抗肝癌合剂对人肝癌细胞凋亡及间隙连接通讯功能的影响

目的探讨抗肝癌合剂(IPAH)对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞凋亡和间隙连接通讯功能的影响。方法制备抗肝癌合剂含药血清,分为高、中、低剂量组,另设阴性对照组和空白血清对照组。培养人肝癌细胞株SMMC-7721进行体外实验,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,荧光漂白恢复实验(FRAP)观察对细胞间隙连接通讯功能的影响。结果抗肝癌合剂中剂量组24、48、72h细胞凋亡率分别为(8.07±1.12)%、(12.04±2.12)%、(17.90±1.74)%;高剂量组24、48、72h细胞凋亡率分别为(11.54±2.23)%、(18.29±2.39)%、(22.90±2.43)%,与阴性对照组[(2.42±1.15)%、(2.98±0.92)%、(3.35±0.67)%]及空白对照组[(3.01±1.07)%、(3.88±0.97)%、(4.09±1.23)%]比较,差异有统计学意义(P均0.01)。抗肝癌合剂低、中、高剂量组荧光恢复率分别为(22.43±2.62)%、(42.73±4.36)%、(49.40±5.13)%,随着时间和剂量增加,荧光恢复率明显增加,组间差异有统计学意义(P均0.01)。结论抗肝癌合剂具有诱导肝癌细胞系SMMC-7721细胞凋亡的作用,呈一定的剂量和时间依赖关系。其作用可能与上调细胞间隙连接通讯功能相关。     

桔梗皂苷D对肝癌干细胞活力和细胞凋亡的干预作用及其机制研究

目的探讨桔梗皂苷D对肝癌干细胞活力和细胞凋亡的干预作用及其机制。方法 MTT法和Annexin V染色流式细胞术检测桔梗皂苷D和5-氟尿嘧啶对Hep G2肝癌干细胞细胞活力和细胞凋亡的影响;采用Western blot检测Hep G2肿瘤干细胞HAX1表达;运用JC-1染色流式细胞术、Annexin V染色流式细胞术及Western blot方法研究桔梗皂苷D联合5-氟尿嘧啶对肝癌干细胞凋亡通路的影响。结果 5μmol/L 5-氟尿嘧啶处理下Hep G2肿瘤干细胞活力抑制率为(29.1±2.4)%,显著低于常规Hep G2细胞活力抑制率(72.7±5.2)%(P0.05)。5-氟尿嘧啶联合桔梗皂苷D对Hep G2肿瘤干细胞的细胞活力抑制率为(66.7±3.4)%,凋亡诱导率为(33.9±2.1)%,显著高于5-氟尿嘧啶单独处理的细胞活力抑制率[(28.7±1.8)%,P0.05]和凋亡诱导率[(8.9±0.6)%,P0.05]。桔梗皂苷D处理后Hep G2肿瘤干细胞HAX1相对表达水平比对照组显著下降[(0.24±0.02)比(0.78±0.05),P0.05];5-氟尿嘧啶+桔梗皂苷D+HAX1质粒组Hep G2肿瘤干细胞凋亡率显著低于5-氟尿嘧啶+桔梗皂苷D组[(10.1±0.7)%比(34.8±2.2)%,P0.05];5-氟尿嘧啶+桔梗皂苷D组Hep G2肿瘤干细胞相对线粒体膜电位显著低于5-氟尿嘧啶组[(0.21±0.02)比(0.84±0.04),P0.05]。结论桔梗皂苷D可能通过下调HAX1表达抑制肝癌干细胞对5-氟尿嘧啶的抵抗性。     

肿节风与氟尿嘧啶联合应用的抗肿瘤作用

目的:研究肿节风注射液与氟尿嘧啶(5-Fu)联合应用对小鼠移植性肝癌H22实体瘤生长的抑制作用。方法:建立小鼠H22实体瘤模型。小鼠60只,随机分为6组:正常对照组、肿节风注射液小剂量组(1.5g/kg,ip)、大剂量组(3g/kg,ip)、5-Fu组联合用药组。小鼠接种24h后开始给药,每天1次,连续10d。观察各组小鼠移植瘤生长情况及体重变化。并考察给药后胸腺、脾脏指数、外周血象的变化。结果:肿节风注射液小剂量组抑瘤率为26.84%,肿节风注射液大剂量组抑瘤率为44.74%,5-Fu组抑瘤率30.77%,联合用药组抑瘤率分别为58.39%与65.16%,与正常对照组比较,均有显著性差异(P<0.01);联合用药组抑瘤率高于单用肿节风注射液组和5-Fu组(P<0.01)。且联合用药对胸腺、脾脏指数、外周血象无明显影响。结论:肿节风注射液和5-Fu联用对小鼠移植性肝癌H22实体瘤有协同抗肿瘤作用,并能减轻5-Fu的毒副作用。     

