GPI锚定蛋白检测诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症的临床价值

目的：探讨阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）患者不同外周血细胞GPI锚定蛋白的表达情况,为PNH的诊断和鉴别诊断提供依据。方法：采用流式细胞术检测32例PNH患者外周血各类细胞膜上CD55、CD59、 CD16及CD14的表达百分率。结果： PNH患者外周血红细胞、粒细胞膜上CD55、CD59表达均明显减少,与正常对照组比较差异有显著性（P<0.001）,且粒细胞上CD55、CD59表达率低于红细胞（P<0.05）;血小板CD55、CD59表达率也较对照组减少（P<0.05）;有27例PNH患者的淋巴细胞CD55、CD59表达降低,其缺失率达30%,低于粒细胞和红细胞;CD16在粒细胞上表达量差异很大（34%～83%）,与对照组比较差异有显著性（P<0.001）;在单核细胞上可见CD14表达缺失的PNH克隆,CD14表达比例明显低于正常对照组（P<0.001）。结论： 检测外周各系血细胞CD55和CD59可以使典型PNH的诊断更加可靠,使部分缺乏典型临床表现的PNH明确诊断。检测CD16和CD14对排除PNH具有重要意义。     

骨髓增生异常综合征患者外周血细胞免疫表型分析

目的：探讨糖基磷脂配肌醇锚蛋白(GPI-AP)在骨髓增生异常综合征(MDS)患者外周血细胞上的表达情况。方法：利用免疫荧光标记技术和流式细胞仪的方法，对20名正常人、36例MDS、42例阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)和再障—PNH(AA—PNH)综合征患者的外周血细胞表面GPI-AP：退变加速因子(DAF，CD55)和反应性溶血膜抑制物(MIRL，CD59)表达情况进行分析。结果：部分MDS患者血细胞有GPI-AP的缺乏，缺陷红细胞、粒细胞异常率均明显低于PNH或AA—PNH综合征患者(P＜0．005)。结论：部分MDS患者血细胞有锚蛋白的表达缺陷，缺陷细胞的检出率较低且以Ⅱ型细胞为主。     

各种贫血血细胞CD55、CD59免疫表型观察研究

目的观察各种贫血血细胞CD55、CD59免疫表型相互变化关系,探讨其临床意义。方法用流式细胞仪技术检测各种贫血患者骨髓、外周血细胞CD55、CD59免疫表型。结果发现PNH患者血细胞膜表面与糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚连蛋白有关抗原CD55、CD59免疫表达异常减低或缺乏,再障-PNH综合症CD55、CD59也呈不同程度降低。而且较传统常规溶血检测指标敏感。其它贫血血细胞膜表面CD55、CD59抗原表达正常。结论检测血细胞膜表面CD55、CD59GPI锚连蛋白分子表达可做PNH以及再障-PNH综合症确诊诊断和鉴别诊断的最敏感、最特异、最准确的检测指标,并对观察PNH发展、转化、治疗、愈后有重要指导价值。     

CD16在阵发性睡眠性血红蛋白尿症中的特异性表达

目的:检测中性粒细胞表面分化抗原CD16在阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)中表达,评价其在PNH诊断中的意义。方法:运用流式细胞术检测40名健康体检者及36例初治PNH患者外周血中性粒细胞表面分化抗原CD16,并与CD55、CD59及与传统Ham's试验结果进行比较研究。结果:PNH患者外周血细胞的CD16、CD55及CD59均有不同程度的缺乏,与健康对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);与传统Ham's试验比较其灵敏度高,特异度高。结论:细胞膜上糖基化磷脂酰肌醇锚的锚定蛋白CD16的缺陷与PNH有密切关系,流式细胞术检测PNH患者外周血中性粒细胞CD16可作为诊断PNH的有效辅助检查方法,具有一定临床意义。     

