紫杉醇对人腺样囊性癌细胞ACC—2体外辐射增敏作用

目的 经体外实验评价紫杉醇对人腺样囊性癌细胞ACC-2的辐射增敏作用，初步阐明其机制。方法 用克隆形成法检测不同时间-浓度条件紫杉醇和／或放射作用后的人腺样囊性癌细胞ACC-2细胞存活分数，计算辐射增敏率(SER)。用流式细胞仪分析不同时间-浓度条件下紫杉醇对细胞周期和细胞凋亡的影响。结果 紫杉醇对ACC-2细胞具有体外增殖抑制作用。10，100，1000nmol/L紫杉醇作用24h后SER分别为1.29，1．66和1．23。细胞暴露于紫杉醇后发生G2／M期阻滞，紫杉醇作用时间和浓度越高，G2／M期细胞比率也越高。100，1000mol/L紫杉醇作用24h后G2／M期细胞比率明显升高。10nmol/L紫杉醇作用24h细胞凋亡率为20．7％。结论 一定条件下紫杉醇对人腺样囊性癌细胞ACC-2有体外辐射增敏作用。紫杉醇的辐射增敏作用可能是一个多机制事件，紫杉醇的G2／M期阻滞作用和诱导细胞凋亡作用在其中起重要作用。     

紫杉醇对人腺样囊性癌细胞株ACC-2体外辐射增敏作用

目的 评价紫杉醇对人腺样囊性癌细胞株ACC-2的辐射增敏作用。方法 用克隆形成法检测不同时间-浓度条件紫杉醇和／或放射作用后的人腺样囊性癌细胞株ACC-2细胞存活分数，计算辐射增敏率(SER)。结果 紫杉醇对ACC-2细胞具有体外增殖抑制作用。人腺样囊性癌细胞株ACC-2的平均效应剂量(Do)=1．43Gy，Dq=3．6Gy，10，100，1000nmol紫杉醇作用24h后SER分别为1．29，1．66和1．23。结论 人腺样囊性癌细胞株ACC-2具有一定的辐射抗性。紫杉醇对其体外增殖抑制作用表现为时间．浓度依赖性效应。一定条件下紫杉醇对人腺样囊性癌细胞株ACC-2具有辐射增敏作用。     

青蒿素对人宫颈癌细胞的毒性和放射增敏研究

目的探讨青蒿素对宫颈癌细胞系HeLa的毒性和放射增敏作用。方法采用MTT法检测青蒿素对HeLa细胞的毒性,测出青蒿素的最适作用浓度和作用时间。用MTT法检测青蒿素对HeLa细胞放射增敏的影响,用多靶单击方程拟合HeLa细胞的剂量存活曲线求出辐射增敏比,评价增敏效果。用流式细胞仪检测细胞周期。结果青蒿素与HeLa细胞作用24h的IC50为600.19nmol/ml,作用48h的IC50为160.71nmol/ml。青蒿素对HeLa细胞的辐射增敏比（SER）为1.17。单放组和增敏组放疗后24h的周期变化,不同照射剂量的增敏组G2/M期比例下降。结论青蒿素对宫颈癌细胞系HeLa有毒性作用,且有剂量依赖性和时间依赖性。青蒿素对HeLa细胞有放射增敏性,青蒿素能抑制电离辐射诱导的G2期阻滞。     

紫杉醇对肾癌细胞抗癌作用及分子机制的研究

目的探讨紫杉醇对肾癌细胞的抗癌作用及分子机制。方法用不同浓度的紫杉醇(浓度分别为10nmol/L、102nmol/L、103nmol/L)作用于肾癌细胞株48小时后,采用光镜观察紫杉醇对肾癌细胞增殖效应的影响,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度紫杉醇(10、102、103、104nmol/L)对肾癌细胞的生长抑制作用。观察102nmol/L紫杉醇组作用时间分为12h、24h、48h和72h后收集细胞,采用流式细胞术检测紫杉醇对肾癌细胞周期的影响。结果光镜下形态学观察显示不同浓度紫杉醇(10nmol/L、102nmol/L、103nmol/L)处理肾癌细胞48h后,可见早期的凋亡细胞。MTT法结果提示,不同浓度的紫杉醇均可显著抑制肾癌细胞的增殖,且抑制率呈时间、剂量依赖关系。流式细胞术检测发现紫杉醇可导致肾癌细胞周期G2/M期阻滞,具有时间依赖性,并且具有诱导肾癌细胞凋亡的作用。结论紫杉醇能够抑制肾癌细胞的增殖,并阻滞细胞周期在G2/M期。     

