天南星多糖联合顺铂对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、凋亡及上皮间质转化的影响

目的:探讨天南星多糖联合顺铂对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、凋亡及上皮间质转化(EMT)的影响。方法:将MDA-MB-231细胞分为对照组、天南星多糖(50μg/m L)组、顺铂(5μg/m L)组及联合给药组(天南星多糖+顺铂);MTT法检测细胞增殖,Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,Real time PCR法检测EMT相关标记分子(Vimentin、N-cadherin及E-cadherin)mRNA表达,ELISA法检测细胞上清液中纤连蛋白(FN)表达,Western blotting检测Akt及其磷酸化形式(p-Akt)蛋白的表达。结果:天南星多糖组、顺铂组和天南星多糖+顺铂组均可抑制MDA-MB-231细胞的增殖,其作用呈时效关系;各给药组细胞早、晚期凋亡率及E-cadherin mRNA水平值高于对照组,而Vimentin、N-cadherin mRNA、FN水平及p-Akt/Akt显著低于对照组(P0.05);与天南星多糖组和顺铂组比较,天南星多糖+顺铂组的早、晚期凋亡率及E-cadherin mRNA水平显著升高,Vimentin、N-cadherin mRNA、FN表达水平及p-Akt/Akt显著降低(P0.05)。结论:天南星多糖和顺铂对乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖、凋亡及上皮间质转化均有一定的作用,可抑制PI3K/Akt信号通路的激活,且二者联合作用时效果更好。     

启膈散协同顺铂抑制食管癌EC9706细胞生长与miR-21的关系

目的:观察启膈散含药血清联合顺铂对人食管癌细胞EC9706的增殖效应,从miR-21探讨其作用机制。方法:制备启膈散含药血清,MTT法筛选其最佳作用浓度;PCR检测miR-21、PDCD4 mRNA和PTEN mRNA的表达情况;Western-blot检测蛋白PDCD4、PTEN的表达水平。结果:5%含药血清的浓度作用效果最为显著(q>1)。与5%对照血清组比较,除5%含药血清PDCD、PTEN mRNA和0.5μg/m L顺铂组的PTEN mRNA表达量下降外,其余各组的miR-21、PDCD4 mRNA和PTEN mRNA表达均升高(P<0.05);顺铂联合含药血清后,两组miR-21表达和联合高浓度顺铂组的PDCD4 mRNA均比其单用下降(P<0.05),而两组PTEN mRNA和联合低浓度组的PDCD4 mRNA的表达则升高(P<0.05)。与对照组相比,各组PDCD4蛋白表达量升高P<0.05;高浓度顺铂联合含药血清组比单用高顺铂组PDCD4蛋白表达量升高(P<0.05),低浓度顺铂的两组变化不明显(P>0.05);两个浓度顺铂联合含药血清时PTEN的表达量均高于单独使用顺铂(P<0.05)。结论:启膈散能够增加EC9706对顺铂的敏感性,可能是通过miR-21与其调控的下游基因PDCD4与PTEN共同参与完成。     

黄芪、莪术单药及配伍通过影响上皮间质转化抑制Lewis荷瘤小鼠肺转移的研究

目的通过观察黄芪、莪术及其配伍应用对Lewis荷瘤小鼠肺转移灶数目及肿瘤上皮间质转化的影响,研究其基于上皮间质转化机制抑制肿瘤转移的作用,并分析黄芪、莪术配伍应用的意义。方法将50只C57 Lewis荷瘤小鼠模型随机分为模型组、顺铂组、黄芪单药组、莪术单药组及黄芪-莪术配伍组,接种后次日开始连续15 d,分别给予相应药物干预,处死后解剖取出肺脏,解剖显微镜下观察双肺表面超过2 mm结节数目;剥离腋下种植瘤体,EnVision法检测肿瘤组织中E-cad、MMP-2、MMP-9表达。结果顺铂组和配伍组肺转移结节数量少于模型组(均P0.05),单药组肺转移灶数量虽均少于模型组但差异无统计学意义(P0.05);各中药组均不及顺铂组(P0.05),配伍组少于黄芪、莪术单药组,但差异无统计学意义(P0.05)。E-cad表达,与模型组相比,顺铂组、配伍组升高(均P0.05),单药组与模型组比差异均无统计学意义(P0.05);各中药组低于顺铂组(均P0.05),配伍组高于莪术组(P0.05),与黄芪组差异无统计学意义(P0.05)。MMP-2表达,各组差异无统计学意义(P0.05)。MMP-9表达,顺铂组、配伍组、莪术单药组低于模型组(均P0.05),黄芪组与模型组比较差异无统计学意义(P0.05);各中药组高于顺铂组(均P0.05),配伍组低于黄芪组(P0.05),与莪术单药组接近,差异无统计学意义(P0.05)。结论黄芪-莪术配伍抑制肿瘤转移的效果优于单用黄芪、莪术,其作用机制为提高E-cad蛋白表达、降低MMP-9表达;黄芪、莪术配伍使用在提高E-cad表达上优于单用黄芪、莪术,在降低MMP-9表达上与莪术相近、优于单用黄芪。     

