大鼠慢性脑血流灌注不足脑的病理组织学和超微结构变化

目的 研究慢性脑血流灌注不足脑皮层、海马和皮层下白质的病理变化,以探讨脑认识功能下降的病理基础。方法：采用老年大鼠持久双侧颈总动脉结扎造成慢性脑血流灌注不足动物模型,以环胞素Ａ在缺血前后胃灌治疗。分为对照组、缺血２个月、缺血４个月组和治疗组,预定时间取脑,切片,进行光、电镜观察。结果：缺血组皮层海马的神经细胞以变性、固缩和退化为主;皮层下白质有神经纤维和髓鞘溃变;普遍存在胶质细胞增生、形成胶质小结     

血管性痴呆的动物模型及其胆碱能机制研究

目的 建立血管性痴呆（ＶＤ）的运行模型,并探讨血管性痴呆认知障碍的发病机制。方法 采用持久性双侧颈总动脉法致老龄大鼠慢必离血流灌注不足,建立老大鼠血管要模型,进行数字减影血管造影（ＤＳＡ）检查、穿梭箱试验和胆碱乙酰酶（Ｃｈｏｌｉｎｅ ａｃｅｔｙｉｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ,ＣｈＡＴ）免疫组化测定。结果 慢性脑血流灌注不足２月后出现明显的认知功能障碍,缺血４月后更明显;海马ＣＡ１区ＣｈＡＴ免疫反应阳性神     

慢性肾功能衰竭及接受替代治疗者并发结核感染的治疗

慢性肾衰及接受替代治疗者并发结核感染时，其治疗与一般抗结核治疗有所不同。应用常规剂量异烟肼时，神经毒性明显增多，且可出现精神与行为异常，加大维生素Ｂ６的剂量后可以防止。乙胺丁醇的剂量为１５ｍｇ／（ｋｇ·ｄ）时，视力障碍的发生率仍高达１７．６％。同时服用环胞素Ａ与利福平时，环胞素Ａ的剂量需增加１～４倍。异烟肼与硫唑嘌呤同时服用时，血白细胞减少的发生率增加。     

米诺环素介导小胶质细胞形态转换减轻缺血性脑卒中早期脑损伤的机制研究

目的 观察大鼠缺血性脑损伤早期的病理生理特点,探讨米诺环素在缺血性脑损伤早期的神经保护效应及可能机制.方法 线栓法制备大鼠缺血性脑损伤(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,在MCAO 6、24 h分别给予米诺环素腹腔注射,通过TTC染色观察脑梗死面积,TUNEL染色及尼氏染色检测神经元凋亡情况;免疫荧光染色了解小胶质细胞形态变化以及Western blot检测凋亡通路NF-κB表达情况.使用Morris水迷宫检测手术28 d后大鼠学习记忆能力.结果 米诺环素减少MCAO 6 h后大鼠脑梗死面积[(43.0±5.3)cm3 vs (36.0±6.8)cm3, P<0.01],减少脑神经元凋亡数量并促进M2型(神经保护型)小胶质细胞增殖,MCAO 24 h后米诺环素治疗不能改善脑梗死以及神经元细胞凋亡(P>0.05).米诺环素显著减少MCAO 6 h诱导的凋亡信号通路蛋白NF-κB的表达(P<0.01).MCAO 28 d后大鼠学习记忆能力较假手术组显著降低;米诺环素显著改善MCAO后学习记忆能力(P<0.05),而MCAO 24 h后米诺环素不能改善大鼠神经功能障碍,差异无统计学意义(P>0.05).结论 米诺环素能促进缺血性脑卒中早期活化小胶质细胞向M2型转化并抑制凋亡信号通路,减轻脑缺血诱导的神经炎症及细胞凋亡,改善大鼠学习记忆功能.     

