芳香开窍法对全脑缺血再灌注大鼠脑水肿及超氧化物歧化酶、丙二醛水平的影响

目的:观察芳香开窍药对脑水肿大鼠脑组织SOD、MDA水平的影响,以探讨芳香开窍法对缺血性中风的治疗作用机理,为临床上运用芳香开窍法提供实验依据。方法:采用pulsinelli的4vo法建立大鼠全脑缺血再灌注模型,检测脑组织水含量以及超氧化物歧化酶及丙二醛水平。结果:①芳香开窍中药能降低缺血再灌注大鼠脑组织含水量,与模型组及尼莫通组比较具有显著性意义(P<0.01);②芳香开窍药能提高缺血再灌注大鼠脑组织SOD水平,与模型组及尼莫通组比较具有显著性意义(P<0.01);③芳香开窍中药能降低缺血再灌注大鼠脑组织 MDA含量,与模型组及尼莫通组比较具有显著性意义(P<0.05)。结论:芳香开窍药能降低缺血性脑水肿,其机制可能通过减少脑组织MDA含量及升高SOD水平有关,这可能是其芳香开窍法的机理之一。     

清心开窍方多糖对AD大鼠海马区GFAP及βAPP表达的影响

目的:探讨清心开窍方多糖对Aβ25-35杏仁核注射诱导AD大鼠海马区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及淀粉样前体蛋白(βAPP)表达的影响.方法:雄性SD大鼠40只,随机分为正常组、模型组、安理申组、清心开窍方组(简称清开方组)和多糖组.观察各组大鼠水迷宫空间记忆能力,并通过免疫组化方法研究海马区GFAP及βAPP的表达.结果:清心开窍方组和多糖组能明显改善AD大鼠学习记忆能力,大鼠海马区GFAP及βAPP表达水平降低,与模型组比较有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01).结论:清心开窍方能明显改善AD大鼠学习记忆能力,可能是通过降低海马区GFAP、βAPP表达作用.     

酸枣仁汤对睡眠剥夺大鼠学习记忆的影响及机制研究

目的:考察酸枣仁汤对睡眠剥夺大鼠学习记忆的影响及机制研究。方法:50只雄性大鼠随机分为5组,即大平台对照组、睡眠剥夺组、酸枣仁汤大、中、小剂量组,釆用改良多平台法建立大鼠睡眠剥夺模型,进行7天连续睡眠剥夺,并每天给药一次,Morris水迷宫测定学习记忆,TUNEL染色观察大鼠海马神经细胞凋亡,高效液相-电化学检测血NE,DA,5-HT的含量。结果:与睡眠剥夺组相比,酸枣仁汤21g/kg、10.5g/kg组大鼠的学习记忆能力明显改善,海马凋亡阳性细胞凋亡率明显减少,NE含量明显降低,DA,5-HT含量明显升高。结论:酸枣仁汤可改善睡眠剥夺大鼠学习记忆能力,可能与抑制神经细胞凋亡和改变单胺类递质的含量有关。     

电项针对大鼠睡眠剥夺诱发氧化应激反应影响机制研究

目的:通过电项针干预睡眠剥夺大鼠的实验研究探讨电项针对失眠诱发氧化应激反应影响机制。方法:将大鼠随机分为空白组、模型组、电项针组、黄芪注射液组,除空白组外,其余组通过腹腔注射PCPA复制睡眠剥夺大鼠模型。通过光栅分光光度计观察脑干中SOD及NO含量的变化。结果:光栅分光光度计法证实,睡眠剥夺后,电项针组和黄芪注射液组大鼠脑干网状组织内NO、SOD的含量降低,与模型组比较均有显著差异(P<0.01);而此两组比较无显著性差异(P>0.05)。电镜下观察可见,睡眠剥夺后,模型组大鼠脑干细胞膜边界不清晰,细胞浑浊,细胞内有空泡变性,线粒体空泡变性,肿胀明显粗面内质网含量减少,突触融合;而电项针组未见明显变化。结论:电项针可通过减轻睡眠剥夺大鼠的氧化应激反应,减少睡眠剥夺大鼠神经毒性作用。     