复方苦参注射液对人子宫内膜癌细胞HEC-1B雌激素受体表达的影响

目的探讨复方苦参注射液对人子宫内膜癌细胞（HEC-1B）雌激素受体（ER）亚型ER-α36、ERα-66的影响,探讨其作用机制。方法 HEC-1B细胞给予高、中、低3个浓度复方苦参注射液、苦参注射液、白土苓注射液、顺铂注射液处理,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察各给药组对HEC-1B细胞增殖的影响。HEC-1B细胞给予中浓度复方苦参注射液、苦参注射液、白土苓注射液、顺铂注射液处理,采用反转录聚合酶链反应法（RT-PCR）观察不同给药组对HEC-1B细胞雌激素受体ER-α36、ERα-66表达水平的影响。结果与空白对照组比较,高浓度复方苦参注射液、苦参注射液均显著抑制HEC-1B细胞增殖（P〈0.05）。复方苦参注射液、苦参注射液、顺铂注射液作用于HEC-1B细胞48 h后,与空白对照组比较,细胞中ER-α36 mRNA表达水平均明显降低（P〈0.05）;除白土苓组外,其他各给药组ERα-66mRNA表达水平亦明显降低（P〈0.05）。结论复方苦参注射液抑制HEC-1B细胞增殖的作用机制可能与抑制细胞雌激素受体ER-α36、ER-α66的基因表达有关。     

黄芪、莪术联合顺铂对人肝癌裸鼠CD147、iNOS表达的影响

目的探讨黄芪、莪术配伍联合顺铂(DDP)对人肝癌裸鼠CD147、iNOS表达的影响。方法构建人肝癌裸鼠原位移植瘤模型。成瘤后,将其随机分为8组:模型对照组、阳性对照组(DDP)、黄芪莪术配伍高剂量组(H)、黄芪莪术配伍中剂量组(M)、黄芪莪术配伍低剂量组(L)、黄芪莪术配伍高剂量+顺铂组(H+DDP)、黄芪莪术配伍中剂量+顺铂组(M+DDP)、黄芪莪术配伍低剂量+顺铂组(L+DDP),每组8只,给药15d,免疫组织化学染色及Real-time RT-PCR检测肿瘤组织中CD147、iNOS蛋白及mRNA的表达。结果与模型对照组相比,H、M、H+DDP、M+DDP、L+DDP组CD147、iNOS蛋白及mRNA表达均显著下降(P0.05或P0.01),并与剂量呈一定的正相关性。与DDP组相比,H+DDP组CD147、iNOS蛋白表达降低(P0.05或P0.01)。结论黄芪、莪术配伍可能是通过下调CD147、iNOS蛋白及mRNA表达对肿瘤新生血管生成产生影响。     