重组白细胞介素－2治疗慢性肝炎22例观察

应用重组白细胞介素－２（ｒＩＬ－２）治疗慢性活动性肝炎（ＣＡＨ），对治疗前后外周血淋巴细胞亚群、乙肝病毒５项标志进行了检测，结果治疗后ＣＤ４＋Ｔ细胞明显增加，ＣＤ８＋Ｔ细胞明显降低（Ｐ＜０．０１），ＣＤ４＋／ＣＤ８＋倒置情况有明显改善。有２例ＣＡＨ血ＨＢｅＡｇ转阴，但未见抗－ＨＢｓ阳转。本文还就ｒＩＬ－２对ＣＡＨ肝功能的影响进行了讨论。     

小鼠乳腺癌细胞系IL-2基因转导及成瘤性研究

目的研究白细胞介素２（ＩＬ－２）转基因乳腺癌细胞在小鼠体内成瘤性。方法用感染法将人ＩＬ－２基因体外导入乳腺癌细胞系４Ｔ１。转基因细胞４Ｔ１／ＩＬ－２培养上清内ＩＬ－２分泌量，ＤＮＡ、ＲＮＡ分别用ＥＬＩＳＡ，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交及逆转录ＰＣＲ法分析。体内实验将动物区分４Ｔ１，４Ｔ１／ＩＬ－２混合接种或单独接种三组。每周测量肿瘤大小，实验结束统计学用方差分析处理。结果４Ｔ１／ＩＬ－２细胞分泌的ｈＩＬ－２量为１２ｎｇ（每２４ｈ内１０６细胞），ｈＩＬ－２基因已整合到转导细胞基因组内并有ｈＩＬ－２ｍＲＮＡ表达。４Ｔ１／ＩＬ－２细胞接种动物后肿瘤发生延迟，瘤体小，与４Ｔ１接种组相比有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。结论ＩＬ－２转基因细胞在动物体内引起抗肿瘤作用。     

慢性乙型肝炎患者sIL—2R水平,mIL—2R表达及T细胞亚群的检测及意义

目的：探讨慢性乙型肝炎病人血清可溶性白细胞介素－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）水平、淋巴细胞膜白细胞介素－２受体（ｍＩＬ－２Ｒ）表达及Ｔ细胞亚群的变化及意义。方法：分别２采用双抗体平心ＥＬＩＳＡ法和碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶（ＡＰＡＡＰ）法检测了１０８例慢性乙型肝炎病人血清ｓＩＬ－２Ｒ、ｍＩＬ－２Ｒ表达及Ｔ细胞五群（ＣＤ４、ＣＤ８）的变化，并与６６例同期健康人进行了对照。结果：慢性乙型肝炎病人ｓＩＬ－２Ｒ、Ｃ     

蛇床子香豆素对肾阳虚模型大鼠学习记忆和神经肽的影响

观察蛇床子素和蛇床子总香豆素对肾阳虚模型大鼠和正常鼠学习记忆成绩和神经肽水平的影响。用醋酸氢化可的松复制肾阳虚大鼠模型，以Ｏｓｔ和Ｔ给模型鼠和正常鼠用药，用跳台试验法测定大鼠学习记忆成绩，并用放射免疫法测定大鼠下丘脑和血浆中精氨酸升压素和生长抑素的含量。结果：肾阳虚组与正常组比较，学习记忆成绩明显下降，ＡＰ降低而ＳＳ升高；肾阳虚动物用药后学习记忆成绩提高，ＡＰ升高而ＳＳ下降。     

实验性变态反应性神经炎周围神经浸润CD4（＋）T细胞的凋亡

为探讨实验性变态反应性神经炎（ＥＡＮ）中周围神经浸润ＣＤ４（＋）Ｔ细胞的凋亡,应用免疫组织化学和原位末端标记法动态检测不同发病阶段ＥＡＮ大鼠坐骨神经浸润ＣＤ４（＋）Ｔ细胞于免疫后第１８ｄ出现,在第２２ｄ达高峰后下降,第３０ｄ基本消失。原位末端标记法证实凋亡ＣＤ４（＋）Ｔ细胞中存在断裂的ＤＮＡ片段。提示ＣＤ４（＋）Ｔ细胞亡是ＥＡＮ浸润ＣＤ（＋）Ｔ细胞的重要清除机制。     