松郁安神方对REM睡眠剥夺大鼠认知功能及神经递质的影响

目的:研究松郁安神方对REM睡眠剥夺大鼠认知功能及血浆中神经递质的影响。方法:药物治疗5 d后水迷宫实验观察大鼠的学习记忆,用高效液相-电化学检测NE、DA、5-HT的含量。结果:中药治疗后大鼠的学习记忆能力较模型组明显改善,NE含量明显降低,DA、5-HT含量明显升高。结论:松郁安神方不仅可改善REM睡眠剥夺大鼠的学习记忆能力,而且可调节大鼠睡眠相关物质NE、DA、5-HT的含量,其学习记忆能力的改变可能与某些神经递质的改变有关。     

加味四逆散对异相睡眠剥夺大鼠前额叶 皮质突触可塑性改变的研究

目的:探讨加味四逆散对异相睡眠剥夺168 h大鼠的学习记忆能力及前额叶皮质突触结构可塑性的作用。方法:以多平台法复制睡眠剥夺模型,药物干预组以加味四逆散灌胃,分别在睡眠剥夺6,30,54,78,102,126,150 h时间点给药,每次用药量为16.25 g.kg-1。应用Y迷宫评估动物学习与记忆能力的变化,并使用透射电镜观察动物前额叶皮质(prefrontalcortex,PFC)突触结构可塑性的改变。结果:加味四逆散组大鼠Y迷宫成绩明显高于模型组大鼠(P<0.05)。与模型组比较,加味四逆散组大鼠PFC神经元突触间隙明显变窄(P<0.05),突触后膜致密物(post synaptic density,PSD)厚度明显变厚(P<0.01)。结论:加味四逆散能改善异相睡眠剥夺模型大鼠学习与记忆能力,与其影响前额叶皮质神经元突触结构可塑性,从而增强其突触传递效能有关。     

电项针对睡眠剥夺大鼠脑干5-HT5,-HIAA,NE含量的影响

目的:通过电项针干预睡眠剥夺大鼠的实验研究探讨电项针对失眠影响机制。方法:将大鼠随机分为空白组、模型组、电项针组、甜梦胶囊组,除空白组外,其余组通过腹腔注射PCPA复制睡眠剥夺大鼠模型。通过荧光分光光度计观察大鼠脑中5-HT5、-HIAA、NE含量的变化。结果:荧光分光光度计法证实,睡眠剥夺后,电项针可以提高脑干网状组织内5-HT、5-HIAA的含量,降低NE的含量,与模型组比较有显著差异(P<0.01),甜梦胶囊组NE的含量降低,同模型组相比有显著性差异(P<0.01),与电项针组比较无显著性差异(P>0.05)。甜梦胶囊组5-HT、5-HIAA的含量降低,同模型组相比无显著性差异(P>0.05),与电项针比较有显著性差异(P<0.05)。结论:电项针可以通过恢复5-HT通路与NE通路之间的相互平衡和制约,进而恢复正常的睡眠觉醒节律,从而纠正失眠。     

酸枣仁汤对睡眠剥夺后大鼠海马NO和NOS的影响

目的:观察酸枣仁汤(SZRT)对睡眠剥夺后模型大鼠学习记忆和海马一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)的影响。方法:♂大鼠被分为大平台对照组(对照组)、睡眠剥夺组(模型组),SZRT高剂量组(21g生药/kg),中剂量组(10.5g生药/kg),低剂量组(5.25g生药/kg),釆用多平台法复制大鼠睡眠剥夺动物模型,造模期间ig给药7d,Y-maze测定学习记忆,HE染色观察大鼠海马CA1区组织形态学,硝酸还原酶法测定海马NO含量,化学比色法测定海马NOS活性。结果:Y-maze测试显示,与模型组相比较,SZRT高剂量组的错误次数减少,主动回避率增多。SZRT可减轻睡眠剥夺后大鼠海马锥体细胞损伤,SZRT高剂量组可降低海马NO含量和NOS活性。结论:SZRT能改善睡眠剥夺后大鼠的学习记忆障碍,可能与降低NO含量,抑制NOS活性有关。     