芦荟大黄素联用顺铂对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨芦荟大黄素(AE)单用或联用顺铂(CP)对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响。方法:以MDA-MB-231细胞为研究对象,用5,10,20,30,40,50μmol·L-1AE,2,4,8,12,24,36μmol·L-1CP,或不同浓度AE联用CP处理乳腺癌MDA-MB-231细胞48 h,另设空白组,MTT法检测细胞增殖;Annexin V FITC/PI双染和流式细胞术检测细胞凋亡与细胞周期;Western blot分析Bcl-2相关X蛋白(Bax),B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-x L蛋白表达的变化。结果:与空白组比较,AE单用显著抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖,半数抑制浓度(IC50)为22.21μmol·L-1,与CP联用时IC50为9.51μmol·L-1。联用指数CI501,表明两药物有协同作用;AE单用使细胞周期阻滞在G1期,并诱导细胞凋亡,联用CP则增强阻滞,凋亡率明显增加;两药联用显著抑制Bcl-2和Bcl-x L的表达,并上调Bax的表达,与空白组比较均具有明显的统计学差异(P0.05,P0.01)。结论:芦荟大黄素抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,使细胞周期阻滞在G1期,并通过上调促凋亡蛋白和下调抗凋亡蛋白,诱导凋亡。与顺铂联用能增强其促凋亡作用,两药存在协同作用。     

山慈菇-蜂房药对抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞体外侵袭转移的机理研究

目的 研究山慈菇-蜂房药对对人乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响及其作用机制。方法 噻唑蓝（MTT）法检测山慈菇-蜂房药对大鼠含药 血清对细胞活力的影响,Transwell小室法测定其侵袭力,实时荧光定量PCR（RT-PCR）法检测细胞基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）基 因的表达。结果 山慈菇-蜂房药对组MDA-MB-231细胞体外生长杀伤率为35.86 %;能明显抑制MDA-MB-231 细胞的侵袭能力（P＜ 0.01）,其抑制率为34.8 %;MMP-9 mRNA明 显降低,TIMP-1 mRNA明显升高,MMP-9 mRNA/ TIMP-1 mRNA值显著降低（P＜ 0.05,P＜ 0.01）。结论 山慈菇-蜂房药对能够抑制MDA-MB-231 细胞侵袭能力,其机制可能与 下调MMP-9mRNA表达,上调TIMP-1mRNA的表达,降低MMP-9 mRNA/ TIMP-1 mRNA比值有关。     

启膈散与顺铂对食管癌细胞EC9706低氧下生长抑制及其miR-21,PDCD4和PTEN表达的影响

目的:观察低氧下启膈散和顺铂抑制食管癌细胞增殖的协同效应,从miR-21及其靶基因角度探讨其机制。方法:制备含药血清,噻唑蓝(MTT)比色法检测启膈散和顺铂单用或联合应用对食管癌细胞EC9706增殖的影响,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测启膈散和顺铂单用或两者联合应用对食管癌细胞miR-21,程序死亡蛋白4(PDCD4),磷酸酶和张力蛋白类似物(PTEN)mRNA表达的影响,免疫印迹法(Western blot)检测PDCD4,PTEN蛋白表达。结果:启膈散在浓度为8%,10%与1 mg·L-1顺铂合用具有协同作用,其两药相互作用系数(CDI)分别为0.90,0.94。顺铂高浓度组,联合高、低浓度组miRNA-21表达量明显低于空白组(P0.05);联合高、低浓度组miRNA-21表达量显著低于同浓度顺铂组(P0.01),且联合高浓度组低于联合低浓度组(P0.05)。顺铂高浓度、启膈散组PDCD4 mRNA表达量明显低于空白组(P0.05),而联合高、低浓度组PDCD4,PTEN mRNA表达量明显高于空白组(P0.05);联合高、低浓度组PDCD4,PTEN mRNA明显高于同浓度顺铂组(P0.01),且联合高浓度组PTEN mRNA表达高于联合低浓度组(P0.01)。与空白组比较,联合高、低浓度组PTEN蛋白表达明显升高(P0.05),且联合高、低浓度组PTEN蛋白显著高于同浓度顺铂组(P0.01);顺铂高、低浓度组,联合高、低浓度组PDCD4明显高于空白组(P0.05),联合高浓度组明显高于同浓度顺铂组和联合低浓度组(P0.05,P0.01)。结论:启膈散含药血清和顺铂在抑制食管癌细胞EC9706增殖方面具有协同作用,其机制可能与通过抑制miR-21表达从而升高PDCD4和PTEN基因表达相关。     

