姜黄素对人实体瘤细胞和白血病细胞作用的比较

目的探讨姜黄素对人急性髓系白血病HL-60细胞及肝癌细胞(QGY)增殖、细胞周期的调控及细胞凋亡的影响,并比较它对HL-60、QGY的作用效果.方法采用MTT法测定姜黄素在不同浓度、不同时间对HL-60、QGY的抑制作用,流式细胞仪分析细胞周期分布,透射电镜观察细胞的超微结构变化.结果姜黄素可抑制HL-60、QGY细胞的生长,其抑瘤率与药物浓度和作用时间呈依赖关系,72 h的中效浓度(IC50)分别为24.8μmol/L、49.5μmol/L;流式细胞仪分析证实姜黄素能使HL-60细胞聚积在S期、G2/M期,凋亡峰为8.65%,使QGY细胞聚积在S期,凋亡峰为10.84%;电镜观察发现姜黄素可导致HL-60细胞胞浆内有明显脂肪变性,导致QGY细胞变性、坏死,诱导细胞凋亡.结论姜黄素对HL-60的抑瘤效果更明显,它主要通过抗增殖作用,抑制HL-60细胞的生长;对QGY细胞,主要通过诱导肿瘤细胞凋亡,达到抑瘤作用.     

姜黄素对人急性髓性白血病细胞的作用及机理的初步探讨

目的　探讨姜黄素对急性髓性白血病细胞 (HL- 6 0 )增殖和细胞周期的调控及细胞凋亡的影响。方法　采用 MTT法测定姜黄素在不同浓度、不同时间对 HL- 6 0的抑制作用 ;流式细胞仪分析细胞周期分布 ;透射电镜观察细胞的超微结构变化。结果　姜黄素可抑制 HL- 6 0细胞的生长 ,其抑瘤率与药物浓度和作用时间呈依赖关系 ;中效浓度 (IC50 )为 2 4 .8μm ol/ L 时 ,流式细胞仪分析证实姜黄素能使 HL- 6 0细胞聚积在 S期、G2 / M期 ;电镜观察发现姜黄素可使 HL- 6 0细胞超微结构发生改变。结论　姜黄素可干扰 HL- 6 0细胞的周期分布 ,具有抗细胞增殖及诱导细胞凋亡的作用     

姜黄素抗急性白血病机制研究

目的:探讨姜黄素抗急性白血病的作用机制。方法:不同浓度(0.0,6.3,12.5和25.0μmol/L)姜黄素作用急性白血病HL60细胞后,用噻唑蓝法检测姜黄素对细胞生长的抑制作用;倒置相差显微镜观察细胞的形态变化,DAPI染色后用荧光显微镜观察细胞的形态变化,caspase 3试剂盒检测其活性,流式细胞仪分析细胞周期。结果:姜黄素对HL60细胞的生长有抑制作用,并呈时间-剂量依赖性,48 h的IC50为20.4μmol/L。25.0μmol/L姜黄素作用48 h后,相差倒置显微镜和荧光染色可见典型的细胞凋亡的形态改变。caspase 3酶活性检测发现,随着姜黄素浓度的增加,caspase 3酶活性也逐渐升高。流式细胞仪检测发现,姜黄素浓度为6.3,25.0μmol/L时,细胞阻滞在S期,而12.5μmol/L时,则在G2/M期。结论:姜黄素可诱导HL60细胞凋亡和周期阻滞,不同浓度姜黄素可使细胞分别阻滞在S和G2/M期,caspase 3参与其凋亡和细胞周期阻滞过程。     

乌苯美司对人白血病细胞生长抑制及其机制探讨

目的：研究国产氨肽酶N抑制剂乌苯美司（Ubenimex）对人白血病细胞的作用及其机理。方法：应用MTT比色法观察Ubenimex对细胞的生长抑制作用，光学显微镜观察细胞形态结构的改变，DNA凝胶电泳、DNA片段原位末端标记及流式细胞仪（FCM）检测，分析细胞凋亡。结果：①Ubenimex明显抑制HL60细胞的生长，半数抑制浓度（IC50）为13．03μg/ml；而K562细胞的敏感性较差。其抑制作用均呈剂量效应关系。②典型的细胞形态改变，DNA末端原位标记的检出及流式细胞仪结果，均证实Ubenimex能诱导白血病细胞的凋亡。③10μg/ml Ubenimex作用12h即可明显诱导HL60细胞DNA断裂，K562细胞的凋亡敏感性显著低于HL60细胞；两者凋亡率均呈剂量和时间依赖性，经Ubenimex处理后，HL60细胞出现G1期阻滞。结论：Ubenimex能抑制K562，HL60细胞生长，诱导细胞凋亡是其机制之一。     

