)ng/g比(269.69±15.89)ng/g,P0.05]、IL-6([788.99±15.47)ng/g比(242.96±15.78)ng/g,P0.05]、TNF-α([610.89±18.14)ng/g比(154.99±18.47)ng/g,P0.05]水平升高,AMPK mRNA([1.25±0.85)比(5.36±0.19),P0.05]和蛋白表达([0.30±0.06)比(1.33±0.10),P0.05]水平降低;与模型组比较,柳氮磺胺吡啶组、栀子苷低剂量组、栀子苷高剂量组结肠黏膜损伤指数([1.01±0.10)分、(2.42±0.18)分、(0.99±0.09)分比(3.69±0.23)分,P均0.05]、DAI评分([0.95±0.23)分、(2.04±0.30)分、(1.00±0.22)分比(2.69±0.25)分,P均0.05]、大体形态损伤评分([1.01±0.27)分、(1.61±0.31)分、(1.03±0.25)分比(2.26±0.21)分,P均0.05]、结肠组织MLCK mRNA([1.29±0.18)、(2.87±0.15)、(1.31±0.18)比(3.89±0.26),P均0.05]和蛋白([0.78±0.11)、(0.95±0.12)、(0.79±0.10)比(1.15±0.12),P均0.05]表达水平、IL-2 ([388.87±33.69)ng/g、(585.96±50.47)ng/g、(389.48±35.69)ng/g比(654.74±24.54)ng/g,P均0.05]、IL-6 ([367.47±18.14)ng/g、(664.58±18.47)ng/g、(369.65±18.87)ng/g比(788.99±15.47)ng/g,P均0.05]、TNF-α([259.54±20.83)ng/g、(458.96±24.47)ng/g、(255.47±19.59)ng/g比(610.89±18.14)ng/g,P均0.05]水平降低,AMPK mRNA([4.06±0.54)、(2.41±0.54)、(4.04±0.39)比(1.25±0.85),P均0.05]和蛋白([0.95±0.09)、(0.65±0.07)、(0.94±0.08)比(0.30±0.06),P均0.05]表达水平升高;且栀子苷高剂量组结肠黏膜损伤指数、DAI评分、大体形态损伤评分、结肠组织MLCK mRNA和蛋白表达水平、IL-2、IL-6、TNF-α水平低于栀子苷低剂量组(P0.05),AMPK mRNA和蛋白表达水平高于栀子苷低剂量组(P0.05);与柳氮磺胺吡啶组比较,栀子苷低剂量组结肠黏膜损伤指数、DAI评分、大体形态损伤评分、结肠组织MLCK mRNA和蛋白表达水平、IL-2、IL-6、TNF-α水平升高(P0.05),AMPK mRNA和蛋白表达水平降低(P0.05);栀子苷高剂量组和柳氮磺胺吡啶组结肠黏膜损伤指数、DAI评分、大体形态损伤评分、结肠组织AMPK、MLCK mRNA和蛋白表达、IL-2、IL-6、TNF-α水平比较差异无统计学意义(P0.05)。结论栀子苷能抑制溃疡性结肠炎模型大鼠肠道损伤及炎症反应;其机制可能与栀子苷增强AMPK mRNA和蛋白表达,抑制MLCK mRNA和蛋白表达,进而抑制AMPK/MLCK信号通路有关。     