黄芪、莪术联合顺铂对人肝癌裸鼠TF、HGF、FVⅡ表达的影响

目的探讨黄芪、莪术配伍联合顺铂(DDP)影响肿瘤新生血管生成的作用机制。方法构建人肝癌裸鼠原位移植瘤模型。成瘤后,将其随机分为8组:模型对照组、阳性对照组(DDP)、黄芪莪术配伍高剂量组(H)、黄芪莪术配伍中剂量组(M)、黄芪莪术配伍低剂量组(L)、黄芪莪术配伍高剂量+顺铂组(H+DDP)、黄芪莪术配伍中剂量+顺铂组(M+DDP)、黄芪莪术配伍低剂量+顺铂组(L+DDP),每组8只,给药15 d,Western Blot及Real-time RT-PCR检测肿瘤组织中TF、HGF、FVⅡ蛋白及mRNA的表达。结果与模型对照组相比,H、M、H+DDP、M+DDP组TF、HGF、FVⅡ蛋白及mRNA表达均显著下降(P<0.01),并与剂量有一定的正相关性。与DDP组相比,H+DDP组TF、HGF、FVⅡ蛋白及mRNA表达降低(P<0.01)。结论黄芪、莪术配伍可能是通过下调TF、HGF、FVⅡ蛋白及mRNA表达对肿瘤新生血管生成产生影响。     

芪玉三龙方干扰miRNA21/PTEN/PI3K信号轴抑制LLC肺癌细胞增殖

目的：探讨芪玉三龙方抑制LLC肺癌细胞增殖的分子机制。方法：LLC肺癌细胞常规传代培养,分别设置为LLC组、空白血清组、siRNA组、含药血清组。MTT法筛选芪玉三龙方最佳作用浓度和作用时间。RT-qPCR、Western Blot及免疫荧光法检测miRNA21/PTEN/PI3K信号轴相关分子表达。结果：芪玉三龙方含药血清呈浓度依赖性抑制LLC肺癌细胞活性。与LLC组比较,siRNA组和含药血清组miRNA21 mRNA表达显著降低（P<0.01）,PTEN蛋白和mRNA表达显著上升（P<0.01）,p-AKT、p-mTOR、eIF4E、p70S6K蛋白表达显著降低（P<0.05,P<0.01）,含药血清组PI3K蛋白表达显著降低（P<0.05）。结论：芪玉三龙方可抑制miRNA21的转录,使PTEN表达有所上升,下调PI3K/AKT/mTOR信号轴关键分子表达,从而温和抑制LLC肺癌细胞增殖。     

黄芪配伍莪术对小鼠结肠癌细胞CT26黏附和迁移能力的影响

目的探讨黄芪配伍莪术在体外对小鼠结肠癌细胞CT26黏附和迁移能力的影响及作用机制。方法体外培养CT26细胞,设对照组,分别以0.00625、0.0125、0.025、0.05、0.1、0.2g/ml的黄芪、莪术药物浓度处理24h和48h后,采用CCK-8法检测黄芪配伍莪术对CT26细胞存活率的影响以选择合适的给药浓度。采用划痕实验检测黄芪配伍莪术对CT26细胞迁移能力的影响,采用细胞黏附实验检测黄芪配伍莪术对CT26细胞与细胞及与细胞外基质间黏附能力的影响。药物处理24h后采用Western blot法和RT-PCR法检测CT26细胞中黏附相关因子E-钙黏蛋白(E-cadherin)、抗癌1号蛋白(KAI1)、抑癌基因张力蛋白同源10号染色体缺失的磷酸酶基因(PTEN)、基质蛋白酶诱导因子(CD147)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的蛋白和mRNA表达。结果选择0.0125、0.025、0.05g/ml浓度进行后续实验。与对照组比较,24h时黄芪配伍莪术组0.025、0.05g/ml浓度及48h时0.0125、0.025、0.05g/ml浓度CT26细胞的迁移率均明显降低;与黄芪配伍莪术组0.0125g/ml浓度比较,24、48h 0.025、0.05g/ml浓度CT26细胞迁移率均明显降低;与黄芪配伍莪术组0.025g/ml浓度比较,24、48h 0.05g/ml浓度CT26细胞迁移率均明显降低;除黄芪配伍莪术组0.05g/ml浓度外,各组48h CT26细胞迁移率较本组24h均明显增加(P0.05或P0.01)。与对照组比较,黄芪配伍莪术组0.0125、0.025、0.05g/ml浓度与细胞外基质黏附率均明显下降;与黄芪配伍莪术组0.0125g/ml浓度比较,0.025、0.05g/ml浓度与细胞黏附率明显升高,0.05g/ml浓度与细胞外基质黏附率明显下降;与黄芪配伍莪术组0.025g/ml浓度比较,0.05g/ml浓度与细胞黏附率明显升高(P0.05或P0.01)。与对照组比较,黄芪配伍莪术组0.025、0.05g/ml浓度CT26细胞的E-cadherin、KAI1、PTEN蛋白及mRNA表达水平显著升高,CD147蛋白表达显著降低;与黄芪配伍莪术组0.0125g/ml浓度比较,0.025g/ml浓度E-cadherin蛋白及mRNA表达明显升高,0.05g/ml浓度E-cadherin、KAI1、PTEN蛋白及mRNA表达显著升高,CD147蛋白及mRNA表达下降;与黄芪配伍莪术组0.025g/ml浓度比较,0.05g/ml浓度的KAI1、PTEN蛋白及mRNA表达明显升高,CD147蛋白及mRNA表达下降(P0.05或P0.01)。结论黄芪配伍莪术可以增强CT26细胞间黏附,减弱与细胞外基质黏附能力,并抑制其迁移能力,其作用机制可能与促进同源性黏附相关因子E-cadherin、PTEN、KAI1表达,抑制异源性黏附相关因子CD147、MMP-9、HIF-1α表达有关。     

