Hedgehog信号通路对胰腺癌细胞增殖的影响

目的 研究特异性阻断hedgehog信号通路对人胰腺癌Mia PaCa-2细胞增殖的影响.方法 用Western blot方法检测7种胰腺癌细胞系中hedgehog信号蛋白表达情况,筛选出hedgehog通路活化明显的Mia PaCa-2细胞系进行研究;应用特异性hedgehog通路阻断剂KAAD-cyclopamine阻断Mia PaCa-2细胞的hedgehog信号通路,Western blot方法检测Gli1蛋白表达变化;MTT法检测阻断hedgehog信号通路对胰腺癌细胞增殖的影响;RT-PCR方法检测胰岛素样生长因子2(IGF2)mRNA表达的变化.结果 KAAD-cyclopamine处理后hedgehog信号通路中关键效应蛋白Gli1表达水平明显下调(P=0.032);KAAD-cyclopamine明显抑制胰腺癌Mia PaCa-2细胞增殖,其作用呈剂量及时间依赖性;阻断hedgehog信号通路后,胰腺癌细胞中胰岛素样生长因子2(IGF2)mRNA表达水平下调(P=0.037).结论 Hedghog信号通路异常活化参与促进胰腺癌细胞增殖;特异性阻断hedgehog信号通路后胰腺癌细胞增殖明显受抑制,其部分机制可能通过下调IGF2表达水平实现.     

Hedgehog信号通路相关蛋白在人胰腺癌SW1990耐药株中的表达及意义

目的:探讨Hedgehog信号通路蛋白在人胰腺癌吉西他滨耐药细胞株SW1990中的表达,为克服胰腺癌获得性耐药提供实验基础。方法:采用浓度梯度递增法建立人胰腺癌SW1990耐药株,采用噻唑蓝法测定SW1990亲代与耐药细胞IC50。实时荧光定量PCR检测亲代与耐药细胞mRNA中hedgehog信号通路成员Shh、SMO、Gli-1的表达差异。Western印迹法检测亲代与耐药细胞中上述蛋白质的表达。结果:人胰腺癌耐药株SW1990的IC50从亲代的(3.1±0.2)μmol/L提高到(232.2±12.3)μmol/L。荧光定量PCR结果显示耐药株中Shh、Gli-1的表达提高了(12.07±1.71)倍和(4.15±0.42)倍。亲代SW1990中未检测到SMO表达,而耐药细胞中却可以检测到SMO的表达。Western印迹结果同样显示,人胰腺癌SW1990耐药细胞株中高表达上述蛋白质。结论:人胰腺癌耐药株中高表达部分hedgehog信号通路蛋白。针对hedgehog信号通路的靶向治疗可能为克服胰腺癌耐药提供新的理论基础。     

Rab23基因的siRNA干扰诱导肝癌Huh7细胞凋亡

目的 观察信号通路Sonic bedgehog(Shh)抑制因子Rab23的RNA干扰对人肝癌细胞株Huh7增殖和凋亡的影响.方法 实验细胞分为转染组、隐性对照组和空白对照组.设计针对Rab23基因的siRNA,通过Liperfectemin 2000将其转染进Huh7细胞株,噻唑蓝(MTT)比色法试验检测沉默Rab23基因后第0、8、16、24和48 h的细胞数和MTr的D(λ)值;流式细胞术检测沉默Rab23基因48 h细胞凋亡情况.结果 转染组与空白对照组比较,加入siRNA后,8 h时细胞增殖数无明显减少,16、24和48 h时细胞数明显减少(P＜0.01),24、48 h时细胞存活率差异有统计学意义.隐性对照组与空白对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);Huh7细胞经siRNA作用48 h后,可见亚二倍体核型峰-凋亡峰.其中,转染组凋亡率为28%,隐性对照组及空白对照组未见凋亡峰.结论 Rab23对肝细胞癌的增殖起维持作用;通过沉默该基因可以抑制肝癌细胞增殖,并促进细胞凋亡.     

NF-κB相关信号通路在胰腺癌发病中的作用

胰腺癌是外科恶性程度最高的肿瘤之一,随着分子生物学的发展,对胰腺癌的发病机制也有了很大的了解.胰腺癌细胞中存在着多种信号通路传导的异常,包括:Notch信号通路,k-ras信号通路,hedghog信号通路,NF-κB信号通路等,其中由于NF-κB信号的改变在胰腺癌细胞中普遍存在,故考虑NF-κB在胰腺癌各信号通路相互作用中有着重要地位,本文针对NF-κB在胰腺癌细胞中参与的相关信号通路进行综述.     

