HPLC测定血浆中黄豆苷元浓度及其人体药动学研究

目的 建立HPLC测定人血浆中黄豆苷元浓度的方法,进行其人体药动学研究.方法 以氟康唑为内标.血浆样品经预处理后,选用HypersilODS2色谱柱(4.6 mm ×250 mm,5μm),甲醇-水(49:51)为流动相,流速1.0 mL·min-1,室温260 nm处测定.结果 黄豆苷元血浓度线性范围为5～640μg·L-1,最低定量浓度为5μg·L-1;相对回收率为89.53%～110.35%,绝对回收率为61.24%～85.04%,日内、日间变异系数均＜12%.黄豆苷元药动学参数t1/2为(3.863±0.983)h,ρmax (192.261±115.077)μg·L-1,tmax(0.900±0.409)h,AUC0～12(490.839±162.855)μg·h·L-1,AUC0～∞(535.279±163.190)μg·h·L-1.结论 本法分离效果良好,灵敏度高,重现性好,回收率高,日内、日间误差小,适用于黄豆苷元人体药动学及生物利用度研究.     

反相高效液相色谱法同时测定人血浆中替米沙坦、氢氯噻嗪含量

目的 建立可同时检测人血浆中替米沙坦、氢氯噻嗪含量的反相高效液相色谱方法.方法 色谱条件:色谱柱为Zorbax80(A) Extend-C18(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相为乙腈-四丁基氢氧化铵磷酸盐缓冲液(24:76);流速:1.0 mL·min-1;检测波长:230 nm(替米沙坦),272 nm(氢氯噻嗪);柱温:20℃.结果 本法替米沙坦的线性范围为31.8～1 591.2μg·L-1,r=0.999 4,方法回收率为98.68%,RSD=3.09%,最低检测质量浓度为20 μg·L-1.氢氯噻嗪的线性范围为30～240 μg·L-1,r=0.9991,方法回收率为100.32%,RSD=5.11%,最低检测质量浓度为20μg·L-1.结论 本法可以同时测定血浆中替米沙坦和氢氯噻嗪的浓度,具有样品处理简单、方法稳定、有较好的实用性,易于开展药动学及药效学研究.     

高效液相色谱-库仑电化学检测法定量测定小鼠血浆中CTN986

目的 建立血浆中CTN986的定量测定方法,为药物代谢研究提供技术手段.方法 采用HPLC-库仑电化学色谱方法,DiamonsilTM(钻石)C18(,4.6 mm×200mm,5μm)色谱柱,0.2 mol·L-1磷酸二氢钠-甲醇(60∶40)为流动相,CoulochemⅢ电化学检测器,Model 5010 Analytical cell为检测手段,以峰面积定量.结果 检测下限为150μg·L-1,定量下限为390μg·L-1,方法线性范围为0.390～12.5,12.5～50 mg·L-1;在1.563,6.25,12.5,25 mg·L-1 4种质量浓度平均回收率为53.43%;日内、日间平均RSD为1.03%,2.28%.结论 该方法灵敏度高,方法操作简便,可满足药动学研究的要求.     

RP-HPLC测定人血浆中卡托普利浓度及其药动学

目的 建立测定人血浆中卡托普利的反相高效液相色谱法,研究其在人体内的药动学规律及特点.方法 采用美国Waters公司高效液相色谱仪.色谱柱Hypersil柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-水-冰醋酸(45:55:0.2),流速1.0mL·min-1;检测波长:257 nm.结果 卡托普利血药浓度线性范围为6.25～800μg·L-1,最低检出浓度为6.25μg·L-1;方法回收率为105.8%;日内、日间RSD分别为4.40%～7.88%和2.87%～9.34%.结论 本法灵敏、准确,可用于卡托普利临床药动学研究.     

