铁皮石斛茎节离体培养的研究

目的通过无菌茎段实现铁皮石斛快速繁殖。方法将铁皮石斛试管苗茎节接种于不同NAA浓度的MS培养基上诱导腋芽萌发,并在含不同激素配比和有机添加物的培养基上继代和诱导生根。结果NAA0.4mg/L,6-BA5mg/L时铁皮石斛腋芽萌发率达93.33%;NAA0.3mg/L,6-BA2mg/L时丛苗的生根率达96.67%,香蕉汁和土豆汁能够显著促进丛生芽的增殖和壮苗生根。结论建立了适合铁皮石斛茎段离体培养的快速繁殖体系。     

铁皮石斛原球茎高效再生体系的研究

目的以铁皮石斛Dendrobium officinale实生种子为外植体,研究铁皮石斛原球茎的增殖、分化、诱导生根等条件,筛选出适宜铁皮石斛原球茎高效再生的诱导条件,建立高效的再生体系。方法以铁皮石斛种子为外植体,在培养基上诱导产生原球茎,经过增殖培养后,转移到分化培养基中诱导芽苗分化,待分化的芽苗长到1~2 cm时,转移到生根培养基诱导生根,最终长成完整的再生植株。结果适宜铁皮石斛生长的基本培养基为1/2 MS;原球茎诱导的培养基为1/2 MS+1.0 mg/L6-BA+0.2 mg/L NAA+50 g/L土豆泥;原球茎增殖的最适培养基为1/2 MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,最高增殖系数达23;最佳分化培养基为1/2 MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,平均分化率最高达95%;最佳生根培养基为1/2 MS+0.3mg/L NAA+50 g/L土豆泥,生根率达100%。结论铁皮石斛实生种子是铁皮石斛离体繁殖的优良外植体来源。以铁皮石斛种子诱导获得的高效再生技术体系可以为铁皮石斛快速繁殖和工厂化生产提供理论基础。     

铁皮石斛组培快繁体系专用培养配方的研究

目的建立一种铁皮石斛组培快繁体系专用培养配方。方法以铁皮石斛试管苗为材料,研究了不同生长调节剂配比和不同基本培养基对铁皮石斛增殖、生根、壮苗的影响,以及不同移栽基质组合对铁皮石斛移栽成活率的影响。结果最适诱导丛生芽增殖的培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;最适诱导生根的培养基为1/2 MS+0.05mg/L NAA+1 mg/L的活性炭;最适合壮苗的培养基为N6+0.1 mg/L IBA+0.5 mg/L NAA;移栽成活率较高的栽培基质为木炭、火山泥和经发酵的树皮,比例为1∶1∶1。结论实现了铁皮石斛快速繁殖体系专用培养配方的建立,大大缩短了铁皮石斛种苗培育时间。     

铁皮石斛茎段原球茎的诱导增殖与分化

目的:探讨植物生长调节剂、基本培养基、蔗糖质量浓度以及相关添加物对铁皮石斛茎段原球茎的诱导、增殖、分化以及根部生长等方面的影响。方法:通过正交试验方式,要求没有添加激素下,对铁皮石斛茎段原球茎进行消毒处理、试验培养基的配备、对原球茎进行诱导、对原球茎进行增殖和分化处理、生根的培养等,分析不同植物生长调节剂、基本培养基配比对于茎段原球茎的诱导影响,不同基本培养基、马铃薯泥以及蔗糖浓度增殖分化原球茎效果,以及香蕉泥、萘乙酸(NAA)和马铃薯泥对铁皮石斛茎段原球茎生根效果。结果:1)最适宜诱导铁皮石斛茎段原球茎的培养基组合是NAA 0.1 mg/L+1/2MS(Murashige and Skoog)培养基+6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)4 mg/L。2)铁皮石斛茎段原球茎增殖最佳的培养基是:MS+蔗糖30 g/L;分化的最佳培养基是:马铃薯泥10%+蔗糖10 g/L+1/2 MS。3)铁皮石斛茎段原球茎的生根最佳培养基组合是马铃薯泥10%+1/2 MS+NAA 1 mg/L+香蕉泥10%。结论:在没有添加激素的前提下,基于正交试验方式发现变化蔗糖含量和基本培养基能够对铁皮石斛茎段原球茎增殖和分化效果进行调节,并找出了最理想的组合模式。     

