针刺大椎穴对癫痫大鼠NO含量及NOS阳性神经元数量的影响

通过针刺大椎穴治疗戊四唑"点燃"癫痫大鼠,观察其NO含量及NOS阳性神经元数量变化,探讨针刺治疗癫痫的机理.用戊四唑腹腔注射造成癫痫大鼠模型40例,随机分为模型组、针刺组、中药对照组、西药对照组,每组10例;并设立正常空白组10例.疗程结束后取材、固定、浸糖、切片;测定正常组、模型组及各治疗组治疗后NO含量及NOS阳性神经元数量,比较空白组与模型组指标变化,将针刺组与模型组、中药组、西药组之间进行比较.结果发现戊四唑造模后,各组大鼠大脑皮质、海马组织NO含量、NOS阳性神经元数量明显上升.治疗后,NO含量、NOS阳性神经元数量明显降低,其中,针刺组优于中药对照组、西药对照组(P<0.05).说明针刺大椎穴可以有效降低癫痫大鼠海马及大脑皮质NO含量及NOS阳性神经元数量,提示针刺抗癫痫作用可能是通过降低与癫痫发作密切相关神经递质含量而发挥作用.     

小儿抗痫胶囊对癫痫大鼠脑内GABA-T活性影响的实验研究*

[目的] 观察中药小儿抗痫胶囊对癫痫大鼠戊四唑点燃模型的影响,进一步从调节γ-氨基丁酸(GABA)代谢的角度探讨小儿抗痫胶囊的作用机制.[方法] 动物模型采用大鼠戊四唑点燃模型.采用微量紫外比色法,观察大鼠大脑皮质、双侧海马γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-T)活性的变化.[结果]中药组、西药组、模型组体质量与正常对照组相比有显著性差异(P＜0.01),模型组体质量显著低于正常组,中药组较西药组体质量显著升高(P＜0.01);模型组较正常对照组大鼠脑内GABA-T活性显著升高(P＜0.01),中药组显著低于模型组(P＜0.01).[结论] 抗痫胶囊对大鼠戊四唑点燃发作有显著对抗作用,其作用机制可能与其降低病模大鼠脑内GABA-T活性、谷氨酸(Glu)含量及增加GABA含量,影响脑内GABA代谢有关.     

癫痫清颗粒对大鼠海马区神经元影响

目的:观察癫痫清颗粒对戊四唑引起大鼠海马神经元凋亡的影响。方法:大鼠腹腔注射10 g·L~(-1)戊四唑(40 mg·kg~(-1)),每2 d 1次,连续15次,停药l周后,再次腹腔注射戊四唑,根据本次癫痫发作级别随机分为7组,每组6只,连续灌胃给药治疗4周,麻醉后取脑,通过尼氏染色观察癫痫清颗粒对戊四唑诱发大鼠慢性癫痫模型海马组织结构的影响,并通过免疫组化染色观察癫痫清颗粒对戊四唑诱发大鼠慢性癫痫模型海马组织神经元Apaf-1、caspase-9和caspase-3表达的影响。结果:与模型对照组相比癫痫清低、中、高剂量组及苯妥英钠组大鼠海马齿状回存活细胞显著升高,与模型对照组相比癫痫清低、中、高剂量组Apaf-1表达均显著降低,与模型对照组相比癫痫清中剂量组caspase-9表达显著降低,与模型对照组相比癫痫清低、中、高剂量组caspase-3表达均显著降低。结论:癫痫清颗粒对戊四唑诱发慢性癫痫模型大鼠海马区神经元具有呈剂量依赖性的保护作用。     

三氟拉嗪对癫痫大鼠NO、NOS、SOD、MDA的影响

目的探讨钙调蛋白抑制剂三氟拉嗪(TFP)对癫痫大鼠NO、NOS、SOD、MDA含量的影响。方法将SD大鼠随机分为对照组、模型组、TFP低剂量组、TFP高剂量组,模型组腹腔注射生理盐水4mL/kg、TFP低剂量组腹腔注射TFP1mg/kg、TFP高剂量组腹腔注射TFP2mg/kg,以上三组30min后腹腔注射戊四氮37.5mg/kg;对照组只予以腹腔注射生理盐水。测定大鼠海马组织NO、NOS、SOD、MDA含量。结果模型组NO、NOS、MDA含量明显升高,SOD含量明显减少,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.01);给药后TFP低、高剂量组NO、NOS、MDA含量减少,SOD含量升高,与模型组比较,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论 TFP能增加癫痫大鼠海马组织SOD含量,减少NO、NOS、MDA含量,能减轻癫痫大鼠海马组织神经元的损伤。     

