人脐带间充质干细胞的生物学特性及其在血液系统疾病中的应用

间充质干细胞是一种具有自我更新和多向分化能力的成体干细胞,在组织工程、基因治疗和造血干细胞移植领域具有较好的应用前景。骨髓是间充质干细胞的经典来源。近年研究显示,人脐带中也存在大量间充质干细胞,由于脐带来源间充质干细胞具有来源广泛、取材方便、相对纯净、含量丰富以及免疫原性低等优点,正逐渐成为间充质干细胞研究领域的热点之一。本文就其生物学特征、优势以及在血液系统疾病中的应用前景等予以综述。     

脐血干细胞移植的研究及临床应用

脐血作为干细胞的主要来源,近年来国内外对其进行了大量的基础性研究和临床探索。已经证实脐血中含有大量造血干细胞、丰富的间充质干细胞。临床干细胞移植治疗采用脐血具有诸多优势,如来源丰富,组织配型时间短,抗原表达弱,加之间充质干细胞的免疫调节及加速造血恢复等影响,脐血的移植成功率高,移植反应弱、移植物抗宿主病少见。目前脐血移植治疗的疾病已经达到80余种,治疗的患者全世界已经超过了6000例。脐血移植已经在恶性肿瘤、免疫缺陷、心脏病、神经系统损伤、组织器官修复、糖尿病、血管疾病等的治疗上显示巨大的潜力。     

脂肪干细胞研究进展

传统干细胞研究的重要内容——胚胎干细胞研究遭遇到各种伦理、法律的瓶颈之后,成体干细胞的研究日益兴盛,属于成体干细胞的造血干细胞(HSC)、间充质干细胞(MSC)、表皮干细胞、神经干细胞的研究都得     

亲缘单倍体造血干细胞联合间充质干细胞共移植治疗重型再生障碍性贫血1例报告

目的探讨亲缘单倍体造血干细胞联合间充质干细胞共移植治疗重型再生障碍性贫血的疗效。方法报告1例亲缘单倍体造血干细胞联合间充质干细胞共移植治疗重型再障患者的疗效并对有关文献进行复习。结果移植后患者造血功能恢复迅速,仅有Ⅱ度急性移植物抗宿主病发生,无明显感染及其他并发症发生。结论单倍体造血干细胞联合间充质干细胞治疗重型再生障碍性贫血是有效、可行的。     

不同类型干细胞移植治疗缺血性脑卒中的研究现状

干细胞具有自我复制和多向分化的潜能,可分化为神经元或其支持结构,为其移植治疗脑卒中提供了广阔的前景.目前,用于治疗脑卒中的成体干细胞主要包括骨髓间充质干细胞(BMSCs)、脐血间充质干细胞(UCBM SCs)、造血干细胞(HSCs)、神经干细胞(NSCs)及人畸胎瘤衍生的细胞(NT2细胞).     

干细胞、肿瘤干细胞与高压氧微环境

干细胞可以分为胚胎干细胞与成体干细胞;在骨髓的成体干细胞中有造血干细胞与基质干细胞;后者又被称为间充质干细胞;近年来发现间充质干细胞具有多向分化的潜能即有明显的可朔性,可以分化为神经细胞、脂肪细胞、骨细胞、肌肉细胞等[1～3];在许多组织如肝脏、皮肤、肠道、肺、胰腺等均可以分离-出间充质干细胞.胚胎干细胞向成体干细胞分化及成体干细胞向不同类型的成熟细胞分化均依赖于所处的微环境;分化方向的确定是微环境与干细胞内外因素相互作用的结果[4～7];肿瘤细胞在机体大多数组织内均可以发生,它具有无限增殖性,许多特性与干细胞相似.     