清心开窍方挥发油对AD大鼠皮质GFAP、Aβ及βAPP表达的影响

目的:探讨清心开窍方挥发油对Aβ25-35杏仁核注射诱导AD大鼠皮质区GFAP、Aβ、βAPP及IL-6表达的影响。方法:雄性SD大鼠40只,随机分为正常组、模型组、安理申组、清心开窍方组和挥发油组。采用杏仁核注射Aβ25-35诱导AD大鼠模型,观察大鼠水迷宫空间记忆能力,并通过免疫组化方法研究皮质区GFAP、Aβ、βAPP及IL-6的表达。结果:清心开窍方和挥发油能改善AD大鼠学习记忆能力,大鼠皮质区GFAP、Aβ、βAPP及IL-6表达水平降低,与对照组比较有显著性差异(P0.05)。结论:清心开窍方能明显改善AD大鼠学习记忆能力,其机制可能是通过降低皮质GFAP、Aβ、βAPP及IL-6的表达发生作用。     

酸枣仁汤对睡眠剥夺大鼠认知功能及海马NA,GABA,5-HT的影响

目的:观察复方酸枣仁汤(SZRT)对睡眠剥夺(SD)大鼠认知功能及海马NA,GABA,5-HT含量的影响。方法:行为学筛选合格的雄性大鼠50只分为对照组、睡眠剥夺组、酸枣仁汤(SZRT)21.0g/kg,10.50g/kg,5.25g/kg剂量组,建立睡眠剥夺大鼠动物模型,进行7d连续睡眠剥夺,1d1次,Y-型电迷宫测定学习记忆,Elisa法检测海马中去甲肾上腺素(NA),γ-氨基丁酸(GABA),5-羟色胺(5-HT)的含量。结果:与睡眠剥夺组相比,SZRT 21.0g/kg组大鼠的学习记忆的能力改善,NA的含量降低,GABA和5-HT含量升高。结论:酸枣仁汤(SZRT)可改善睡眠剥夺大鼠认知功能,与改变单胺类递质作用有关。     

清心开窍方及皂苷对AD大鼠学习记忆能力及脑组织凋亡信号转导分子,Aβ及βAPP表达的影响

目的:探讨清心开窍方及其皂苷成分对Aβ25-35杏仁核注射诱导AD大鼠学习记忆能力及脑组织凋亡信号转导分子,Aβ及βAPP表达的影响.方法:雄性SD大鼠40只,随机分为正常组、模型组、安理申组、清心开窍方组和皂苷组,每组8只.采用双侧杏仁核注射Aβ25-35(10g·L-1)制造AD大鼠模型,造模后第2天起,分别灌胃给药安理申(1.67 mg·kg-1)、清心开窍方水煎剂(12.67 mL· kg-1)、皂苷(6.30 mg·kg-1)及双蒸水,2周后,观察大鼠水迷宫空间记忆能力,并通过免疫组化方法研究脑组织Caspase-3,Aβ及βAPP的表达.结果:中药各组能明显改善AD大鼠学习记忆能力,与对照组比较有显著性差异(P＜0.05,P＜0.01);清心开窍方组、皂苷组大鼠大脑皮层、海马区Caspase-3,Aβ及βAPP表达水平降低,与模型组比较差异非常显著(P＜0.01,P＜0.05).结论:清心开窍方及其皂苷能显著改善AD大鼠学习记忆的能力,可能是通过降低皮质、海马Caspase-3,Aβ及βAPP表达发挥作用.     