炻乳汤含药血清对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及迁移的影响

目的探讨炻乳汤合药血清对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及迁移的影响。方法以高、中、低剂量炻乳汤含药血清加入体外培养的三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞。MTT法检测其对MDA-MB-231细胞增殖的影响,Transwell细胞迁移实验观察其对MDA-MB-231细胞迁移的影响。结幂低剂量组、中剂量组与空白对照组对比,增值率下降;高剂量组72h有使肿瘤细胞凋亡的作用（P〈0.01）;三组均明显抑制细胞迁移（P〈0．01）。结论炻乳汤有抑制MDA-MB-231细胞增殖及迁移作用。     

从PTEN-PI3K-AKT信号通路探讨补肾疏肝方含药血清抑制人肺腺癌A549细胞增殖和转移的机制

目的:通过研究补肾疏肝方含药血清对PTEN-PI3K-AKT信号通路的影响,探讨补肾疏肝方抑制肺腺癌细胞增殖和转移作用机制。方法:大鼠60只,随机分为6组,每组10只,分别为生理盐水组(NS为2 m L),顺铂组(8 mg·kg-1),补肾疏肝方低剂量组(15 g·kg-1),补肾疏肝方高剂量组(30 g·kg-1),联合顺铂低剂量组(15 g·kg-1+8 mg·kg-1),联合顺铂高剂量组(30 g·kg-1+8 mg·kg-1),每只大鼠ig,2 m L,每天2次,共5 d。制备药物血清:经药物作用后的大鼠,经腹主动取血,分离血清,灭活,过滤,冻存。MTT法检测补肾疏肝方含药血清对A549细胞增殖的影响。三维细胞培养观察并计数各组细胞形成管状结构数量。RT-PCR检测含药血清对A549肺腺癌细胞AKT-1,Cyclin D1,NF-κB mRNA水平的表达,Western blot检测含药血清对PTEN,p-PI3K,p-AKT蛋白水平的表达。结果:低剂量补肾疏肝方含药血清对A549细胞有抑制作用,低剂量中药与顺铂联用有协同作用且以时间依赖方式,即补肾疏肝方低剂量组与联合顺铂低剂量组在48,72,96 h的抑制率均高于其他组(P0.05,P0.01);补肾疏肝方低剂量组与联合顺铂低剂量组拟态血管数目均低于其他组(P0.05,P0.01);补肾疏肝方低剂量组与联合顺铂低剂量组PTEN蛋白表达均高于其他组(P0.05,P0.01),补肾疏肝方低剂量组与联合顺铂低剂量组p-PI3K,p-AKT蛋白,Akt1,Cyclin D1,NF-κB的mRNA表达均低于其他组(P0.05,P0.01)。结论:补肾疏肝方含药血清可通过PTEN-PI3K-AKT信号通路抑制人肺腺癌A549细胞增殖和转移。     

