小檗碱抑制人乳腺癌MDA-MB-23细胞增殖及其与过氧化物酶体增殖物激活受体γ的关系

目的 探讨小檗碱对人乳腺癌细胞MDA-MB-231体外生长的影响及其与过氧化物酶体增殖物激活受体γ (PPARγ)的关系,以评价其在乳腺癌治疗中的应用潜力.方法 采用MTT法检测小檗碱对MDA-MB-231细胞的生长抑制效应;TUNEL法检测细胞凋亡;联合PPARγ拮抗剂GW9662,分析小檗碱对MDA-MB-231细胞增殖的影响与PPARγ受体的关系;实验同时采用罗格列酮作为阳性药进行平行比较分析.结果 小檗碱呈量-效和时-效关系抑制MDA-MB-231细胞生长,24 h的半数抑制浓度(IC_(50))为0.21μmol/L;小檗碱诱导MDA-MB-231细胞凋亡作用随药物浓度的增加而增强;PPARγ受体拮抗剂不能逆转小檗碱对细胞增殖的抑制作用.结论 小檗碱可明显抑制MDA-MP-231细胞生长,但与罗格列酮不同,其作用不通过PPARγ受体介导;小檗碱诱导MDA-MB-231细胞凋亡的效应较罗格列酮更为显著;小檗碱可望成为治疗乳腺癌的有效药物.     

槲皮素对白血病K562细胞增殖及PPARγ蛋白表达影响的研究

目的:研究槲皮素在诱导白血病K562细胞凋亡过程中PPARγ蛋白的表达.方法:用槲皮素作用于K562细胞一定时间后,通过胎盘蓝拒染法观察其生长曲线,MTT法检测其对细胞的抑制率,Hoechst33258染色后荧光显微镜下观察细胞核形态,流式细胞仪检测处理后细胞的凋亡率,采用Western-blotting技术从蛋白分子水平上检测槲皮素对PPAR～蛋白表达.结果:槲皮素显著抑制K562细胞的增殖并呈浓度依赖关系.电泳的结果显示一定浓度的槲皮素能够上调PPARγ蛋白的表达,进而可能诱导K562细胞的凋亡.结论:PPARγ蛋白表达的上调可能是槲皮素抑制K562细胞增殖诱导凋亡的原因之一,其中,槲皮素起着PPARγ非特异配体的作用.     

华蟾素对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖迁移凋亡的影响

目的:研究华蟾素对MDA-MB-231细胞增殖、迁移和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:体外培养三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231,用倒置显微镜观察不同浓度华蟾素对MDA-MB-231细胞形态的影响;CCK-8实验检测华蟾素对MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用;划痕实验检测华蟾素对MDA-MB-231细胞迁移能力的抑制作用;FITC/PI双染流式细胞术检测不同浓度华蟾素对MDA-MB-231细胞凋亡率的影响;Western Blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved capsase-3、Cleaved caspase-9和PTHrP的表达。结果:CCK-8结果显示华蟾素可以时间、浓度依赖性地抑制MDA-MB-231细胞增殖;划痕实验结果表明华蟾素可抑制MDA-MB-231细胞迁移;流式细胞术结果表明华蟾素可浓度依赖性地诱导MDA-MB-231细胞凋亡;Western Blot结果表明,华蟾素可上调MDA-MB-231细胞中促凋亡蛋白Bax、Cleaved capsase-3、Cleaved caspase-9,下调抑凋亡蛋白Bcl-2。此外,华蟾素还可抑制MDAMB-231细胞中PTHrP的表达。结论:华蟾素通过线粒体途径诱导MDA-MB-231细胞凋亡可能是其抗三阴性乳腺癌的机制;华蟾素通过下调乳腺癌MDA-MB-231细胞中PTHrP进而抑制溶骨性骨转移的发生,有待于后续的动物实验来进行验证。     

胭脂树橙对白血病K562细胞凋亡及PPARγ蛋白表达的影响

目的 探讨胭脂树橙在诱导白血病K562细胞凋亡过程中对PPARγ蛋白表达的影响.方法 用胭脂树橙作用于K562细胞一定时间后,通过台盼蓝拒染法观察K562细胞生长曲线,MTT法检测其对细胞的抑制率,Hoechst 33258染色后,荧光显微镜下观察细胞核形态;流式细胞仪检测细胞的凋亡率;采用Western-blotting技术从蛋白分子水平上检测胭脂树橙对PPARγ蛋白表达的影响.结果 胭脂树橙显著抑制K562细胞的增殖并呈浓度依赖关系.电泳的结果 显示一定浓度的胭脂树橙能够上调PPARγ蛋白的表达,进而可能诱导K562细胞的凋亡.结论 PPARγ蛋白表达的上调可能是胭脂树橙抑制K562细胞增殖诱导凋亡的原因之一,其中,胭脂树橙具有PPARγ非特异配体的作用.     