半枝莲提取物对H22荷瘤小鼠免疫功能的影响及其抑瘤作用

目的 探讨中药半枝莲提取物(ESB)的抗肝癌作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响.方法 将接种H22肝癌细胞的小鼠分为模型组、ESB高、中、低剂量组(12、6、3 g/kg)、5-氟尿嘧啶组(5-Fu组),另设正常对照组,连续给药10d.观察小鼠瘤重、体质量、胸腺指数和脾指数;并检测各组淋巴细胞增殖活性、NK细胞活性及脾细胞IL-2分泌量.结果 ESB中、高剂量可明显抑制荷瘤小鼠移植瘤的生长,抑瘤率分别为28.68%、36.98%.而且能明显增加小鼠胸腺指数和脾指数(P<0.01),而5-Fu组胸腺指数和脾指数明显降低.模型组荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖活性、NK细胞活性及分泌IL-2能力均明显低于正常对照组(P<0.05).与模型组比较,5-Fu组荷瘤小鼠的NK细胞活性和脾细胞IL-2分泌量进一步降低(P<0.05).而ESB高剂量组三者均得到明显改善.ESB中剂量治疗使荷瘤小鼠的NK细胞活性增强,与模型组比较差异显著(P<0.05).结论 ESB可明显抑制H22移植瘤的生长,改善荷瘤小鼠的免疫功能.     

魔芋葡甘露聚糖对Lewis肺癌小鼠细胞免疫功能的影响

目的观察中药蛇六谷主要成分魔芋葡甘露聚糖(KGM)对肺癌小鼠免疫功能的影响。方法建立小鼠Lewis肺癌模型后,随机分成KGM高、中、低剂量组及对照组、环磷酰胺(CTX)组。建模第2天起,KGM高、中、低剂量按300、200、100mg/(kg·d)连续灌胃13天,对照组以等剂量生理盐水灌胃13天,环磷酰胺组予环磷酰胺30mg/kg每周2次腹腔注射给药,共4次。第14天处死小鼠,取瘤体、脾脏称重并计算抑瘤率和脾脏指数,MTS法检测脾脏中T淋巴细胞增殖活力,ELISA法检测脾细胞IL-2的表达。结果 (1)与对照组比较,CTX组、KGM中、高剂量组瘤重降低明显,差异有统计学意义[(0.69±0.50)g、(1.71±0.95)g、(1.54±0.83)g比(2.51±1.11)g,P0.05];KGM低、中、高剂量组瘤重高于CTX组,差异有统计学意义[(2.15±0.88)g、(1.71±0.95)g、(1.54±0.83)g比(0.69±0.50)g,P0.05]。(2)与对照组比较,CTX组脾脏指数降低[(2.73±1.19)mg/g比(4.61±0.69)mg/g,P0.01],KGM各剂量组脾脏指数升高,其中KGM中、高剂量组差异有统计学意义[(5.93±0.88)mg/g、(6.02±1.47)mg/g比(4.61±0.69)mg/g,P0.05]。(3)与对照组比较,CTX组T淋巴细胞增殖反应能力下降[(0.4055±0.2295)比(0.6125±0.0719),P0.05],KGM各剂量组增强,其中KGM高剂量组最强[(0.8198±0.0251)比(0.6125±0.0719),P0.05];与CTX组比较,KGM各剂量组的T淋巴细胞增殖反应能力均增强[(0.6338±0.1027)、(0.70±0.0966)、(0.8198±0.0251)比(0.4055±0.2295),P0.05]。(4)与对照组比较,CTX组IL-2下降[(434.43±44.64)pg/m L比(552.98±27.99)pg/m L,P0.05],KGM各剂量组上升[(664.69±30.46)pg/m L、(830.83±71.42)pg/m L、(1058.47±70.58)pg/m L比(552.98±27.99)pg/m L,P0.05],且KGM各剂量组两两比较,差异有统计学意义(P0.01)。结论 KGM通过提高Lewis肺癌小鼠脾脏T淋巴细胞增殖,上调脾细胞IL-2表达,提高其免疫功能,从而发挥抗肿瘤作用。     