姜黄素对人结肠癌细胞SW480增殖周期及凋亡的影响

目的探讨姜黄素对人结肠癌细胞SW480细胞生长的抑制作用及其对细胞增殖周期和凋亡的影响。方法采用甲基噻唑（MTT）比色法和生长曲线测定不同浓度姜黄素在不同作用时间内对在体外培养SW480细胞增殖的影响，同时应用流式细胞术检测细胞增殖周期及凋亡率的变化。结果姜黄素可在G0／G1期阻滞人结肠癌细胞SW480的增殖，使S期细胞比率降低；在一定范围内，姜黄素的浓度越高、作用时间越长，对肿瘤细胞生长的抑制作用越强，凋亡率也越高。结论姜黄素能抑制人结肠癌细胞SW480细胞生长，并诱导细胞凋亡而阻止细胞周期。     

紫杉醇诱导HL—60细胞凋亡的研究

目的：观察抗微管药紫杉醇对急性白血病细胞株HL－60是否具有凋亡诱导作用,并进一步研究bcl－2基因在此过程中的作用。方法：（1）以紫杉醇处理HL－60细胞,观察细胞生长抑制作用的时间效应和剂量效应,在光镜和电镜下观察细胞形态变化;（2）用流式细胞仪检测药物孵育前后细胞凋亡率（AP）的变化;（3）用RT－PCR法检测药物孵育前后bcl-2基因的表达水平。结果：（1）在一定剂量和时间范围内紫杉醇能抑制HL－60细胞生长;（2）紫杉醇能诱导HL－60细胞凋亡,并显示剂量效应：（3）在紫杉醇诱导HL－609细胞凋亡过程中,bcl－2基因表达水平下调。结论：紫杉醇能诱导HL－60细胞凋亡;bcl-2基因参与了紫杉醇诱导HL－60细胞凋亡的调控。     

雄黄对HL—60／ADR作用的初步研究

目的：探讨中药雄黄对HL－60／ADR耐药细胞在抑制生长、逆转耐药、诱导凋亡方面的作用和影响。方法：（１）MTT比色法观察对细胞的换制;（2）用免疫组化法检测细胞Pgp的变化;（3）流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：（1）雄黄抑制HL－60／ADR耐药细胞的生长,药物浓度与HL－60／ADR细胞生长抑制率之间呈指数关系;（2）随着药物浓度的增加和时间的推移,HL－60／ADR细胞中MDR基因的表达产物Pgp阳性率逐步降低;（3）随着药物浓度的增加,HL－60／ADR细胞凋亡率增加。结论：雄黄可抑制HL－60／ADR 细胞生长,逆转其耐药,促进细胞凋亡,与剂量呈依赖性,其机制可能与Pgp表达下降有关。     

苦参碱对白血病细胞诱导分化作用和机理研究

为了解苦参碱对人粒系白血病细胞系HL－60细胞的诱导分化作用并探讨其机制,采用MTT法,光镜观察、S－AP免疫组织化学法、硝基蓝四氮唑（NBT）还原试验,流式细胞仪检测,逆转录酶／多聚酶链反应（RT－PCR）检测,观察苦参碱对HL－60细胞的增殖抑制作用,分化诱导作用及其对细胞周期移行和癌基因表达的影响,结果表明：苦参碱明显地抑制HL－60细胞的增殖,并诱导其向成熟粒系分化;苦参对HL－60细胞的诱导分化作用与其下调c-myc基因表达,阻滞细胞在G1期有关。     