农吉利碱对乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡及相关因子表达的影响

目的:探讨农吉利碱对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖与凋亡的影响。方法:体外培养MDA-MB-231细胞,给予不同药物浓度(0、10、20、40μmol/L)农吉利碱处理MDA-MB-231细胞24、48、72h。四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测对MDA-MB-231细胞活力的影响,光镜和吖啶橙染色分析细胞形态,流式细胞术检测农吉利碱处理细胞72h后的凋亡率和细胞内活性氧水平,免疫印迹法(Western blot)检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、激活型半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved-Caspase-3)蛋白表达。结果:农吉利碱10、20、40μmol/L对MDA-MB-231细胞具有明显抑制作用,光镜、吖啶橙染色法可见细胞出现凋亡特征性改变,农吉利碱可诱导细胞凋亡,抑制Bcl-2蛋白表达,促进Bax和Cleaved-Caspase-3的蛋白表达,并与农吉利碱浓度呈依赖性。结论:农吉利碱抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖,并促进其凋亡,与Bax和Cleaved-Caspase-3的表达增加和Bcl-2降低有关。     

吴茱萸碱对MDA-MB-231细胞增殖迁移及IL-8表达的影响

目的:观察吴茱萸碱对人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)增殖和白介素-8(IL-8)含量的影响。方法:采用CCK-8法测定吴茱萸碱对MDA-MB-231细胞增殖的影响;采用Annexin V/PI双染法测定吴茱萸碱对MDA-MB-231细胞凋亡的影响;采用ELISA法测定不同浓度吴茱萸碱对MDA-MB-231细胞IL-8表达的影响;采用细胞划痕实验测定吴茱萸碱对MDA-MB-231细胞迁移的影响。结果:随着吴茱萸碱浓度的增加,作用时间的延长,细胞的增殖活力抑制率逐渐增高,吴茱萸碱分别作用MDA-MB-231细胞24h,48 h和72 h,增殖活力抑制率达到50%时的浓度(IC50)为175.5μmol/L,124.3μmol/L和108.7μmol/L。吴茱萸碱干预MDAMB-231细胞24 h能够呈剂量依赖性促进细胞凋亡。随着吴茱萸碱浓度的增加,作用时间的延长,MDA-MB-231细胞IL-8的含量逐渐增高。吴茱萸碱对MDA-MB-231细胞迁移的抑制作用呈剂量依赖性和时间依赖性。结论:吴茱萸碱具有抑制MDA-MB-231细胞增殖和细胞迁移,并且促进细胞凋亡的作用,但同时其能够上调IL-8表达的副作用也值得关注。     

小檗碱抗人结直肠腺癌的作用及其机制

目的探讨黄连的主要药用成分小檗碱的抗结直肠腺癌的机制。方法不同浓度的小檗碱作用于人结直肠腺癌(HCT-15)细胞后,用显微镜观察人结直肠腺癌细胞的形态学改变;细胞染色方法观察细胞凋亡和自噬;细胞计数分析(CCK-8)检测小檗碱对细胞增殖的影响;免疫印迹法检测小檗碱对人结直肠癌细胞自噬和凋亡相关指标的影响;裸鼠移植瘤模型观察小檗碱的体内抑制肿瘤生长活性。结果显微镜观察结果显示小檗碱作用HCT-15细胞后细胞数量减少、间距增大、皱缩。小檗碱能够抑制HCT-15细胞增殖,对HCT-15细胞增殖的半数抑制浓度(IC_(50))为50μmol/L。免疫荧光和印迹法显示0、50、100μmol/L的小檗碱处理细胞不同时间后,细胞凋亡和自噬对应的标志物明显上升。免疫印迹结果显示小檗碱诱导HCT-15细胞自噬和凋亡从而抑制细胞的增殖。小檗碱诱导细胞自噬和凋亡主要通过激活p38途径。裸鼠实验结果表明小檗碱能够有效缩小体内肿瘤体积,0、10、20 mg/kg的小檗碱的抑瘤率分别为0、32%、74%。结论小檗碱在体外对HCT-15细胞增殖具有明显抑制作用,其机制主要是通过激活p38信号通路促进肿瘤细胞自噬和凋亡,并能有效抑制体内肿瘤的生长。     