复方黄芪养心合剂对大鼠缺血心肌缝隙连接蛋白CX43磷酸化的影响

目的观察复方黄芪养心合剂(CAMNH)对冠状动脉左前降支结扎所致心肌缺血模型大鼠缝隙连接蛋白CX43的影响。方法 50只SD大鼠采用随机数字表法分为CAMNH大剂量组28g(14mL·kg~(-1)·d~(-1))、CAMNH小剂量组7g(3.5mL·kg~(-1)·d~(-1))、琥珀酸美托洛尔(MSSRT)组9.5ug(7mL·kg~(-1)·d~(-1))、模型组、假手术组五组,每组10只,给予相应药物灌胃后采用冠状动脉左前降支结扎术造模,结扎1h后腹主动脉取血,HE染色观察心肌细胞形态改变;采用ELISA法检测心肌肌钙蛋白I(cTn-I)和肌钙蛋白T(cTn-T)水平;采用Western blot(WB)法检测磷酸化的缝隙连接蛋白CX43表达。结果 cTn-I、cTn-T:与假手术组相比,模型组、MSSRT组、CAMNH小剂量组、CAMNH大剂量组均升高[cTn-I:(144.94±28.83)ng/L、(85.48±24.06)ng/L、(115.07±21.34)ng/L、(81.63±16.89)ng/L比(58.50±9.53)ng/L;cTn-T:(144.33±20.29)ng/L、(97.89±11.78)ng/L、(121.33±15.02)ng/L、(100.20±5.66)ng/L比(77.40±12.52)ng/L,P0.05或P0.01];MSSRT组与模型组比较升高幅度明显减少(P0.01);CAMNH大剂量组与假手术组比明显增高,与CAMNH小剂量组、模型组比增高程度减少(P0.05或P0.01)。WB结果:与假手术组相比,模型组、MSSRT组、CAMNH小剂量组、CAMNH大剂量组CX43表达减少[(0.07±0.01)、(0.13±0.01)、(0.10±0.02)、(0.13±0.02)比(0.18±0.02),P0.01];MSSRT组与模型组比较明显增多[(0.13±0.01)比(0.07±0.01),P0.01];CAMNH小剂量组与模型组比较略升高[(0.10±0.02)比(0.07±0.01),P0.01],与假手术组、MSSRT组相比明显减少[(0.10±0.02)比(0.18±0.02)、(0.13±0.01),P0.05];CAMNH大剂量组与假手术组比明显减少[(0.13±0.02)比(0.18±0.02),P0.01],与CAMNH小剂量组、模型组比增高程度减少[(0.13±0.02)比(0.10±0.02)、(0.07±0.01),P0.05]。结论复方黄芪养心合剂能降低冠状动脉左前降支结扎所引起的心肌缺血损伤,作用与琥珀酸美托洛尔缓释片相当。     

人参皂甙Rg3联合三氧化二砷对人肝癌细胞增殖性的影响

目的探讨人参皂甙Rg3联合三氧化二砷对肝癌裸鼠移植瘤模型的治疗作用,观察其对移植瘤肝癌细胞增殖性的影响。方法采用人肝癌细胞株Bel-7402细胞,种植于32只雄性裸鼠皮下,随机分成联合用药组、Rg3组(5mg/kg、10mg/kg、20mg/kg)、三氧化二砷组及对照组。实验自肿瘤接种第3天开始,人参皂甙Rg3(3个剂量),隔日灌胃,共20次;三氧化二砷40μg.kg-1.d-1,每日腹腔内注射,连续28d;对照组为生理盐水。停药1周后,脱颈处死,完整取出瘤块,检测肿瘤的重量,计算抑瘤率。采用免疫组织化学法检测增殖细胞核抗原(PCNA)在裸鼠肝癌移植瘤组织中的表达情况。结果三氧化二砷组抑瘤率(55.25%)高于Rg3组(5mg/kg亚组为32.24%、10mg/kg亚组为45.10%,20mg/kg亚组为50.00%),但随着Rg3浓度的升高,二者之间的差异明显减小;联合用药组中,5mg/kg亚组平均瘤重(0.58±0.15)g,抑瘤率61.84%;10mg/kg亚组平均瘤重(0.54±0.11)g,抑瘤率64.47%;20mg/kg亚组平均瘤重(0.49±0.12)g,抑瘤率67.76%,其抑瘤作用高于三氧化二砷组,差异有统计学意义(P<0.05)。三氧化二砷组抑制肝癌细胞增殖作用(PI值:38.3±5.3)强于Rg3组(PI值:5mg/kg亚组58.1±2.4;10mg/kg亚组51.8±5.3;20mg/kg亚组41.9±6.5),联合用药组(PI值:5mg/kg亚组38.6±8.4;10mg/kg亚组30.9±3.2;20mg/kg亚组23.3±3.3)作用最强(P<0.05),可以明显抑制移植瘤肝癌细胞增殖性。结论三氧化二砷对裸鼠肝癌移植瘤生长的抑制作用可能是通过抑制PCNA蛋白的表达。人参皂甙Rg3与三氧化二砷联合用药对移植瘤肝癌细胞增殖性的抑制有协同作用。     