LC-MS/MS测定人血浆中依折麦布和总的依折麦布含量及其药动学研究

目的 建立测定人血浆中依折麦布和总的依折麦布浓度的LC-MS/MS方法,进行依折麦布片po给药的药动学研究.方法 22名志愿者血样经叔丁基甲醚萃取吹干重组后进样测定依折麦布浓度,另取血样经β-葡萄糖苷酸酶水解后叔丁基醚萃取吹干重组后进样测定总的依折麦布浓度.分析柱:Capcell C18柱(2 mm×50 mm,5μm),内标(IS)13 C6-依折麦布.流动相:5mmol·L-1醋酸铵水溶液(A泵)和乙腈(B泵)组成,梯度洗脱.采用电喷雾去质子化三重四极杆二级串联质谱,多反应监测方式(MRM)测定样品浓度,依折麦布的监测离子对为m/z 408.5→m/z 270.8,内标为m/z 414.5→m/z 276.8.结果 依折麦布在0.020～20μg·L-1内线性关系良好,相关系数r=0.999 4(n=9).总的依折麦布在0.25～250μg·L-1内线性关系良好,相关系数r=0.999 8(n=9).最低定量线(LLOQ)、低、中、高浓度的依折麦布和总的依折麦布质控样品的日内、日间精密度均小于12%,方法回收率在97%～104%内.志愿者口服10 mg依折麦布后采血72 h,依折麦布和总的依折麦布的药动学参数分别为AUC0-inf(121.9±41.7)和(536.8±182.7)μg·h·L-1;AUC0-t(102.1±31.4)和(478.8 4±170.0)μg·h·L-1;ρmax (4.9±1.6)和(48.46±17.3)μg·L-1;tmax(5.2±6.4)和(1.5±0.9)h;t1/2(26.4±28.8)和(22.5±11.0)h;MRT(23.6±3.8)和(19.7±3.8)h.结论 该方法符合生物样品分析要求,可用于依折麦布血浆浓度的测定,依折麦布和总的依折麦布的药动学参数与文献相近.     

FLU-HPLC测定复方吴茱萸巴布膏中阿魏酸血药浓度及药动学研究

目的 建立大鼠血浆中阿魏酸的FLU-HPLC测定方法,研究大鼠透皮给药复方吴茱萸巴布膏的药物动力学.方法 色谱柱Venusil ASB-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-水-冰醋酸(35:65:0.6),流速0.8 mL·min-1,激发波长352nm,发散波长467 nm.采用固相萃取法去除血浆中杂质,荧光检测-高效液相色谱法测定了血样中阿魏酸的浓度,并用3P97软件进行了药动学参数的计算.结果 方法的最低检测浓度为1.5 μg·L-1(S/N=3),绝对回收率范围为87.82%～96.51%.透皮给药后,药-时曲线符合一室模型,主要药动学参数A 457.569 μg·L-1,Ka 0.146 h-1,Ke 0.090 h-1,ρmax 81.581μg·L-1,tmax8.639 h,Lag time 0.290 h.结论 与传统方法比较,本方法灵敏度高、准确,更适用于阿魏酸血药浓度的测定及药动学研究.     

Beagle犬血浆中齐墩果酸浓度的测定

目的 建立测定Beagle犬血浆中齐墩果酸的HPLC-MS测定法,以进行齐墩果酸滴丸的生物利用度和药动学研究.方法 采用HPLC-MS,以Hypersil GOLD(2.1 mm×150 mm,5 μm)色谱柱,流动相为20 mmoL·L-1醋酸铵-乙腈(24∶76),流速0.3 mL·min-1,检测波长为210 nm.结果 Beagle犬血浆内源性物质不干扰样品的测定,血浆中齐墩果酸浓度在3.88～240.00 μg·L-1内线性关系良好(r=0.999 3);最低检测浓度为3.88 μg·L-1;方法平均回收率大于85%;平均提取回收率大于80%;日内和日间RSD均小于10%.结论 所建立的测定方法准确可靠,符合生物样品分析要求.     