小檗碱对K562细胞分化及凋亡的影响

目的:研究小檗碱对K562细胞是否具有抑制增殖、促进分化、诱导凋亡的作用,为临床应用黄连治疗慢性粒细胞白血病提供理论依据.方法:MTT比色法、克隆形成实验检测小檗碱对K562细胞增殖的影响;瑞氏-吉姆萨染色观察细胞凋亡的形态改变;DNA琼脂糖凝胶电泳检测晚期细胞凋亡;流式细胞术分析细胞周期分布,细胞表面分化抗原表型检测分析细胞分化.结果:小檗碱对K562细胞的生长有抑制作用;小檗碱与Ara-C联用存在一定的协同效应;小檗碱处理K562细胞48 h后能明显促进其向红系、粒系、巨核系分化,随着作用时间的延长小檗碱诱导K562细胞发生凋亡的百分比逐渐增加.结论:小檗碱能有效地抑制K562细胞的增殖,其作用可能是通过诱导K562细胞发生G0/G1期和(或)G2期阻滞并进一步诱导其凋亡和分化实现的.     

虎眼万年青总皂苷对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及凋亡的影响

目的 研究虎眼万年青总皂苷对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响.方法 用MTT比色法检测虎眼万年青总皂苷对MDA-MB-231细胞的增殖抑制作用;流式细胞术分析细胞凋亡与细胞周期变化;透射电镜观察细胞形态学变化.结果 虎眼万年青总皂苷对MDA-MB-231细胞生长有明显抑制作用,并呈剂量、时间依赖性;可诱导细胞发生凋亡,且凋亡率呈浓度依赖性,使细胞周期明显阻滞于G0/G1期;电镜下可见典型的细胞凋亡形态学改变.结论 虎眼万年青总皂苷可抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,并可诱导细胞凋亡,其机制可能与虎眼万年青总皂苷将癌细胞阻止于G0/G1期相关.     

西黄丸含药血清对三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、迁移的影响

目的:研究西黄丸含药血清对三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、迁移以及对环氧化酶2(COX-2)转录的影响,以期探讨西黄丸对三阴性乳腺癌细胞的作用。方法:大鼠灌胃给药制备西黄丸含药血清,实验设置大鼠空白血清组和西黄丸含药血清组,以含药血清干预三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,细胞划痕实验检测细胞迁移,RT-PCR法检测COX-2、TNF-αmRNA表达。结果:西黄丸含药血清可以抑制MDA-MB-231细胞增殖,可以促进MDA-MB-231细胞凋亡,并且西黄丸含药血清可以降低MDA-MB-231细胞划痕愈合率,可以降低在炎性环境下MDA-MB-231细胞中COX-2 mRNA表达(P<0.05)。结论:西黄丸含药血清可以有效地抑制MDA-MB-231细胞增殖,促进其细胞凋亡,可能抑制细胞迁移,并且可以减少炎性因子的转录。     

珍珠母超微粉蛋白及寡肽对小鼠镇静安眠作用比较

目的比较珍珠母超微粉蛋白、寡肽对小鼠镇静安眠作用。方法利用PCPA制造小鼠失眠模型,观察小鼠的自主活动情况,ELISA法测小鼠血中ATCH含量并计算脑及脑系数。结果阳性对照组、寡肽组小鼠的自主活动次数显著降低,小鼠血中ACTH的含量增加,但脑干系数无影响。结论超微粉寡肽类成分(MCP)镇静安眠活性最强,为镇静安眠主要活性部位,调节ACTH可能是其镇静安眠机制。     

丁香苦苷不同给药途径的药物动力学研究

目的:研究并比较丁香苦苷单体两种给药途径在家兔体内的药物动力学过程,考察丁香苦苷单体口服后的绝对生物利用度。方法:家兔静脉注射丁香苦苷注射液和灌胃给予丁香苦苷水溶液,采集血样,固相萃取小柱活化方法处理血浆后高效液相色谱法测定丁香苦苷血浆浓度,采用药动学软件3P97进行数据处理,确定药动学参数。结果:丁香苦苷静脉给药后在体内符合二室模型分布,其主要药动学参数分别如下:T1/2α为2.41min,T1/2β为15.38min。灌胃给药后丁香苦苷的药动学行为符合一级吸收二室模型,Cmax为17.91min,T1/2(α)为9.642min,T1/2(β)31.748min。绝对生物利用度为35.9%。结论:丁香苦苷单体经口服和静脉两种给药途径给药后,吸收和消除均较快。     

