亲水作用色谱串联质谱法测定人血浆中的拉米夫定

目的:建立简便、快速的亲水作用色谱串联质谱法(HILIC-MS/MS)测定人血浆中的拉米夫定。方法:以13C1,15N2(拉米夫定为内标,血浆样品经乙腈沉淀蛋白后,采用Luna HILIC(100 mm×3.0 mm,3μm)柱分离。流动相为乙腈-5 mmol·L-1醋酸铵-甲酸(95∶5∶0.01,v/v/v),进样体积2μL,样品分析时间3 min。采用ESI源正离子模式、多反应监测(MRM),用于定量分析的离子反应分别为m/z230(112(拉米夫定)和m/z233(115(内标)。结果:测定人血浆中拉米夫定的线性范围为8.0～2000 ng·mL-1,定量下限为8.0 ng·mL-1,日内、日间精密度(RSD)均小于9.0%,准确度(RE)在-7.1%~2.7%之间。本法成功应用于健康受试者口服2种拉米夫定片后的生物等效性研究。结论:采用稳定同位素内标的HILIC-MS/MS法更为简便、快捷和准确,适用于人血浆样品中拉米夫定的测定。     

高灵敏度液相色谱-串联质谱法测定人血浆中普拉克索

目的:建立灵敏、易操作的液相色谱(串联质谱法测定人血浆中普拉克索,并应用于临床药动学研究。方法:血浆样品经乙醚-二氯甲烷(3:2,v/v)液-液萃取后,以乙腈-10 mmol.L-1醋酸铵-甲酸(60:40:0.1,v/v/v)为流动相,Venusil ASB-C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm)进行分离,采用电喷雾电离源,以选择反应监测(SRM)方式进行正离子检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z212→m/z(111+126+153)(普拉克索)和m/z243→m/z210(石杉碱甲,内标)。结果:测定血浆中普拉克索的线性范围为5.92～740 pg.mL-1,定量下限为5.92 pg.mL-1,日内、日间精密度(RSD)均小于9.7%,准确度(RE)在-2.5%～0.6%之间。本法被成功应用于健康受试者单剂量口服0.125 mg和0.25 mg盐酸普拉克索片的药动学研究。结论:本方法同时选择3个主要碎片离子作为普拉克索定量产物离子,明显改进了分析方法的灵敏度,适用于人血浆样品中普拉克索的测定。     

HPLC-MS/MS法测定人体血浆中扎托布洛芬的浓度

目的:建立灵敏、快速和选择性高的高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定人血浆中扎托布洛芬浓度。方法:采用Agilent ZORBAX Eclipse Plus-C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液(90:10,v/v),地西泮为内标,以多反应监测(MRM)扫描方式进行监测,监测离子质荷比:扎托布洛芬m/z 299.2→m/z 225.2,地西泮m/z 285.1→m/z193.1,血浆样品经乙腈沉淀蛋白后取上清液进样。结果:血浆中扎托布洛芬线性范围为0.02～20.0μg.mL-1,低、中、高3个浓度日内、日间精密度均小于10%。结论:本方法灵敏度高,选择性强,分析时间短,适用于人血浆中扎托布洛芬的浓度测定。     

LC-MS/MS法测定乳腺癌患者血浆中拉帕替尼浓度

目的 建立一种快速、灵敏的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法检测乳腺癌患者血浆中拉帕替尼的浓度.方法 以厄洛替尼为内标,血浆样品经乙腈直接沉淀蛋白后,经CAPCELL PAK-C18(50 mm×100 mm,3.5μm)色谱柱分离,流动相为乙腈-水(均含0.1％甲酸水)(88:12,v/v),柱温30℃,分析时...     

