HPLC-MS/MS测定人血浆阿奇霉素浓度及生物等效性研究

目的 建立人血浆中阿奇霉素的高效液相色谱/质谱/质谱(HPLC-MS/MS)测定法,测定受试者口服阿奇霉素颗粒后的血药浓度,并对受试制剂与参比制剂的生物等效性进行评价。方法 19名健康受试者采用随机双交叉试验设计,单剂量口服阿奇霉素颗粒受试制剂和参比药物各500 mg,用HPLC-MS/MS测定用药后不同时间血药浓度。血药浓度-时间数据经DAS 2.0统计软件处理,计算主要药动学参数,并进行两种制剂的生物等效性评价。结果 受试制剂和参比制剂的T_max分别为(2.5±1.1)h和(2.6±1.7)h,C_max分别为(574.6±209.2) ng·mL^-1和(594.5±229.9) ng·mL^-1,t_1/2分别为(44.7±15.2) h和(42.0±13.0) h,AUC_0-144分别为(5 319.6±2 507.8) h·ng·mL^-1和(5 710.7±2 710.1)h·ng·mL^-1,AUC^_0-∞分别为(5 704.2±2 858.7) h·ng·mL^-1和(6 010.0±2 808.1) h·ng·mL^-1, 以AUC_0-144计算,相对生物利用度为(94.2±15.7)%。两制剂的主要药动学参数无显著性差异。结论 受试制剂与参比药物生物等效。     

曲马氨酚片的人体药物动力学研究

目的 测定曲马氨酚片中曲马多和对乙酰氨基酚的药动学参数。方法 采用高效液相色谱法分别测定20名健康志愿者口服曲马氨酚片（2个剂量组：1片和2片,每组10名）后血清中的药物浓度,进行药动学分析。结果 2组健康志愿者口服曲马氨酚片后的主要药动学参数：曲马多AUC_{0-24 h}（ng·h·mL^-1）分别为2 724.89 ± 1 016.54,1 361.61 ± 441.79;AUC_0-∞（ng·h·mL^-1）分别为3 065.49 ± 1 190.66,1 555.04 ± 582.51;t_max（h）分别为1.8 ± 0.75,1.9 ± 0.57;t_1/2（h）分别为7.34 ± 1.39,7.63 ± 2.02;Kel（h^-1） 分别为0.098 ± 0.019,0.097 ± 0.027; Clr（mL·min^-1）分别为31.84 ± 13.65,30.03 ± 9.20;MRT（h）分别为7.62 ± 1.07,7.77 ± 0.75。对乙酰氨基酚的AUC_{0-24 h}（μg·h·mL^-1）分别为 40.28 ± 10.36,18.37 ± 3.84;AUC_0-∞（μg·h·mL^-1）分别为41.63 ± 10.96,18.81 ± 4.06;t_max（h）分别为0.9 ± 0.46,0.9 ± 0.39;t_1/2（h）分别为5.39 ± 1.16,4.96 ± 1.03;Kel（h^-1）分别为0.13 ± 0.03,0.15 ± 0.03;Clr（mL·min^-1）分别为17.17 ± 4.57,18.42 ± 3.89;MRT（h）分别为4.86 ± 0.48,4.50 ± 0.53。结论 各剂量组之间的主要药动学参数（t_max,t_1/2,Kel,Clr,Vd,MRT)无显著性差异,各剂量组AUC_0-t/dose,AUC_0-∞/dose,C_max/dose比较无显著性差异;符合线性动力学特征。     