丹参注射液联合美常安对急性重症胰腺炎模型大鼠血清炎性因子及胰腺组织病理的影响

目的探讨丹参注射液联合美常安治疗急性重症胰腺炎(SAP)大鼠的实验效果。方法选取成年SPF级雄性SD大鼠90只,采用随机数字表法分为空白对照组、实验对照组、SAP模型组、丹参治疗组、美常安治疗组和联合治疗组六组,各15只大鼠,比较各组给药后72h血清白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-1β(IL-1β)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和血清内毒素(LPS)水平。结果丹参治疗组、美常安治疗组及联合治疗组IL-10、IL-1β、TNF-α、IL-6及病理学评分均低于SAP模型组[IL-10:(114.34±23.71)pg/mL、(105.21±27.53)pg/mL、(68.45±14.78)pg/mL比(189.21±37.40)pg/mL;IL-1β:(41.40±4.93)pg/mL、(39.51±3.76)pg/mL、(31.40±3.56)pg/mL比(56.65±8.37)pg/mL;TNF-α:(2.45±0.28)pg/mL、(2.21±0.32)pg/mL、(1.74±0.29)pg/mL比(3.21±0.54)pg/mL;IL-6:(1087.23±184.50)pg/mL、(967.39±202.41)pg/mL、(753.61±114.88)pg/mL比(1383.47±284.57)pg/mL;病理学评分:(10.96±1.80)分、(10.27±1.44)分、(7.36±1.20)分比(14.15±1.60)分,P均0.05]。同时联合治疗组IL-10、IL-1β、TNF-α、IL-6水平及病理学评分均低于丹参治疗组、美常安治疗组[IL-10:(114.34±23.71)pg/mL、(105.21±27.53)pg/mL比(68.45±14.78)pg/mL;IL-1β:(41.40±4.93)pg/mL、(39.51±3.76)pg/mL比(31.40±3.56)pg/mL;TNF-α:(2.45±0.28)pg/mL、(2.21±0.32)pg/mL比(1.74±0.29)pg/mL;IL-6:(1087.23±184.50)pg/mL、(967.39±202.41)pg/mL比(753.61±114.88)pg/mL;病理学评分:(10.96±1.80)分、(10.27±1.44)分比(7.36±1.20)分,P均0.05]。丹参治疗组、美常安治疗组及联合治疗组MDA、LPS均低于SAP模型组[MDA:(7.30±1.08)pg/mL、(7.11±0.95)pg/mL、(5.94±0.89)pg/mL比(8.98±1.26)pg/mL;LPS:(0.42±0.09)pg/mL、(0.38±0.10)pg/mL、(0.31±0.07)pg/mL比(0.51±0.13)pg/mL,P均0.05]。而丹参治疗组、美常安治疗组及联合治疗组SOD高于SAP模型组[(267.81±10.75)pg/mL、(278.00±14.41)pg/mL、(310.47±16.90)pg/mL比(222.50±12.89)pg/mL,P0.05]。联合治疗组MDA、LPS均低于丹参治疗组、美常安治疗组[MDA:(5.94±0.89)pg/mL比(7.30±1.08)pg/mL、(7.11±0.95)pg/mL,P0.05;LPS:(0.31±0.07)pg/mL比(0.42±0.09)pg/mL、(0.38±0.10)pg/mL,P均0.05]。SOD高于丹参治疗组、美常安治疗组[(310.47±16.90)pg/mL比(267.81±10.75)pg/mL、(278.00±14.41)pg/mL,P0.05]。结论丹参注射液联合美常安治疗SAP大鼠效果显著,能显著的减轻炎症反应及氧自由基损伤,保护大鼠的胰腺组织。     

依达拉奉对急性肺损伤的治疗作用及其机制探讨

目的探讨自由基清除剂依达拉奉对急性肺损伤大鼠模型的保护作用。方法将32只SD大鼠随机分为C组(生理盐水+生理盐水,n=8)、E组(生理盐水+依达拉奉,n=8)、LPS组(脂多糖+生理盐水,n=8)和LPS+E组(脂多糖+依达拉奉,n=8),各组经尾静脉注入LPS和依达拉奉或等体积生理盐水。6 h后麻醉大鼠并行动脉血气分析及肺病理学检查,检测血浆中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素6(IL-6)及肺组织中丙二醛(MDA)和NO水平。结果与C组相比,LPS组出现明显的肺损伤改变、动脉血氧分压显著下降[(99.37±4.35)mmHg vs(60.11±8.41)mmHg,P<0.01]、血浆中TNF-α[(3.89±0.53)pg/mL vs(11.95±1.97)pg/mL,P<0.01]和IL-6[(4.73±0.91)pg/mL vs(41.25±7.11)pg/mL,P<0.01]显著升高,肺组织中MDA[(2.06±0.42)nmol/mg vs(8.91±2.03)nmol/mg,P<0.01]和NO[(3.97±0.87)nmol/mg vs(8.74±2.01)nmol/mg,P<0.01]也显著升高;与LPS组相比,自由基清除剂依达拉奉使肺组织中MDA[(8.91±2.03)nmol/mg vs(3.76±0.68)nmol/mg,P<0.01]和NO[(8.74±2.01)nmol/mg vs(3.53±0.71)nmol/mg,P<0.01]显著降低,显著减轻急性肺损伤(ALI)大鼠的肺损伤程度,提高动脉血氧分压[(60.11±8.41)mmHg vs(85.69±6.41)mmHg,P<0.01],并使血浆中的TNF-α[(11.95±1.97)pg/mL vs(5.65±1.09)pg/mL,P<0.01]和IL-6[(41.25±7.11)pg/mL vs(11.06±1.27)pg/mL,P<0.01]显著降低。结论自由基清除剂依达拉奉能减轻急性肺损伤的病理生理变化,其机制在于依达拉奉能有效清除自由基并减少致炎因子的释放。     