Glu-GNPs对人肺腺癌细胞株A549放射增敏的初步探讨

目的探讨偶联葡萄糖的纳米金颗粒(Glu-GNPs)对人A549细胞的放射增敏作用及其机制。方法噻唑蓝(MTT)法检测低浓度(≤20 nmol/L)Glu-GNPs联合放射对A549细胞存活的影响,克隆形成检测Glu-GNPs对A549细胞的放射增敏作用,流式细胞仪(FCM)检测细胞周期及其凋亡。结果低浓度Glu-GNPs对A549细胞生长无明显抑制,联合X射线后具有抑制作用,在15 nmol/L范围内,随浓度增大,抑制作用增强;15 nmol/LGlu-GNPs对A549细胞有放射增敏作用,由Dq、Do计算放射增敏比(SER)分别为1.93、1.10;Glu-GNPs、单纯放射均可诱导细胞凋亡,凋亡率分别为(7.64±1.43)%、(13.46±1.99)%,联合放射组凋亡率为(21.43±1.04)%,显著高于前两组(P<0.01);Glu-GNPs作用后,细胞周期发生变化,表现为S期减少,G2/M期增加(P<0.05)。结论 Glu-GNPs对人肺腺癌细胞株A549具有放射增敏作用,其机制可能为抑制细胞亚致死损伤修复,阻滞细胞于G2/M期,并诱导细胞凋亡。     

紫杉醇诱导黑色素瘤细胞凋亡的研究

目的：探讨紫杉醇体外抑制人黑色素瘤细胞（A375细胞）增殖及诱导凋亡作用机制。方法：四甲基偶氮唑蓝（MTT）还原法测定细胞活力；光镜和电镜观察细胞形态变化；流式细胞术（FCM）检测细胞周期和凋亡率。结果：紫杉醇通过诱导细胞凋亡抑制A375细胞生长。并呈时间和剂量依赖性（P〈0．01）；当0．01-1μmol／L紫杉醇作用于培养细胞24h后即可引起猾亡小体等典型细胞凋亡形态学改变；FCM分析显示：紫杉醇在0．001μmol／L即可诱导细胞凋亡，但不影响细胞周期，在0．01μmol／L时使G0／G1期细胞明显减少，在0．1μmol／L以上时使细胞发生G2／M期阻滞。结论：紫杉醇具有抑制A375细胞生长和诱导细胞凋亡作用。不同浓度紫杉醇诱导细胞凋亡的作用机制不同。     

多西紫杉醇对人舌鳞癌Tca8113细胞的生长抑制作用

目的研究多西紫杉醇对人舌鳞癌Tca8113细胞增殖及凋亡的作用。方法将0．1μmol／L的多西紫杉醇分别作用于Tca8113细胞12、24、48h,分别用倒置显微镜观察细胞形态、流式细胞术检测细胞凋亡状况;将浓度为0．001、0．01、0．1、1、10μmol／L的多西紫杉醇分别作用于Tea8113细胞12、24、48h后,用MTT法检测细胞增殖状况。结果多西紫杉醇对Tea8113细胞的增殖有明显的抑制作用,且浓度在0．001、0．01、0．1、1、10μmol／L时呈时间和浓度依赖性;镜下可见典型的凋亡细胞形态学特征。流式细胞术检测：多西紫杉醇浓度为0．1μmol／L时,作用12、24、48h,凋亡率增加,细胞阻滞于G2／M期。结论多西紫杉醇对Tca8113细胞有增殖抑制和诱导凋亡作用,这可能与抗癌机制有关。     

蛋白酶体抑制剂PS-341对白血病细胞株SHI-1的生长抑制作用研究

目的探讨蛋白酶体抑制剂PS-341对膜连蛋白急性单核细胞白血病细胞株SHI-1的抑制作用。方法台盼蓝拒染法观察不同浓度PS-341对SHI-1细胞活力的影响，用异硫氰酸荧光黄（Annexin—V—FITC）、碘化丙啶（PI）检测60nmol／L浓度PS-341处理0、6、12、24h时的SHI-1细胞凋亡率，并用流式细胞仪检测细胞周期。结果PS～341呈时间和剂量依赖性抑制SHI-1细胞活力；60nmol／L浓度PS-341在0、6、12、24h诱导SHI-1细胞凋亡率分别为4．2％、8．5％、13.7％和30．1％；流式细胞仪检测显示，60nmol／L浓度PS-341处理SHI-1细胞0、6、12、24h，G1期的细胞比例分别为46．0％、30．0％、14．3％和0.8％，G2/M期的细胞比例分别为160％、25．5％、49．4％和69．0％。结论PS-341可以抑制SHI-1细胞生长，并能诱导其凋亡，使SHI-1细胞停留在G2/M期。     