复方苯磺酸氨氯地平/盐酸贝那普利片人体药动学研究

目的 研究健康受试者单剂量与多剂量口服复方苯磺酸氨氯地平/盐酸贝那普利片后的药动学。 方法 LC-MS/MS测定单剂量与多剂量给药后氨氯地平与贝那普利及贝那普利拉血药浓度并利用DAS软件计算药动学参数。结果 单剂量给药氨氯地平与贝那普利及贝那普利拉的主要药动学参数分别是：t_1/2为(47.3±10.6),(1.3±0.4)和(4.5±0.6) h,C_max为(6.4±1.5),(136.5±40.2)和(158.3±46.7)μg·L^-1,AUC_0-t为(267.7±88.4),(144.3±46.7)和(891.4±265.4)μg·h·L^-1;多剂量给药氨氯地平与贝那普利的主要药动学参数分别是：t_1/2为(45.1±8.7),(1.4±0.4)和(5.3±0.8)h,C_max为(8.2±1.8),(142.4±47.5)和(165.2±40.8)μg·L^-1,AUC_0-t为(413.5±102.4),(155.7±52.8)和(915.7±316.9)μg·h·L^-1,R为(1.6±0.6)、(1.0±0.1)和(1.2±0.1)。结论 复方苯磺酸氨氯地平/盐酸贝那普利片2组分及活性代谢产物在健康受试者体内的吸收速率和消除速度不随连续给药变化,但连续给药后苯磺酸氨氯地平在体内有轻微蓄积。     

天麻素血药浓度测定及药动学研究

目的 建立天麻素血浆药物浓度LC-MS/MS测定法,测定健康受试者血浆中天麻素的浓度并评价天麻素胶囊的药动学。方法 建立以阿昔洛韦为内标的天麻素血药浓度LC-MS/MS测定方法,色谱柱为Atlantics T3(100 mm×3.0 mm,3 μm),流动相为乙腈-水(10∶90),对18名健康受试者单剂量口服150 mg天麻素胶囊进行药动学研究。结果 建立了简单、专属的天麻素血浆药物浓度的LC-MS/MS测定法,以沉淀法进行样品前处理,无杂质干扰测定,灵敏度达到了3.00 ng∙mL^-1,每个生物样品分析时间仅为2 min。18名健康受试者口服天麻素胶囊150 mg后,测定血浆样品并估算天麻素的药动学参数,T_max均值为(0.8±0.3)h,t_1/2均值为(2.1±0.4)h,C_max均值为(378±84)ng∙mL^-1,AUC_0-12 均值为(878±175)ng∙h∙mL^-1,AUC_0-∞均值为(897±175)ng∙h∙mL^-1。结论 本法快速、准确、灵敏度高且前处理简单,能很好的应用于药动学研究。     

毛兰素注射液在大鼠体内药动学研究

目的 阐明毛兰素注射液在SD大鼠体内药动学规律。方法 SD大鼠分别单次和隔天、每隔一个半衰期一次多剂量静脉注射毛兰素注射液。采用高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)测定大鼠静脉注射后不同时间大鼠血浆中毛兰素的血药浓度。结果 大鼠单次静脉注射25,50,100 mg·kg^-1毛兰素注射液的主要药动学参数为：T_1/2β分别为3.66,3.75,3.89 h; AUC_0-12分别为1 453.0,3 041.6,6 731.6 ng·mL^-1·h;AUC_0-∞分别为1 462.0,3 077.3,6 788.7 ng·mL^-1·h;Vd分别为11.67,10.37,3.38 L·kg^-1;CL分别为0.049,0.089,0.024 L·kg^-1·h^-1;MRT分别为0.18,0.28,0.21 h;50 mg·kg^-1剂量的毛兰素注射液隔日给药5次其药动学参数与单次给药相近;而50 mg·kg^-1剂量的毛兰素注射液每隔一个半衰期一次给药5次的T_1/2β为5.43 h,AUC_(S0)(0-t)为9 800.8 ng·mL^-1·h。结论 毛兰素注射液在大鼠体内的动力学过程与剂量相关,毛兰素注射液单剂量给药的体内药动学符合开放型二房室模型,T_1/2β与给药剂量与关,表明毛兰素在大鼠体内的消除过程符合一级动力学规律。隔日多剂量给药的消除过程亦符合一级动力学规律;而每隔一个半衰期一次多剂量给予50 mg·kg^-1剂量的毛兰素其在大鼠体内则呈非线性消除。     