阵发性睡眠性血红蛋白尿患者测定CD55、CD59的意义

本文采用流式细胞技术测定6例阵发性睡眠性血红蛋白尿（PNH）．11例再障-PNH综合征,10例再生障碍性贫血（AA）患者外周血淋巴细胞膜CD55和CD59标记率。6例PNH患者均表现出CD55和CD59下降（P＜0.01）．11例再障-PNH综合征患者也表现出CD55和CD59下降（P＜0.05）。10例再生障碍性贫血患者中8例CD55和CD59标记率在95％以上．2例标记率在85％以上,与对照组相比无统计学意义。结果表明：血细胞膜上糖基磷脂酰肌醇（GPI）“锚”相关蛋白CD55和CD59的缺陷与PNH有密切关系。流式细胞技术测定血细胞膜CD55和CD59可作为诊断PNH的有效方法。     

CD55、CD59免疫表型对PNH相关疾病诊断的观察研究

目的 探讨CD55、CD59免疫表型与PNH及相关疾病诊断及鉴别诊断价值.方法 用流式细胞仪检测PNH及相关疾病CD55、CD59免疫表型.结果 发现PNH患者血细胞膜表面与糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚连蛋白有关抗原CD55、CD59表达减低或缺乏,再障-PNH综合症CD55、CD59也呈不同程度降低.其它贫血血细胞膜表面CD55、CD59.抗原表达正常.结论 CD55、CD59 GPI锚连蛋白分子表达可做PNH以及再障-PNH综合症诊断和鉴别诊断的最敏感、最准确的检测指标.     

CD55、CD59免疫表型对PNH相关疾病诊断的观察研究

目的探讨CD55、CD59免疫表型与PNH及相关疾病诊断及鉴别诊断价值。方法用流式细胞仪检测PNH及相关疾病CD55、CD59免疫表型。结果发现PNH患者血细胞膜表面与糖基磷脂酰肌醇（GPI）锚连蛋白有关抗原CD55、CD59表达减低或缺乏,再障-PNH综合症CD55、CD59也呈不同程度降低。其它贫血血细胞膜表面CD55、CD59抗原表达正常。结论CD55、CD59GPI锚连蛋白分子表达可做PNH以及再障-PNH综合症诊断和鉴别诊断的最敏感、最准确的检测指标。     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者外周血CD55、CD59测定

阵发性睡眠性血红蛋白尿症(paroxysmal nocturnal hemoglobinuria,PNH)是一种获得性克隆性造血干细胞疾病,临床表现为全血细胞减少、血管内溶血、反复静脉血栓形成[1],PNH是由于各种原因造成骨髓损伤,导致糖化肌醇磷脂-锚(PIG-A)基因突变,使糖基磷酯酰肌醇(GPI)锚连蛋白合成障碍,患者血细胞呈现多种锚连接蛋白的减少或缺失,其中包括衰变加速因子(DAF,CD55)和反应性溶血膜抑制物(MIRL,CD59)的缺失[2].作者测定了PNH患者外周血CD55、CD59的表达,以探讨CD55、CD59检测对PNH诊断及鉴别诊断的意义.     

六类贫血患者外周血CD55^-和CD59^-细胞检测结果及其意义

目的检测贫血患者外周血中红细胞和中性粒细胞膜表面的糖化磷脂酰肌醇（GPI）连接的衰变加速因子（DAF，CD55）和膜反应性溶血抑制物（MIRL，CD59）的表达情况，探讨其临床意义。方法采用荧光标记的CD55和CD59单克隆抗体，流式细胞仪检测42例正常人、8例PNH、36例AA、22例MDS、10例AIHA、32例IDA、25例巨幼贫患者CD55^-和CD59^-的红细胞和中性粒细胞的百分率。结果正常人CD55^-和CD59^-红细胞和中性粒细胞的百分率均〈5％，PNH患者均〉25％，部分AA、MDS、AIHA患者〉5％（均〈20％），巨幼贫和IDA患者的红细胞和中性粒细胞CD55^-和CD59^-百分率均正常。采用流式细胞仪检测外周血CD55^-和CD59^-的红细胞和中性粒细胞是目前诊断PNH的最可靠、最敏感的方法。也是临床鉴别PNH和其他贫血的较好方法。     