尿苷二磷酸-葡萄糖6-脱氢酶在胰腺癌组织中表达及其意义的生物信息学分析

背景与目的:尿苷二磷酸-葡萄糖6-脱氢酶(UGDH)是一种将UDP-葡萄糖转化为UDP-葡萄糖醛酸的代谢酶,通过参与糖胺聚糖在肿瘤组织中的生物合成来影响肿瘤的侵袭能力和耐药性。多项研究表明UGDH基因参与多种癌症的发生与发展,然而,目前尚无胰腺癌中关于UGDH基因的研究,因此本研究应用生物信息学方法研究UGDH在胰腺癌中的表达及其意义。方法:基于Oncomine数据库分析4个数据集中胰腺癌组织中UGDH基因的差异表达;对TCGA中胰腺癌基因表达谱和生存数据进行生存分析。基于UALCAN数据库,分析TCGA中胰腺癌UGDH基因与其他基因的表达相关性,使用Pearson系数法,获得其明显正相关与负相关的基因,分别进行GO与KEGG通路富集分析。基于HGNC数据库提供的人类所有基因的注释,提取胰腺癌中所有mRNA的表达谱,利用GSEA分析软件,进行UGDH基因在胰腺癌中的基因基富集分析;利用GeneMANIA对UGDH基因进行单基因PPI网络分析,并进一步对网络中出现的基因用Metascape进行功能富集分析,用Cytoscape的MCODE插件对网络进行关键子网络分析。结果:UGDH基因在胰腺癌组织中的表达明显上调;UGDH低表达患者较UGDH高表患者总生存率升高、生存期更长(均P<0.05)。GO富集分析发现,UGDH及其共表达基因富集于内膜系统、RNA定位、蛋白酶体蛋白分解代谢过程、核质转运、核酸运输等与癌症相关生物学过程;KEGG通路富集分析显示,差异基因显著富集于内质网蛋白加工、自噬、泛素介导的蛋白水解、蛋白质输出、剪接体、RNA转运、mRNA监测通路、病毒致癌作用、长期抑制作用、结直肠癌、N-聚糖的生物合成、胰腺癌通路、鞘脂信号通路、癌症中的蛋白聚糖、肾细胞癌、人类巨细胞病毒感染、乙肝等癌症相关通路。GSEA分析富集于泛素介导的蛋白水解作用、氨基糖和核苷酸糖代谢、氨酰生物合成、卵母细胞减数分裂、肾细胞癌、基础转录因子、鞘脂类代谢、ErbB信号通路、黏附连接、慢性粒细胞白血病、RIG-I样受体信号传导通路、促性腺激素释放激素信号通路、胰岛素信号通路、子宫内膜癌、神经胶质瘤、神经营养蛋白信号通路、内吞作用、MAPK信号通路、胰腺癌等癌症相关通路。PPI预测及关键子网络分析显示,HGS、UBE2V1、MAT2A、SUMO1在互作网络中有重要作用。结论:UGDH基因在胰腺癌组织中表达上调,且与胰腺癌发生发展及预后密切相关,本研究结果可能为今后胰腺癌发病机制及分子靶向治疗的研究提供重要线索和依据。     

发育生物学与肿瘤研究

近年来研究发现,很多在发育生物学中研究较多的信号通路在肿瘤发生中有重要的作用,包括Wnt、TGF-β和hedgehog等在动物发育中起重要作用的信号通路,都在肿瘤中发现了突变[1-3].……     

Indian hedgehog在软骨细胞力学信号转导作用的研究进展

软骨细胞力学是近几年生物力学发展的新领域,是细胞工程和组织工程学的基础,细胞的形态、结构、功能及其新陈代谢、分化都与力学有着密切的关系。力学对维持软骨细胞生物学功能必不可少,机械应力联合其他化学分子共同调节关节软骨的生理和病理变化[1]。软骨细胞通过细胞骨架、细胞外基质、离子通道、细胞膜受体等来感受力学信号,并且结合基因表达来调控自身的代谢活动[2]。近年来研究发现Indian hedgehog为力学敏感性的基因[3]。本文主要对软骨细胞力学生物学转导机制以及与Indian hedgehog信号通路进行综述。     