姜黄素对前列腺癌PC-3M细胞生长抑制和凋亡的影响

目的：探讨姜黄素(curcumin) 对人前列腺癌PC-3M细胞生长抑制及凋亡调控的作用。方法：按姜黄素浓度分为10、20、30和40 μmol•L^-14个处理组和对照组（未加姜黄素）,处理PC-3M细胞不同时间后,倒置显微镜观察细胞形态;采用MTT法检测细胞的增殖抑制情况;荧光染色法检测细胞凋亡;流式细胞仪（FCM）进行细胞周期时相分析;免疫组化SP法检测细胞内caspase-3蛋白的表达水平。结果：与对照组比较,姜黄素处理组可使细胞明显变圆、体积缩小、脱壁细胞增多;MTT法检测显示,姜黄素处理组随着浓度的增加和作用时间延长,对PC-3M细胞的增殖抑制作用增强,并呈时间、剂量依赖性(P<0.01）;荧光显微镜下部分细胞发生凋亡形态学改变,对照组和4个姜黄素不同浓度处理组凋亡率分别为（9.83±1.53）%、（19.50±1.00）%、（24.83±2.52）%、（30.17±2.08）%和（38.50±2.65）%;流式细胞术显示,停滞在S、G₂/M期细胞增加,而G₀/G₁期细胞减少;免疫组化结果显示,随着姜黄素浓度增加,caspase-3 蛋白表达增强,呈剂量依赖性（P<0.01）。结论：姜黄素对人前列腺癌PC-3M细胞的生长具有明显抑制作用。上调caspase - 3 蛋白的表达,诱导细胞凋亡可能是其作用机制之一。     

鸦胆子油乳抗人胃腺癌增殖作用的初步研究

目的 研究鸦胆子油乳对人胃腺癌细胞的增殖抑制作用。方法 采用体外药物敏感试验和流式细胞仪技术检测鸦胆子油乳对SGC－7901细胞增殖周期影响及诱导凋亡作用。结果 鸦胆子油乳体外具有明显的抑制SGC－7901增殖的作用。与对照组相比,鸦胆子油乳2μg/ml分别孵育SGC-7901细胞24h和36h后,细胞周期被阻滞于DNA合成期（S期）。流式细胞仪检测未见明显的亚二倍体峰,鸦胆子油 同浓度、不同孵育时间诱导细胞凋亡的作用无显著差异（P＞0.05）。结论 鸦胆子油乳在体外能有效抑制SGC－7901细胞的增殖,初步研究表明其主要通过阻滞细胞周期于S期而不是通过诱导凋亡来抑制SGC－7901细胞的增殖。     

槲皮素对人白血病HL—60细胞DNA和细胞周期的影响

以人白血病HL－60细胞为实验对象，利用3H-脱氧胸苷（3H－TdR）掺入实验，JAM实验法及流式细胞仪观察槲皮素对HL－60细胞DNA和细胞周期的影响。结果显示，槲皮素15μmol／L～120μmol／L可显著抑制HL－60细胞的DNA合成及诱发DNA链断裂；槲皮素主要是阻滞G1期向S期移行，使G1期细胞蓄积，S期细胞减少。槲皮素的作用呈明显的剂量依赖关系。     

胆固醇合成抑制剂洛伐他汀对HL-60细胞caspase-3基因表达的影响

目的　观察胆固醇合成抑制剂洛伐他汀 (lovastatin ,LOV)对HL 60细胞caspase 3基因表达的影响 ,进一步探讨其抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡的分子机制。方法　 4、8、16μmol/LLOV处理HL 60细胞 1～ 4d后 ,MTT比色法及生长曲线测定检测细胞增殖效应 ,流式细胞仪测定细胞周期相的分布及凋亡率 ,DNA梯形带检测观察细胞的凋亡效应 ,RT PCR及Westernblot方法分别分析LOV对HL 60细胞caspase 3mRNA、caspase 3蛋白表达的影响。结果　LOV能显著抑制HL 60细胞增殖 ,使细胞周期阻滞于G0 /G1期 ,细胞凋亡率增加 ,有凋亡特征性的DNA梯形带出现 ;LOV能上调HL 60细胞cas pase 3蛋白表达 ,但对caspase 3mRNA表达无明显影响 ,该作用呈剂量 效应和时间依赖关系。结论　LOV对HL 60细胞有增殖抑制和诱导凋亡作用 ,LOV能上调HL 60细胞caspase 3蛋白表达 ,推测这可能是LOV抑制HL 60细胞增殖并诱导其凋亡的重要分子机制。     