成体干细胞参与创伤修复基本模式的思考

目前应用成体干细胞促进创伤修复的实验研究日益增多,但由于我们对于细胞参与创伤修复的细胞和分子机制所知甚少,所以难以产生有效的干预措施。来源于间充质的成体间充质干细胞（MSC）是创伤修复重要的种子细胞,其促进创伤愈合的过程同时体现了自身的细胞分化过程。研究表明,在不同创伤和病损组织中,外源输注或内源性的MSC的生物学特性（表型、细胞骨架、增殖、黏附、迁移）和分子生物学特性（细胞的信号传导通路和基因表达发生变化）不断发生改变,     

干细胞的基础研究及开发应用

介绍了胚胎干细胞、间充质干细胞、造血干细胞、神经干细胞的细胞生物学特征及应用研究的概况，展望了干细胞作为组织工程学、克隆器官、移植及其它应用的细胞来源的发展前景与存在问题。     

干细胞的研究与临床应用（三）：—干细胞技术在临床的应用

干细胞技术应用于临床的三个阶段(1)把一种组织的成体干细胞直接移植给相应组织坏损的病人。血液系统干细胞的研究已经有几十年的历史 ,大家熟悉的“骨髓移植”治疗白血病 ,实际就是移植造血干细胞。瑞典神经学家及其同事应用从流产胎儿脑中分离的神经组织细胞 ,移植入病人的脑中来治疗帕金森症 ,对一个术后 10年的病人进行跟踪研究 ,发现移植的神经元仍然存活并继续产生多巴胺 ,病人的症状明显改善。我们已经建立了从流产胎儿的组织中分离各种组织成体干细胞的技术 ,准备在几年内建立一个包含 4万份不同组织配型的成体干细胞库 ,就可以基本…     

骨髓间充质干细胞在骨髓移植中的应用

间充质干细胞（Mesenehymal Stem Cells，MSC）是中胚层来源的具有多向分化能力的干细胞，是成体干细胞的一种，主要存在于结缔组织和器官间质中，以骨髓组织中含量最为丰富。由于骨髓是其主要来源，因此统称为骨髓间充质干细胞（bone marrow meschymal stem cell，BM—MSC）。也因其比较容易贴壁和形成成纤维样的克隆，又可称为贴壁细胞或者成纤维细胞集落形成单位（CFU—F）、骨髓基质细胞（MSC）或间充质干细胞或间充质祖细胞（MPC）。许多研究发现，BM—MSC在骨髓移植中有着极其重要的应用价值，一方面在骨髓微环境中支持造血；另一方面，对移植免疫有一定的影响，能够在某些方面减轻移植物抗宿主效应。     

FAM172A蛋白对人胚胎肾细胞凋亡及增殖的影响

目的 研究与糖尿病大血管病变有关的新蛋白FAM172A对人胚胎肾细胞(HEK293细胞)凋亡及增殖的影响.方法 以前期研究工作中所构建的pDrive-FAM172A质粒为模板,通过PCR方法扩增出人FAM172A基因编码框,将扩增产物亚克隆到PDC315真核表达载体,经酶切、测序鉴定,选择插入序列正确的PDC315-FAM172A质粒用脂质体2000转染HEK293细胞,同时用PDC315空质粒作为对照转染HEK293细胞.用噻唑蓝(XTT)法、生长曲线法观察过表达FAM172A基因对HEK293细胞增殖的影响.用碘化丙啶(PI)单染色法、膜联蛋白V/PI双染色法观察过表达FAM172A基因对HEK293细胞凋亡及细胞周期的影响.结果 成功构建PDC315-FAM172A真核表达载体,经酶切、测序证实插入序列正确.与PDC315质粒转染相比,XTT显示PDC315-FAM 172A质粒转染使细胞增殖增加约52%(A值为0.21±0.07比0.32±0.06,P<0.01);生长曲线显示PDC315-FAM172A质粒转染使HEK293细胞生长速度增快;PI单染色法显示PDC315-FAM172A质粒转染使细胞凋亡减少约38.5%(分别23.79%±1.36%比14.64%±0.95%,P<0.01),同时G0～G1期细胞明显减少(分别66.79%±1.73%比58.16%±0.75%,P<0.01)而S期细胞明显增加(分别22.62%±1.16%比33.56%±0.94%,P<0.01);膜联蛋白V/PI双染色法显示PDC315-FAM172A质粒转染使早期凋亡细胞减少约28%(13.63%±0.56%比9.79%±0.39%,P<0.01),晚期凋亡细胞减少约29%(7.70%±0.29%比5.43%±0.29%,P<0.01).结论 FAM172A蛋白促进HEK293细胞增殖、抑制凋亡、促使细胞进入S期,提示FAM172A蛋白的生理功能之一是参与细胞生长的调控,这为深入研究FAM172A蛋白的生理功能及在糖尿病大血管并发症中的作用提供了线索.     