针刺百会穴对睡眠剥夺大鼠模型脑电图α波、β波频率的影响

目的:通过睡眠剥夺大鼠模型脑电图α波、β波的频率,分析针刺百会穴对失眠的治疗效果。方法:采用水平台法建立睡眠剥夺大鼠模型,分为实验组、假穴位组和模型组,以正常喂养的大鼠作为空白对照组。实验组行百会穴针刺治疗,假穴位组行百会穴左侧旁0.2cm的假穴位针刺治疗,模型组、空白组不予以治疗。在72h睡眠剥夺结束后记录各组大鼠脑电波数据,观察针刺百会穴对睡眠剥夺大鼠模型脑电图α波、β波频率的影响。结果:针刺前,实验组、假穴位组、模型组大鼠α波、β波频率无统计学差异(P0.05),且α波均低于空白组,β波均高于空白组,说明睡眠剥夺可影响正常脑电波频率,提升大鼠大脑皮层兴奋性;针刺假穴位组大鼠脑电图变化与模型组比较无统计学差异(P0.05),且治疗后大鼠的狂躁表现无显著改善,没有立刻进入睡眠;针刺治疗中,实验组大鼠α波频率上升、β波频率下降,趋向于正常,且治疗后立刻进入睡眠状态,说明针刺百会穴可降低睡眠剥夺模型的大脑皮层兴奋度。结论:针刺百会穴对睡眠剥夺大鼠模型具有安神作用。     

泻肝安神方对睡眠剥夺大鼠学习记忆行为及海马形态的影响

目的研究泻肝安神方对睡眠剥夺大鼠学习记忆行为及海马形态的影响。方法采用对氯苯丙氨酸腹腔注射法诱导大鼠睡眠剥夺模型,分别以不同剂量泻肝安神方及地西泮进行干预。观察大鼠的一般情况、逃逸潜伏期及穿越平台次数。采用HE染色,对各组大鼠海马进行形态学观察。结果泻肝安神方可延长睡眠剥夺模型大鼠的睡眠时间,降低逃逸潜伏期,增加穿越平台次数,减轻海马锥体层细胞损伤。结论泻肝安神方可提高睡眠剥夺大鼠受损学习记忆能力,改善海马组织形态。     

醒神胶囊对睡眠剥夺大鼠血清中乳酸、SOD、皮质醇和睾酮的影响

目的:观察醒神胶囊的对抗睡眠剥夺作用.方法:小平台水环境法(flower pot technique)复制96小时睡眠剥夺大鼠模型,通过动物的外观变化、体重、血清中皮质醇、睾酮、乳酸含量及总SOD活性的变化,观察醒神胶囊的作用效果.结果:醒神胶囊可以改善睡眠剥夺大鼠的外观表现和能量代谢,减少体重的下降,并可减轻睡眠剥夺造成的低睾酮、高皮质醇、乳酸堆积及氧自由基增多的状态,其效果呈剂量依赖性.结论:醒神胶囊有较好的对抗睡眠剥夺兼抗躯体疲劳的作用.     

甜梦口服液对睡眠剥夺大鼠学习记忆、炎症因子及神经递质的影响

目的:利用大鼠睡眠剥夺模型观察甜梦口服液对失眠或睡眠不足引起的学习记忆下降的影响。方法:利用多平台水环境对大鼠进行连续72 h快速动眼相(rapid eye movement,REM)睡眠剥夺建立失眠动物模型,大平台组作为对照。睡眠剥夺前4周分别灌胃给予低(2.1 ml/kg)、中(4.2 ml/kg)、高(8.4 ml/kg)3种剂量甜梦口服液,对照组及睡眠剥夺组灌胃给予等量生理盐水。应用Morris水迷宫检测各组大鼠的学习记忆能力;酶联免疫吸附测定各组大鼠血清中白介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)、中缝核5-羟色胺(5-HT)神经递质的含量;Western Blot检测大鼠海马脑源性神经营养因子(BDNF)变化。结果:与睡眠剥夺模型组比较甜梦口服液组空间学习记忆能力升高,逃避潜伏期缩短;血清IL-1β和TNF-α含量降低;中缝核的5-HT的含量减少;海马BDNF蛋白水平明显上调。结论:甜梦口服液具有提高睡眠剥夺大鼠免疫功能及提高学习记忆的作用,其机制可能与降低血液中炎症因子、中缝核的5-HT及升高海马的BDNF含量有关。     

