微分化急性髓系白血病21例临床分析及诊断标准复习

微分化急性髓系白血病(AML-M0)是一种少见的AML,约占AML的3%-5%,随着细胞免疫学的发展,特别是单克隆抗体在临床的广泛应用,越来越多的M0患者被诊断,对M0的诊断和治疗问题也越来越受重视.但因为其属于少见疾病,一些医师对诊断标准尚不十分熟悉,容易漏诊和误诊.现总结上海市中美白血病协作组在2003年6月到2007年4月诊断的21例M0患者资料,并复习诊断标准,希望提高广大医师对M0的认识和诊断水平.     

微分化急性髓系白血病4例实验室检查特点

微分化急性髓系白血病（AML-M0）是一种少见的急性髓细胞白血病（AML），1987年由Lee等首次提出，1991年由法美英（FAB）协作组将其归人AML，确定为M0。M0仅根据光镜下的形态和细胞化学染色很难确认，常被误诊为急性淋巴细胞白血病（ALL）。随着电镜细胞化学和细胞免疫学的发展，特别是单克隆抗体在临床上的广泛应用，使M0得以诊断，并陆续有文章发表，但例数都很少。现总结我院近年来诊断的4例M0病例资料，并对其实验室检查特点及诊断做一分析。     

192例急性髓系白血病免疫表型、细胞遗传学及临床特征的研究

本研究对192例急性髓系白血病（AML）患者进行免疫表型检测,并探讨其与细胞遗传学改变和临床特征的关系。应用流式细胞术及一组系列相关单克隆抗体对192例AML患者骨髓进行免疫表型分析,用染色体G显带技术对其中的125例进行核型分析。结果显示,髓系抗原CD13、CD33、MPO、CD117表达最常见于AML。CD117表达于84．6％AML—M3病例中;较强的自发荧光、CD34与HLA—DR双阴性、表达相关髓系抗原CD13、CD33和MPO对于AML—M3诊断具有一定参考价值。CD14仅在AML—M4和AML—M5中表达;CD64和CD15同时强阳性伴HLA—DR高表达提示AML—M5可能性大。192例AML中,有47．9％伴淋系抗原表达,其中以CD7（20．8％）和CD56（26．0％）最常见,其次为CD19（9．9％）和CD2（7．3％）。125例AML中核型异常者76例（60．8％）。17例伴t（8;21）的AML—M2患者CD19、CD56、CD15表达均明显增加。另外28例t（15;17）均见于M3;2例inv（16）见于M4E0。LymAg^＋组CD34阳性患者比例（77．2％）明显高于LymAg-组（48．0％）。结论：免疫表型对AML的诊断与分型至关重要,免疫表型与患者的异常核型改变及临床特征关系密切。本研究结果提示综合细胞形态学、遗传学及免疫表型分析,对AML患者诊断、分型及预后评估有重要意义。     

CD7、CD56、CD19在AML预后及MRD监测中的意义

目的探讨急性髓系白血病伴淋系抗原（LyLAML）表达者在预后及白血病微小残留病（MRD）监测中的临床意义。方法利用流式细胞术（FCM）对86例AML进行免疫分型,并以CD7、CD56、CD19为标志进行MRD检测。结果交叉表达现象在M5中出现频率最高,其次为M2;CD7表达在Ly^＋AML中最常见;首次化疗形态学完全缓解（cR）率Ly^＋-AML病例低于L）r—AML病例;2年死亡率LytAML病例高于Ly^--AML病例;在MRD阳性检出率方面,CD7＋AML组与Ly—AML组之间差异有统计学意义（P〈0．05）,CD56’AML组与Ly^-AML组之间差异有统计学意义（P〈0．05）,CD19^＋AML组与Ly^-AML组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。讨论Ly^＋AML与LY—AML有不同的临床特点,CD7’AML和CD56^＋AML预后差;CD7、CD56可以作为MRD监测的重要指标。     

血小板过氧化物酶影响因素及超微结构定位

原始巨核细胞缺乏特异的形态特征 ,给急性巨核细胞白血病 (AML M7)的临床诊断带来一定困难[1 ] 。电镜血小板过氧化物酶 (PPO)检测技术对AML M7的诊断及鉴别诊断有重要作用 ,我们比较了固定剂作用前后骨髓细胞PPO活性 ,并用快速包埋方法 ,透射电镜下作了观察。现报告如下。病例和方法1　病例　AML M77例 ,为本院 1997～ 2 0 0 2年住院患者 ,按FAB标准确诊。2　电镜样品制备　按常规方法 ,Epon812 #包埋 ,超薄切片后 ,枸橼酸铅、醋酸铀染色 ,日立H 6 0 0电镜观察。3　电镜组化测定血小板PPO活性3.1　取患者骨髓 3～ 5ml,肝素抗凝…     