盐酸二氧丙嗪颗粒的人体生物等效性研究

目的 研究盐酸二氧丙嗪颗粒的人体相对生物利用度.方法 健康志愿者18名,随机双交叉单剂量口服盐酸二氧丙嗪实验和参比制剂,用高效液相色谱法测定血浆中盐酸二氧丙嗪的浓度.用DAS程序计算相对生物利用度和评价生物等效性.AUC0-60,AUC0-inf和ρmax经方差分析和双单侧;检验,tmax进行秩和检验.结果 单剂量口服实验制剂和参比制剂后血浆中的盐酸二氧丙嗪的ρmax分别为(30.548±5.373)和(29.670±4.970)μg·L-1;tmax分别为(2.833±1.225)和(2.593±1.798)h;AUC0-60分别为(436.722±95.713)和(433.668±83.881)μg·h·L-1;AUC0-inf分别为(455.990±105.688)和(448.718±84.741)μg·h·L-1.ρmax,AUC0-60,AUC0-inf的90%可信区间分别为98.0%～107.9%,95.7%～105.0%,95.1%～107.0%.结论 试验制刑对参比制剂的人体相对生物利用度为(101.3±15.2)%,试验制剂和参比制荆具有生物等效性.     

盐酸曲美他嗪片的人体生物等效性研究

目的 研究盐酸曲美他嗪片的人体相对生物利用度和生物等效性.方法 健康志愿者20名,随机双交叉单剂量国产盐酸曲美他嗪片(受试制剂)和进口盐酸曲美他嗪片(参比制剂),剂量分别为40 mg,剂间间隔为1周.分别于服药后24h内多点抽取静脉血;用高效液相色谱法测定血浆中曲美他嗪的浓度.用DAS药动学程序计算相对生物利用度并评价两种制剂生物等效性.AUC0-24,AUC0-inf和pmax经方差分析和双单侧t检验,tmax进行秩和检验.结果 单剂量口服盐酸曲美他嗪片受试和参比制剂后,血浆的曲美他嗪的pmax分别为(122.78±11.60)和(115.12±10.98) μg·L-1;tmax分别为(2.08±0.34)和(2.13±0.39)h;AUC0-24分别为(962.56±122.03)和(914.53±86.16)μg·h·L-1;AUC0-inf分别为(1 004.71±125.94)和(966.40±99.53)μg·h·L-1.AUC0-24的90%可信区间为100.4%～109.5%,AUC0-inf的90%可信区间为99.1%～108.4%,pmax的90%可信区间为102.6%～110.8%.结论 两制剂的人体相对生物利用度为(105.41±11.22)%,两者具有生物等效性.     

人血浆中溴吡斯的明浓度的RP-HPLC测定法

目的 建立RP-HPLC测定血浆中溴吡斯的明浓度的方法.方法 采用Sep-Pak柱固相萃取法提取溴吡斯的明;Waters2690系列高效液相色谱仪测定.色谱柱Nucleosil 100-5 CN柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);柱温:室温;检测波长:269 nm;流动相为乙腈-水(0.1%三乙胺水溶液加1 mol·L-1 Hac调节pH 3.2)梯度洗脱;外标法定量.结果 溴吡斯的明血药浓度的线性范围为2.0～50.0 μg·L-1;最低检测浓度2.0 μg·L-1;方法回收率为96.89%～111.51%;日内及日间精密度分别为2.79%～7.00%和2.33%～5.51%.结论 本法灵敏、准确,可用于溴吡斯的明人体药动学研究.     

阿莫西林对大鼠体内黄芩苷血药浓度的影响

目的 研究口服阿莫西林对中药有效成分黄芩苷血药浓度的影响.方法 用HPLC-ECD方法测定阿莫西林和黄芩苷合并给药组与黄芩苷单独给药组大鼠的血药浓度,比较两者的药动学参数.结果 阿莫西林和黄芩苷合并给药组大鼠ρmax(964.94±301.18)μg·L-1,AUC0～24 h(8 989.35±2 610.28)μg·h·L-1;黄芩苷单独给药组大鼠ρmax(2 645.62±601.42)μg·L-1,AUC0～24 h(28 952.90±5 731.42)μg·L-1.结论 两组药动学参数存在显著性差异(P＜0.05),口服阿莫西林严重影响黄芩苷的血药浓度,应提醒临床医生和患者注意.     