体外观察紫杉醇对肝癌HepG2细胞生长的影响

目的：观察微管稳定剂紫杉醇对肝癌HepG2细胞的作用。方法：检测紫杉醇对HepG2细胞作用的效应和剂量效应，在光镜和电镜下观察紫杉醇作用后细胞形态变化；用流式细胞仪分析细胞周期的改变。结果：随着作用时间及药物浓度的增加，紫杉醇对HepG2细胞的增殖抑制作用就越明显。70μmol/L紫杉醇作用72h，细胞生长抑制率达80％，形态学及流式细胞仪分析显示S期及G2／M期阻滞和细胞凋亡。结论：紫杉醇诱发的人肝癌细胞的凋亡与细胞DNA合成期及分裂期阻滞密切相关，这一作用机制将为临床治疗提供理论依据。     

紫杉醇对HEC-1-B细胞凋亡诱导作用的实验研究

目的:探讨紫杉醇对体外培养的人子宫内膜腺癌细胞(HEC-1-B)细胞凋亡的诱导作用. 方法:体外培养HEC-1-B细胞,用浓度2, 4, 8, 16, 20 nmol/L的紫杉醇作用细胞12 h,24 h,48 h后,提取细胞DNA片段进行琼脂糖凝胶电泳;消化HEC-1-B细胞并经碘化丙锭(PI)染色后,流式细胞仪(FCM)对细胞进行细胞周期分析;电子显微镜对紫杉醇作用后的HEC-1-B细胞进行形态学分析. 结果:体外培养的HEC-1-B细胞经不同浓度的紫杉醇处理后,细胞生长明显受到抑制;于8 nmol/L紫杉醇作用48 h后可观察到细胞凋亡特异的DNA梯状电泳;流式细胞仪分析证实,细胞凋亡率达19.7%;且电镜下可观察到典型的凋亡早期形态学改变. 结论:人子宫内膜腺癌细胞(HEC-1-B)细胞对紫杉醇具有药物敏感性,紫杉醇对HEC-1-B细胞的杀伤作用,是通过诱导细胞凋亡途径实现的.     

紫杉醇对人肺腺癌细胞系A549生长抑制作用的研究

目的:评价紫杉醇对肺腺癌细胞A549的生长抑制作用,以及诱导凋亡与G2-M期阻滞的关系。方法:紫杉醇不同浓度、不同时间分别处理A549细胞,采用MTT试验和流式细胞术进行检测及分析。结果:紫杉醇对A549的细胞毒性呈时间依赖性(P<0.05),10~1 000 nmol/L的浓度对A549生长的影响差异不显著(P>0.05)。紫杉醇浓度≤100 nmol/L时,G2-M期细胞的比率随浓度增加而增高(P<0.05);凋亡的比例在低浓度范围内(0.1~10 nmol/L)呈浓度依赖性,浓度进一步增加,反而降低。10 nmol/L作用时,凋亡的发生呈时间效应;1 000 nmol/L作用时,G2-M期阻滞表现出时间效应,但不如低浓度诱导凋亡出现的早。紫杉醇诱导的凋亡和G2-M期阻滞无相关性(P>0.05)。结论:紫杉醇对A549的生长抑制作用呈时间依赖性,但在一定浓度范围内剂量效应不明显;低浓度紫杉醇虽然对G2-M期阻滞的影响较小,但却能比高浓度更早诱发凋亡,延长作用时间亦可达到有效抑制肿瘤细胞增殖的目的。     

Tip30联合紫杉醇对腺样囊性癌细胞生长抑制的实验研究

目的:观察抑癌基因Tip30联合紫杉醇抑制腺样囊性癌细胞ACC-2生长及特征性细胞核DNA变化.方法:待检ACC-2细胞分为4组:紫杉醇组、转基因组、紫杉醇 转基因组、空白对照组,采用MTT法检测细胞增殖率;DNA片段分析检测DNA裂解.结果:不同处理组检测结果分析显示,紫杉醇 Tip30组ACC-2细胞生长明显受到抑制,DNA裂解片段最为明显;单项处理组细胞生长亦受到抑制;对照组细胞生长未受影响.结论:Tip30联合紫杉醇可显著抑制ACC-2细胞生长,出现特征性DNA ladder现象.     