复方氨酚曲马多片中对乙酰氨基酚的人体药代动力学研究

目的 研究氨酚曲马多片在中国健康人体内的药代动力学特性。方法 10名健康志愿者(男女各半)单剂量口服2片氨酚曲马多片（每片曲马多/对乙酰氨基酚为37.5 mg/325 mg）。对乙酰氨基酚血药及尿药浓度采用高效液相色谱-紫外（HPLC-UV）检测法测定。结果 受试者单次口服给药后,以HPLC-UV法测血浆及尿液中对乙酰氨基酚浓度。采用DAS软件计算对乙酰氨基酚的药代参数。C_max为(10.95±7.85)mg·L^-1,T_max为(0.83±0.29)h,t_1/2为(2.09±0.34)h,AUC_0～24为(26.93±11.64)mg·h·L^-1,AUC_0-∞为(27.74±11.57)mg·h·L^-1,尿液中24 h以原形排泄百分比(2.90±1.32)%;受试者各项检查未见异常,无不良反应发生。结论 对血浆药代动力学参数及尿中药物排泄量进行性别单因素方差分析,结果未显示性别差异。该药在试验剂量下具有良好的安全性。     

HPLC检测人血浆头孢丙烯及其药动学研究

目的 建立人血浆头孢丙烯检测的高效液相色谱方法,研究头孢丙烯分散片的人体药动学。方法 血浆经高氯酸沉淀,采用ZORBAX Eclipse XDB-C₈色谱柱;流动相为乙腈-0.1%三氟乙酸-水(15∶40∶45),流速为1.0 mL·min^-1;检测波长282 nm。10名健康志愿者单剂量口服500 mg头孢丙烯分散片后,不同时间点抽取静脉血。用该方法检测血浆中头孢丙烯浓度,用DAS程序计算药动学参数。结果 头孢丙烯浓度在0.10~20.00 mg·L^-1内线性关系良好(r=0.999 9);高、中、低3个浓度的相对回收率分别为(99.20±4.41)%,(98.07±3.94)%和(100.07±1.69)%;日内RSD分别为5.28%,5.19%和1.97%,日间RSD分别为4.38%,3.95%和1.33%。头孢丙烯在人体内符合一级吸收的一室模型,C_max为(8.79±1.09)mg·L^-1,t_1/2(ke)为(1.06±0.29) h。结论 本方法简便、快速、准确可靠,可满足药动学研究的要求。     

肾移植术后环孢素A血药浓度监测及其体内吸收评价

目的 探讨肾移植术后稳定患者口服微乳化环孢素A(CsA-ME)的剂量与其血药浓度谷值(C₀)和给药后2 h的血药浓度(C₂)的关系及其随时间的变化趋势,从而评价CsA-ME的体内吸收过程。方法 采用荧光免疫偏振法(FPIA)对92例肾移植患者术后不同时间内测定全血中环孢素A的C₀和C₂浓度,并分别与每位患者每日每千克体重的用药剂量(ND)相比,得出其相应的浓度(即C₀/ND,C₂/ND)。计算C₂/C₀比值并对所得数据进行统计分析。结果 肾移植患者术后1~3个月内,C₀/ND和C₂/ND均增加。C₀/ND从(43±15)增加到(56±20) (ng·mL^-1)/(mg·kg^-1),C₂/ND从(129±62)增加到(212±80) (ng·mL^-1)/(mg·kg^-1),表明药物的吸收逐渐增加。但术后3~12个月内,C₂/ND维持原有水平,C₀/ND则逐渐降低为48±15 (ng·mL^-1)/(mg·kg^-1),C₂/C₀比值则从4.5±1.9逐渐增加至5.2±2.3,表明药物在体内的消除代谢逐渐增加。术后3~12个月内,C₂/ND的个体间变异系数明显小于C₀/ND的个体间变异系数。结论 肾移植患者服用CsA-ME在术后3~12月内,其环孢素A在体内的累积清除率逐渐增加,表明术后一年内单纯用C₀作为监测指标已不能准确预测CsA-ME在体内的药物暴露总量,应结合C₂监测对于提高个体化的治疗将更有临床意义。     