LC-MS/MS方法同时检测人血浆中异烟肼、乙胺丁醇和吡嗪酰胺的浓度

目的:建立同时检测人血浆中3种抗结核药物异烟肼、乙胺丁醇和吡嗪酰胺浓度的LC-MS/MS方法,用于肺结核患者及临床试验中三药血药浓度的测定。方法:以对乙酰氨基酚为内标,血浆样品经乙腈沉淀蛋白等处理后检测。采用AgilentZORBAX SB-Aq色谱柱(2.1 mm×100 mm,3.5μm)为分析柱,ZORBAX SB-Aq柱(2.1 mm×12.5 mm,5μm)为保护柱,以乙腈-5 mmol·L-1甲酸铵水溶液(含0.1%甲酸)(8:92,v/v)为流动相,使用电喷雾离子源(ESI),以正离子多反应监测(MRM)方式进行检测,异烟肼m/z 138.2→121.0,乙胺丁醇m/z 205.2→116.1,吡嗪酰胺m/z 124.1→81.1,对乙酰氨基酚m/z152.0→110.0。分析时间为5 min。结果:血浆中内源性物质对测定无干扰,异烟肼线性范围为0.1～6.0μg.mL-1,定量下限(LLOQ)为0.1μg.mL-1,乙胺丁醇线性范围为0.1～5.0μg.mL-1,定量下限(LLOQ)为0.1μg.mL-1,吡嗪酰胺线性范围为1.0～50.0μg.mL-1,定量下限(LLOQ)为1.0μg.mL-1。日内、日间精密度(RSD)均小于10%,准确率为90.4%～108.7%。结论:本方法特异性强,灵敏度高,测定结果可靠,适用于临床血浆样品的高通量分析。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中替扎尼定

目的:建立灵敏的液相色谱-串联质谱法测定人血浆中替扎尼定的浓度。方法:血浆样品碱化后经乙醚液-液萃取,以甲醇-10 mmo·lL-1醋酸铵-甲酸(55∶45∶0.1,v/v/v)为流动相,采用Zorbax SB C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm)分离,通过电喷雾电离源,以选择反应监测(SRM)方式进行正离子检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z254→44(替扎尼定)和m/z243→210(内标,石杉碱甲)。结果:测定血浆中替扎尼定方法的线性范围为10.0～5000 pg·mL-1,定量下限可达10.0 pg·mL-1。日内、日间精密度(RSD)均小于10.0%,准确度(RE)在±3.6%以内。结论:本方法灵敏度高,血浆用量少,适用于替扎尼定制剂的人体药物动力学研究。     

LC-MS/MS方法测定人血浆中多西环素浓度

目的建立迅速、简单、灵敏的液相色谱-串联质谱法测定人血浆中多西环素的浓度。方法血浆样品采用固相萃取的方法,以含0.04%TFA的混合溶液(甲醇-乙腈-水=45∶45∶10,v/v/v)为流动相;采用Dikma C18柱(30 mm×4.6 mm,5μm)分离,通过电喷雾电离源(ESI),以选择性反应监测(SRM)方式进行正离子检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z 444.7→428.1(多西环素)和m/z 464.6→448.0(内标,去甲金霉素)。结果建立的人血浆内多西环素测定方法线性范围为50⁵ 000 ng·mL-1,定量下限可达50 ng·mL-1。日内、日间精密度(RSD)均<12%。结论该方法预处理简洁,灵敏,专属性强,可方便用于人血浆中多西环素的测定。     

氯吡格雷在人血浆浓度的液质联用测定法

目的建立测定人血浆中氯吡格雷(抗心肌及抗脑梗死药)血药浓度的HPLC/MS/MS法。方法血浆样品用叔丁基甲醚提取,内标为噻氯匹定;色谱柱用X-Terra MS C_(18)(2.1 mm×50 mm,5μm),柱温30℃,流动相:乙腈-水(含10 mmol·L~(-1)醋酸铵,调pH为4.0)为70:30,流量为0.3 mL·min~(-1);质谱用ESI离子源,定量分析的离子反应分别为m/z 322→z 212 (氯吡格雷),m/z 264→m/z 154(内标噻氯匹定)。结果氯吡格雷的线性范围为10×10~4～1.2×10~4pg·mL~(-1)(γ=0.9993),日内、日间RSD均小于10%,提取回收率约为80%。结论该方法快速、准确、灵敏度高,可用于氯吡格雷血药浓度测定。     

高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中硝苯地平浓度

目的:建立高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中硝苯地平浓度。方法:以尼群地平为内标,血浆样品经乙腈沉淀后,经HPLC-MS/MS分离-分析。采用Diamonsil C18柱(2.1 mm×150 mm,5μm),以甲醇-乙腈-水(38.4∶38.4∶23.2)为流动相;流速:0.3 mL·min-1,采用电喷雾离子源(ESI),以多离子反应监测方式(MRM)进行正离子监测,硝苯地平和内标尼群地平的定量分析离子对分别为m/z369.1/224.2和m/z361.2/315.1。结果:硝苯地平血浆浓度测定方法线性范围为1.274～254.80 ng·mL-1,r=0.994 4。定量下限为1.274 ng·mL-1,方法回收率在85%～115%之间。日内和日间RSD小于11%。结论:本试验所建立起来的人血浆中硝苯地平浓度测定法灵敏、准确、可靠,适用于硝苯地平的人体内药动学研究。     