铁皮石斛快繁技术体系研究

目的以铁皮石斛Dendrobium officinale带芽茎段为材料,对铁皮石斛的组织培养进行系统研究,以期建立铁皮石斛的快繁技术体系。方法采用植物组织培养的方法对铁皮石斛外植体的消毒方法、原球茎的诱导、增殖、分化、幼苗生根及瓶苗移栽等进行研究。结果铁皮石斛外植体最佳的消毒方式为75%乙醇消毒30 s,再用0.1%HgCl2消毒10 min;铁皮石斛带芽茎段原球茎诱导的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+2 g/LAC,诱导率达到34.98%;原球茎增殖的最佳培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.8 mg/L 2,4-D+2 g/LAC,增殖率达到89.6%;原球茎分化的最佳培养基为MS+1.2mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA+2 g/L AC,分化率达到89.6%;幼苗生根的最佳培养基配方为1/2 MS+2.5 mg/L NAA+15%土豆汁+2 g/LAC,生根率达到90.4%～92.8%;瓶苗移栽最佳方式为大苗、树皮块苔藓草做基质、基质中添加0.03 mg/L赤霉素,并接种适量菌根真菌Epulorhiza sp.。结论建立了铁皮石斛的快繁技术体系,为铁皮石斛的工业化生产奠定技术基础。     

印尼莪术快速繁殖技术初步研究

以印尼莪术根茎为外植体,诱导不定芽、增殖至生根形成完整植株的试验。结果表明:较好的不定芽诱导培养基为MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.5mg/L,芽的增殖培养基为MS 6-BA 1.2 mg/L NAA 0.1 mg/L,试管苗的生根培养基为1/2MS NAA 0.5 mg/L。     

流苏石斛丛生芽增殖和生根的研究

目的为了提高流苏石斛的增殖系数。方法以流苏石斛的无菌苗为材料,研究不同浓度的激素、香蕉汁、土豆汁、椰汁对流苏石斛丛生芽增殖的影响,以及激素对流苏石斛丛生芽生根的影响。结果适宜丛生芽增殖的培养基为MS+6-BA2.0 mg/L+NAA 1.2 mg/L+香蕉汁10%,增殖系数达10.769;1/2MS+NAA 0.2 mg/L+IBA 2.0 mg/L+AC 0.1%时生根效果最好,生根率达90.19%,而且根生长健壮,平均生根数为4.778。结论生长素和细胞分裂素进行配合使用,能有效的促进石斛丛生芽的增殖。低浓度激素培养的丛生芽更容易生根。     

植物生长物质对地榆不同性质芽体诱导分化及增殖的影响

目的:研究植物生长物质对地榆不同性质芽体诱导分化及增殖的影响,建立地榆无性系快繁技术体系。方法:采以地榆叶茎和花茎为外植体,接种到添加不同激素的培养基上,分别进行丛生芽途径和愈伤组织植株再生的组培快繁。结果:花茎在MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA培养基中诱导丛生芽的生长情况最好,在MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA培养基中次之;叶茎在4种诱导丛生芽培养基中均不能诱导出丛生芽。继代增殖培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA,生根培养基为1/2MS+0.5 mg/L NAA,丛生芽均生长情况良好。结论:建立了地榆无性系快速繁殖技术体系。     

麻花秦艽休眠芽离体培养时的丛生芽发生途径研究

目的:以休眠芽为外植体,建立麻花秦艽丛生芽再生的实验技术体系,为麻花秦艽种苗工厂化离体快繁和种质资源离体保存提供理论依据和技术支撑。方法:以MS为基本培养基,添加不同浓度和种类的细胞分裂素和生长素,诱导休眠芽产生丛生芽。以1/2MS为基本培养基,添加不同浓度和种类的生长素诱导丛生芽生根。结果:MS+2.0 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂培养基是诱导休眠芽产生丛生芽及丛生芽继代的最佳培养基,丛生芽诱导率为93.3%,丛芽经继代培养后芽增殖系数为5.6。最佳生根培养基是1/2MS(无机盐减半)+2.0 mg/L IAA+0.5 mg/L IBA+15 g/L蔗糖+7 g/L琼脂,生根率达93.5%,再生植株生长健壮。结论:该试验建立了以休眠芽为外植体的麻花秦艽丛生芽再生植株的技术体系。     