人脐血间充质干细胞体分离、培养及向脂肪细胞分化的实验研究

目的:探讨脐血间充质干细胞(UCB-MSCs)的分离培养及向脂肪细胞的分化潜能。方法:从足月儿脐血中获得间充质干细胞,体外培养传代,流式细胞检测细胞表面及抗原细胞周期;予10-6M地塞米松、100μg/ml1-甲基-3-异丁基-黄嘌呤(IBMX)、50μg/ml抗坏血酸的IMDM培养基,对MSCs进行诱导向脂肪细胞分化,油红-O染色染色鉴定。结果:成功建立了脐血间充质干细胞分离及培养扩增的方法;流式细胞仪检测结果显示,贴壁细胞均表达CD105、CD29和CD44,不表达造血细胞表型CD34、CD45和内皮细胞表型CD31;经脂肪培养液诱导后在细胞胞浆里可见颗粒状红色脂滴形成。结论:脐血间充质干细胞能进行体外分离培养,并能诱导分化为脂肪细胞。     

EFFECT OF SOMATOSTATIN ON THE CELL CYCLE OF HUMAN GALLBLADDER CANCER CELL

In the last decades, incidence rate of gallblad-der cancer was increasing in China, but the survivorrate was not satisfying even if the radical operationswere performed[1]. Since gallbladder cancer wasnon-sensitive to either chemotherapy or radiothera-py[2,3], many researches had been done to find somenew effective adjuvant approaches to improve the sur-vival of patient who suffered from this malignant dis-ease , especially the patients who lost the chance ofresection.Recent evidences showed t…     

人星形细胞瘤细胞系JCBI的建立及其特性观察

一株人类星形细胞瘤细胞系在体外已连续传代培养近3年,传至180代。定名为JCBI。其形态具有恶性肿瘤细胞的典型特征;细胞倍增时间为70h;培养第6天时细胞分裂指数为33‰;平板集落形成率为49％;染色体数是83条(35％)和82条(27％),为亚四倍体核型,染色体具有明显异常;在免疫抑制小鼠皮下异种移植成功,成瘤率为87.5％;电镜观察JCBI细胞浆内含有丰富的胶质微丝。用抗GFAP抗体进行免疫细胞化学染色,发现JCBI细胞呈GFAP阳性,证明JCBI确为星形细胞来源的恶性肿瘤。本细胞系的建立为胶质瘤研究提供了一个较好的细胞实验模型。     

川楝素对人结肠癌细胞LoVo生物行为学的影响

目的探讨川楝素对人结肠癌细胞LoVo生物行为学的影响。方法采用MTT法、黏附实验、Transwell小室侵袭实验,观察川楝素对人结肠癌细胞LoVo增殖、黏附和侵袭能力的影响。结果川楝素能有效抑制人结肠癌细胞LoVo增殖(P0.01)。川楝素作用人结肠癌细胞LoVo 24 h后,细胞的黏附能力明显降低(P0.01),侵袭的细胞数与对照组比较明显减少(P0.01)。结论川楝素有抑制人结肠癌细胞LoVo的增殖、黏附及侵袭的能力。     

节律蛋白mPERl在NIH3T3细胞增殖和迁移中的作用

目的 研究PERl蛋白对NIH3T3细胞增殖和迁移的影响。方法 将重组表达质粒pcDNA3．1／mPERl转染入NIH3T3细胞中．并以未转染的NIH3T3细胞为对照．利用MTT法检测细胞增殖的改变。利用RT-PCR技术和Westernblot检测节律蛋白mPERI对细胞迁移关键性蛋白基质金属蛋白酶2（MMP-2）表达的影响。结果 MITT法显示PERl表达上调可以抑制NIH3T3细胞增殖．RT—PCR技术和Westernblot检测显示在NIH3T3细胞中。当节律蛋白roPERl表达上调时，细胞迁移关键性蛋白MMP-2在RNA和蛋白水平的表达较对照组降低。结论 上调NIH3T3细胞内的PERl蛋白表达能抑制细胞增殖以及细胞迁移的关键性MMP-2在RNA和蛋白水平的表达。     