铅暴露对大鼠大脑皮质和海马NOS的影响

目的 观察铅暴露对大鼠海马和大脑皮质一氧化氮合酶(NOS)的影响,探讨铅暴露对中枢神经系统损害的机制.方法 4周龄Wistar雄性大鼠,按体重用45 mg/kg醋酸铅灌胃30天;第30天时测定大鼠海马和大脑皮质总NOS和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性,对大鼠脑组织冰冻切片进行β-NADPH染色,并对海马各区nNOS阳性神经元进行数量统计分析.结果 与空白对照组大鼠比较,染铅组大鼠海马和大脑皮质总NOS活性明显降低,而iNOS活性均升高,海马CA1和齿状回nNOS阳性神经元数量减少,差异有显著性(P＜0.01).结论 铅暴露可以使大鼠海马和大脑皮质总NOS活性降低,iNOS活性升高,海马nNOS阳性神经元数量减少.     

电针预处理抑制癫痫持续状态诱发的海马区神经元凋亡研究

目的:观察电针预处理对癫痫持续状态(status epilepticus,SE)诱发的海马区神经元凋亡的影响。方法:20只SD大鼠被随意分为4组:对照组、癫痫组、电针组、电针对照组,电针组和电针对照组给予电针预处理3周后,按经典方法建立锂-匹罗卡品大鼠癫痫模型,用TUNEL法及免疫荧光法观察海马区神经元的凋亡。结果:(1)与对照组比较,癫痫组和电针对照组海马CA1/CA3区TUNEL及Caspase-3阳性的神经元明显增多(P<0.01,n=5);(2)与癫痫组和电针对照组相比,电针预处理减少了海马CA1/CA3区TUNEL及Caspase-3阳性神经元的数量(P<0.05,n=5)。结论:电针百会及大椎穴预处理,可以减低SE诱发的海马区神经元的凋亡。     

茸菖胶囊对幼年大鼠癫痫后NRSF和BDNF蛋白表达的影响

[目的] 研究茸菖胶囊对幼年大鼠癫痫后神经元限制性沉默因子(NRSF)和脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达的影响。[方法] 建立戊四唑点燃癫痫模型,分为中药高、中、低剂量组、西药组、模型组和空白组,用蛋白免疫印迹杂交法检测各组NRSF和BDNF 蛋白的变化。[结果] 幼年大鼠致痫后模型组海马NRSF和BDNF蛋白表达升高,中药高剂量组可显著降低大鼠海马齿状回NRSF和BDNF蛋白表达(P<0.01),作用优于西药组和其他中药组。[结论] 中药复方茸菖胶囊抗癫痫及改善癫痫后认知障碍机制可能与调控组蛋白乙酰化修饰及其所介导的神经元基因表达有关。     

乌灵菌粉抗大鼠戊四唑诱导癫痫的作用

目的:研究乌灵菌粉对大鼠戊四唑的癫痫点燃过程和点燃后学习能力的影响及其可能的机制.方法:将SD大鼠随机分为4组:戊四唑点燃模型组(模型对照组),低剂量乌灵茵粉组(0.3 g.kg-1),高剂量乌灵菌粉组(0.6 g.kg-1)和空白对照组.各组大鼠隔日腹腔注射亚惊厥剂量戊四唑(35 mg·kg-1),空白对照组注射生理盐水,共12次.乌灵菌粉于每次戊四唑注射前30 min灌胃.采用放射状八臂迷宫(四臂放食物)测试大鼠学习能力.化学荧光法测定大鼠脑内组胺含量.结果:(1)与模型对照组相比,低剂量乌灵菌粉组第7次注射戊四唑后发作级别显著降低,第6次注射戊四唑后肌阵挛潜伏期明显延长,第7次注射戊四唑后癫痫泛化潜伏期明显延长(P＜0.05);高剂量乌灵菌粉组第6、7和8次注射戊四唑后癫痫发作级别明显降低,第8和9次注射戊四唑后肌阵挛潜伏期显著延长,第6次注射戊四唑后癫痫泛化潜伏期明显延长(P＜0.05);(2)与空白对照组相比,模型对照组在放射状八臂迷宫训练3天后工作记忆和参考记忆错误次数均明显增加(P＜0.05),乌灵菌粉部分逆转了这种戊四唑点燃癫痫诱发的学习能力受损;(3)模型对照组海马、皮层、丘脑和下丘脑组胺含量较空白对照组明显下降(P＜0.05),低剂量乌灵茵粉组海马、高剂量乌灵菌粉组海马、丘脑和下丘脑组胺含量较模型对照组上升(P＜0.05).结论:乌灵茵粉延缓大鼠戊四唑癫痫点燃的形成过程,改善癫痫大鼠的学习能力,增强脑内组胺能神经可能是其作用机制之一.     