海藻玉壶汤对Hep3B肝癌裸鼠肝功能及CyclinD1、Bax蛋白表达的影响

目的:观察海藻玉壶汤对人肝癌移植瘤裸鼠的抗癌作用,以及对肝功能指标血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartic transaminase,AST)和细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、细胞凋亡调控基Bax蛋白表达的影响。方法:30只BALB/c裸鼠皮下接种Hep3B细胞,建立肝癌异位移植瘤模型,分为模型组(9 g·L~(-1)氯化钠溶液灌胃),阳性对照组(盐酸多柔比星腹腔注射),海藻玉壶汤高剂量组、中剂量组、低剂量组(海藻玉壶汤灌胃)。治疗21 d后,称量小鼠体质量,取肿瘤组织测瘤质量、常规HE染色;免疫组织化学检测肿瘤组织CyclinD1、Bax;生化分析仪检测血清ALT、AST。结果:各组小鼠体质量比较,差异无统计学意义(P0.05)。海藻玉壶汤高剂量组、中剂量组、低剂量组与模型组比较,移植瘤瘤质量较低,差异具有统计学意义(P0.05)。HE染色观察肿瘤组织病理学可见治疗组不同程度肿瘤细胞灶性坏死,胞核固缩深染。免疫组织化学可见海藻玉壶汤各组CyclinD1蛋白阳性表达下降(P0.05),Bax蛋白阳性表达增强(P0.05)。结论:海藻玉壶汤可剂量依赖性地抑制裸鼠Hep3B移植瘤生长,一定程度上保护肝功能,并通过影响细胞周期和凋亡发挥抗肿瘤作用。     

复原抗癌汤对H22原发性肝癌小鼠Survivin蛋白表达的影响

目的 复原抗癌汤对H22原发性肝癌小鼠Survivin蛋白表达的意义.方法 建立H22原发性肝癌小鼠模型,随机分为空白对照组、荷瘤对照组、化疗组、中药低、中、高剂量(4.48、8.96、17.92g/kg·d)组进行治疗,检测各组肿瘤的生长情况;RT-PCR和免疫组化法检测肿瘤组织Survivin蛋白的表达;结果与荷瘤对照组比较,复原抗癌汤各剂量以及顺铂对原发性肝癌均有抑制作用,抑瘤率分别为53.12%、32.87%、37.51%、39.82%(P均＜0.05);RT-PCR和免疫组化见中药高剂量治疗组与中药低剂量治疗组比较其Survivin蛋白表达强阳性率明显低于后者,且差异显著(P＜0.05);但与中药中剂量治疗组比较,Survivin蛋白表达强阳性率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 复原抗癌汤抑制原发性肝癌小鼠瘤体生长、抑制Survivin蛋白表达,最终抑制肝癌细胞的血性转移.     

石菖蒲超临界萃取物对抑郁模型大鼠行为学的影响

目的探讨石菖蒲超临界萃取物对抑郁模型大鼠行为学的影响。方法 80只造模成功大鼠根据实验处理方法不同分为模型组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组20只,分别按0. 05 g/100 g、0. 10 g/100 g和0. 15 g/100 g的剂量对抑郁型大鼠进行药液灌胃治疗,以20只正常大鼠为空白组,对各组糖水偏爱度、强迫游泳不动时间和旷场运动得分进行观察和评分。结果实验第1天,模型组和低、中、高剂量组大鼠糖水偏爱度显著低于空白组[(55. 1±3. 6)%、(54. 7±2. 5)%、(55. 8±3. 4)%、(54. 9±2. 8)%比(80. 1±2. 6)%](P <0. 05),在实验第28天,低、中、高剂量组抑郁大鼠糖水偏爱度高于模型组[(62. 0±4. 5)%、(72. 5±4. 9)%、(77. 8±3. 8)%比(54. 8±3. 2)%](P <0. 05),中剂量组高于低剂量组(P <0. 05)。实验第28天,低、中、高剂量组游泳不动时间少于模型组[(112. 0±5. 4) s、(91. 8±3. 6) s、(78. 4±4. 9) s比(142. 2±4. 8) s](P <0. 05),且低、中、高剂量组逐渐降低;低、中、高剂量组水平和垂直得分均高于模型组(P <0. 05)。结论石菖蒲超临界萃取物可以有效改善抑郁型大鼠的行为学的病征。     