西黄丸含药血清对三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、迁移的影响

目的:研究西黄丸含药血清对三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、迁移以及对环氧化酶2(COX-2)转录的影响,以期探讨西黄丸对三阴性乳腺癌细胞的作用。方法:大鼠灌胃给药制备西黄丸含药血清,实验设置大鼠空白血清组和西黄丸含药血清组,以含药血清干预三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,细胞划痕实验检测细胞迁移,RT-PCR法检测COX-2、TNF-αmRNA表达。结果:西黄丸含药血清可以抑制MDA-MB-231细胞增殖,可以促进MDA-MB-231细胞凋亡,并且西黄丸含药血清可以降低MDA-MB-231细胞划痕愈合率,可以降低在炎性环境下MDA-MB-231细胞中COX-2 mRNA表达(P<0.05)。结论:西黄丸含药血清可以有效地抑制MDA-MB-231细胞增殖,促进其细胞凋亡,可能抑制细胞迁移,并且可以减少炎性因子的转录。     

三黄煎剂调节Aurora激酶A提高表柔比星对乳腺癌MDA-MB-231细胞药效的研究

目的:探讨三黄煎剂对表柔比星作用于MDA-MB-231细胞药效的影响及相关机制。方法:采用CCK-8法检测三黄煎剂对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的影响。RT-PCR法、Western Blot法检测三黄煎剂对MDA-MB-231细胞Aurora A、p53的mRNA及蛋白表达水平的影响。siRNA沉默MDA-MB-231细胞中Aurora A,并用CCK-8法检测对三黄煎剂作用于MDA-MB-231细胞增殖抑制的影响。CCK-8法、Annexin V-FITC/PI法检测三黄煎剂联合表柔比星对MDA-MB-231细胞增殖抑制率、凋亡率的影响。Western Blot法检测三黄煎剂联合表柔比星对MDA-MB-231细胞凋亡相关蛋白及Aurora A表达的影响。结果:三黄煎剂对MDA-MB-231细胞增殖抑制率呈浓度梯度依赖增长(P0.05),给药48 h疗效好于24 h(P0.05),与给药72 h无统计学差异(P0.05)。三黄煎剂能够调节MDAMB-231细胞Aurora A、p53的mRNA及蛋白的表达。siRNA沉默Aurora A后,将三黄煎剂对MDA-MB-231细胞增殖抑制率下调了34.6%(51.5%到33.7%)。三黄煎剂与表柔比星联用能够增加表柔比星对MDA-MB-231细胞的增殖抑制率及凋亡率,调节凋亡相关蛋白c-PARP,c-Caspase 3,Bcl-2,Bax及Aurora A的表达水平。结论:三黄煎剂能够增加MDA-MB-231细胞对化疗药物表柔比星的敏感性,可能与三黄煎剂对Aurora激酶A的抑制有关。     