调督安神胶囊对PTX致痫大鼠海马神经元超微结构的影响

目的：观察调督安神胶囊对PTX致痫大鼠海马神经元超微结构的影响。方法：建立PTX癫痫大鼠模型。随机分为模型对照组，中药低、高剂量组及西药组。分别给予双蒸水和调督安神胶囊、西药灌胃。采用透射电镜法观察海马CA3区神经元超微结构的变化。结果：PTX致痫大鼠海马神经元水肿、变性，损伤明显。经过中药治疗后的大鼠海马神经元损伤较轻，尤以中药高剂量纽海马神经元损伤最轻。结论：调督安神胶囊可减轻海马神经元的损伤，进而起到神经保护作用，这可能是其改善癫痫大鼠学习和记忆障碍的机制之一。     

交通心肾法对老龄雌性大鼠血管内皮L-Arg/NOS/NO通路的影响

目的 探讨交通心肾法对老龄雌性大鼠血管内皮L-精氨酸/一氧化氮合酶/一氧化氮(L-Arg/NOS/NO)通路的影响.方法 选用15月龄雌性SD大鼠,随机将其分为老龄空白组、中药治疗组、西药对照组和中药对照组,分别给予生理盐水、交通心肾方药(20.65 g/kg)、戊酸雌二醇(0.12 mg/kg)和更年安(0.65 g/kg)灌胃,共28 d,另选3月龄大鼠作为青年组.采用放免法检测大鼠血清雌二醇(E2)、促卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH),硝酸还原酶法测定主动脉外膜NO,比色法测定主动脉外膜NOS、L-Arg.结果 与老龄空白组相比,中药治疗组NOS无明显差异(P＞0.05),西药对照组和中药对照组NOS含量均明显下降,且有显著性差异(P＜0.05).与老龄空白组相比,中药治疗组和西药对照组L-Arg含量无显著性差异(P＞0.05);中药对照组L-Arg含量明显下降,且有显著性差异(P＜0.05).与老龄空白组相比,中药治疗组和西药对照组NO均升高,且有显著性差异(P＜0.05),中药对照组NO稍有升高,但无显著性差异(P＞0.05).雌激素和NO呈正相关性.结论 交通心肾法能升高老龄雌性大鼠雌激素水平,对血管内皮L-Arg/NOS/NO通路有一定的调节作用.     

电针预处理抑制癫痫持续状态诱发的海马区神经元凋亡研究

目的：观察电针预处理对癫痫持续状态（status epilepticus,SE）诱发的海马区神经元凋亡的影响。方法：20只SD大鼠被随意分为4组：对照组、癫痫组、电针组、电针对照组,电针组和电针对照组给予电针预处理3周后,按经典方法建立锂-匹罗卡品大鼠癫痫模型,用TUNEL法及免疫荧光法观察海马区神经元的凋亡。结果：（1）与对照组比较,癫痫组和电针对照组海马CA1/CA3区TUNEL及Caspase-3阳性的神经元明显增多（P〈0.01,n=5）;（2）与癫痫组和电针对照组相比,电针预处理减少了海马CA1/CA3区TUNEL及Caspase-3阳性神经元的数量（P〈0.05,n=5）。结论：电针百会及大椎穴预处理,可以减低SE诱发的海马区神经元的凋亡。     