比卡鲁胺片人体生物等效性研究

目的 研究国产比卡鲁胺片在健康人体的药代动力学特征,比较其与同规格进口片剂的生物等效性。方法 20名健康男性志愿者单剂量交叉口服两种比卡鲁胺片,在每次服药前,服药后1、3、4、6、9、12、16、20、24、28、32、36、40、48 h,3、7、14、21、28 d分别采集血样,用HPLC法测定血浆中药物浓度,用3P97软件拟合药代动力学参数,并用SAS软件进行等效性检验。结果 试验组口服国产比卡鲁胺片50 mg后,平均C_max为691.50 μg/L,平均T_max为20.65 h,平均AUC_0～∞为148 124 μg·h/L,平均消除半衰期为127.46 h;对照组口服进口比卡鲁胺片Casodex 50 mg后,平均C_max为697.30 μg·L^-1,平均T_max为24.10 h,平均AUC_0～∞为153 782 μg·h/L,平均消除半衰期为131.06 h。统计分析表明两种制剂生物等效,受试制剂与参比制剂的相对生物利用度为99.43%。结论 两种比卡鲁胺片剂具有生物等效性。     

LC-MS/MS测定人血浆中哌甲酯

目的 建立LC-MS/MS测定人血浆中盐酸哌甲酯的浓度。方法 待测血浆1.0 mL，经1 mol·L^-1的氢氧化钠40 μL碱化后，用4 mL乙醚萃取处理，采用Eclipse XDB-C₁₈ (4.6 mm×150 mm，5 μm)色谱柱，以甲醇和水为流动相梯度洗脱，流速1.0 mL·min^-1。以电喷雾正离子源离子化，检测离子对盐酸哌甲酯为234.0/84.0，内标卡马西平为237.0/194.0。结果 血浆中内源性物质对测定无干扰，最低定量限为0.1 ng·mL^-1，在1~100 ng·mL^-1内盐酸哌甲酯线性关系良好(r=0.999 1)，日内、日间RSD均小于8%，样品分析时间为10 min。结论 该法专属性强、灵敏度高，操作简便快速，测定结果可靠，适于进行盐酸哌甲酯血药浓度监测。     

HPLC测定利奈唑胺的血药浓度

目的 建立人血浆中利奈唑胺浓度测定的高效液相色谱法。方法 以苯巴比妥为内标,血浆样品用乙腈沉淀蛋白,采用Luna C₁₈柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)分析。流动相为乙腈-水(25∶75),流速为1.0 mL·min^-1,检测波长251 nm,柱温35 ℃。 结果 本法在0.1～40 mg·L^-1内线性关系良好(r=0.999 9),检测限为0.05 mg·L^-1,日内、日间RSD均小于4％。结论 本方法简单、灵敏、准确,适用于利奈唑胺临床血药浓度监测及人体药动学研究。     

改良RP-HPLC测定全血中环孢素A的浓度

目的 建立一种简便的RP-HPLC法测定全血中环孢素A(CsA)的浓度,为临床合理应用CsA提供依据。方法 全血样品1 mL经乙醚提取,正己烷洗涤去干扰后,采用Zorbax SB-C₁₈ 柱 (4.6 mm×150 mm,3.5 μm) 分离,流动相为乙腈-甲醇-水-异丙醇(60∶10∶29∶1),流速1.5 mL·min^-1,柱温70 ℃,检测波长210 nm;环孢素D(CsD)为内标。结果 CsA全血浓度在25~1 600 ng·mL^-1内线性关系良好(r=0.999 8),平均方法回收率99.51%,日内、日间RSD均小于5%,最低检测限5 ng·mL^-1。结论 本法简便快速,灵敏度高,重复性好,线性范围广。用于患者全血中CsA浓度监测,效果良好。     