Effect of Exogenous bFGF on the Proliferation of Human Adenoid Cystic Carcinoma ACC-2 Cells

To observe the effects of basic fibroblast growth factor （bFGF） on human adenoid cystic carcinoma ACC-2 cell line proliferation and ERK, cyclin D1/p21^waf/cip1 signaling pathways, human adenoid cystic carcinoma cells （ACC-2） were cultured and the influence of bFGF of different concentrations on cell proliferation was determined by MTT. Protein was detected by immuno-precipitation and ERK activity by using ERK agent kit. p-ERK1/2 and down-stream cyclin D1, p21^waf/cip1 expression were detected by Western blotting and the interfering role of mitogen protein-activated kinase （MEK） suppressor U0126 in the afore-mentioned indicators was examined. MTT demonstrated ACC-2 cell proliferation was substantially enhanced by bFGF, immuo-precipitation displayed ERK activity was up-regulated by bFGF, and immuno-imprinting also showed p-ERK1/2, cyclin D1 expression was greatly enhanced and p21^waf/cip1 expression was inhibited by bFGE U0126 suppressed the effect of bFGF. It is concluded that bFGF can promote the proliferation of human adenoid cystic carcinoma ACC-2 cells, and its pathways are associated with the up-regulated activity and expression of p-ERK1/2, inhibited p21waf/cip1 expression and enhanced cyclin D1 expression.     

熊果酸人腺样囊性癌对ACC-83侵袭与转移的影响

目的探讨熊果酸对人腺样囊性癌ACC-83细胞体外侵袭及转移的影响。方法应用不同浓度熊果酸处理人腺样囊性癌ACC-83细胞,通过Transwell小室模型测定其侵袭力及粘附力,细胞迁移实验测定细胞的运动能力,光学显微镜下观察细胞形态学变化。结果熊果酸能有效抑制人腺样囊性癌ACC-83细胞侵袭力、粘附力及运动能力（P〈0.05）,呈剂量效应关系（P〈0.05）。同时发现熊果酸处理组悬浮细胞增多,细胞体积变小,形态较圆,伪足数目较少。结论熊果酸具有抑制人腺样囊性癌ACC-83细胞侵袭与转移的作用。     

应用抑制性消减杂交技术分析涎腺腺样囊性癌转移相关基因

目的：克隆涎腺腺样囊性癌转移相关的基因。方法：应用mRNA抑制性消减杂交技术，研究涎腺腺样囊性癌高、低转移细胞系基因表达上的差异。结果：以高转移细胞ACC-M为测试子，低转移细胞ACC-2为驱赶子，获得高表达的基因序列有7个，均为已知序列同源基因。其中XAGE-1b基因为肿瘤睾丸抗原家族中的一个重要基因。结论：与ACC-2相比ACC-M中部分基因的高表达与涎腺腺样囊性癌高转移特性的获得有关，此结果为进一步探索腺样囊性癌肿瘤转移分子机理以及肿瘤转移控制和基因治疗提供了重要的依据。     

腺病毒介导的P~(53)基因对涎腺腺样囊性癌细胞系生长的影响

目的研究P53基因对涎腺腺样囊性癌细胞系生长的影响。方法以人涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83、SACC-LM、ACC-2、ACC-M和NACC为实验对象,将载有人野生型P53cDNA的重组腺病毒(Ad5CMV-P53)感染涎腺腺样囊性癌细胞系,观察Ad5CMV-P53对涎腺腺样囊性癌细胞生长的影响。结果5种涎腺腺样囊性癌细胞系转染Ad5CMV-P53病毒后,均可以诱导其发生凋亡,使细胞系生长受到明显的抑制。结论Ad5CMV-P53介导的野生型P53基因,可能是一种有效的治疗涎腺腺样囊性癌的辅助手段。     

Notch信号通路相关基因的表达与涎腺腺样囊性癌转移的关系

目的筛选与涎腺腺样囊性癌转移相关的Notch信号通路基因。方法对已构建的涎腺腺样囊性癌高低转移细胞株ACC-M、ACC-2基因表达谱进行生物信息学分析,在与Notch信号通路基因进行比对后,筛选出差异基因,通过荧光实时定量PCR技术对相关基因的表达差异进行初步验证。结果涎腺腺样囊性癌的表达谱中有46个基因与Notch信号通路有关。验证发现,Notch-1,Notch-2,Notch-4,CHUK,FOXC1,FZD2,FZD3,GBP2和RUNX1在2个细胞株中的表达差别有统计学意义（P〈0．05）,同时Notch-1在发生转移的涎腺腺样囊性癌中的表达明显高于未发生转移的涎腺腺样囊性癌（P〈0．05）。结论Notch信号通路中的多个基因可能参与了涎腺腺样囊性癌的发生和发展;Notch-1的表达与涎腺腺样囊性癌的发生、转移密切相关。