五指毛桃组织培养获得再生植株的研究

目的采用组织培养快繁技术培养五指毛桃种苗,为人工种植提供种源。方法采用五指毛桃叶片作外植体,以MS和1/2 MS为基本培养基,采用正交设计研究植物生长调节剂多因素组合(6-BA、NAA、2,4-D、IAA、KT和IBA)对五指毛桃初代诱导、不定芽分化和诱导生根的影响。结果不定芽最佳诱导培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,外植体经20 d诱导培养,可分化形成不定芽72个;MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA+0.3 mg/L KT最利于不定芽继代增殖,增殖倍数6.67;1/2 MS+1.0 mg/L IBA+0.3 mg/L NAA最适于诱导生根获得再生植株,生根率100%;宜移栽于泥炭-珍珠岩(1︰1)的基质上,成活率为93%。结论此途径繁殖速度快、再生率高,能为栽培五指毛桃提供大量种苗。     

老鸦瓣芽茎组织培养初步研究

目的 建立老鸦瓣芽茎愈伤组织诱导及丛生芽增殖体系。方法 以老鸦瓣冷藏芯芽产生的芽茎为外植体,MS为基本培养基,考察不同质量浓度6-BA、NAA对愈伤诱导、分化及丛生芽增殖的影响。结果 芽茎诱导愈伤的最佳培养基为MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 2.0 mg/L,愈伤诱导率78.54%,诱导出的愈伤组织在原培养基上继代培养增殖后即可进行芽分化;愈伤分化不定芽最佳培养基为MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L,芽诱导率为66.21%;丛生芽增殖培养基为MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 0.2 mg/L,增殖系数2.48。结论 筛选出芽茎诱导愈伤、分化不定芽及丛生芽增殖的培养基,初步建立了老鸦瓣芽茎组织培养体系。     

瑞香狼毒不定芽生长过程黄酮类和香豆素类成分累积研究

目的 研究瑞香狼毒Stellera chamaejasme不定芽生长过程黄酮类和香豆素类成分的累积规律.方法 采用组织培养筛选不定芽诱导和生长的最适培养基;分别通过分光光度法、高效液相色谱法分析不定芽生长过程总黄酮和3种香豆素类成分伞形花内酯、瑞香素和东茛菪内酯的动态累积.结果 不定芽诱导最适培养基为MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L NAA,培养4周后,平均每个顶芽诱导35个不定芽;不定芽生长最适培养基为MS+0.3 mg/L BA+0.1 mg/L NAA,培养4周后,芽平均株高为2.3 cm;生长在最适培养基的不定芽,其总黄酮的累积量在第5周达到最高,为0.218 g;3种香豆素类成分的量在整个不定芽生长中均表现随培养时间而增加,到第5周,质量分数均达到最高值,但均不及野生根中的量,而且质量分数高低顺序也发生变化.结论 瑞香狼毒不定芽中黄酮类和香豆素类成分累积最高为培养后的第5周.     

黑果枸杞基茎丛生芽诱导及植株高效再生体系的建立

目的优化黑果枸杞Lycium ruthenicum离体培养方法及条件,探索有效增殖方式,筛选适宜的植株再生途径,建立其人工高效繁殖技术体系。方法以无菌实生苗带1～2个节的茎段为材料,采用MS、改良的MS1以及改良的MS2为基本培养基,通过单因素、完全组合及L_9(3~4)正交试验研究不同植物激素种类及其质量浓度对愈伤组织诱导、腋芽萌发、基茎不定丛芽诱导及植株再生的影响。结果在MS+NAA 1.0 mg/L+6-BA 0.1 mg/L培养基中,可诱导出大量愈伤组织,但其再分化能力较弱,培养35 d后最高增殖系数仅为4.36;而在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.05 mg/L+KT 0.5 mg/L中培养,随着腋芽萌发,茎段与培养基接触的节处开始膨大并出现不定芽点,萌发出基茎丛生芽,发生率达100%,培养45 d增殖系数最高可达到42.84;试管苗生根的适宜培养基为改良的MS1+NAA 1.0 mg/L,培养40 d后生根率达98.9%;试管苗经炼苗后移栽成活率90%以上。结论研究通过基茎丛生芽这一全新的增殖途径,成功建立了黑果枸杞体外高效再生体系,不仅大大提高了试管苗的产量及品质,也为枸杞属其他植物的体外快繁提供了另一思路。     

安徽药菊茎尖组织培养技术的研究

目的 :研究安徽药菊茎尖组织培养技术 ,建立最佳培养条件。方法 :取药菊的茎尖 0.5mm左右 ,分别在不同的培养基中培养 ,诱导其为完整植株。结果与结论 :以MS+6-BA 2mg·L^-1+NAA 0.2mg·L^-1为茎尖诱导培养基较好 ,40d后 ,芽诱导率达 80%以上 ;以MS+6BA2mg·L^-1+NAA0.5mg·L^-1为芽增殖培养基 ,25～30d后 ,芽增殖系数达 4～7倍 ;生根培养基以MS +NAA 0.5mg·L^-1为宜 ,生根率 100% ,根系粗壮 ,移栽易于成活。     