α-硫辛酸对溃疡性结肠炎小鼠Th17相关炎症因子表达影响研究

目的:探讨α-硫辛酸(α-lipoic acid,ALA)对溃疡性结肠炎小鼠Th17相关炎症因子表达的影响。方法:将雄性Balb/c小鼠(22~25g)随机分为对照组(Control)、ALA对照组(ALA)、溃疡性结肠炎组(UC)、ALA治疗组(UC+ALA)四组,每组10只,观察各组小鼠疾病活动指数(DAI)评分,比较结肠质量指数及结直肠组织病理变化;酶联免疫吸附(ELISA)检测小鼠血清中IL-17、IL-21分泌情况,RT-PCR检测结肠组织TNF-α、TGF-βmRNA表达情况。结果:结肠质量指数、DAI及组织病理学评分在对照组及ALA组中无明显差异,但在UC组中显著升高,在UC+ALA组中明显降低(P<0.05);IL-17、IL-21在对照组及ALA组小鼠血清中的水平无明显差异,但在UC组中显著升高,在UC+ALA组中明显降低(P<0.05);TNF-α、TGF-βmRNA在对照组及ALA组小鼠结肠组织中的表达水平无明显差异,但在UC组中显著升高,在UC+ALA组中明显降低(P<0.05)。结论:α-硫辛酸能够降低TNBS引起的溃疡性结肠炎小鼠IL-17、IL-21、TNF-α、TGF-β等Th17相关炎症因子的表达水平,改善炎症反应及病理损伤。     

超声复合微泡促进骨髓间充质干细胞归巢对大鼠前列腺炎的治疗作用

目的 研究静脉注射骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)对大鼠前列腺炎的治疗作用.方法 贴壁法分离、培养、扩增BMSCs.将50只SD大鼠按随机数字表法分为慢性细菌性前列腺炎(chronic bacterial prostatitis,CBP)组、CBP+BMSCs组、CBP+超声复合微泡(microbubble-enhanced therapeutic ultrasound,MEUS)组、CBP+ MEUS+ BMSCs组和正常对照组,每组10只.在小动物超声引导下向大鼠前列腺两侧叶内注射大肠埃希菌建立前列腺炎症模型,注入细菌1～14 d为急性炎症期,4～ 12周为慢性炎症期,对照组注入等量PBS.建模28 d后经静脉单纯注入BMSCs、单纯行MEUS及行MEUS+注入BMSCs,活体成像观察BMSCs向前列腺归巢情况.观察移植BMSCs 2周后大鼠前列腺组织病理学变化并作炎症评分,RT-PCR检测炎症因子IL-1β、TNF-α mRNA,ELISA检测IL-1β、TNF-α蛋白含量,统计分析各组表达差异.结果 前列腺组织病理学提示CBP组、CBP+ BMSCs组、CBP+ MEUS组前列腺呈典型炎症病理变化,腺管上皮增生,层次增加,炎细胞浸润,纤维组织增生,而CBP+ MEUS+ BMSCs组大鼠前列腺炎症明显减轻.RT-PCR检测结果提示CBP组炎症因子IL-1β(0.282±0.067)、TNF-α(0.631 ±0.116),CBP+BMSCs组IL-1[β(0.893 ±0.117)、TNF-α(0.876 ±0.137),CBP+ MEUS组IL-1β(0.683 ±0.097)、TNF-α(0.814±0.127)高于正常对照组IL-1β(0.282±0.067)、TNF-α(0.256±0.059)和CBP+MEUS+BMSCs组IL-1β(0.322±0.086)、TNF-α(0.313 ±0.079) (P ＜0.05);ELISA检测结果显示CBP组炎症因子IL-1β[(315.14±86.08) pg/mL]、TNF-α[(86.41 ±24.32) pg/mL],CBP+BMSCs组IL-1 β[(278.87±72.04) pg/mL]、TNF-α[(67.77±16.98) pg/mL],CBP+ MEUS组IL-1 β[(321.24 ±93.12) pg/mL]、TNF-α[(79.14±19.17) pg/mL]含量均显著高于正常对照组[IL-1β(43.36±11.35) pg/mL、TNF-α(13.26±3.97) pg/mL]和CBP+MEUS+BMSCs组[IL-1 β (65.34±17.23) pg/mL、TNF-α(19.94±5.37) pg/mL],差异有统计学意义(P＜0.01),而CBP+ MEUS+ BMSCs组与正常对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 超声复合微泡促进BMSCs向前列腺归巢,能够减轻前列腺炎症反应,可能为前列腺炎的治疗带来新策略.     