特异性阻断Shh信号通路对胰腺癌细胞系SUIT-2增殖和凋亡的影响

目的： 研究组抑胚胎发育相关信号通路Sonic hedgehog (Shh)对人胰腺癌细胞系SUIT-2增殖和凋亡的影响。方法：用四唑蓝（MTT）比色试验检测Shh信号通路特异性抑制剂cyclopamine对胰腺癌细胞系SUIT-2增殖的抑制作用；流式细胞术检测细胞增殖指数(PI)和凋亡指数(AI)；用裸鼠移植瘤模型检测cyclopamine对移植瘤生长的抑制作用。 结果：cyclopamine对SUIT-2细胞株增殖的抑制作用呈剂量和时间依赖性。cyclopamine作用后使胰腺癌细胞周期阻滞在G0／G1期，细胞凋亡增加；SUIT-2的AI为14.3±0.35， PI为36.1±0.44，对照组分别为1.3±0.24和52.3±0.28（均P<0.05）。在裸鼠移植瘤模型中，cyclopamine同时给药组肿瘤生长明显受到抑制，而延期给药组对肿瘤生长的抑制作用较弱。结论：shh信号分子对胰腺癌细胞的增殖起维持作用；通过特异性阻断该信号通路，可以抑制胰腺癌细胞增殖，并促进细胞凋亡。     

姜黄素对前列腺癌PC3细胞生长及Notchl信号的作用

研究表明Notch信号通路在器官、细胞发育及肿瘤发生等病理生理过程中起重要作用[1].Notch信号通路尤其是Notch1蛋白的表达与前列腺的发育和肿瘤转化密切相关[2-3].我们通过观察姜黄素对PC-3细胞体外增殖、凋亡及Notch1和配体Jagged1表达的影响,探讨其对雄激素非依赖性前列腺癌细胞的作用.     

MAPK信号传导通路在髓核细胞研究进展

丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPK)是将细胞外刺激信号转换成广泛的细胞内反应的一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在许多生理过程中发挥着重要的细胞信号传导的作用[1].在真核细胞生物中,MAPK信号通路在基因表达、细胞增殖、分化、凋亡、新陈代谢等生理病理过程中发挥着重要的作用.在哺乳类动物中,MAPK家族基因有10来个,目前研究发现常见的MAPK信号通路有:细胞外信号调节激酶(ERK1/2),c-Jun氨基末端激酶(JNK1/2/3),p38激酶(α,β,γ,δ)以及大丝裂原活化蛋白激酶(ERK5/BMK1) [2-4].每一个常见的信号通路都存在三级激酶级联,细胞受外部信号刺激后通过MAPKKK转化为细胞内的信号并进一步磷酸化激活MAPKK,最后MAPKK通过双重磷酸化进一步激活MAPK,进而引起一系列细胞内信号的改变,在细胞增殖及功能上发挥着重要的作用.研究腰椎间盘退变过程中髓核细胞MAPK信号通路的信号变化将有助于人类对退行性腰椎间盘病进一步认识,并可能从中找到治疗退行性腰椎间盘病的方法.本文将综述MAPK常见信号通路在髓核细胞的研究进展.     

Faculty of Anaesthetists of the Royal College of Surgeons of Ireland

The Faculty of Anaesthetists of the Royal College of Surgeons of England, 35–43 Lincoln's Inn Fields, London WC2A 3PN. Telephone: 01-405 3474.     

深圳市某两所小学流行性腮腺炎突发疫情的流行病学分析

目的：通过对深圳市某两所小学发生的流行性腮腺炎突发疫情的流行病学特点及差异性进行分析,为制定科学、高效的防控策略提供科学依据。方法2013年5～7月深圳市大鹏新区某两所小学爆发流行性腮腺炎,以学校为整体研究对象,分别标记为学校A（24个班,学生1210例）和学校B（27个班,学生1274例）,对比两所小学的疫情流行病学差异性。结果分析发现,学校A流行性腮腺炎发病率为4.30%,发病班级所占比54.17%,均较学校B1.73%和29.63%高,对比差异有统计学意义（P＜0.05）;分析显示学校A学生出现疫病平均年龄为（11.2±1.1）岁,较学校B（9.34±1.0）岁,对比差异明显（P＜0.05）;且两组疫病患儿在接种疫苗率对比上差异无统计学意义（P＞0.05）;但疫情发生时,学校B疫苗紧急接种率明显高于学校A,对比差异有统计学意义（P＜0.05）。结论小学作为流行性腮腺炎爆发的主要场所之一,疫病爆发高峰季节前,针对易感染人群给予相应的疫苗接种等预防控制措施,同时加强流行性腮腺炎的监测,对于降低感染人群数量,减轻、遏制疫情有着积极的意义,值得相关防控部门重视。