HPLC-MS/MS测定人体血浆和尿液中罗通定的浓度

目的 建立一种简便、灵敏的测定人体血浆和尿液中罗通定浓度的高效液相色谱串联质谱( HPLC-MS/MS)方法.方法 血浆、尿液样品分别采用乙腈沉淀处理后,进样分析.采用Agilent-ECLIPSE-C18柱(2.1mm×150 mm,5μm),以乙腈-0.2％甲酸溶液=85∶15为流动相,采用正离子,多反应监测方式测定样品浓度.检测离子为m/z356.3→192.3(罗通定)和m/z 285.0→193.0(地西泮,内标).结果 罗通定血浆及尿样均在2.5～1000 ng· mL-1与峰面积线性关系良好(r=0.999 4);最低定量浓度均为2.5 ng·mL-1.日内与日间RSD均＜10％,血浆样品回收率在91.4％～109.2％,尿样回收率在88.63％～115.8％.结论 本方法简便快速、灵敏准确,适用于罗通定在人体内的药物动力学研究.     

HPLC/MS/MS法测定人血浆中麦考酚酸浓度

目的 建立测定人血浆中麦考酚酸(免疫抑制剂)含量的HPLC/MS/MS方法 .方法 血浆样品经乙腈沉淀蛋白后,以15 mmol·L-1醋酸铵-甲醇梯度洗脱,用Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18色谱柱,通过电喷雾离子化三重四极杆串联质谱,经多反应监测模式检测,m/z321.2→m/z 303.0(麦考酚酸),m/z237.0→m/z194.0(卡马西平,内标).结果 血浆中麦考酚酸的线性范围为0.1～10 μg·mL-1,方法 回收率为104.1%～106.6%,日内、日间精密度均小于7%.结论 本法简便、快速、灵敏、准确,已应用于肾移植后患者麦考酚酸酯的治疗药物监测.     

LC-MS/MS方法测定Beagle犬血浆中比卡鲁胺的浓度

目的 建立灵敏的液相色谱-串联质谱法测定狗血浆中比卡鲁胺的浓度.方法 血浆样品采用乙腈蛋白沉淀方法,以0.2％甲酸-乙腈(35∶65,v/v)为流动相;采用Zorbax SB C18柱(150 mm×4.6mm,5 μm)分离,通过电喷雾电离源,以选择多反应监测(MRM)方式进行负离子检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z428.9→254.7(比卡鲁胺)和m/z 269→169.6(内标,甲苯磺丁脲).结果 建立的体内比卡鲁胺测定方法线性范围为5～2 000 ng·mL-1,定量下限可达1 ng·mL-1.日内、日间精密度(RSD)均＜10％.结论 该方法预处理操作简洁、灵敏、专属性强,可方便用于比卡鲁胺药物的体内药动学研究.     

正负离子切换液相色谱-串联质谱法同时测定人血浆中头孢他啶和他唑巴坦

目的:建立灵敏、专属的液相色谱-串联质谱法同时测定人血浆中头孢他啶和他唑巴坦,并用于临床药代动力学研究。方法:血浆样品经乙腈沉淀蛋白后,以乙腈-5 mmol.L-1醋酸铵-甲酸(20∶80∶0.16,v/v/v)为流动相,使用VenusilASB-C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm)分离。采用电喷雾电离源,多反应监测模式(MRM),以正负离子切换同时测定头孢他啶和他唑巴坦,切换时间在进样后3.8 min。头孢他啶采用正离子检测,用于定量的离子反应分别为m/z 547→468(头孢他啶),m/z 364→208(内标头孢羟氨苄),头孢他啶和内标头孢羟氨苄的保留时间分别为3.0 min和2.8 min;他唑巴坦采用负离子检测,用于定量的离子反应分别为m/z 299→138(他唑巴坦),m/z 232→140(内标舒巴坦),他唑巴坦和内标舒巴坦的保留时间分别为4.4 min和4.9 min。结果:头孢他啶和他唑巴坦的线性范围分别为0.250～250μg.mL-1和0.0250～25.0μg.mL-1,日内、日间精密度(RSD)均小于10.8%,准确度(RE)在-7.6%～2.1%之间。本法被成功应用于健康受试者静脉滴注不同剂量头孢他啶/他唑巴坦钠(6∶1)注射液(头孢他啶/他唑巴坦含量分别为1 g/0.167 g,2 g/0.333 g,4 g/0.667 g)的药动学研究。结论:该方法专属性强,灵敏度高,操作简便,适用于注射用头孢他啶/他唑巴坦临床药代动力学研究。     