青蒿素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及其作用机制探讨

目的：探讨青蒿素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及其可能作用机制。方法采用大鼠心肌缺血再灌注模型(缺血30 min,再灌注4 h),雄性SD大鼠30只根据随机数字表随机分为三组：假手术组(SO组,n=10)、缺血再灌注组(I/R组,n=10)和青蒿素治疗组(A+I/R组,n=10,Artemisinin：25 mg/kg,Tid,造模前1 d灌胃)。检测心肌损伤标记物肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)和肌钙蛋白I (cTnI);检测炎症因子高迁移率族蛋白1(HMGB1)、白介素17A (IL-17A)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(INF-γ)和白介素6(IL-6);检测总p38(t-p38)和磷酸化p38(p-p38)。结果与SO组比较,I/R组中心肌损伤标记物CK [(3891±245.44) U/L vs (1539±140.57) U/L]、LDH [(1917±140.54) U/L vs (889±87.23) U/L]、cTnI [(66.34±2.13) pg/mL vs (26.45±1.72) pg/mL];炎症因子HMGB1[(0.423±0.059) vs (0.301±0.067)]、IL-17A [(149.29±5.88) pg/mL vs (55.26±4.33) pg/mL]、TNF-α[(185.27±5.61) pg/mL vs (95.34±3.56) pg/mL]、INF-γ[(418.86±12.37) pg/mL vs (223.35±10.51) pg/mL]、IL-6[(156.89±6.01) pg/mL vs (65.43±4.21 pg/mL]、p-p38[(0.416±0.025) vs (0.188±0.013)]表达明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05);与I/R比较,A+I/R组中心肌损伤标记物CK [(1934±199.56) U/L]、LDH [(973±79.47) U/L]、cTnI [(38.1±2.69) pg/mL]和炎症因子HMGB1(0.174±0.026)、IL-17A [(93.65±2.69) pg/mL]、TNF-α[(145.85±3.92) pg/mL]、INF-γ[326.54±9.81] pg/mL]、IL-6[(95.47±3.16) pg/mL]、p-p38[(0.297±0.021)]表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论青蒿素可能通过抑制p38MAPK通路减轻I/R中炎症反应;青蒿素亦可通过抑制炎症反应减轻心肌缺血再灌注损伤。     

RNA干扰对小鼠腹腔活化巨噬细胞分泌TNF-α的影响

[目的]探讨RNA干扰对小鼠腹腔活化巨噬细胞表达TNF-α的抑制作用。[方法]原代培养小鼠腹腔巨噬细胞,构建针对小鼠TNF-α的siRNA表达框架,转染细胞,用RT-PCR方法检测TNF-αmRNA的水平,用ELISA方法检测TNF-α分泌情况。[结果]从凝胶电泳图像TNF-α/β-actin灰度值比可以看出干扰组TNF-αmRNA的水平0.18±0.03较阳性对照组0.91±0.05及阴性对照组0.85±0.10明显降低（P〈0.05）。干扰组TNF-α分泌量（21.87±1.20）pg/mL较阳性对照组（28.02±1.03）pg/mL及阴性对照组（27.64±1.92）pg/mL均明显降低（P〈0.05）。[结论]RNA干扰可以有效地抑制原代培养小鼠腹腔巨噬细胞TNF-αmRNA水平及其蛋白分泌。     