鼠尾草酚通过PPARγ信号通路调节膀胱癌T24 细胞增殖及侵袭机制研究

目的：探讨鼠尾草酚调节膀胱癌T24 细胞增殖及侵袭的分子机制。方法：将膀胱癌T24 细胞分为T24 细胞组、5-氟尿嘧啶组及鼠尾草酚低、高剂量组（低、高剂量组）。5-氟尿嘧啶组加入50.0 μg/mL 的5-氟尿嘧啶,低、高剂量组分别加入50.0 μg/mL、100.0 μg/mL 的鼠尾草酚,培养72 h。测定各组细胞增殖情况、克隆形成数目、侵袭迁移水平、凋亡水平及过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）、β-连环蛋白（β-catenin） mRNA 与蛋白水平。结果：与T24 细胞组比较,其余各组细胞凋亡率、PPARγ mRNA 及蛋白表达水平升高（P＜0.05）,OD 值、存活率、细胞克隆形成数目、穿膜数、β-catenin mRNA 及蛋白表达水平降低（P＜0.05）。与5-氟尿嘧啶组比较,低剂量组细胞凋亡率、PPARγ mRNA 及蛋白表达水平降低（P＜0.05）,OD 值、存活率、细胞克隆形成数目、穿膜数、β-catenin mRNA 及蛋白表达水平升高（P＜0.05）;高剂量组细胞凋亡率、PPARγ mRNA及蛋白表达水平升高（P＜0.05）,OD 值、存活率、细胞克隆形成数目、穿膜数、β-catenin mRNA 及蛋白表达水平降低（P＜0.05）。与低剂量组比较,鼠尾草酚高剂量组细胞凋亡率、PPARγ mRNA 及蛋白表达水平升高（P＜0.05）,OD 值、存活率、细胞克隆形成数目、穿膜数、β-catenin mRNA 及蛋白表达水平降低（P＜0.05）。结论：鼠尾草酚能抑制膀胱癌T24 细胞增殖、侵袭迁移,促进膀胱癌T24 细胞凋亡;其机制可能与鼠尾草酚能促进PPARγ mRNA 及蛋白表达,激活PPARγ 信号通路进而抑制β-catenin mRNA 和蛋白表达有关。     

黄芪多糖可能通过调控细胞自噬提高宫颈癌HeLa细胞对顺铂的敏感性北大核心CSCD

该研究旨在探讨黄芪多糖可能通过调节细胞自噬提高宫颈癌HeLa细胞对顺铂的化疗敏感性,并探讨其作用的可能机制。该实验将HeLa细胞分为对照组、顺铂组、黄芪多糖组和黄芪多糖联合顺铂组,分别运用MTr法检测各实验组宫颈癌HeLa细胞增殖抑制情况;流式细胞术检测各实验组HeLa细胞的凋亡及周期情况;RT-PCR法检测自噬相关蛋白beclinl,LC3II,1062的mRNA表达情况;Western blot法检测自噬相关蛋白beclinl,LC3Ⅱ,LC3Ⅰ,p62的表达水平。MTT结果显示,与对照组相比,各给药组均可明显抑制HeLa增殖（P〈0．05）,联合给药组的抑制作用更加显著（P〈0．01）。流式细胞术结果显示,与对照组相比,各给药组HeLa的凋亡率均明显增加（P〈0．05）,其中联合给药组的凋亡率显著增加（P〈0．01）;与对照组相比,各给药组HeLa细胞均发生了明显的周期阻滞,以G0／G1期的阻滞最为明显,其中联合给药组G0／G1期的阻滞显著。RT-PCR和Westernblot结果显示,与对照组相比,beclinl、LC3Ⅱ基因及蛋白表达上调,p62基因及蛋白的表达下调,联合给药组的上述相应变化更加显著。通过以上实验结果的分析,推测黄芪多糖可能通过调节细胞自噬来增加宫颈癌HeLa细胞对顺铂的化疗敏感性,这一作用的可能机制是通过上调自噬相关蛋白beclinl,促进LC3I转化为LC3Ⅱ,下调自噬标记蛋白p62,增强HeLa细胞自噬活性,从而增加HeLa细胞对顺铂化疗的敏感性。     