人牙龈结合上皮细胞和口腔龈上皮细胞生物学特性的比较

目的：从人口腔龈上皮细胞中分选出P-钙黏蛋白（P-cadherin）阳性表达和阴性表达的细胞,并将之与人牙龈结合上皮细胞的黏附、增殖和迁移的生物学特性进行比较。方法：分离培养人口腔龈上皮细胞,通过磁珠从中分选出P-钙黏蛋白阳性表达和阴性表达的细胞;分离培养人牙龈结合上皮细胞;测定人牙龈结合上皮细胞、口腔龈上皮细胞及从中分选出的P-钙黏蛋白阳性表达和阴性表达细胞的黏附、增殖和迁移能力。结果：P-钙黏蛋白阳性表达细胞占全部口腔龈上皮细胞的20%。P-钙黏蛋白阳性表达的口腔龈上皮细胞和人牙龈结合上皮细胞表现出较强而相似的黏附和迁移能力,但前者增殖较旺盛（0.72±0.06）, 后者增殖较慢（0.60±0.05,P<0.05）; 而P-钙黏蛋白阴性表达的口腔龈上皮细胞与牙龈结合上皮相比,表现出的黏附（48%±6% vs. 87%±11%,P<0.05）、增殖（0.36±0.04 vs. 0.60±0.05,P<0.05）和迁移能力［（10.3±2.7）个 vs. （23.4±4.8）个,P<0.05］均较弱。结论：P-钙黏蛋白阳性表达的口腔龈上皮细胞与牙龈结合上皮细胞在生物学特性方面有一定相似性而又有区别,提示口腔龈上皮细胞转化为牙龈结合上皮细胞的过程中,可能不仅仅是部分细胞的简单迁移,其中可能牵扯到更为复杂的基因、蛋白表达方面的改变。     

顺铂诱导人肝癌细胞凋亡模型的构建

目的 建立肝癌细胞凋亡模型,探讨顺铂抗癌作用机理,为进一步研究细胞凋亡分子机制打下基础。方法 用抗癌药顺铂诱导增减的人肝癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１肝癌细胞发生凋亡,用四氮甲唑蓝比色试验（ＭＴＴ）,细胞形态学检查,ＤＮＡ凝胶电泳检测。结果 顺铂可显著抑制ＳＭＭＣ－７７２１细胞的生长,并有很好的量效和时效关系,经药物作用后,肝癌细胞在显微镜下呈现典型的凋亡形态学改变,ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳吴现明显的梯度     

改良的大鼠睾丸支持细胞分离培养方法

目的 简化睾丸支持细胞的分离方法，提高细胞产量。方法 采用0.25%膜酶、0.05%胶原酶序贯两步消化法消化，细胞悬液在37℃、5%CO2培养箱内孵育培养48h，观察产量和细胞功能。结果 改良的分离方法所获得的睾丸支持细胞占细胞总数的90%以上，大大提高了支持细胞的获取量，细胞Fas配体（Fas-L)表达功能正常。结论 改良的分离培养方法简化了传统的分离培养方法，同时提高了细胞产量。     

人骨髓基质细胞的分离、培养及成骨鉴定

目的建立一种体外分离培养人骨髓基质细胞 (HumanBoneMarrowStromalCells ,hBMSCs)的方法。方法 :从髂棘 (髂前或髂后 )抽取骨髓液 5～ 8ml,经密度离心后的骨髓单核细胞 ,以 10 6/ml浓度接种培养 ,贴壁细胞接近长满后 ,进行传代培养 ,每传一代约 5～ 7d。培养期间进行碱性磷酸酶的检测和钙染色。结果 :原代培养和传代培养的细胞均为贴壁、形态不一的细胞。两种细胞在体外可向成骨方向转化。结论 :人骨髓基质细胞在体外长期培养后仍具有成骨能力 ,为骨髓中间充质干细胞 ,掌握其培养方法为其广泛应用奠定基础。