乌司他丁对老年患者腹腔镜子宫全切手术术后认知功能的影响

目的探讨乌司他丁(Uli)对老年腹腔镜子宫全切手术后患者认知功能的影响。方法选择美国麻醉师协会(ASA)Ⅰ或Ⅱ级择期行腹腔镜子宫全切手术的老年患者50例,随机分为观察组和对照组。观察组在常规全麻诱导前静滴乌司他丁,接着持续静脉泵注乌司他丁直至手术结束,对照组给予相应生理盐水。于手术前1天(D0)和手术后1(D1)、3(D2)、7(D3)天测定血清白介素-1(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S100β蛋白的含量,并记录简易智力状态检查量表(MMSE)评分,D0和D3测定脑事件相关电位p300潜伏期和振幅,观察术后认知功能下降发生率。结果与D0时间点相比,两组患者在D1时间点均出现MMSE评分的下降[观察组:(24.46±1.69)分比(27.67±2.64)分,对照组:(21.21±1.80)分比(27.19±2.88)分,P0.05]。炎症因子增高IL-1β[观察组:(16.29±4.61)pg/mL比(10.33±2.99)pg/mL,对照组:(19.58±5.69)pg/mL比(10.45±3.12)pg/mL,P0.05]、IL-6[观察组:(26.68±3.53)pg/mL比(3.74±0.58)pg/mL,对照组:(42.55±4.36)pg/mL比(3.96±0.63)pg/mL,P0.05]、TNF-a[观察组:(61.30±11.91)pg/mL比(30.84±3.98)pg/mL,对照组:(80.98±15.33)pg/mL比(30.24±4.05)pg/mL,P0.05],NSE增高[观察组:(5.35±1.69)μg/mL比(2.78±2.36)μg/mL,对照组:(7.87±3.38)μg/mL比(2.89±1.97)μg/mL,P0.05],S100β蛋白表达水平增高[观察组:(0.17±0.13)μg/mL比(0.04±0.01)μg/mL,对照组:(0.22±0.33)μg/mL比(0.04±0.01)μg/mL,P0.05];与对照组相比,观察组在D3时间点MMSE评分增高[(27.54±2.37)分比(25.01±2.12)分,P0.05];与对照组相比,观察组在D3时间点IL-1β、IL-6、TNFa、NSE、S100β蛋白表达水平降低[(10.22±3.20)pg/mL比(13.33±3.58)pg/mL]、[(3.94±0.69)pg/mL比(14.23±0.84)pg/mL]、[(32.52±5.60)pg/mL比(43.07±4.38)pg/mL]、[(2.34±1.10)μg/mL比(5.65±0.89)μg/mL]、[(0.05±0.01)μg/mL比(0.16±0.0)μg/mL],P均0.05;与对照组相比,观察组D3时p300潜伏期缩短[(302.34±29.12)比(353.67±35.65),P0.05],振幅升高[(8.11±2.23)比(5.23±1.93),P0.05],观察组术后认知功能下降发生率低于对照组(P0.05)。结论乌司他丁可减轻或预防老年腹腔镜子宫全切手术患者术后认知功能下降,具有脑保护作用。     

乌司他丁对老年腹腔镜子宫全切术患者术后认知功能的影响

目的探讨乌司他丁(Uli)对老年腹腔镜子宫全切手术后患者认知功能的影响。方法选择美国麻醉师协会(ASA)Ⅰ或Ⅱ级择期行腹腔镜子宫全切手术的老年患者50例,随机分为观察组和对照组。观察组在常规全麻诱导前静滴乌司他丁,接着持续静脉泵注乌司他丁直至手术结束,对照组给予相应生理盐水。于手术前1天(D0)和手术后1(D1)、3(D2)、7(D3)天测定血清白介素-1(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S100β蛋白的含量,并记录简易智力状态检查量表(MMSE)评分,D0和D3测定脑事件相关电位p300潜伏期和振幅,观察术后认知功能下降发生率。结果与D0时间点相比,两组患者在D1时间点均出现MMSE评分的下降[观察组:(24.46±1.69)分比(27.67±2.64)分,对照组:(21.21±1.80)分比(27.19±2.88)分,P0.05]。炎症因子增高IL-1β[观察组:(16.29±4.61)pg/mL比(10.33±2.99)pg/mL,对照组:(19.58±5.69)pg/mL比(10.45±3.12)pg/mL,P0.05]、IL-6[观察组:(26.68±3.53)pg/mL比(3.74±0.58)pg/mL,对照组:(42.55±4.36)pg/mL比(3.96±0.63)pg/mL,P0.05]、TNF-a[观察组:(61.30±11.91)pg/mL比(30.84±3.98)pg/mL,对照组:(80.98±15.33)pg/mL比(30.24±4.05)pg/mL,P0.05],NSE增高[观察组:(5.35±1.69)μg/mL比(2.78±2.36)μg/mL,对照组:(7.87±3.38)μg/mL比(2.89±1.97)μg/mL,P0.05],S100β蛋白表达水平增高[观察组:(0.17±0.13)μg/mL比(0.04±0.01)μg/mL,对照组:(0.22±0.33)μg/mL比(0.04±0.01)μg/mL,P0.05];与对照组相比,观察组在D3时间点MMSE评分增高[(27.54±2.37)分比(25.01±2.12)分,P0.05];与对照组相比,观察组在D3时间点IL-1β、IL-6、TNFa、NSE、S100β蛋白表达水平降低[(10.22±3.20)pg/mL比(13.33±3.58)pg/mL]、[(3.94±0.69)pg/mL比(14.23±0.84)pg/mL]、[(32.52±5.60)pg/mL比(43.07±4.38)pg/mL]、[(2.34±1.10)μg/mL比(5.65±0.89)μg/mL]、[(0.05±0.01)μg/mL比(0.16±0.0)μg/mL],P均0.05;与对照组相比,观察组D3时p300潜伏期缩短[(302.34±29.12)比(353.67±35.65),P0.05],振幅升高[(8.11±2.23)比(5.23±1.93),P0.05],观察组术后认知功能下降发生率低于对照组(P0.05)。结论乌司他丁可减轻或预防老年腹腔镜子宫全切手术患者术后认知功能下降,具有脑保护作用。     