酸枣仁汤对慢性睡眠剥夺老年失眠大鼠下丘脑GABA及其受体表达的影响

目的:研究酸枣仁汤对慢性睡眠剥夺老年失眠大鼠下丘脑GABA及其受体表达的影响。方法:利用"多平台水环境法"建立老年大鼠慢性睡眠剥夺模型,将实验大鼠随机分为4组,环境对照组,慢性睡眠剥夺模型组,舒乐安定组以及酸枣仁汤组。应用免疫组织化学方法观察睡眠剥夺21 d后各组大鼠下丘脑GABA含量的变化,Realtime-PCR法检测大鼠下丘脑GABAARα1和γ2亚单位mRNA表达水平。结果:免疫组化法检测结果表明,与环境对照组比较,慢性睡眠剥夺模型组较环境对照组GABA含量降低(P0.05);与慢性睡眠剥夺模型组比较,舒乐安定组和酸枣仁汤组GABA相对表达量相对升高(P0.05)。Realtime-PCR法检测结果表明,与环境对照组比较,慢性睡眠剥夺模型组GABAARα1、GABAARγ2表达下调(P0.05);与慢性睡眠剥夺模型组比较,酸枣仁汤组和舒乐安定组GABAARα1、GABAARγ2表达明显上调(P0.05)。结论:酸枣仁汤改善睡眠机制与调控大鼠下丘脑GABA的含量及其受体表达有关。     

刺五加对睡眠剥夺大鼠学习记忆及海马单胺类神经递质的影响

目的:探讨刺五加对睡眠剥夺大鼠学习记忆能力及对海马单胺类神经递质AchE(乙酰胆碱酯酶),5-HT(5-羟色胺)、NE(去甲肾上腺素)、5-HIAA(5-羟吲哚乙酸)的影响.方法:将75只大鼠随机分为5组,大平台对照组、睡眠剥夺组、刺五加高、中、低剂量组.给药组分别给予刺五加溶液(11.2,5.6,2.8 g·kg-1),大平台对照组、睡眠剥夺组给予相应容量的蒸馏水,连续给药7d后开始实验.用小平台法建立快速眼动睡眠(REMS)剥夺大鼠模型,4d后,以六角迷宫行为学方法测试学习记忆能力,并测定大鼠海马匀浆液中AchE,5-HT,NE,5-HIAA的含量及计算出5-HIAA/5-HT的比值.结果:与大平台对照组比较,睡眠剥夺组错误次数增多、认知率降低,且差异显著(P＜0.01),但寻找时间缩短(P＜0.05);在刺五加干预下,错误次数明显减少、认知率升高(P＜0.01),寻找时间缩短(P＜0.01).各给药组大鼠海马匀浆液中的5-HT,NE,5-HIAA,5-HIAA/5-HT含量均显著高于睡眠剥夺组(P＜0.05或P＜0.01),且呈剂量递增趋势;各给药组AchE含量显著低于睡眠剥夺组而高于大平台对照组(P ＜0.05或P＜0.01).结论:刺五加改善睡眠剥夺大鼠学习记忆能力的机制可能是通过调节睡眠剥夺造成的单胺类神经递质紊乱,加速5-HT的代谢转化,调节NE的异常,增高海马组织中AchE活性实现的.     