HPLC测定小儿清热止咳颗粒中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的含量

目的 建立用反相高效液相色谱法测定小儿清热止咳颗粒中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱含量的方法。方法 采用ZORBAX SB C₁₈色谱柱,流动相为0.1%磷酸溶液-乙腈(96∶4),流速为1.0 mL·min^-1,紫外检测波长为205 nm。结果 盐酸麻黄碱线性范围为4.388~43.88 μg·mL^-1(r=0. 999 9),平均回收率99.7%,RSD为2.1%(n=6)。盐酸伪麻黄碱线性范围为5.300~53.00 μg·mL^-1 (r=0. 999 7),平均回收率98.5%,RSD为2.8%(n=6)。结论 本法定量准确、重复性好,可作为该制剂的质量控制方法。     

HPLC测定盐酸齐拉西酮血药浓度

目的 建立盐酸齐拉西酮血药浓度的测定方法。方法 采用反相高效液相色谱法测定盐酸齐拉西酮血药浓度,色谱柱采用Kromasil C₁₈(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相：甲醇-乙腈-40 mmol·L^-1乙酸铵溶液(用乙酸调节pH值至3.50±0.1) (100∶100∶155);流速：1.0 mL·min^-1;内标：卡马西平;检测波长：254 nm。结果 以盐酸齐拉西酮与内标物峰面积之比(Y)对盐酸齐拉西酮血清浓度(C)进行线性回归,得回归方程：C=213Y-85.5(r=0.996 2),表明本法在20.0~1 200 μg·L^-1内线性关系良好,平均加样回收率为97.4%。结论 本法操作简便、结果准确,可以用于临床盐酸齐拉西酮血药浓度的测定。     

LC-ESI-MS/MS快速测定人血浆中匹伐他汀浓度

目的 建立一种快速灵敏测定人体血浆中匹伐他汀浓度的高效液相色谱串联质谱检测方法。方法 以Agilent C18柱(4.6 mm×150 mm,3.5 μm)为色谱柱,流动相为甲醇-0.005 mol·L^-1甲酸铵水溶液-乙腈-1%甲酸水溶液(7.5∶2.5∶70∶20);流速：0.5 mL·min^-1,柱温：40 ℃。采用选择反应监测(SRM)对匹伐他汀(m/z 422.2→290.2)和内标瑞舒伐他汀(m/z 482.2→258.2)进行测定。结果 匹伐他汀高(80 μg·L^-1)、中(50 μg·L^-1)、低(0.25 μg·L^-1)3个浓度的平均回收率RSD均小于15%;线性范围为：0.1~100 μg·L^-1,回归方程为Y=1.222 6X-1.056 1×10^-4,r=0.996 0。结论 该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于匹伐他汀临床血药浓度监测和药动学研究。     

HPLC检测人血浆中厄贝沙坦的浓度

目的 建立人血浆厄贝沙坦检测的高效液相色谱法。方法 血浆经乙醚萃取,以ZORBAX Extend-C₁₈为色谱柱;流动相为乙腈-水-0.1％TFA-0.5 mmol·L^-1 SDS体系,流速为0.8 mL·min^-1;检测波长为242 nm(0~6.5 min)和266 nm(6.5~7.8 min)。结果 厄贝沙坦浓度在0.05~6.00 mg·L^-1内线性关系良好(r=0.999 9);定量限为0.05 mg·L^-1;高中低3个浓度的相对回收率分别为(103.93±1.09)%、(99.85±0.65)%和(100.95±1.21)%;日内RSD分别为3.04％,1.15％,1.19%,日间RSD分别为4.50%,3.32%,1.18%。结论 本方法准确可靠、简便快速,适用于人血浆厄贝沙坦浓度的测定及其药动学研究。     

HPLC荧光法测定高三尖杉酯碱在大鼠体内的分布

目的 研究高三尖杉酯碱注射液在大鼠体内的组织分布,为该药进行临床研究及合理应用提供依据。方法 生物样品在碱性条件下通过氯仿提取,用Kromasil C₁₈柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),乙腈-10 mmol·L^-1 KH₂PO₄缓冲液(含0.2%三乙胺,用H₃PO₄调pH至2.5)(25∶75)为流动相,荧光检测波长为λex 280 nm,λem 320 nm。结果 绝对回收率为91.27%~102.4%,最低检测限为0.5 ng·mL^-1。SD大鼠单次尾静脉注射高三尖杉酯碱注射液0.5,1,2 h后主要效应器官的浓度分布特点是：C_骨髓>C_心,主要消除器官的浓度分布特点是C_肝>C_肺>C_肾。结论 本法准确,灵敏度高,可用于高三尖杉酯碱的体内过程研究。高三尖杉酯碱在骨髓中有较高浓度分布,应引起重视。     