润燥活血汤对干燥综合征模型小鼠血清及颌下腺M3R表达的影响

目的观察润燥活血汤对干燥综合征(SS)模型小鼠血清及颌下腺毒蕈碱样乙酰胆碱3型受体(M3R)表达的影响。方法 8周龄雄性BALB/c小鼠47只,按区组随机选出5只处死摘取颌下腺,剩余的小鼠随机分为正常组10只,模型组32只。参照文献的方法,采用背部皮内5个部位多点注射抗原的方法进行免疫,建立SS小鼠模型。在造模后第5周随机选取2只造模小鼠处死,通过病理形态学观察判定造模成功。另30只小鼠随机分为模型组10只,润燥活血汤组10只和羟氯喹(HCQ)组10只。润燥活血汤组小鼠按11.4g·kg~(-1)·d-1剂量灌胃润燥活血汤,模型组小鼠灌胃等量生理盐水,HCQ组小鼠按0.06g·kg~(-1)·d-1剂量灌胃HCQ混悬液(HCQ与生理盐水混合液),每天1次;正常组小鼠常规饲养;同时观测各组小鼠唾液量、饮水量。连续用药30天后眼眶取血后处死小鼠,摘取颌下腺、脾脏。采用苏木素-伊红(HE)染色评价颌下腺淋巴细胞浸润情况,采用ELISA法测定血清M3R水平,免疫组化法检测颌下腺M3R表达水平。结果与正常组比较,模型组小鼠血清、颌下腺M3R表达增加[血清M3R:(12.23±10.10)pg/mL比(2.72±1.21)pg/mL,P0.05;颌下腺M3R:(2.23±0.11)%比(1.21±0.11)%,P0.01];颌下腺淋巴细胞浸润程度增加,病理评分明显增高[(2.42±0.22)分比(0.18±0.05)分,P0.01];与模型组比较,润燥活血汤组、HCQ组小鼠血清、颌下腺M3R表达降低[血清M3R:(3.30±6.25)pg/mL、(3.17±0.87)pg/mL比(12.23±10.10)pg/mL,P均0.05;颌下腺M3R:(1.62±0.40)%、(1.53±0.06)%比(2.23±0.11)%,P均0.05];颌下腺淋巴细胞浸润浸润程度减轻,病理评分明显降低[(1.21±0.33)分、(1.08±0.09)分比(2.42±0.22)分,P均0.05];润燥活血汤组和HCQ组之间比较差异无统计学意义(P0.05)。与模型组比较,润燥活血汤组小鼠唾液量增加[(25.53±4.27)mg比(22.42±2.52)mg,P0.05];润燥活血汤组小鼠唾液量与HCQ组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论润燥活血汤治疗干燥综合征(SS)作用机制可能与下调M3R表达,抑制颌下腺淋巴细胞浸润,改善腺体分泌功能有关。     

抗TNF-α抗体对结肠炎小鼠肠黏膜免疫功能影响的研究

目的探讨抗肿瘤坏死因子α(TNF-α)抗体对葡聚糖硫酸钠(DSS)结肠炎小鼠肠黏膜免疫功能的影响。方法制备小鼠DSS结肠炎模型,实验分成正常对照组、DSS模型组、抗TNF-α抗体组,每组6只。抗TNF-α抗体5 mg/kg腹腔注射给药,正常对照组和DSS模型组用等量生理盐水腹腔注射,每周2次,注射时间共7 d。每日进行疾病活动指数(DAI)评分,实验结束后取小鼠结肠进行HE染色评分,结肠黏膜匀浆检测髓过氧化物酶(MPO)活性和TNF-α、干扰素γ(IFN-γ)、白介素13(IL-13)和白介素17(IL-17)水平。结果与正常对照组比较,DSS模型组小鼠出现明显体重减轻、便血和腹泻,DAI评分和HI评分增加(P<0.01),结肠匀浆中MPO活性、TNF-α、IFN-γ、IL-13和IL-17水平均有不同程度的增加(P<0.01)。与DSS模型组比较,抗TNF-α抗体组小鼠DAI评分和HI评分明显降低(P<0.01),结肠匀浆中MPO活性、TNF-α、IFN-γ、IL-13和IL-17水平均有不同程度的降低(P<0.01)。结论 DSS结肠炎小鼠结肠局部免疫功能紊乱,抗TNF-α抗体具有调节DSS结肠炎小鼠结肠黏膜局部免疫功能的作用。     