骨髓移植治疗重型β地中海贫血(附2例报告)

目的探讨骨髓移植治疗重型地中海贫血的可行性。方法２例４和４．５岁男性患儿,经地贫基因检查确诊为重型 β地中海贫血,分别移植其胞兄的骨髓 ８５０和 ４７５ｍｌ。两例 ＨＬＡ－ＤＲ位点均有一个不合,血型均相同;用白消安、环磷 酰胺、抗人胸腺免疫球蛋白（ＡＴＧ）预处理,例２未用ＡＴＧ;环孢Ａ和粒系集落刺激因子预防移植物抗宿主病。结果２例 白细胞数大于１．０Ｘ１０９／Ｌ的时间分别为移植后第１４天和第１７天,红细胞数大于４．ＳＸ１０９／Ｌ的时间分别为移植后第１８ 天和第 ２７天,例 １因更昔洛韦影响白细胞曾一度下降, ３个月后恢复正常; ２例血小板和 Ｈｂ术后均恢复正常,最后一 次输血时间分别为移植后第１０３天和第１８天。移植后例Ⅰ出现Ⅱ度急性ＧＶＨＤ和巨细胞病毒性间质性肺炎,获治愈。 两例移植后至今均无需输血,Ｈｂ持续１００ｇ／Ｌ以上,地贫基因均已转为供者型。结论骨髓造血于细胞移植可根治重型 β地中海贫血。更昔洛韦治疗移植后巨细胞病毒感染间质性肺炎用量要准确,疗程要足够。     

慢性脑缺血对大鼠认知功能障碍及影响机制研究

目的观察慢性脑缺血（CCH）过程中大鼠认知功能的变化、前额叶皮层和海马神经元组织学改变以及胆碱能系统改变,探讨慢性脑缺血致大鼠认知障碍的影响机制。方法选取大鼠分组后,应用Morris水迷宫定位航行实验和空间搜索实验观察各组大鼠学习记忆功能变化;苏木精-伊红染色观察前额叶皮层和海马组织学改变;免疫组织化学方法显示前额叶皮层和海马胆碱乙酰转移酶和烟碱型乙酰胆碱受体α4阳性细胞表达。结果①Morris水迷宫测试：a.定位航行实验：各组大鼠逃避潜伏期随天数增加而缩短,逃避潜伏期有差异性;b空间搜索实验：CCH各组大鼠在中环停留时间随低氧时间延长而减少;②与对照组比较,CCH大鼠前额叶皮层和海马变性坏死神经元增多,随着低氧时间延长而加重;③CCH各组大鼠前额叶皮层和海马ChAT阳性表达随低氧时间延长而下降;④CCH各组大鼠前额叶皮层和海马nAChRα4阳性表达随着低氧时间延长而下降。结论慢性脑缺血大鼠认知功能障碍随低氧时间延长呈加重趋势。慢性脑缺血致大鼠认知功能障碍的机制与大鼠前额叶皮层和海马神经元组织学改变和胆碱能系统改变有关。     

胶原膜包裹或应用环孢素A改善鸡羽根角蛋白材料的组织相容性

目的 观察经胶原膜包裹或应用免疫抑制剂后,鸡羽根角蛋白(CCK)材料在体埋植对周围组织的影响.方法 30只SD大鼠,随机均分为5组.将经特殊处理的CCK埋植入竖脊肌组织中.实验组:A组为CCK材料埋植加术后两周腹腔内注射免疫抑制剂环孢素A(CsA,日剂量5 mg/kg),B组为CCK材料浸泡CsA(2.5 mg/ml)后埋植,C组为胶原膜包裹CCK材料后埋植,D组仅埋植CCK材料.空白对照组仅作切口,不埋植材料.分别于术后2、4、8周取材,常规切片染色,光镜下观察埋植材料的降解情况及对周围组织的影响,免疫组织化学术检测周围组织内T淋巴细胞浸润情况.结果 术后各组大鼠一般状况良好,术后第2、4、8周,可见大量巨噬细胞,尤其是多核巨细胞分布于材料边缘,吞噬材料.炎性细胞数量较少.第2、4、8周A组CD3阳性表达细胞数较B组少,与D组有显著差异(P＜0.05),A组与空白对照组无显著差异(P＞0.05).结论 短期应用免疫抑制剂可显著改善CCK的在体组织相容性;CCK在体内可降解,巨噬细胞,尤其多核巨细胞参与了该过程.     