叶下珠复方Ⅱ号对小鼠H22肝癌移植瘤生长的抑制作用

目的观察叶下珠复方Ⅱ号对小鼠H22肝癌移植瘤生长的抑制作用,并探讨其可能的作用机制。方法取昆明小鼠40只,建立小鼠H22肝癌移植瘤模型,分为模型组、叶下珠复方Ⅱ号高剂量组（37.5g/kg）、低剂量组（18.75g/kg）和环磷酰胺（20mg/kg）治疗组。叶下珠复方Ⅱ号高、低剂量组均灌胃给药,环磷酰胺组采用腹腔注射,每日1次,连续8d。末次给药24h后,测定瘤体质量,计算抑瘤率;检测血清IL-2和TNF-а含量。结果叶下珠复方Ⅱ号高、低剂量组瘤重明显低于模型组,差异均有显著性意义（P〈0.01）,但与环磷酰胺组比较,差异均无显著性意义（P〉0.05）。叶下珠复方Ⅱ号高、低剂量组的抑瘤率分别为67%和58%,与环磷酰胺组接近。叶下珠复方Ⅱ号高剂量组血清IL-2水平明显高于模型组（P〈0.05）。叶下珠复方Ⅱ号高、低剂量组血清TNF-а水平明显低于模型组,差异有显著性意义（P〈0.05）。结论叶下珠复方Ⅱ号有较好的抑制小鼠H22肝癌移植瘤生长作用,作用机制与调节免疫,升高IL-2水平和抑制TNF-а水平有关。     

塞来西布通过骨形态发生蛋白/Smad信号通路对胫骨骨折大鼠骨折愈合影响的实验研究

目的 探讨塞来昔布通过骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins,BMP)/Smad信号通路对胫骨骨折大鼠疼痛评分和骨折愈合的影响.方法 将48只SD大鼠分为对照组、模型组、塞来昔布低剂量组和塞来昔布高剂量组,每组12只.模型组、塞来昔布低剂量和塞来昔布高剂量组建立胫骨骨折模型.塞来昔布低剂量和塞来昔布高剂量组的灌胃剂量分别为4 mg/(kg·d)和8mg/(kg·d),连续4周.采用von Frey纤维细丝实验测量机械性痛阈.应用Micro-CT评估骨折愈合情况.采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清疼痛介质和炎症细胞因子.采用定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)和Western blot检测骨痂中BMP/Smad信号通路水平.结果 建模前4组大鼠痛阈比较,差异无统计学意义(P＞0.05).干预后,模型组痛阈显著低于对照组[(5.14±1.32)g比(13.05±0.76)g],差异有统计学意义(P＜0.05),塞来昔布低剂量组[(9.28±1.45)g]和塞来昔布高剂量组[(11.35±1.21)g]痛阈显著高于模型组,塞来昔布高剂量组显著高于低剂量组,差异均有统计学意义(P＜0.05).模型组IL-6[(16.77±2.86)pg/ml]和TNF-α[(22.73±1.57)pg/ml]水平显著高于对照组,塞来昔布低剂量组的IL-6[(10.54±1.24)pg/ml]和TNF-α[(13.87±1.28)pg/ml]水平显著低于模型组,塞来昔布高剂量组的IL-6[(7.74±1.05)pg/ml]和TNF-α[(10.13±1.17)pg/ml]水平显著低于塞来昔布低剂量组,差异均有统计学意义(P＜0.05).模型组5-羟色胺[(431.26±45.89)pg/ml]和P物质[(18.81±2.05)ng/ml]水平显著高于对照组,塞来昔布低剂量组的5-羟色胺[(334.75±34.56)pg/ml]和P物质[(13.97±1.54)ng/ml]水平显著低于模型组,塞来昔布高剂量组的5-羟色胺[(285.29±30.75)pg/ml]和P物质[(10.32±1.10)ng/ml]水平显著低于塞来昔布低剂量组,差异均有统计学意义(P＜0.05).塞来昔布低剂量组和模型组的骨痂体积显著高于塞来昔布高剂量组[(69.47±6.92)mm3、(55.42±5.81)mm3、(44.15±5.46)mm3],且模型组骨痂体积高于塞来昔布高剂量组,差异均有统计学意义(P＜0.05).模型组和塞来昔布低剂量组的BMP2 mRNA和Smad4 mRNA水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05),但均显著高于对照组和塞来昔布高剂量组(P＜0.05),塞来昔布高剂量组BMP2蛋白和Smad4蛋白水平显著低于模型组和塞来昔布低剂量组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 塞来昔布能有效抑制胫骨骨折大鼠的炎症反应和疼痛,但高剂量塞来昔布也可能通过抑制BMP/Smad通路抑制骨痂的形成,影响骨折的愈合.     