紫杉醇对QGY细胞的作用:G2/M期阻滞和细胞凋亡

目的：观察微管稳定剂紫杉醇对肝癌QGY细胞的作用。方法：检测紫杉醇对QGY细胞作用的时间效应和剂量效应，在光镜和电镜下观察紫杉醇作用后细胞形态变化；用流式细胞仪分析细胞周期的改变。结果：随着作用时间及药物浓度的增加，紫杉醇对QGY细胞的增殖抑制作用就越明显。56μmol／L紫杉醇作用72h，细胞生长抑制率达78，6％，形态学及流式细胞仪分析显示G2/M期阻滞和细胞凋亡。结论：紫杉醇诱发的人肝癌细胞的凋亡与细胞分裂期阻滞密切相关，这一作用机制将为临床治疗提供理论依据。     

环氧化酶-抑制剂对白血病HL-60细胞的影响

研究环氧化酶 2（COX 2）抑制剂塞来考昔（Celecoxib）对急性白血病HL 60细胞的增殖抑制、诱导凋亡作用及其机制。方法：以不同浓度的Celecoxib作用于体外培养的HL 60细胞，MMT法检测细胞生长抑制率，流式细胞仪检测细胞凋亡率，应用Hoechst 33258 荧光染色法观察细胞凋亡时的形态学变化，并对细胞凋亡前后的Caspase3活性进行检测。 结果：COX 2抑制剂 Celecoxib可显著的抑制细胞的生长，并诱导细胞发生凋亡，在细胞凋亡过程中Caspase3活性显著升高，并呈现出明显的量-效与时-效关系。结论：COX 2抑制剂 Celecoxib对HL 60细胞具有显著的增殖抑制及诱导凋亡作用，升高Caspase3活性可能是其重要作用机制之一，这为COX 2抑制剂进一步用于临床治疗白血病提供了有利的实验依据。     

白藜芦醇抑制HepG2细胞生长和对细胞间隙连接通讯的影响

目的研究白藜芦醇对人肝癌细胞HepG2的生长抑制作用以及对细胞间隙连接通讯（GJIC）的影响。方法利用MTT法观察白藜芦醇对HepG2细胞的生长抑制作用。流式细胞仪检测细胞周期的时相分布，使用荧光探针5＇-CFDA／AM标记细胞．采用荧光漂白后重恢复技术（FRAP）和共聚焦显微镜技术观察白藜芦醇对HepG2细胞间隙连接通讯的影响。结果不同浓度的白藜芦醇处理细胞不同时间后，HepG2细胞的生长增殖明显受到抑制，抑制率最高达92．1％，各处理组间比较均有显著性差异（F=18．532，P〈0．05）；细胞周期分析显示，白藜芦醇能诱导HepG2细胞在S期停滞．抑制细胞DNA的合成并可诱导细胞凋亡：另外，白藜芦醇有恢复HepG2细胞间隙连接通讯的功能，且随浓度增加而增加。结论白藜芦醇可抑制HepG2细胞增殖，使细胞停滞于S期，并能诱导细胞凋亡；白藜芦醇还有恢复HepG2细胞间隙连接通讯功能的作用，提示此作用可能是白藜芦醇抑制HepG2细胞增殖和抗肿瘤作用的机制之一。     

常染色体显性遗传性多囊肾病囊肿液对肾小管上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的：观察常染色体显性遗传性多囊肾病（ADPKD）囊肿液对肾小管细胞增殖，凋亡以及细胞周期的影响，以初步探讨ADPKD囊肿发生，发展的机制。方法：用不同浓度的ADPKD囊肿液处理MDCK和LLC－PK1两株肾小管细胞，采用MTT法观察细胞增殖，用流式细胞术检测细胞周期和凋亡指数。结果：（1）与对照组相比，不同浓度（10％，20％，40％，60％，V／V）ADPKD囊肿液作用24h能明显促进上述两株肾小管细胞增殖，并呈剂量依赖性；而且明显影响细胞周期，使G0－G1期细胞增多，S期细胞减少，（2）高浓度（40％，60％）ADPKD囊肿液作用48h对MDCK细胞仍有上述作用，但对LLC－PK1细胞则无类似作用。（3）不同浓度ADPKD囊肿液均不诱导上述两株细胞凋亡。结论：ADPKD囊肿液可剂量依赖性地促进肾小管细胞增殖，并在24h达作用高峰，但并不诱导肾小管细胞凋亡，其机制可能与囊肿液通过激活G1期细胞，使细胞未从G1期脱出细胞周期而发生凋亡有关。     