高压氧对糖尿病大鼠认知功能 及NGF mRNA 表达的影响

目的 探讨高压氧疗法对2 型糖尿病（T2DM）大鼠认知功能及脑组织神经生长因子microRNA （NGF mRNA）表达的影响。方法 将48 只成年健康SD 大鼠按随机数字表法分为空白对照组（12 只）、 T2DM 模型组（36 只）。模型复制成功后,T2DM 模型组大鼠再次按随机数字表法分为非干预A 组（6 只）、 非干预B 组（12 只）,以及高压氧A 组（6 只）、高压氧B 组（12 只）。10 d 后采用Morris 水迷宫实验检测 非干预A 组、高压氧A 组认知功能,空白对照组、非干预B 组、高压氧B 组随机选取6 只大鼠脑组织检测 NGF mRNA。高压氧A、B 组于注射15 d 后开始高压氧干预,1 次/d,20 d 后各组再次分别检测认知功能 及NGF mRNA。结果 与非干预A 组比较,高压氧A 组逃避潜伏期缩短（P <0.05）,穿越虚拟平台次数增 多（P <0.05）;与非干预B 组比较,高压氧B 组脑组织NGF mRNA 表达水平升高（P <0.05）。结论 高压氧 治疗可显著改善T2DM 大鼠认知功能,提升脑组织NGF mRNA 表达水平,提示高压氧治疗可有效改善早期 T2DM 患者认知功能,其机制可能与高压氧增强脑组织NGF mRNA 表达有关。     

环孢素A在实验性大鼠胰性脑病中的保护作用

目的:探讨环孢素(cyclosporine A,CsA)对大鼠胰性脑病脑组织损害的保护作用,为胰性脑病的治疗提供实验依据。方法:将60只Wister大鼠随机分为对照组和CsA治疗组,两组大鼠均经颈内动脉注射精制胰磷脂酶A2(PLA2),建立大鼠胰性脑病模型,CsA治疗组在造模前5min腹腔注射CsA(30mg/kg),之后每天同时间腹腔注射CsA(30 mg/kg),直至处死,对照组用等容积生理盐水代替。对照组和CsA治疗组分别于造模后1、3及7d各处死动物10只,测定大鼠脑组织匀浆TNF-α、IL-10水平,并检测脑组织含水量、脑组织的组织学改变、中枢神经系统脱髓鞘改变。结果:经CsA处理后,大鼠脑组织匀浆TNF-α水平、脑组织含水量较对照组显著降低(P<0.05),而IL-10则较对照组升高(P<0.05),CsA治疗组脑组织神经细胞水肿较轻,脱髓鞘改变轻微。结论:CsA可以减轻胰性脑病脑损害的发生和发展。     