贫血患者外周血CD55+和CD59+细胞检测及临床意义

目的检测贫血患者外周血中红细胞和中性粒细胞膜糖基磷脂酰肌醇（GPI）连接的补体调节蛋白CD55和CD59表达情况，探讨其临床意义。方法用流式细胞仪，采用直接荧光素标记的CD55和CD59单克隆抗体，测定50例健康人、18例阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）、9例再生障碍性贫血-阵发性睡眠性血红蛋白尿综合症（AA-PNH综合征）、27例再生障碍性贫血（AA）、11例巨幼细胞性贫血、8例缺铁性贫血患者外周血中红细胞和中性粒细胞膜CD55^＋和CD59^＋表达的百分率。结果外周血中红细胞和中性粒细胞膜CD55^＋和CD59^＋的百分率健康人均〉95%，PNH患者在25％～94．8％之间。巨幼细胞性贫血、缺铁性贫血患者外周血中红细胞和中性粒细胞膜CD55^＋和CD59^＋可为正常或有程度不同的CD55^＋和CD59^＋细胞缺失。结论红细胞和中性粒细胞GPI锚相关蛋白CD55^＋和CD59^＋的缺陷与PNH密切相关，利用流式细胞术同时检测外周血中红细胞和中性粒细胞膜CD55^＋和CD59^＋是目前诊断PNH最可靠、最敏感的方法，是临床鉴别诊断PNH和其它贫血性疾病的较好方法。     

CD55,CD59抗原表达在PNH合并全血细胞减少症诊断中的应用

目的 探讨红细胞和粒细胞膜CD55与CD59抗原表达在阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)合并全血细胞减少症(PCP)诊断中的应用.方法采用流式细胞术结合直接免疫荧光法,检测PCP患者病因可疑为PNH的的外周血红细胞和粒细胞膜 CD55与CD59抗原的表达.结果 125例中,PNH32例,非PNH 93例(包括再生障碍性...     

CD34、CD59在阵发性睡眠性血红蛋白尿中的表达及意义

目的研究阵发性睡眠性血红蛋白尿（PNH）患者骨髓CD34^＋细胞比率及外周血粒、红细胞CD59表达阳性率并探讨其临床意义。方法采用流式细胞术检测20例PNH患者骨髓单个核细胞（BMMNC）中CD34^＋细胞比率及外周血中粒、红细胞CD59表达阳性率。结果PNH患者CD34^＋细胞比率显著低于正常人（P〈0．01）;其中增生减低组CD34^＋细胞比率低于增生活跃、增生明显活跃组（P均〈0．05）,而后两组之间差异无显著性（P〉0．05）。正常人外周血粒、红细胞CD59表达阳性率均〉95％,其中粒细胞CD59表达稳定性较好;PNH患者外周血粒、红细胞CD59表达阳性率与正常对照组相比均显著减低（P〈0．01）;粒细胞CD59在不发、偶发、频发组中表达逐渐减低且差异均有显著性（P〈0．05）,红细胞CD59表达则在三组之间差异无显著性（P〉0．05）。结论CD34^＋造血干细胞减少可能参与PNH发病;外周血粒、红细胞CD59检测是诊断PNH的特异性及敏感性方法,其中粒细胞CD59缺失程度对判断病情严重与否具参考价值。     

Reduction of CD55 and/or CD59 in red blood cells of patients with HIV infection.