芍药苷对血虚肝郁证候模型大鼠海马CA3区组织形态及一氧化氮通路的影响

目的探讨血虚肝郁证模型大鼠海马CA3区组织形态、谷氨酸(Glu)、一氧化氮(NO)含量、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)蛋白表达的变化,以及芍药苷的干预作用。方法 56只雄性SD大鼠采用辐照结合束缚制作血虚肝郁证大鼠模型,随机分为模型组,芍药苷高、中、低剂量组,另设正常SD大鼠为空白组,每组14只。造模第1天开始芍药苷高、中、低剂量组每天分别灌胃40、20、10mg/kg的药物,模型组和空白组灌胃等量的纯净水,共21 d。采用大脑切片HE染色,观察病理形态学改变;邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生HPLC荧光检测法测定海马中Glu含量;格里斯法(Griess法)测定NO含量;免疫组化法测定海马CA3区i NOS蛋白的表达。结果与空白组比较,模型组海马CA3区神经元胞体收缩、染色质加深、细胞核深染、核收缩呈三角形、核仁不明显;海马组织中Glu、NO含量显著升高(P0.05),i NOS蛋白表达显著增多(P0.05)。与模型组比较,芍药苷组海马CA3区神经元细胞核未见明显异常,神经元形态基本完整;芍药苷高剂量组海马组织中Glu含量显著降低(P0.05),芍药苷高、中剂量组海马组织中NO含量显著降低(P0.05),i NOS蛋白表达显著降低。结论血虚肝郁证模型大鼠海马CA3区神经元出现萎缩等病理状态,Glu、NO含量升高,i NOS蛋白表达增多,而芍药苷对海马组织的病理变化具有改善作用,其发挥神经保护的功能可能是通过降低Glu和NO含量,降低i NOS蛋白的表达等多途径实现的。     

CHANGES OF NO CONTENT IN HIPPOCAMPUS OF DIABETES MELLITUS RATS AND PROTECTIVE EFFECTS OF SERICIN

目的:探讨丝胶对糖尿病大鼠海马一氧化氮(NO)含量的影响.方法:48只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和阳性对照组,每组12只大鼠.链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病模型,丝胶治疗组大鼠给予丝胶灌胃,阳性对照组大鼠给予二甲双胍灌胃.分别检测各组大鼠的血糖和海马NO的含量.结果:与糖尿病模型组大鼠相比,丝胶治疗组和阳性对照组大鼠的血糖和海马NO含量明显降低(P＜0.05).结论:丝胶可通过降低海马NO的含量减轻过量NO对神经元的毒性,改善糖尿病时的认知功能障碍.     

糖尿病大鼠海马NO含量的变化及丝胶的保护作用

目的:探讨丝胶对糖尿病大鼠海马一氧化氮(NO)含量的影响。方法:48只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和阳性对照组,每组12只大鼠。链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病模型,丝胶治疗组大鼠给予丝胶灌胃,阳性对照组大鼠给予二甲双胍灌胃。分别检测各组大鼠的血糖和海马NO的含量。结果:与糖尿病模型组大鼠相比,丝胶治疗组和阳性对照组大鼠的血糖和海马NO含量明显降低(P<0.05)。结论:丝胶可通过降低海马NO的含量减轻过量NO对神经元的毒性,改善糖尿病时的认知功能障碍。     

内源性组胺对大鼠戊四唑点燃癫痫诱发记忆障碍的作用

目的：研究大鼠戊四唑点燃癫痫诱发记忆障碍的发病机制，并探讨内源性组胺对此类记忆障碍的作用。方法：大鼠隔日腹腔注射亚惊厥剂量（35mg／kg）的戊四唑，直至完全点燃。采用穿梭箱被动回避试验测定大鼠的记忆能力。化学荧光法测定脑内组胺含量。大鼠脑病理切片采用HE染色，在光学显微镜下计数海马完整神经元。结果：大鼠戊四唑点燃后记忆能力明显下降，表现为穿梭箱内被动回避反应潜时缩短，而腹腔内注射组胺前体物质组氨酸则阻断了被动回避反应潜时的缩短。戊四唑点燃后大鼠海马、丘脑和下丘脑组胺含量明显下降，同时点燃使海马CA1区和CA3区完整神经元数目分别减少至对照组的72．7％和78．9％。结论：戊四唑点燃癫痫可导致大鼠记忆能力下降，可能与癫痫造成的组胺能神经活性降低和海马神经元丢失有关。     

尼莫地平对阿尔茨海默病大鼠脑组织NO、NOS含量及行为学的影响

目的：探讨尼莫地平对阿尔茨海默病（AD）大鼠脑组织一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶（NOS）浓度及行为学改变的影响。方法：SD大鼠30只，随机分为空白对照组,AD模型组和尼莫地平组，采用大鼠脑组织立体定位微量注射技术，尼莫地平组和AD模型组用鹅膏蕈氨酸（IBO）1μl(5μg)损毁大鼠双侧迈内特基底核（nbM）建立AD动物模型，空白对照组以0.1mol/L pH7.4PB液代替IBO。尼莫地平组给予尼莫地平0.5mg/kg，空白对照组和AD模型组以生理盐水代替尼莫地平，连续灌胃60d，每d2次，每次2ml。做迷宫试验及跳台试验测学习记忆能力，然后将大鼠断头处死，分离海马及大脑皮质，分别检测NO,NOS含量。结果：AD模型组较空白对照组学习记忆能力显著降低，海马及大脑皮质NO,NOS含量显著升高，尼莫地平较AD模型组学习记忆能力显著升高，海马及大脑皮质NO、NOS含量显著降低。结论：用IBO损毁大鼠双侧nbM可建立AD动物模型，尼莫地平可显著改变AD模型大鼠的学习记忆能力，降低海马及大脑皮质NO、NOS含量。     