加味黄风汤对糖尿病肾病模型大鼠肾组织8-OHdG表达的影响

目的观察加味黄风汤对糖尿病肾病模型大鼠肾脏8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)表达水平的影响。方法 40只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为空白对照组、模型组、加味黄风汤低、高剂量组,各10只,除空白对照组外其余组大鼠均经腹腔注射链脲佐菌素(STZ)造模,8周后检测24h尿微量白蛋白,检测血清肌酐及血糖水平,肾组织病理切片光镜及电镜检查,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠肾组织8-OHdG表达水平,化学发光法(Luminescence)检测大鼠肾组织腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)水平。结果模型组大鼠24h尿微量白蛋白较空白对照组增加[(1702.06±659.75)μg比(503.03±320.16)μg,P0.05],肾脏病理可见肾小球肥大,系膜基质增生,基底膜增厚及足细胞足突融合,模型组大鼠肾组织8-OHdG表达水平较空白对照组增加[(795.23±185.73)ng/mL比(600.79±159.54)ng/mL,P0.05)],肾组织ATP水平较空白对照组下降[(0.27±0.17)pmol/mg比(0.72±0.14)pmol/mg,P0.05)]。治疗8周后加味黄风汤低、高剂量组糖尿病肾病模型大鼠24h尿微量白蛋白水平明显下降[(783.34±326.11)μg比(1567.46±621.97)μg,(610.99±325.54)μg比(1610.34±695.64)μg,P0.05];血糖水平明显下降[(24.31±1.90)mmol/L比(29.19±1.88)mmol/L,(23.97±2.73)mmol/L比(30.56±1.88)mmol/L,P0.05];光镜下肾小球肥大、系膜基质增生减轻;电镜下足细胞足突融合、基底膜增厚情况都有所改善。加味黄风汤低、高剂量组较模型组肾组织8-OHdG表达水平均有所下降[(695.49±159.76)ng/mL、(610.61±71.43)ng/mL比(795.23±185.73)ng/mL,P0.05]。高剂量组肾组织8-OHdG表达水平低于低剂量组,但二者差异无统计学意义[(610.61±71.43)ng/mL比(695.49±159.76)ng/mL,P0.05]。加味黄风汤低、高剂量组较模型组肾组织ATP表达水平均有所上升[(0.39±0.15)pmol/mg、(0.52±0.14)pmol/mg比(0.27±0.17)pmol/mg,P0.05]。高剂量组ATP表达水平高于低剂量组,但二者差异无统计学意义[(0.52±0.14)pmol/mg比(0.39±0.15)pmol/mg,P0.05]。结论糖尿病肾病模型大鼠肾组织8-OHdG表达明显上升,ATP表达水平下降,出现蛋白尿,足细胞损伤。加味黄风汤可下调糖尿病肾病模型大鼠肾组织8-OHdG表达水平,提高肾组织ATP水平,减轻蛋白尿水平,改善血糖,保护肾功能。     

β-咔啉类衍生物对BALB/c裸小鼠肝癌皮下移植瘤生长的影响

目的 观察β-咔啉类衍生物(HMD)对人肝癌裸小鼠皮下移植瘤生长的影响.方法 雄性BALB/c裸小鼠每只以2×107个活细胞/ml(0.2 ml)建立人肝癌的裸小鼠模型,随机分为HMD低剂量组(0.22 mg/kg); HMD中剂量组(0.44 mg/kg); HMD高剂量组(0.87 mg/kg);5-氟尿嘧啶注射液组(5-Fu)和生理盐水对照组.各组连续给药15d.观察HMD对裸小鼠人肝癌移植瘤生长的影响及对裸小鼠主要脏器的毒性.结果 HMD低、中、高剂量组及阳性组对裸小鼠人肝癌移植瘤体重的影响与阴性对照组比较均有极显著性差异(P＜0.01).HMD中、高剂量组及阳性组对裸小鼠体质量增加影响与阴性对照组比较有极显著性差异(P＜0.01).对肝脏重量及肝脏系数的影响,HMD低、中、高剂量组及阳性组与阴性对照组比较有显著性差异(P＜0.05),肾脏及肾脏系数各组间差异不显著(P＞0.05).结论 HMD对人肝癌HepG2裸小鼠皮下移植瘤生长有明显的抑制作用,未见有异常毒性症状出现.     