HPLC测定健康人体内齐多夫定的浓度及药动学研究

目的 建立HPLC-紫外检测方法测定健康人体中齐多夫定含量的方法,并用该法研究齐多夫定在健康人体内的药动学.方法 色谱柱为Symmetry C18(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为水-乙腈(75∶25),检测波长265 nm.以替硝唑为内标,血样以固相萃取法进行预处理.结果 血浆样品线性范围20～4 000 μg·L-1(r=0.999 9),血浆样品萃取回收率均在90%以上,日内、日间的RSD皆小于3%.应用该法研究12名健康受试者po 400 mg齐多夫定胶囊后的药动学,其体内过程符合二室模型,其药动学参数为:tmax为(0.73±0.13)h,ρmax为(2 234.50±853.87)μg·L-1,用梯形法计算所得的AUC0-t为(3 358.75±572.97)μg·h·L-1,t1/2β为(1.43±0.49)h.结论 此方法准确,灵敏,适于药物分析,其药动学参数为临床合理用药提供理论依据.     

高效液相-串联质谱测定血浆中依西美坦的浓度

目的 建立高效液相色谱-串联质谱的方法测定人血浆内的依西美坦浓度,对两种制剂进行人体生物等效性研究.方法 采用Lichrospher C18(4.6 mm×150 mm,5 μm)色谱柱;柱温25℃;流动相为甲醇-水(含0.05%甲酸)(80∶20);流速为1.0mL·min-1;通过液相串联质谱,大气压化学电离(APCI),以选择反应监测(SRM)方式进行检测;检测离子为依西美坦m/z296.8[M+H]+→121[M+H]+,非那雄胺(内标)m/z373.2[M+H]+→305.2[M+H]+.结果 依西美坦的线性范围为0.099 4～39.76 μg·L-1,依西美坦受试制剂和参比制剂的t1/2分别为(13.37±4.62)和(15.65±5.89)h,ρmax分别为(19.97±8.51)和(20.04±9.16)μg·L-1,tmax分别为(0.95±0.39)和(0.90±0.29)h,AUC0-72分别为(95.64±26.87)和(96.73±25.97)μg·h·L-1,AUC0-∞分别为(100.47±28.76)和(114.59±62.32)μg·h·L.结论 该方法简便、灵敏度高,两制剂生物等效.     

马来酸依那普利片的人体生物等效性研究

目的 用HPLC-MS测定健康受试者口服马来酸依那普利制剂后的血药浓度,估算受试制剂和参比制剂的药动学参数,评价两种制剂的生物等效性和相对生物利用度.方法 采用随机二交叉设计试验,20例男性健康志愿受试者,单剂量口服受试制剂和参比制剂的马来酸依那普利片.以高效液相色谱-串联质谱法测定血浆中依那普利和依那普利拉的浓度.采用SPSS及BAPP2.2软件处理计算主要药动学参数.结果 受试制剂和参比制剂血浆中马来酸依那普利的t1/2分别为(1.33±0.22)和(1.25±0.37)h;ρmax分别为(238.59±55.40)和(230.61±78.29) μg·L-1,tmax分别为(0.70±0.20)和(0.80±0.20)h,AUC0-8h分别为(339.03±70.66)和(373.23±108.83) μg·h·L-1,AUC0-∞分别为(343.51±71.15)和(378.36±107.35)μg·h·L-1.依那普利拉的t1/2分别为(6.26±0.63)和(5.72±0.54)h;ρmax分别为(83.75±25.91)和(99.13±29.61)μg·L-1,tmax分别为(3.80±0.60)和(3.40±0.70)h,AUC0-36h分别为(812.02±181.88)和(803.35±199.50)μg·h·L-1,AUC0-∞分别为(832.99±180.85)和(817.36±201.78)μg·h·L-1,以依那普利和依那普利拉计算的人体相对生物利用度分别为(90.84±39.6)%和(102.8±31.3)%.结论 两种制剂在健康人体内具有生物等效性.     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中厄贝沙坦

目的 建立快速、灵敏的液相色谱-串联质谱法测定人血浆中厄贝沙坦的浓度.方法 50μL血浆样品经乙腈沉淀蛋白处理后,以乙腈-水-甲酸(90:10:0.25)为流动相,Zorbax SB C18柱分离,通过电喷雾离子源四极杆串联质谱,以选择反应监测(SRM)方式进行检测.结果 测定血浆中厄贝沙坦方法的线性范围为2.0～5 000 μg·L-1定量下限为2.0 μg·L-1.日内、日间精密度(RSD)均小于8.3%,准确度(RE)在±4.1%以内.厄贝沙坦和内标替米沙坦的回收率分别为90.9%和90.4%;每个样品测试时间仅为3.6 min.应用此法研究了18名健康受试者单剂量po 150 mg厄贝沙坦片后的药动学特点.结论 该法选择性强,灵敏度高,适用于厄贝沙坦的临床药动学研究.     