抗癫一号对癫痫大鼠自由基代谢及海马神经元能影响

目的 探讨抗癫一号对慢性致痫大鼠自由基含量及海马神经元的影响.方法 腹腔注射戊四唑（PTZ）造成慢性癫痫大鼠动物模型,化学比色法测定其自由基含量,HE染色观察海马区神经元变化.结果 抗癫一号可减少癫痫大鼠血清内自由基含量,与模型组比较差异具有统计学意义（P ＜ 0.05或P ＜ 0.01）;可增加海马区神经元的数目,恢复神经元形态及结构.结论 抗癫一号通过增加抗氧化酶活性来阻止PTZ点燃后所产生的自由基对神经元的损害,从而起到神经保护作用.     

青藤碱对戊四唑致癫痫大鼠的抗癫痫及神经保护作用

目的:观察青藤碱(sinomenine,SN)对戊四唑致痫大鼠癫痫行为、认知功能及海马神经元损伤的影响。方法:亚惊厥剂量戊四唑(35 mg·kg~(-1))每隔一天腹腔注射一次,建立慢性点燃癫痫大鼠模型;采用Morris水迷宫方法检测大鼠学习记忆的能力;采用HE染色观察大鼠海马神经元形态学的变化;采用Hoechst 33258染色和western blot方法检测神经元凋亡情况。结果:连续给予戊四唑处理15次后,约70%大鼠完全点燃,癫痫发作级别随时间逐渐升高,潜伏期缩短,持续时间延长;而每天给予不同剂量SN(20、40、80 mg·kg~(-1))处理后可显著降低癫痫发作级别和点燃率,延长发作潜伏期,缩短持续时间;和正常对照组大鼠相比,戊四唑致痫大鼠学习记忆能力明显下降,而给予不同剂量SN(20、40、80 mg·kg~(-1))处理后显著改善癫痫大鼠的学习记忆能力;进一步研究发现,戊四唑导致海马CA1、CA3区神经元损伤,出现核浓缩、嗜酸性变、核深染、排列紊乱等形态学变化,而给予不同剂量SN(20、40、80 mg·kg~(-1))处理后明显减轻神经元的损伤;同时,不同剂量SN(20、40、80 mg·kg~(-1))也能明显抑制戊四唑诱导的海马CA1、CA3区神经元的凋亡;另外,和正常对照组大鼠比较,戊四唑致癫痫大鼠海马神经元Bax和活化的caspase-3表达显著增加,Bcl-2表达显著减少,而给予不同剂量SN(20、40、80 mg·kg~(-1))处理后明显减少Bax和活化的caspase-3的表达,增加Bcl-2表达。结论:青藤碱能抑制戊四唑致癫痫大鼠的癫痫发作,改善学习记忆能力,减轻神经元损伤,具有神经保护作用。     

戊四唑致痫小鼠海马结构内一氧化氮合酶阳性神经元的时程变化

目的观察海马内一氧化氮合酶(NOS)在戊四唑(PTZ)致痫后的时程变化.方法用NADPH-黄递酶(NADPH-d)组织化学方法的方法,分别观察正常及致痫后15min、30min、1h、2h、4h、6h、12h海马内NOS阳性神经元变化.结果致痫后15min～1h,NOS阳性神经元数量明显减少,1～2h增加至最高峰,2～12h逐渐降低,12h阳性细胞数目最少,2h最高.结论一氧化氮的含量,随癫痫发作状态的不同而增、减.     

戊四唑致痫小鼠海马结构内一氧化氮合酶阳性神经元的时程变化

目的：观察海马内一氧化氮合酶（NOS）在戊四唑（PTZ）致痫后的时程变化。方法：用NADPH-黄递酶（NADPH-d)组织化学方法的方法,分别观察正常及致痫后15min,30min,1h、2h、4h、6h、12h海马内NOS阳性神经元变化。结果：致痫后15min-1h,NOS阳性神经元数量明显减少,1-2h增加至最高峰,2-12h逐渐降低,12h阳性细胞数目最少,2h最高,结论：一氧化氮的含量,随癫痫发作状态的不同而增、减。