5-氟尿嘧啶气雾对人胃癌细胞MKN-45增殖、凋亡及周期的影响

目的通过体外模拟5-氟尿嘧啶(5-Fu)腹腔气雾化疗环境,评价5-Fu雾化对人胃癌细胞MKN-45增殖、凋亡及周期的影响。方法运用自主研发的气雾化疗仪将5-Fu雾化,体外模拟腹腔气雾化疗环境,对胃癌细胞进行处理,维持气雾环境压力为8mmHg,作用时间为30min,并设生理盐水雾化作为对照,处理后用MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。结果 MTT结果显示,5-Fu气雾化疗组杀伤率显著高于生理盐水组[(31.13±3.51)%比(4.65±1.99)%,P<0.001];流式细胞结果显示,与生理盐水组相比,5-Fu气雾化疗组细胞凋亡率升高[(12.00±0.92)%比(2.65±0.52)%,P<0.001)],G1期细胞增多[(51.83±1.95)%比(36.41±2.33)%,P<0.001]、S期细胞减少[(16.72±2.36)%比(45.20±3.27)%,P<0.001],差异均有统计学意义。结论 5-Fu气雾能有效抑制胃癌细胞的增殖并诱导凋亡,使细胞阻滞于G1期,为气雾化疗的临床应用提供实验依据。     

三奇注射液对小鼠H_(22)肝癌移植瘤突变型P53和增殖细胞核抗原表达的影响

目的通过研究三奇注射液(SQ)对荷H22肝癌ICR小鼠的突变型P53和增殖细胞核抗原(PCNA)基因表达水平的影响,探讨其抗肿瘤的可能机制。方法参考动物移植性肿瘤模型造模法,配制H22肝癌细胞液,接种于50只ICR小鼠的右腋部皮下,随机分为5组,即生理盐水组(NS 10 mg/kg),5-FU组(5-FU25 mg/kg),SQ高剂量组(SQH20 g/kg),SQ中剂量组(SQM10 g/kg),SQ低剂量组(SQL5 g/kg),次日起每天腹腔注射给药,第15天处死小鼠,按组别固定瘤块,免疫组化法检测突变型P53和PCNA基因表达水平。结果与生理盐水组比较,SQ高、中、低剂量组突变型P53和PCNA基因表达水平降低(P0.05)。结论 SQ可下调小鼠移植性H22肝癌突变型P53和PCNA表达水平。     

肝癌介入后根治性精准肝切除的临床应用

目的:探讨根治性精准肝切除在肝癌介入后病例中应用的优势。方法:回顾性分析我院2005年1月至2012年12月间,肝癌介入治疗后行肝癌切除病例68例,其中采用传统Pringle法肝门阻断的肝切除术30例,根治性精准肝切除38例,比较两组在手术时间、术中出血量、术后肝功能损害、术后并发症及住院时间方面的差别。结果:根治性精准肝切除组手术时间(314.5±51.2)min长于Pringle法肝切除组(221.4±33.8)min,P<0.05。但根治性精准肝切除组较Pringle法肝切除组,术中出血少[(375.4±76.8)vs(596.1±107.3)mL,P<0.05];术后肝功能损害轻,术后第3天,ALT:[(311.7±44.3)vs(575.6±67.3)]U/L;AST:[(172.3±35.7)vs(443.7±40.3)]U/L;TD:[(41.2±13.2)vs(50.9±19.7)]μmol/L,差别均P<0.05;术后并发症发生率低(2/38,5.26%)比(8/30,26.67%),P<0.05;住院时间短[(16.4±2.6)vs(22.7±5.1)]d,P<0.05。结论:根治性精准肝切除运用于肝癌介入后病例中,相对传统Pringle法肝门阻断肝切除术有着术中出血少、肝功能损害轻、并发症发生率低、住院时间短的优势。     