芹菜素对深II度烧伤大鼠急性肺损伤保护作用的研究

目的 研究芹菜素对深II度烧伤大鼠急性肺损伤的保护作用及其机制。方法 将120只实验用SD大鼠随机平均分为假烧伤组(生理盐水)、模型组(生理盐水)、地塞米松5mg/kg组和芹菜素12.5、25、50 mg/kg组。除假手术组外,其余各组大鼠均采用106℃、0.03 MPa压力持续5s的方法制备深II度烧伤大鼠模型。给药治疗14d后,检测各组大鼠肺功能指标,计算肺指数,HE染色法行肺组织病理学检查并行损伤评分,TUNEL法观察肺细胞凋亡,透射电子显微镜观察肺细胞超微结构改变;生化分析法检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和MDA含量,ELISA法检测炎症细胞因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6]含量。结果 与模型组比较,地塞米松5mg/kg组和芹菜素25、50 mg/kg组大鼠呼吸频率降低[(100.13±5.69)次/min、(108.72±6.81)次/min、(98.27±5.58)次/min比(116.04±7.25)次/min,P<0.05或P<0.01]、肺泡通透指数降低[(2.74±0.42)、(2.88±0.46)、(2.19±0.37)比(3.92±0.57),P<0.01]、氧分压(PaO₂)升高[(6.71±1.30) KPa、(6.59±1.34)KPa、(8.24±1.76)KPa比(4.05±0.86)KPa,P<0.01]、肺指数降低[(5.16±0.65)、(5.18±0.71)、(4.53±0.68)比(5.93±0.85),P<0.05或P<0.01];肺组织形态结构病变、细胞凋亡状况和肺细胞超微结构病变均明显改善,损伤评分降低[(7.76±0.91)分、(7.15±1.12)分、(4.89±0.75)分比(10.73±1.74)分,P<0.01]和凋亡指数(AI)降低[(36.90±6.45)%、(34.19±6.28)%、(22.14±4.67)%比(51.27±8.03)%,P<0.01];SOD活性升高[(58.47±8.70)U/mg、(62.98±9.04)U/mg、(69.13±9.37)U/mg比(48.19±8.24)U/mg,P<0.05或P<0.01]且MDA含量降低[(4.56±0.92)nmol/mg、(4.29±0.82)nmol/mg、(3.02±0.71) nmol/mg比(5.64±1.10) nmol/mg,P<0.05或P<0.01]、TNF-α含量降低[(84.82±11.03)pg/mL、(94.17±12.68)pg/mL、(63.84±9.01)pg/mL比(126.75±15.41) pg/mL,P<0.01]、IL-1β含量降低[(0.69±0.16)pg/mL、(0.98±0.17)pg/mL、(0.57±0.13)pg/mL比(1.40±0.29)pg/mL,P<0.01]、IL-6含量降低[(104.17±13.99)pg/mL、(135.93±15.02)pg/mL、(97.85±12.16)pg/mL比(183.82±18.15) pg/mL,P<0.01];芹菜素25、50 mg/kg组MPO活性升高[(1.29±0.37)U/g、(1.40±0.39)U/g比(0.99±0.24)U/g,P<0.05]、CAT活性升高[(24.05±5.36)U/mg、(26.24±5.48)U/mg比(17.92±4.33)U/mg,P<0.05或P<0.01]。与地塞米松5mg/kg组比较,芹菜素50 mg/kg组肺泡通透指数降低[(2.19±0.37)比(2.74±0.42),P<0.01]、PaO2升高[(8.24±1.76)KPa比(6.71±1.30) KPa,P<0.05]、肺指数降低[(4.53±0.68)比(5.16±0.65),P<0.05],肺组织损伤评分降低[(4.89±0.75)分比(7.76±0.91)分,P<0.01]、AI降低[(22.14±4.67)%比(36.90±6.45)%,P<0.01],MPO活性升高[(1.40±0.39)U/g比(1.07±0.28)U/g,P<0.05]、SOD活性升高[(69.13±9.37)U/mg比(58.47±8.70)U/mg,P<0.05],MDA含量降低[(3.02±0.71) nmol/mg比(4.56±0.92)nmol/mg,P<0.01]、TNF-α含量降低[(63.84±9.01)pg/mL比(84.82±11.03)pg/mL,P<0.01]。结论 芹菜素对深II度烧伤大鼠急性肺损伤具有保护作用,可能与抑制氧化应激和炎症反应有关。     