酸枣仁汤对老年慢性睡眠剥夺大鼠视交叉上核中血管活性肠肽、精氨酸加压素肽能神经细胞的影响

目的:研究酸枣仁汤对老年慢性睡眠剥夺大鼠视交叉上核中血管活性肠肽(VIP)、精氨酸加压素(AVP)肽能神经细胞的影响。方法:利用"多平台水环境法"建立老年大鼠慢性睡眠剥夺模型,将实验大鼠随机分为4组,环境对照组,慢性睡眠剥夺模型组,舒乐安定组以及酸枣仁汤组。用免疫组织化学方法观察睡眠剥夺21 d后各组大鼠视交叉上核中VIP、AVP肽能神经细胞的变化,用Real Time-PCR法检测视交叉上核中VIP mRNA、AVP mRNA的表达。结果:与环境对照组相比较,慢性睡眠剥夺模型组VIP表达明显降低、AVP表达明显升高(P0.05);与慢性睡眠剥夺模型组比较,治疗组VIP则有不同程度的升高(P0.05),AVP则出现明显下降,其中酸枣仁汤组上下浮动最为显著。与环境对照组比较,慢性睡眠剥夺模型组VIP、AVPmRNA表达下调;与慢性睡眠剥夺模型组比较,舒乐安定组和酸枣仁汤组VIP、AVPmRNA表达上调。结论:酸枣仁汤能够调控大脑视交叉上核VIP、AVP的表达,有效调节老年睡眠剥夺大鼠的昼夜节律。     

刺五加对睡眠剥夺大鼠学习记忆及海马LTP的影响

目的研究刺五加对睡眠剥夺大鼠学习记忆能力及海马长时程增强的影响。方法采用小平台法建立快速眼动睡眠(REMS)剥夺大鼠模型,利用行为学及神经电生理学方法,观察刺五加对其学习记忆能力及海马突触长时程增强(LTP)的影响,探讨刺五加对睡眠剥夺造成的学习记忆损害的保护作用及作用机制。结果与大平台对照组比较,睡眠剥夺组错误次数增多、认知率降低,且差异显著(P<0.01),但寻找时间缩短(P<0.05);在刺五加干预下,错误次数明显减少、认知率升高(P<0.01),寻找时间缩短(P<0.01)。睡眠剥夺组大鼠LTP明显受到抑制,高频刺激(HFS)引起的群峰电位幅值及兴奋性突触后电位斜率的增大明显低于大平台对照组(P<0.01),各剂量给药组对睡眠剥夺引起的LTP抑制现象均有明显恢复作用(P<0.01)。结论睡眠剥夺能引起动物学习记忆能力的降低,刺五加可对抗此作用,其机制可能与改善神经突触可塑性有关。     

天王补心丹对慢性睡眠剥夺模型大鼠心肌、下丘脑视交叉上核VIP、AVP表达的影响

目的 :探讨天王补心丹对慢性睡眠剥夺模型大鼠药物干预的可能机制。方法:40只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、天王补心丹组和艾司唑仑组。采用多平台水环境联合咖啡因注射复制慢性睡眠剥夺模型。造模完成后用天王补心丹和艾司唑仑对模型大鼠进行治疗。以行为学测试检测大鼠学习记忆水平,取心肌和下丘脑视交叉上核(SCN)观察形态学改变,ELISA法检测VIP、AVP的表达水平。结果:行为学测试:与模型组比较,治疗组大鼠对位训练与探查训练结果有显著性差异(P0.05,P0.01)。透射电镜:与模型组比较,治疗组大鼠心肌组织及SCN损伤程度减轻。ELISA:与模型组比较,治疗组大鼠心肌中VIP、AVP的表达下调(P0.05,P0.01),SCN中VIP、AVP的表达上调(P0.05,P0.01)。结论:天王补心丹"心脑相关"的药物干预机制可能和调节心肌、SCN中VIP、AVP的表达有关。