液-质联用法测定人血浆伊潘立酮的药物浓度

目的:建立高效液相串联质谱方法测定人血浆中伊潘立酮的药物浓度。方法:方法色谱柱为Kromasil 60-5CN(100mm×2.1mm,5μm),流动相:乙腈与5mmol·L-1醋酸铵缓冲液(含0.1%甲酸)体积比为35∶65,流速为0.3mL·min-1,吡格列酮为内标,采用电喷雾离子源,以多反应监测(MRM)方式进行正离子检测。用于定量分析的离子分别为m/z 427.2→m/z261.2(伊潘立酮),m/z357.2→m/z133.8(吡格列酮,内标)结果:伊潘立酮的血浆浓度在20～20 000pg·mL-1范围内线性良好,定量下限为20pg·mL-1,日内精密度<3%,日间精密度<9%,回收率为96.9%～101%。结论:该法操作简单,灵敏,准确,重现性好,适用于伊潘立酮人体药动学研究及生物等效性研究。     

HPLC-MS/MS法测定血浆中的他林洛尔及人体药动学研究

目的建立一种灵敏、快速、简便的测定人血浆中他林洛尔浓度的高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS),为研究他林洛尔在人体内的药物动力学提供手段。方法以盐酸氟西汀作为内标(I.S.),血浆样品用乙腈沉淀蛋白,离心后取上清液进样,用预柱Phenomenex C18柱(10 mm×4.6 mm,5μm),Phenomenex C18反相色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),进行分离,以乙腈∶缓冲液(5 mmol.L-1醋酸胺和0.02%甲酸)(45∶55,V/V)为流动相,柱温40℃,流速:0.9 mL.min-1,HPLC-MS/MS选择m/z为364.3(母离子)和308.3(子离子)监测他林洛尔,m/z为310.0(母离子)和148.3(子离子)监测内标氟西汀。结果他林洛尔及内标盐酸氟西汀在9 min内完全分离,他林洛尔在2.0~320.0ng.mL-1时线性关系良好,相关系数为0.9976;平均萃取回收率大于77%;平均方法回收率大于91%,小于103%;最低定量限为2.0ng.mL-1;日内日间RSD均小于9%。主要药动学参数如下:Cmax(91.90±48.09)ng.mL-1;tmax(2.79±0.89)h;t21(14.67±2.15)h。结论本方法简便快速、灵敏准确,适用于他林洛尔药物动力学的研究。他林洛尔片在中国人体内的药动学参数与文献报道相似。     

LC-MS/MS法测定人血浆中氯马斯汀浓度

目的:建立LC-MS/MS法测定人血浆中氯马斯汀浓度,并进行其药代动力学和生物等效性研究。方法:血浆样品以苯海拉明为内标,经提取溶剂[正己烷-二氯甲烷-异丙醇(30∶20∶1)]萃取后进行LC-MS/MS分析。采用高效液相色谱分离系统,色谱柱为Inertsil Hilic C18柱(150 mm×3.0 mm,5μm),流动相为乙腈10 mmo·lL-1醋酸铵溶液)-甲酸(40∶60∶1)。采用质谱检测系统,ESI离子源,正离子模式,多级反应监测(MRM)方式,m/z344→215(氯马斯汀),m/z256→167(内标,苯海拉明)。结果:在0.01～5.0 ng·mL-1范围内,氯马斯汀血药浓度呈良好的线性关系(r=0.9972),精密度RSD%均小于10%,准确度在90.8%～102%。结论:本测定方法灵敏准确,适用于人血浆中氯马斯汀浓度的测定。     