BACKGROUND: Anemia is a common feature in HIV infection. An increased sensitivity of lymphocytes from HIV patients to lysis by complement has been correlated with a decreased expression of CD55 and CD59 in their surface. The aim of this study was to evaluate CD55/CD59 presence in red cells of HIV patients and explore possible correlations with clinical parameters. MATERIAL/METHODS: CD55/CD59 expression was evaluated in erythrocytes of 37 patients (30M/7F, median age: 39 years) with HIV infection (25 also having hemophilia), 121 controls, and 8 PNH patients using the sephacryl-gel microtyping system. Ham and sucrose tests were also performed. RESULTS: Anemia was present in 14/37 (37%) HIV patients. Interestingly, all HIV patients had deficient CD55 and/or CD59 erythrocytes: 8 (21%) for both CD55 andCD59 and 29 (78%) isolated CD55 and/or CD59 negativity. Deficient erythrocytes did not account for more than 10% of the total in the vast majority of patients. In controls, only 2 (1%) had red cells with double CD55/CD59 negativity and 3 (2%) had isolated deficiency. All PNH patients had a simultaneous CD55/CD59 deficiency. Positive Ham and sucrose tests were found only in PNH. There was no correlation between the presence of deficient CD55/CD59 erythrocytes and anemia, hemolysis, antiretroviral therapy, CD4+ counts, viral load, or concomitant hepatitis C infection in HIV patients. CONCLUSIONS: This study provides evidence supporting the presence of erythrocytes with CD55 and/or CD59 deficiency in HIV. Further studies using molecular techniques will be required to clarify the exact role of this deficiency in HIV patients.     

阵发性睡眠性血红蛋白尿患者尿激酶受体的表达及临床意义

目的:检测尿激酶型纤溶酶原激活物受体在阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)患者中的表达,并探讨其与PNH诊断以及血栓形成的关系。方法:PNH患者22例,其中4例伴血栓形成;单纯心/脑血栓形成患者20例;健康志愿者20例。以流式细胞术检测外周血粒细胞上CD87的表达,ELISA法检测血清可溶性尿激酶受体(su鄄PAR)。结果:健康志愿者外周血CD87 粒细胞比例皆>90%,单纯心/脑血栓形成组与健康志愿者组表达率差异无统计学意义。与其他两组相比,PNH患者外周血CD87 粒细胞百分率显著降低(P<0.01)。PNH组血清su鄄PAR水平显著升高(P<0.01),PNH患者伴血栓形成组与不伴血栓形成组比较,前者外周血CD87 粒细胞比例明显降低,血清su鄄PAR水平显著升高(P<0.01)。PNH患者血清su鄄PAR与CD87 粒细胞百分率呈负相关。结论:PNH患者外周血CD87 粒细胞百分率显著降低,血清su鄄PAR水平明显增高,与血栓形成并发症相关。以流式细胞术检测粒细胞CD87及血清su鄄PAR,有助于PNH的诊断及监测血栓形成的病情变化。     

CD55CD59CD34对PNH早期诊断研究应用

目的:探讨CD55、CD59、CD34抗原在阵发性睡眠性血红蛋白尿综合征(PNH)的早期诊断中的价值。方法:应用流式细胞仪测定PNH患者CD55、CD59、CD34抗原阳性表达变化,并与非PNH组以及正常对照组CD55、CD59、CD34抗原表达情况进行分析,同时做糖水试验、Ham试验、RC%、NAP积分检测。结果:PNH、AA-PNH患者CD55+、CD59+表达率较正常对照组及其它病组明显减少,差异有显著性(P<0.01);PNH患者CD34+表达率较正常对照组及其它病组明显增高(P<0.01),而AA患者CD34+表达率最低。结论:CD55、CD59、CD34抗原表达率可作为PNH综合征早期诊断最敏感指标,而基础检测对PNH的诊断及病情监控有重要意义,可达到早发现、早鉴别、早诊断、早治疗的目的。     

Phenotypic analysis of affected peripheral erythroid for CD59 in paroxysmal nocturnal hemoglobinuria