北细辛叶柄愈伤组织的增殖培养及器官分化研究

目的研究北细辛Asarum heterotropoides叶柄愈伤组织增殖培养、再生芽分化及不定根诱导的最适条件,建立高效的愈伤组织培养和再生体系。方法以北细辛幼嫩叶柄诱导出愈伤组织,于含不同质量浓度6-苄基腺嘌呤(6-BA)和萘乙酸(NAA)的增殖培养基中扩大培养,选取嫩绿致密的愈伤组织接种在不同激素浓度配比的分化培养基上诱导再生芽及不定根,经驯化后移栽。结果愈伤组织增殖较适培养基为1/2 MS+0.40 mg/L 6-BA+0.10 mg/L NAA,在含0.40 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA的1/2 MS培养基中再生芽分化率最高,无激素添加的1/2 MS培养基适于壮苗培养,不定根诱导最适培养基为1/4 MS+0.25 mg/L IBA。结论确定北细辛愈伤组织增殖及分化的最适培养基及激素水平,建立了完善的北细辛再生体系,成功获得再生植株。     

盾叶薯蓣成熟叶片植株再生的研究

目的 :以成熟叶片为外植体 ,建立一套盾叶薯蓣Dioscoreazingiberensis的快速繁殖技术。方法 :以大量元素减半的MS培养基为基本培养基 ,通过研究BA ,NAA和IBA对愈伤组织诱导、不定芽分化、不定芽增殖和生根的影响找出相应的最佳激素组合。结果与结论 :在含 1.0～ 5 .0mg·L^-1BA和 1.0～ 2 .0mg·L^-1NAA的培养基上 ,80 %以上的叶片可以在 60d内形成愈伤组织 ;愈伤组织转到含 2 .0～ 5 .0mg·L-1BA和 0 .2～ 0 .5mg·L^-1NAA的培养基上后 ,60 %以上的愈伤组织可以在 50d内分化出不定芽 ;在含 2 .0mg·L-^-1IBA的培养基上 ,100 %的不定芽可在20d内长出 4～ 6条不定根。再生植株移栽后 ,生长健壮 ,成活率达 80 %以上。     

水半夏组培快繁体系的建立

目的建立水半夏的组培快繁体系,为快速、大量生产水半夏种苗提供基础。方法利用不同植物激素配比的培养基,以水半夏块茎为外植体进行试验。结果愈伤培养基MS+NAA 0.2 mg/L+KT 1.0 mg/L+蔗糖3%+琼脂6 g/L可成功诱导水半夏愈伤组织;丛生芽培养基MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 2.0 mg/L+蔗糖3%+琼脂6 g/L诱导不定芽效果较好,增殖倍数高;生根培养基1/2 MS+NAA 0.2 mg/L+IBA 0.4 mg/L+KT 0.2 mg/L+蔗糖3%+琼脂6 g/L+AC 0.3 g/L,有利于水半夏不定根的快速形成,12～14周即可获得再生水半夏植株。培养基MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 1.5 mg/L+蔗糖3%+琼脂6 g/L为诱导水半夏分化一次性成苗的最佳激素配比,5～6周可形成试管苗,10周后可用于炼苗。结论建立的水半夏组培快繁体系为水半夏优良品种的快速繁殖奠定基础,且可应用于工厂化生产水半夏种苗。     

新疆雪莲胚芽的组织培养和植株再生

目的:以新疆雪莲胚芽为外植体,建立一套新疆雪莲快速繁殖技术。方法:以MS培养基为基本培养基,通过研究植物生长物质BA和NAA对丛生芽的分化、丛生芽的增殖和生根的影响找出相应的最佳生长物质组合。结果:在附加NAA0.02-0.1mg·L^-1和BA2mg·L^-1的MS培养基上,所有的胚芽都可在45d内诱导出丛生芽;丛生芽切成小块后接入含NAA0.1-0.2mg·L^-1和BA2-3mg·L^-1的培养基中,都可在30d快速增殖;在含0.4mg·L^-1NAA的大量元素减半的MS培养基中,92%的不定芽可在25d内生根;再生植株移栽后,生长较好,成活率达70%。结论:新疆雪莲的胚芽可通过不定芽途径高频率的形成植株。