《老老恒言》论老年养生

简要论述了《老老恒言》中有关老年养生的思想和方法 ,认为饮食以调理脾胃为要 ,应注意饮食有节、五味调和、清淡为补 ;起居以养静为要 ,应注意调顺四时、起居有常、静养与导引相结合 ;养性以安命为要 ,应注意清心寡欲、修心养性     

中药产业竞争力提升战略研究

本文运用了竞争力理论与战略理论，分析了中药产业竞争力提升的环境与条件，提出了提升中药产业竞争力的三大战略目标、三大总体战略、四条战略举措及三个实施阶段与重点任务。     

病性变化和转化的哲理数学原理

病性的变化和转化以及疾病的传变是中医病理学的2个核心问题。它们可分别从阴阳五行数学的公理1和公理2、3得到圆满的解释。病性变化,其症结在于主导属性明晰度的大小发生变化;病性转化,其症结则在于主导属性明晰度的正负号发生变化。     

胃脘痛证候量化诊断的探讨

目的:探讨胃脘痛证候的量化诊断规律。方法:以因子分析方法对808例胃脘痛患者的临床四诊信息进行分析。结果:因子分析从胃脘痛临床症状中提取12个因子,分别代表脾胃湿热、脾胃虚寒、肝胃气滞、气阴两虚、胃热炽盛、胃阴亏虚、肝胃郁热、脾胃气虚等8个证候,同时对各个证候进行量化。结论:因子分析所得的胃脘痛的常见证候分类及量化诊断为临床辨证提供客观依据。     

中国中医科学院西苑医院肿瘤科

本文较详细地介绍了中国中医科学院西苑医院肿瘤科成立以来,确立了以中医综合治疗结、直肠癌为主攻方向,不断探索具体治疗方法和建立系统评价体系的成长历程。他们作为国家中医药管理局"十一五"结直肠癌专病建设组长单位,牵头联合全国26家医院以及挪威国家补充替代医学研究中心,进行的中医结直肠癌的诊疗方案的验证工作,牵头制定《结直肠癌中西医结合诊疗方案》,以及探索建立辐射社区医院的结直肠癌中医三级防治网络等工作,得到国内外医学界的广泛认可,具有典范借鉴意义。     

咳嗽六经辨治初探

六经皆有咳嗽,寒热皆可致咳,治疗上不可拘于一理一方,当穷究其机,辨证施治,方能事半功倍。以六经辨证为纲,分析《伤寒杂病论》对咳嗽的有关论述,以期提高咳嗽的临床疗效。     

匙羹藤有效成分牛弥菜醇A降血糖作用研究

目的：研究牛弥菜醇A对实验性糖尿病大鼠降糖作用及机制。方法：观察牛弥菜醇A对糖尿病大鼠的作用，给药14 d后，测定体重、空腹血糖(FBG)、血清胰岛素(INS)、血清超氧化物歧化酶 (SOD)活性、丙二醛(MDA)、血清总胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)；取肝脏测定肝糖原含量；对胰腺做病理切片观察其形态学改变，并计算胸腺、胰腺、脾脏重指数。结果：与模型组相比，牛弥菜醇A(高、中剂量组)血糖值明显下降(P<0.01)；高、中剂量组大鼠的血清SOD活性和INS水平明显增加(P<0.05),血清MDA含量、TG和TC 水平明显降低(P<0.05)，肝糖原含量明显提高(P<0.05)；胸腺、胰腺、脾脏的重量指数明显升高(P<0.01或P<0.05)；病理学观察发现，牛弥菜醇A各剂量组胰岛β细胞形态、结构与模型对照组比较，有不同程度的改善。结论：牛弥菜醇A降糖机制可能与改善机体对胰岛素的敏感性、清除自由基、促进肝糖原合成、提高机体抗氧化能力和增强免疫功能等作用有关。     

天然产物生物合成途径解析策略

天然产物合成途径解析既是本草基因组学研究的主要目标,也是天然产物合成生物学研究的重要基石。该文综述了近期相关领域的研究进展,提出了天然合成生物合成途径解析的一般策略:即首先通过同位素示踪实验结果和化学反应原理、已分离鉴定的中间产物等信息推测出可能的生物合成途径;然后利用共表达分析和/或基因簇发掘筛选出途径中的候选基因;最后对所有候选基因进行异源表达和酶活性检测确定参与代谢途径的酶,并可在原物种中进行该酶基因的抑制或过表达研究,进一步确认该酶在原物种体内的功能。天然产物生物合成途径的解析将有助于通过合成生物学技术为新药研发提供新的化合物来源,并可为中草药的分子育种研究提供"功能性分子标记",加速优良品种的选育,推动中药农业的发展。