HPLC-MS研究盐酸恩丹西酮缓释胶囊人体药动学及生物等效性

目的 首次建立人血浆中盐酸恩丹西酮浓度的HPLC-MS分析方法,用以测定健康受试者口服盐酸恩丹西酮缓释胶囊后的血药浓度,估算受试制剂和参比制剂的药动学参数,评价两种制剂的生物等效性和相对生物利用度.方法 血浆中加入内标米氮平后,乙酸乙酯提取,HPLC-MS分离、分析.色谱系统:ODS柱(4.6 mm×150 mm,5μm),甲醇-乙腈-醋酸铵溶液(0.01 mol·L-1)(35:30:35)为流动相,流速1.0 mL·min-1,柱温35 ℃.质谱检测方式:SIM.结果 盐酸恩丹西酮的线性范围为0.1～80 μg·L-1(r=0.999 9),最低检测质量浓度达0.1 μg·L-1,提取回收率≥85%.口服单剂量和多剂量的盐酸恩丹西酮缓释胶囊后的相对生物利用度分别为(94.1±15.8)%和(94.8±14.3)%.结论 本法简便,准确,灵敏度高.统计学结果表明,口服单剂量和多剂量的缓释胶囊与普通参比胶囊相比,达峰浓度低,达峰时间延长,稳态的波动度小,缓释特征明显.经方差分析和双单侧t检验表明,缓释胶囊和普通参比胶囊生物等效.     

氯雷他定口腔崩解片人体生物等效性研究

目的 对国产氯雷他定口腔崩解片和进口普通片进行生物等效性研究.方法 20名健康男性志愿者按2×2交叉试验方案设计,分别口服受试制剂和参比制剂各20 mg,并采集36 h内动态血标本;采用HPLC/MS测定血浆中氯雷他定浓度,计算药动学参数,并判定两种制剂是否生物等效.结果 受试制剂和参比制剂的主要药动学参数ρmax分别为(19.57±11.09)和(18.97±10.76)μg·L-1,tmax分别为(0.8±0.2)和(0.8±0.2)h,AUC0-36分别为(44.9±17.6)和(42.9±14.6)μg·h·L-1,AUC0-∞分别为(52.6±24.2)和(50.2±19.6)μg·h·L-1,t1/2(ke)分别为(13.1±6.3)和(13.9±6.8)h,两制剂主要药动学参数经对数转换后进行方差分析及双单侧t检验,并计算90%置信区间,表明两种制剂生物等效,受试制剂的人体生物利用度为(103.2±9.0)%.结论 两种制剂生物等效.     

法莫替丁口腔崩解片生物等效性研究

目的 考察法莫替丁口腔崩解片(受试制剂)和法莫替丁片(参比制剂)在健康受试者的生物等效性.方法 采用随机分组、自身交叉对照设计,清洗期7 d.20名男性成年健康受试者空腹服药20 mg,在服药前(0 h)、服药后0.5,1,2,3,4,6,8,10,12及24 h采血6 mL,以固相提取-高效液相色谱法测定血浆药物浓度.以非房室模型计算药动学参数AUC0-t,ρmax,tmax,t1/2和CL/F,通过多因素方差分析、双单侧t检验判断两种制剂的生物等效性.结果 血浆药物浓度测定方法灵敏、准确、精密.20名健康受试者服用受试制剂和参比制剂后的AUCo-t分别为(480.3±144.8)和(470.9±164.7)μg·h·L-1,ρmax分别为(83.1±26.9)和(87.2±35.3)μg·L-1,tmax分别为(2.6±1.3)和(2.7±0.9)h,t1/2分别为(2.8±0.3)和(2.8±0.4)h,CL/F分别为(42.1±13.2)和(43.5±13.4)L·h-1.法莫替丁口腔崩解片相对法莫替丁片的生物利用度为103.0%(90%置信区间为86.7%～115.3%).统计学分析表明,两种制剂生物等效.结论法莫替丁口腔崩解片与法莫替丁片具有生物等效性.     