环孢霉素A对大鼠心脏移植模型淋巴细胞分子表达与移植心脏病理学改变时相关系的影响

【目的】 通过环孢素A(CsA)干预的异体异位心脏移植动物模型的研究,对移植术后淋巴细胞分子表达?心肌组织淋巴细胞浸润能力和移植心脏病理改变时相进行比较,探讨环孢素A对其影响?【方法】 SD大鼠为移植心脏供体,Wistar大鼠为移植心脏受体?实验分为心脏移植对照组和环孢素A干预+心脏移植组实验组两组?在移植前及移植后24 h?3 d?7 d?10 d和12 d时间点免疫荧光测定淋巴细胞在心肌组织中浸润能力?实时定量PCR检测淋巴细胞编码基因CD4?CD8 和酪氨酸激酶P59 mRNA表达水平?心肌组织病理学检查判断排斥反应程度?【结果】 ①心脏移植后24 h内,外周血淋巴细胞基因的转录与表达为一过性降低;②心肌组织CD4+?CD8+ 淋巴细胞浸润和Ⅱ级排斥反应病理改变,主要出现于心脏移植后的d3 ~ d7;③环孢素A不能有效抑制移植后3 d内心肌组织CD4+?CD8+淋巴细胞浸润程度的快速增加,但可明显降低移植后d3 ~ d7的心肌组织CD4+ 淋巴细胞的浸润程度;④环孢素A不能完全阻断淋巴细胞P59基因的表达;⑤环孢素A不能有效抑制淋巴细胞CD4基因正调表达,但可抑制CD8基因的转录?【结论】环孢素A的移植排斥反应的抑制作用在大鼠移植后d3 ~ d7?淋巴细胞基因表达?心肌组织淋巴细胞浸润与排斥反应病理改变有关?这将有助于同种移植病人环孢素A的临床应用?     

环孢素A诱导的大鼠慢性肾毒性变化及与血药浓度的关系

摘要 目的 观察长期应用不同剂量环孢素A（CsA）诱导的大鼠肾毒性的变化,并分析其与血药浓度的关系。方法 SD大鼠随机分为4组：正常对照组,低盐对照组,30 mg/kg剂量组(CsA-L组),60 mg/kg剂量组(CsA-H组),于给药后第2和4周观察大鼠肾功能和肾组织形态学的变化。CsA血药浓度采用FPIA法测定。结果 与低盐对照组相比,药后第2周CsA-L组各指标无明显变化,CsA-H组尿量增多,尿蛋白降低,尿素氮（BUN）升高;药后第4周时,尿量呈减少趋势,肌酐（Crea）和BUN明显升高,且与CsA血药浓度呈显著正相关,病理表现为肾小管细胞空泡变性及小动脉和肾间质病变,CsA-H组各种变化较CsA-L组更为明显。各项检测指标在两个对照组间差异无统计学意义。结论 大鼠长期应用CsA可导致肾脏功能和组织学病变,且病变程度与用药时间和血药浓度有明显的相关性。     

移植的神经干细胞在脑损伤区壳聚糖载体中的存活与分化

目的:探讨移植的NSCs在大鼠脑损伤区壳聚糖载体中的存活、分化情况及其对TBI大鼠认知功能的影响。方法:低温冷冻干燥法制备壳聚糖多孔支架。将从鼠胚前脑中分离的NSCs扩增、标记BrdU。Feeney法制备SD大鼠TBI模型,随机分为3组:损伤对照组清创后不做移植;NSCs 支架移植组行壳聚糖作载体的NSCs移植;NSCs 支架 NGF移植组行壳聚糖作载体的NSCs移植,并在其中加入NGF。术后1、2、3个月行避暗回避和跳台试验。脑切片行Nissl染色、BrdU与NF-200免疫荧光双标染色。结果:两移植组的认知功能在术后1、2、3个月较损伤对照组明显改善,含NGF的移植组改善更加显著。两移植组术后1、2、3个月在移植区均可见BrdU与NF-200免疫荧光双标细胞,含NGF移植组中的双标细胞数量多、胞体大、突起多且长。结论:大鼠TBI后移植的外源性NSCs可以在脑损伤区壳聚糖载体中长期存活并向神经元分化,可以改善大鼠的认知功能;NGF对其具有促进作用。     