硝酸布康唑栓的人体药代动力学

研究单次及多次阴道给药后硝酸布康唑栓在中国健康女性体内的药代动力学特征。12名健康女性受试者依次进行硝酸布康唑栓低(0.05 g)、高(0.1 g)剂量单次给药以及高剂量(0.1 g)连续给药3 d和连续给药5 d药代动力学试验。受试者单次阴道给予0.05和0.1 g受试制剂后,布康唑的c_max分别为(0.895 0±0.261 0)、(1.740±0.511)ng/mL,AUC_{0-96 h}分别为(36.38±10.82)、(73.48±28.99)ng·h/mL,t_1/2分别为(23.0±4.4)、(21.5±5.9)h。结果表明:布康唑在0.05~0.1 g剂量范围内呈线性药代动力学特征。受试者连续3 d给予硝酸布康唑栓后,布康唑的血药浓度波动度(DF)为(0.54±0.27),累积常数Rc_max为(1.3±0.3),R_AUC0-τ为(1.4±0.3)。连续给药5 d后,布康唑的血药浓度DF为(0.64±0.25),累积常数Rc_max为(1.4±0.3),R_AUC0-τ为(1.6±0.2),在人体内的暴露量增加约60%。连续给药3 d与连续给药5 d的各项药动学参数均无显著性差异。     

3, 5, 4'-三甲基白藜芦醇对豚鼠心室肌细胞钠电流和钾电流的影响

目的 研究3, 5, 4''-三甲基白藜芦醇(trans-resveratrol derivative 3,5,4''-trimethoxystilbene，TMS)对豚鼠心室肌细胞钠电流(I_Na)和钾电流(I_K1)的直接作用，探讨其心肌保护作用。方法 用全细胞膜片钳技术记录TMS对单个心室肌细胞I_Na和I_K1的作用。结果 TMS(10 μmol·L^-1)可快速抑制豚鼠心室肌细胞I_Na，用药后3 min左右即开始起效，10 min时抑制率为(36.8±5.6)％(P<0.005)，洗脱后可完全恢复；1，3 μmol·L^-1 TMS未影响I_Na大小。TMS不改变I_Na的最大激活电压，也不影响I_K1的大小。10 μmol·L^-1使半数最大失活电压(V_1/2)由(-87.0±3.3)mV变化到(-96.7±3.5)mV (P<0.001)，使失活曲线斜率(S)由(4.9±0.3)mV 变化到(5.4±0.3)mV (P<0.01)；使半数最大激活电压(V_1/2) (-38.9±1.4)mV 变化到(-47.3±1.3)mV (P<0.001)，未改变激活S。结论 TMS可直接作用于豚鼠心室肌细胞，快速抑制I_Na，且此作用快速、可逆。     

注射用苦参素纳米球与普通粉针剂在大鼠体内药动学比较

目的 比较注射用苦参素纳米球（KU-PLGA-NS）与注射用苦参素普通粉针剂（KUI）在大鼠体内的药动学特性。方法 建立HPLC法检测大鼠血浆中苦参素,采用ANOVA法选择房室模型,将所测得的血药浓度-时间数据,采用DAS程序进行分析,根据F值与AIC选择房室模型求算药动学参数。结果 等剂量KU-PLGA-NS和KUI的AUC_0-t分别为（785.57±170.92）、（342.43±54.49）mg·L^?1·min,C_max为（18.51±2.47）、（28.48±5.40）mg/L,t_1/2Ke为（91.69±1.94）、（11.51±2.47）min。结论 KU-PLGA-NS在大鼠体内的药动学特性与KUI比较AUC和C_max增加,t_1/2延长。