HPLC-MS/ESI测定人血浆中阿立哌唑的浓度

目的 建立测定人血浆中阿立哌唑的HPLC-MS,并用于研究阿立哌唑在精神分裂症患者体内的药动学.方法 血浆样品中加入内标艾司唑仑,用叔丁基甲醚萃取.色谱柱为Hypersil GOLD(2.1 mm×150 mm,5 μm),流动相为乙腈-30 mmol·L-1醋酸铵缓冲液-甲酸(42∶58∶0.1),流速0.35 mL·min-1.采用电喷雾电离源正源(ESI+),选择离子检测方式,用于定量分析的检测离子为m/z 448,450(阿立哌唑)和m/z 295(内标).结果 阿立哌唑在19.90～1 119.60 μg·L-1内线性关系良好(r=0.999 9),最低定量质量浓度为1.00 μg·L-1(S/N=10),方法回收率在97.2%～103.5%之间,日内与日间RSD均小于8.0%(n=5).结论 该方法灵敏度高,结果准确,适用于治疗剂量阿立哌唑体内药动学的研究.     

西嗪伪麻缓释片人体药动学研究

目的 建立人血浆中西替利嗪和伪麻黄碱的LC-ESI-MS测定法,以研究健康志愿者口服西嗪伪麻缓释片后西替利嗪和伪麻黄碱的药动学过程.方法 采用随机双交叉实验设计,12名健康志愿者分别空腹服用和进食后服用西嗪伪麻缓释片1片(每片含盐酸西替利嗪5 mg、盐酸伪麻黄碱120 mg);连续口服西嗪伪麻缓释片7 d,每日2片,采用LC-ESI-MS测定西替利嗪和伪麻黄碱的血药浓度,估算药动学参数.结果 空腹服用和进食后服用西嗪伪麻缓释片1片后西替利嗪的t1/2为(7.6±1.0)和(7.4±0.7)h,tmax为(0.9±0.5)和(2.6±1.2)h,ρmax为(196.3±30.1)和(154.4±28.2)μg·L-1,AUC0-36为(1.51±0.25)和(1.52±0.28)mg·h·L-1;连续口服西嗪伪麻缓释片后西替利嗪的t1/2为(7.5±0.8)h,tmax为(1.0±0.6)h,ρss-max为(246.1±38.2)μg·L-1,ρss-min为(81.3±26.1)μg·L-1,ρss-av为(126.0±24.0)μg·L-1,DF为(1.34±0.31),R为(1.39±0.18),AUCss为(1.51±0.29)mg·h·L-1.空腹服用和进食后服用西嗪伪麻缓释片1片后伪麻黄碱的t1/2为(5.2±0.4)和(5.3±0.4)h,tmax为(4.4±0.9)和(4.6±0.9)h,ρmax为(330.2±68.3)和(341.8±61.6)μg·L-1,AUC0-36为(3.60±0.89)和(3.61±0.98)mg·h·L-1;连续口服西嗪伪麻缓释片后伪麻黄碱的t1/2为(5.3±0.6)h,tmax为(4.3±0.4)h,ρss-max为(456.2±142.6)μg·L-1,ρss-min为(207.8±99.4)μg·L-1,ρss-av为(341.1±118.9)μg·L-1,DF为(0.76±0.17),R为(1.60±0.40),AUCss为(4.09±1.42)mg·h·L-1.结论 所建立的人血浆中西替利嗪和伪麻黄碱的LC-ESI-MS测定方法灵敏、准确、简便.和空腹服药相比较,饮食影响西嗪伪麻缓释片中的西替利嗪的达峰浓度和达峰时间,对伪麻黄碱的药动学基本无影响.西替利嗪和伪麻黄碱在健康受试者体内不存在蓄积现象.伪麻黄碱具有缓释特征.