Objective To determine whether affected reticulocytes could be a reliable marker for the diagnosis of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria (PNH), we analyzed CD59-antigen expression on the membranes of reticulocytes and erythrocytesMethods We studied 10 PNH patients and 5 healthy volunteers by two-color flow cytometry with a membrane permeable fluorescent dye, thiazole orange (TO), and anti-CD59 monoclonal antibodies (MoAb) TO was introduced to gate reticulocytes and anti-CD59 MoAb were used to identify glycosylphosphatidylinositol (GPI)-deficient cellsResults Cells from healthy individuals were only CD59 positive However, in all PNH patients, CD59-antigen expression could be divided into 3 types: type Ⅰ cells (CD59 normally positive), type Ⅱ cells (CD59 partly positive) and type Ⅲ cells (CD59 negative) The majority of reticulocytes belonged to type Ⅲ cells, GPI-deficient cells (610%) In addition, the percentage of affected reticulocytes was higher than that of erythrocytesConclusions Analyzing PNH reticulocytes was important, because most patients had elevated numbers of reticulocytes, which represent more closely the recent erythroid output of BM However, circulating mature erythrocytes were subject to complement- mediated intravascular lysis Therefore, the percentage of abnormal erythrocytes may not accurately reflect the proliferation rate of normal and abnormal erythroid progenitor cells Thus, affected reticulocytes could be a more reliable indicator for the diagnosis of PNH than mature erythrocytes.     

再生障碍性贫血外周血CD55~-、CD59~-细胞表达的临床意义

检测慢性再生障碍性贫血(CAA)患者外周血中红细胞和粒细胞膜CD55、CD59表达情况,探讨其与环孢素A(CsA)疗效和预后的关系。方法采用荧光素标记CD55和CD59单克隆抗体,流氏细胞术检测30例正常人和67例CAA患者。根据CAA外周血红细胞和(或)中性粒细胞是否含有PNH样的CD55-、CD59-细胞分为A组和B组。均予CsA为主治疗大于6个月,并随访观察。结果正常人PNH样的细胞均<3.0%,CAA患者85.1%(57例)为3.0%～10.0%之间,A组与B组比较:对CsA为主的治疗起效时间早,分别为(5.18±2.53)个月与(10.67±1.15)个月,P<0.001;有效率高,分别为87.7%(50/57)、30.0%(3/10),P<0.001;中位随访时间是28.2个月(17.0～51.4个月),复发率低,分别为10.0%(5/50)、66.7%(2/3),P<0.05;3年总生存率高,分别为100.0%、44.4%,P<0.001;1年无病生存率高,分别为43.9%(25/57)、10.0%(1/10),P<0.05。结论 CAA患者红细胞和(或)中性粒细胞存在微量PNH样细胞,有PNH样细胞的CAA对CsA为主治疗敏感起效快,有效率高,复发率低,3年累积总生存率及1年累积无病生存率均高,有助指导临床用药及预测预后。     

再生障碍性贫血患者外周血CD55、CD59的表达分析

目的 通过检测再生障碍性贫血患者外周血粒、红细胞表面锚定蛋白CD55、CD59的表达以及血清补体C3、C4的变化,探讨其在再生障碍性贫血发生、发展中的作用。 方法 运用流式细胞仪对81例再障患者和31例对照人群外周血粒、红细胞CD55、CD59表达进行检测,同时通过免疫比浊方法对血清补体C3、C4进行检测。结果 再障组外周血粒、红细胞CD55、CD59(91.92±17.72、93.83±9.17;94.54±7.88、93.06±15.28)与对照组(99.28±0.69、97.88±2.20;97.92±1.40、97.85±1.67)相比,显著下降(p<0.05);补体C3、C4(0.86±0.11;0.20±0.05)较对照组(1.03±0.26;0.30±0.10)相比,显著降低。 结论 再生障碍性贫血患者外周血粒、红细胞表面锚蛋白CD55和CD59表达缺失,补体数量下降,其介导的体液免疫功能异常可能是再障发生、发展的一种因素。