环孢素对大鼠同种胚胎后肾移植的影响

目的探讨环孢素对胚胎后肾在同种异体成年大鼠体内生长发育及功能发挥的影响。方法将实验组60只行单侧肾脏切除的成年SD大鼠按照使用CsA与否以及移植不同时期(孕后第15、16、17天,E15、E16、E17)的胚胎后肾随机分为6组(E15CsASD、E16CsASD、E17CsASDE15SD、E16SD、E17SD),每组10只,对照组30只SD大鼠同法分组,每组5只,宿主肾脏不切除。Lewis大鼠E15后肾移植到行单侧肾脏切除的成年BN大鼠大网膜(E15CsABN和E15BN),按照使用环孢素与否分为2组,每组15只。术后首日起,使用环孢素组受体大鼠以环孢素8mg·kg-1·d-1皮下注射;不使用环孢素组以等量的生理盐水皮下注射。移植后2～4周开腹观察器官形成情况,并进行组织病理学和后肾功能检查。结果(1)移植后28d,E16SD、E17SD组出现不同程度的排斥反应。E16CsASD、E17CsASD组后肾发育良好、无排斥反应;停用CsA后,原先发育良好的E16CsASD、E17CsASD后肾出现排斥反应。(2)移植后28d,E15SD后肾发育良好,无排斥反应,到100d检查时,发生排斥反应;移植后2周,E15BN组后肾即被完全排斥,而E15CsABN组后肾发育完好。E15CsABN组停用CsA后,原先发育完好的后肾被排斥。(3)移植时宿主肾脏不切除而植入后肾,其后肾不发育。(4)E15CsASD组移植后肾湿重、体积均小于E15SD组(分别为t=-3.74     

兔同种异体角膜缘移植术后免疫排斥反应的实验研究

目的：本研究旨在探索同种异体角膜缘移植免疫排斥反应规律并观察环孢霉素A（CsA）滴眼液的免疫抑制作用。方法：32只新西兰白兔随机分成实验组和CsA对照组．建立右眼角膜缘缺陷症动物模型，1月后实施同种异体角膜缘移植术，术后分别予生理盐水及1％CsA眼液滴眼并观察4周。术前1天及术后1～8周动态监测外周血T淋巴细胞上CD25的表达；分别取术后第4、8及10周的角膜缘植片观测淋巴细胞浸润及T淋巴细胞上CD25的表达。结果：实验组术后第1周外周血表达CD25的T淋巴细胞数就有增高，第3周已达到高峰，第5周开始缓慢下降。CsA组角膜缘植片中浸润的淋巴细胞及表达CD25的T淋巴细胞数目显著低于实验组。结论：同种异体角膜缘移植术后排斥反应的发生与表达CD25的T淋巴细胞数目密切相关：CsA眼液可抑制外周血及植片中T淋巴细胞上CD25的表达，从而抑制排斥反应发生。     

促红细胞生成素及其受体在慢性环孢素A肾毒性大鼠肾组织中的表达

目的探讨慢性环孢素A(CsA)能否导致贫血,以及促红细胞生成素(EPO)及其受体(EPOR)在慢性CsA肾毒性大鼠肾组织中的表达变化。方法 SD大鼠给予CsA15mg/(kg·d)皮下注射4周建立慢性CsA肾毒性模型(CsA毒性组),对照组1mL/(kg·d)皮下注射橄榄油。采用全自动生化分析仪检测两组大鼠的肾功能,血红蛋白(Hb)、红细胞压积(Hct)水平,三色(Masson Trichrome)染色确定肾小管间质纤维化程度;免疫组织化学染色和蛋白质印迹法分别检测肾组织EPO及EPOR蛋白的表达;TUNEL染色和电子显微镜观察细胞凋亡。结果与对照组相比,CsA毒性组大鼠肾功能低下,肾小管间质发生纤维化,凋亡细胞增多(P<0.01);同时CsA毒性组大鼠有贫血发生,表现为Hb和Hct水平的下降(P<0.01)。免疫组织化学染色和蛋白质印迹分析结果表明,EPO在CsA毒性组肾组织中的表达减少,而EPOR的表达增加(P<0.01)。直线相关分析提示,EPO蛋白表达与肾小管间质纤维化(r=-0.729,P<0.001)和TUNEL阳性细胞数(r=-0.841,P<0.001)呈负相关。结论慢性CsA肾毒性大鼠肾组织中EPO蛋白表达减少,从而导致贫血;CsA诱导肾小管上皮细胞凋亡与EPO蛋白表达减少有关。