HPLC-MS/MS法测定琥乙红霉素颗粒体内活性代谢物

目的:建立琥乙红霉素人体内活性代谢物红霉素的HPLC-MS/MS分析方法。方法:选用克拉霉素为内标,血浆样品经正己烷-二氯甲烷-异丙醇(300∶150∶15)提取处理,通过检测活性代谢物红霉素的浓度来监测琥乙红霉素体内行为。色谱条件Waters C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇-水(80∶20,含0.5%甲酸)为流动相,流速0.6 mL·min-1,采用HPLC-MS/MS检测系统(SRM模式),质谱采用电喷雾电离源(ESI),红霉素选择检测离子对为m/z 734→m/z 158,内标克拉霉素选择检测离子对为m/z 748→m/z 158。结果:血浆中红霉素检测方法的线性范围为9.724～2431.0 ng·mL-1,最低检测限可达9.724 ng.mL-1。血浆中红霉素的平均回收率为77.6%～80.0%;日内、日间RSD均小于11%。结论:本法灵敏、准确、选择性高,可用于监测琥乙红霉素的体内行为。     

LC-MS/MS法测定人血浆中硫酸沙丁胺醇浓度及其药动学研究

目的:建立以高效液相色谱电喷雾串联质谱法测定人血浆中硫酸沙丁胺醇浓度的方法,并研究其在健康人体内的药动学。方法:血浆样品碱化后经乙酸乙酯萃取,再进样测定,以甲醇-5%甲酸(85∶15)为流动相,苯海拉明为内标,AgilenTC-C18柱进行分离。多反应方式检测,定量分析的离子反应分别为m/z240.3→m/z148.1(硫酸沙丁胺醇)和m/z256.1→m/z167.2(苯海拉明)。结果:沙丁胺醇检测浓度在0.2～20ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9968),定量下限为0.2ng·mL-1;回收率为95.3%～98.2%,日内、日间RSD分别为3.75%～5.94%、3.15%～9.31%。健康受试者口服硫酸沙丁胺醇口腔崩解片后的药-时数据符合一级吸收的二室模型。结论:本方法简便、快速、灵敏,适用于硫酸沙丁胺醇的临床药动学研究。     

尼美舒利分散片在健康人体内的药代动力学及生物等效性的LC-MS/MS研究

目的:建立人血浆中尼美舒利浓度的LC-MS/MS测定法,并用于尼美舒利分散片的药代动力学和生物等效性研究。方法:采用自身双交叉试验设计,20名男性受试者随机分成2组,分别单剂量口服100 mg受试制剂或参比制剂,0～24 h间隔采集血样。以LC-MS/MS内标法测定尼美舒利血药浓度,使用Agilent TC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸溶液(82∶18,v/v);多反应监测[M+H]+离子通道分别为m/z 309.1→m/z 153.9(尼美舒利)和m/z 237.1→m/z 194.0(内标卡马西平),DAS 2.1计算药动学参数。结果:建立的LC-MS/MS法在0.075～12μg·mL-1范围内色谱响应与浓度相关性良好,最低定量限为0.075μg·mL-1,批内及批间精密度RSD均小于15%。受试制剂与参比制剂的Tmax分别为(3.0±0.7)h和(3.5±1.0)h,Cmax分别为(4.863±1.194)μg·mL-1和(4.657±1.038)μg·mL-1,t1/2分别为(3.2±1.0)h和(3.3±1.1)h,AUC0-24 h分别为(32.35±12.50)h·μg·mL-1和(32.32±11.69)h·μg·mL-1,相对生物利用度F为(105.2%±35.0)%。结论:建立的LC-MS/MS法准确、灵敏,结果可靠,测得尼美舒利受试制剂和参比制剂生物等效。     

LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中右旋酮洛芬的浓度

目的:建立LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中右旋酮洛芬的浓度。方法:血浆样品采用乙腈沉淀法处理,取上清液进样。以乙腈(每500 mL中加入甲酸10μL)-水(80∶20,v/v)为流动相;用Zorbax Eclipse SB-C18柱(5μm,150 mm×4.6 mm)色谱柱分离;以布洛芬为内标。流速0.5 mL·min-1;进样量25μL;柱温为室温。质谱检测采用ESI正离子模式,扫描方式为多反应监测,扫描离子对m/z右旋酮洛芬253.0/209.0,布洛芬204.8/160.8。结果:右旋酮洛芬的线性范围为1.0～1000 ng·mL-1,线性关系良好(r=0.9979),最低定量下限为1.0 ng·mL-1,绝对回收率在100.0%～104.3%之间,变异系数均小于6%。结论:该方法预处理快速简单,灵敏度高,所建立的LC-MS/MS法准确、可靠,可用于犬血浆中右旋酮洛芬的浓度测定及药代动力学研究。