姜黄素对人肝癌Bel7402细胞杀伤动力学及周期时相的影响

目的 研究姜黄素对人肝癌Ｂｅｌ－７４０２细胞杀伤动力学及周期时期的影响，方法 以集落形成法测定药物对增殖期与坪期细胞杀伤的量效关系曲线，以流式细胞仪及ＡＯ／ＥＢ荧光染色法分析药物对Ｂｅｌ７４０２细胞周期时相及凋亡的影响。结果 姜黄素１～１０μｇ／ｍｌ作用２ｈ对不同增殖状态的Ｂｅｌ７４０２细胞均呈单指数型杀伤，但对增殖期细胞敏感，１～１０μｇ／ｍｌ作用２４ｈ，Ｇ０－Ｇ１，期细胞及Ｇ２－Ｍ期细胞的比例     

体外观察紫杉醇对肝癌HepG2细胞生长的影响

目的：观察微管稳定剂紫杉醇对肝癌HepG2细胞的作用。方法：检测紫杉醇对HepG2细胞作用的效应和剂量效应，在光镜和电镜下观察紫杉醇作用后细胞形态变化；用流式细胞仪分析细胞周期的改变。结果：随着作用时间及药物浓度的增加，紫杉醇对HepG2细胞的增殖抑制作用就越明显。70μmol/L紫杉醇作用72h，细胞生长抑制率达80％，形态学及流式细胞仪分析显示S期及G2／M期阻滞和细胞凋亡。结论：紫杉醇诱发的人肝癌细胞的凋亡与细胞DNA合成期及分裂期阻滞密切相关，这一作用机制将为临床治疗提供理论依据。     

三氧化二砷或ATRA对原代APL细胞或HL-60细胞作用研究

目的：探讨三氧化二砷（吡霜）或ATRA对原代APL细胞或HL－60细胞影响,同时分析三氧化二砷与ATRA之间的交叉耐药性。方法:MTT测定HL－60细胞或APL细胞的增殖性。流式细胞仪检测两类细胞的凋亡性,NBT法用于测定HL－60细胞或原代APL细胞的分化性。结果：三氧化二砷与ATRA均能明显抑制APL细胞或HL－60细胞的体外增殖,它们作用机制分别为诱导明显的凋亡或分化。体外三氧化二砷对ATRA耐药HL－60细胞具有明显的抑制增殖作用,并诱导其凋亡发生。结论：三氧化二砷与ATRA无交叉耐药性。研究结果表明,ATRA诱导的高白细胞征并非归因于分化大于凋亡。     

~(131)I-GMCSF诱导HL60/ADM细胞凋亡过程中对细胞周期的影响

目的观察131I-GMCSF在诱导HL60/ADM细胞凋亡过程中细胞周期的改变,进一步探讨凋亡与细胞周期改变的关系。方法采用体外放射免疫治疗模型,通过流式细胞术观察131I-GMCSF诱导HL60/ADM细胞凋亡情况及其对HL60/ADM细胞周期的改变。结果Annexin V/PI双染色法证实一定放射性浓度的131I-GMCSF能明显诱导HL60/ADM细胞凋亡,且随着作用时间的延长,细胞凋亡率增加,流式细胞术显示作用24h后的细胞周期改变主要表现为S期阻滞和G2/M期阻滞,而作用48h后则主要引起细胞发生G2/M期阻滞。结论在放射免疫导向治疗中,辐射诱导的细胞凋亡与细胞周期发生阻滞,特别是与G2/M期阻滞有着密切的关系,细胞周期阻滞与放射敏感性可能存在正相关。