黄芩素通过抑制YAP入核调控三阴乳腺癌细胞克隆形成

目的 观察黄芩素对三阴乳腺癌MDA-MB-468和MDA-MB-231细胞克隆形成能力的影响,探讨Yes相关蛋白（YAP）在其中的介导作用。方法 黄芩素处理MDA-MB-468和MDA-MB-231细胞,噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖能力,平板克隆实验检测细胞克隆形成能力,免疫荧光法检测细胞YAP的细胞核分布,蛋白免疫印迹法检测细胞YAP大肿瘤抑制因子1（LATS1）,YAP,磷酸化Yes相关蛋白（p-YAP）和磷酸化YAP大肿瘤抑制因子1（p-LATS1）蛋白表达水平。结果 与空白组相比,5,10,20 μmol·L^-1黄芩素对MDA-MB-468和MDA-MB-231细胞增殖无明显影响。40,80,160 μmol·L^-1黄芩素能显著抑制MDA-MB-468和MDA-MB-231细胞增殖能力（P<0.01）,抑制效应存在一定剂量依赖性。黄芩素对MDA-MB-468和MDA-MB-231细胞的半数抑制浓度（IC₅₀）分别为（80.3±7.2）,（70.4±6.5） μmol·L^-1。与空白组比较,黄芩素（5,10,20 μmol·L^-1）明显剂量依赖性降低MDA-MB-468和MDA-MB-231细胞克隆形成率（P<0.05,P<0.01）。与空白组比较,黄芩素（10,20 μmol·L^-1）显著剂量依赖性抑制MDA-MB-468和MDA-MB-231细胞YAP细胞核表达（P<0.01）。与空白组比较,黄芩素（5,10,20 μmol·L^-1）明显剂量依赖性上调MDA-MB-468细胞p-YAP和p-LATS1蛋白表达（P<0.05,P<0.01）;同样,黄芩素（10,20 μmol·L^-1）显著剂量依赖性上调MDA-MB-231细胞p-YAP和p-LATS1蛋白表达（P<0.01）。结论 黄芩素可通过介导YAP入核减少,从而抑制三阴乳腺癌MDA-MB-468和MDA-MB-231细胞克隆形成。     

黄芪莪术配伍对人卵巢癌HO-8910原位移植瘤组织中FGF-2和BCL-2表达的影响

目的观察黄芪、莪术配伍对人卵巢癌HO-8910原位癌抑瘤效果。方法选取已建立荧光蛋白转染的HO-8910卵巢癌原位癌动物模型(7组),分为模型组,阳性对照组(顺铂),黄芪组,莪术组,黄芪、莪术配伍(按照2∶1)高、中、低剂量组。用免疫组织化学法及Real time-PCR检测移植瘤组织中FGF-2、BCL-2蛋白及基因的表达。结果阳性对照组,黄芪组,莪术组,黄芪、莪术低剂量组,黄芪、莪术高剂量组肿瘤平均肿瘤重量较对照组皆明显减少,且有统计学差异(P0.05),而黄芪、莪术高剂量组与阳性对照组比较,统计学分析有显著性差异(P0.05);各给药组肿瘤组织中的FGF-2、BCL-2 mRNA表达明显低于阴性对照组,且有统计学差异(P0.05);各给药组肿瘤组织中FGF-2蛋白表达明显低于阴性对照组(P0.05);而各给药组肿瘤组织中BCL-2蛋白表达与阴性对照组相比较无统计学差异(P0.05)。结论黄芪、莪术配伍使用在实验周期内对人卵巢癌HO-8910抑瘤效果明显(P0.05),其作用机制可能与下调FGF-2、BCL-2的表达有关。     

竹节香附素A体外诱导乳腺癌细胞凋亡的作用机制研究

目的：探讨竹节香附素A（RaA）体外抗乳腺癌的作用机制。方法：体外培养乳腺癌细胞（MDA-MB-231）,分别用RaA及RaA联合乙酰半胱氨酸（NAC）干预后检测相关蛋白及信号通路的变化情况。结果：与空白组比较,RaA组抑制MDA-MB-231细胞增殖,促进MDA-MB-231细胞凋亡（P<0.01）,促进MDA-MB-231细胞线粒体膜电位坍塌,提升MDA-MB-231细胞的活性氧（ROS）水平（P<0.01）,提升MDA-MB-231细胞B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白（Bax）/B细胞淋巴瘤-2蛋白（Bcl-2）的比值（P<0.01）,上调MDA-MB-231细胞色素C（Cyt-C）、信号转导及转录激活蛋白3（STAT3）和抑癌基因53（P53）的蛋白水平（P<0.05,P<0.01）,下调MDA-MB-231细胞STAT3的磷酸化水平（P<0.05,P<0.01）;与RaA组比较,RaA联合NAC组可降低MDA-MB-231细胞的ROS水平（P<0.01）,降低MDA-MB-231细胞Bax/Bcl-2的比值（P<0.01）,下调MDA-MB-231细胞Cyt-C、活化胱天蛋白酶-3（active CASP3,CCASP3)和P53的蛋白水平（P<0.01）,上调STAT3磷酸化水平（P<0.01）。结论：RaA通过激活ROS/STAT3/P53信号通路诱导线粒体凋亡在体外发挥抗乳腺癌作用。