加味蒌石汤对肾阴虚型PCOS模型小鼠卵泡抑素及激活素的影响

目的观察加味蒌石汤对肾阴虚多囊卵巢综合征(PCOS)模型小鼠卵泡抑素及激活素的影响。方法 ICR小鼠54只随机分为空白组,模型组,中药高、中、低剂量组,达英-35组六组,每组9只。采用"硫酸脱氢表雄酮(DHEA)联合甲状腺素及利血平"法制备肾阴虚型多囊卵巢综合征小鼠模型。除空白组、模型组外,其余各组予相应的药物灌胃40天,观察小鼠一般情况、体质量,酶联免疫吸附法测定小鼠血清性激素[血清睾酮(T)、雌二醇(E2)、促卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)]、血清卵泡抑素(FS)、激活素(ACT)、环磷酸腺苷(cAMP)及环磷酸鸟苷(cGMP)。结果与空白组及各用药组比较,模型组小鼠出现不安定、多动、体毛稀疏、腹泻、消瘦等表现。实验前各组小鼠体质量差异无统计学意义(P0.05),实验后模型组小鼠体质量低于空白组[(25.96±0.88)g比(28.36±0.77)g,P0.05],中药高、中剂量组与达英-35组小鼠体质量均高于模型组和低剂量组[(28.25±0.55)g、(27.66±1.21)g、(28.08±0.50)g比(25.96±0.88)g、(26.71±0.74)g,P0.05];模型组血清T、LH、FS、cAMP/cGMP高于空白组[(146.30±4.04)nmol/L比(134.36±2.30)nmol/L,(1772.66±122.37)ng/L比(1409.02±47.88)ng/L,(45.07±5.63)ng/L比(34.59±2.52)ng/L,(1.85±0.37)比(1.28±0.15),P0.01],模型组ACT低于空白组[(6.12±0.63)ng/m L比(6.87±0.87)ng/m L,P0.05],中药高、中、低剂量组与达英-35组血清FS均低于模型组[(36.27±3.05)ng/L、(38.33±2.47)ng/L、(39.27±4.09)ng/L、(36.64±2.55)ng/L比(45.07±5.63)ng/L,P0.01],中药高、中、低剂量组与达英-35组ACT均高于模型组[(6.96±0.60)ng/m L、(6.90±0.81)ng/m L、(6.86±0.48)ng/m L、(7.14±0.73)ng/m L比(6.12±0.63)ng/m L,P0.01或P0.05],中药高、中、低剂量组与达英-35组cAMP/cGMP均低于模型组[(1.36±0.10)、(1.48±0.11)、(1.67±0.08)、(1.42±0.11)比(1.85±0.37),P0.01]。结论加味蒌石汤能有效调节肾阴虚PCOS模型小鼠性激素水平,改善肾阴虚状态,降低FS含量和cAMP/cGMP比值,提高ACT含量,促进卵泡发育。     

大剂量维生素C治疗大鼠移植性肝癌

目的 探讨静脉注射大剂量维生素C(VC)对大鼠移植性肝癌的肿瘤的保护作用及作用机制.方法 制备Walker-256移植性肝癌模型,静脉给予VC 2.83 g/kg、5.65 g/kg两种剂量,观察用药后移植性肝癌大鼠的一般状况、肝功能及肿瘤生长情况.结果 移植性肝癌成功率达94%,VC 2.83 g/kg组血清A/G高于模型组(P<0.05),ALT明显低于模型组(P<0.01),GGT亦低于模型组(P<0.05),VC 5.65 g/kg组血清ALT低于模型组(P<0.05),VC 2.83 g/kg组肝癌的坏死程度明显高于模型组.结论 静脉注射VC 2.83 g/kg可明显改善移植性肝癌大鼠的肝脏功能,并可以促进肿瘤细胞的坏死、凋亡,具有一定的抗肿瘤作用.     

越鞠丸对功能性消化不良模型大鼠血清MTL水平及胃窦黏膜NO表达的影响

目的观察越鞠丸对功能性消化不良(FD)模型大鼠胃肠动力、血清胃动素(MTL)水平及胃窦黏膜一氧化氮(NO)含量的影响。方法取48只健康雄性SD大鼠,随机分为空白组、模型组、莫沙必利组、越鞠丸低、中、高剂量(4.5g/kg、9g/kg、18g/kg)组,每组8只。各组大鼠分别予以对应药物连续治疗7天后,观察大鼠体质量、饮水量、进食量、胃内残留率与小肠推进率的改变;检测胃窦黏膜NO表达和血清MTL含量。结果与模型组比较,越鞠丸各剂量组均出现进食量、饮水量增加,莫沙必利组、越鞠丸中、高剂量组大鼠胃内残留率减少[(63.89±16.74)%、(56.79±20.52)%、(64.25±17.79)%比(81.18±6.78)%,P均0.05)];莫沙必利组、越鞠丸各组大鼠小肠推进率升高[(59.47±3.76)%、(52.28±2.75)%、(56.06±1.31)%、(59.74±3.02)%比(46.99±4.59)%,P均0.05)]。与模型组比较,莫沙必利组和越鞠丸中、高剂量组大鼠血清MTL升高[(202.64±27.64)pg/mL、(181.78±35.15)pg/mL、(214.92±40.01)pg/mL比(124.35±10.43)pg/mL,P均0.05];胃窦黏膜组织NO含量减少[(0.09±0.06)μmol/L、(0.11±0.01)μmol/L、(0.09±0.08)μmol/L比(0.17±0.03)μmol/L,P均0.05]。结论越鞠丸能加快大鼠胃肠动力,其作用机制可能与上调MTL水平、下调NO水平有关。