抑制高迁移率组蛋白1对大鼠急性脊髓损伤后炎性反应的影响

目的探讨抑制高迁移率组蛋白1(HMGB1)对大鼠急性脊髓损伤(ASCI)炎性反应的影响。方法选择健康雄性Wister大鼠32只,随机分为正常组、假手术组、模型组、甘草酸(Gly)组,每组8只。正常组大鼠不予任何刺激,假手术组大鼠只咬除T10椎板,不损伤脊髓,模型组和甘草酸组大鼠采用改良Allen’s法制备T10不完全性急性脊髓损伤模型,甘草酸组给予200mg/kg甘草酸灌胃处理,每天1次,连用3天。术后3天取各组大鼠T10段脊髓,应用ELISA法检测脊髓组织HMGB1、核转录因子κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)水平,qRT-PCR法检测脊髓组织HMGB1、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA表达量。结果ELISA结果显示,脊髓损伤后,模型组大鼠脊髓组织HMGB1、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1β水平较正常组明显升高[(3139.33±68.89)pg/mL比(1977.42±19.08)pg/mL、(2420.16±30.45)pg/mL比(1390.88±15.32)pg/mL;(244.61±5.49)pg/mL比(103.35±2.20)pg/mL、(271.91±3.24)pg/mL比(138.90±3.34)pg/mL、(109.89±3.33)pg/mL比(47.44±1.94)pg/mL,P均<0.01];甘草酸组大鼠脊髓组织HMGB1、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1β水平较模型组明显降低[(2566.91±23.75)pg/mL比(3139.33±68.89)pg/mL、(1728.55±24.27)pg/mL比(2420.16±30.45)pg/mL、(177.50±4.86)pg/mL比(244.61±5.49)pg/mL、(190.77±1.95)pg/mL比(271.91±3.24)pg/mL、(66.38±3.62)pg/mL比(109.89±3.33)pg/mL,P均<0.01]。RT-qPCR结果表明,模型组大鼠脊髓组织HMGB1、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA水平较正常组明显升高[(1.25±0.08)比(0.57±0.02)、(1.66±0.04)比(0.76±0.02)、(1.26±0.06)比(0.53±0.03)、(1.73±0.08)比(0.94±0.07)、(1.82±0.07)比(1.01±0.06),P均<0.01];甘草酸组大鼠脊髓组织HMGB1、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA水平较模型组明显降低[(0.79±0.03)比(1.25±0.08)、(1.14±0.04)比(1.66±0.04)、(0.75±0.03)比(1.26±0.06)、(1.37±0.04)比(1.73±0.08)、(1.31±0.04)比(1.82±0.07),P均<0.01]。结论 HMGB1至少部分参与介导ASCI炎性反应,并与HMGB1依赖的NF-κB信号通路密切相关,甘草酸可能通过抑制HMGB1/NF-κB通路减轻大鼠急性脊髓损伤后的炎性反应。     

脂多糖结合蛋白抑制肽对脂多糖与内毒素血症小鼠肺泡巨噬细胞结合的影响

目的 研究脂多糖结合蛋白(LBP)抑制肽P12对脂多糖(LPS)与小鼠肺泡巨噬细胞(AMs)结合的抑制作用,探讨LBP抑制肽体内阻断内毒素信号传导通路的机制.方法 40只小鼠随机分为5组:对照组、内毒素血症组、低剂量P12组、中剂量P12组和高剂量P12组,每组8只.腹腔内注射LPS复制内毒素血症模型,尾静脉注射P12,流式细胞检测分析(FACS)异硫氰酸荧光素标记的LPS(FITC-LPS)与AMs的结合,以平均荧光强度(MFI)表示;ELISA法检测小鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量.结果 内毒素血症组小鼠AMs MFI明显高于对照组(45.31%比4.61%,P＜0.05);低剂量P12组、中剂量P12组和高剂量P12组的MFI分别为40.08%、30.76%和24.45%,低于内毒素血症组(低剂量组P＞0.05,中剂量P12组和高剂量组P均＜0.05).内毒素血症组小鼠血清中TNF-α的含量显著高于对照组[(180.17±39.14)pg/mL比(24.88±5.82)pg/mL,P＜0.01];低剂量P12组、中剂量P12组和高剂量P12组血清中TNF-α的含量分别为(112.69±19.78)pg/mL、(86.34±9.25)pg/mL和(70.48±8.48)pg/mL,均明显低于内毒素血症组(P均＜0.05).结论 LBP抑制肽P12抑制了LPS与内毒素血症小鼠AMs的结合,显著降低了LPS诱导的TNF-α的产生.