免疫分型用于68例急性白血病的分型

要为了评价免疫分型在急性白血病（AL）分型中的科学意义，应用形态学分型、直接免疫荧光标记流式细胞仪检测免疫分型对68例AL进行了分析。结果表明：形态学与免疫学检查符合率为94．1％，有4例形态学误诊被免疫分型纠正；髓系中较特异抗原为CD13、CD33，AML—M3多为CD34低表达，HLA—DR阴性，AML—M4、M5易有CDl4表达，髓系中易见淋系相关抗原表达，常见为CD7；淋系中亦可合并髓系抗原表达。结论：免疫分型可提高AL的诊断分型准确性，特殊类型AL如急性未分化性白血病（AUL）、AML—M0等的诊断必须依赖免疫分型，     

CD56在急性白血病细胞中的表达及临床意义

为了探讨CD56在急性白血病中的表达情况及意义。采用多色流式细胞术（FCM）对70例急性白血病患细胞表面CD56及其它白细胞分化抗原表达进行了分析，结果表明，70例中有16例（22．86％）表CD56，急性髓性白血病（AML）的CD56阳性表达率（15／31，48．39％）明显高于急性淋巴细胞白血病（ALL）（1／35，2．86％）（P＜0．01），CD56在AML各亚型中表达也有差异，AML－M0，－M1和－M2中阳性率（11／15）明显高于AML－M3，－M4和－M5（4／16）P＝0．013）。15例CD56^ 的AML病例中表达HLA－DR13例（41．94％），两呈明显正相关（r=0.439,n=31,P=0.014,结论：CD56主要在AML中表达，对AML的诊断，预后判断及微小残留病的检测具有重要意义。     

115例急性髓细胞白血病多参数流式细胞术免疫表型分析

免疫表型检测已成为白血病诊断和分类的重要手段。为了解急性髓细胞白血病(AML)免疫表型特征，利用三色流式细胞术CIM5／SSC参数散点图设门方法，对115例AML患者幼稚细胞表面及胞浆内分化抗原进行分析：结合FAB分类，比较AML不同亚型中抗原表达的差异，并对其诊断价值加以探讨。结果显示：在AML患者中，CD33、CD38和CDl3的表达最常见，分别达94．8％、91．3％、89．6％。在淋系抗原中，CD7的表达最为常见(20．2％)，其次是CD19(16．5％)和CD2(15％)，某些免疫表型特征与FAB分类具有相关性，包括M3中缺乏表达HLA—DR、CD34和CD56，但CD2的表达增加；M2中CD19，M5中CD14和CD56的表达增加，而M0中未见MPO的表达，结论：多参数流式细胞术是诊断AML的一项可靠技术，AML某些免疫表型特征与FAB分类具有明显相关性．     

骨髓增生异常综合征难治性贫血伴原始细胞增多Ⅱ型的免疫学特征和预后相关研究

本研究探讨骨髓增生异常综合征（MDS）中WHO亚型难治性贫血伴原始细胞增多Ⅱ型（RAEB—Ⅱ）的免疫学特征，并筛选出与MDS预后相关的免疫学指标。采用CIM5／SSC双参数散点设门，应用三色流式细胞术对35例原发MDS患者骨髓标本进行流式细胞术检测，并对其进行随访。另外，选择同时期47例AML—M1、51例AML—M2及38例ALL初诊患者作为对照。对免疫分型结果结合随访应用SPSS13．0软件包进行数据处理。结果显示：RAEB-Ⅱ患者高表达HLA—DR（100％），有较高的灵敏度及特异性。在RAEB—Ⅱ中表达相对较高的还有CD13（94．74％）、CD33（84．21％）和CD117（78．95％）。与MDS其它亚型相比，CD13在REAB—Ⅱ中的表达高于RCMD（P〈0．01）及REAB—Ⅰ（P〈0．05）；CD33、CD117（P〈0．05）及干细胞抗原CD34（P〈0．01）在RAEB—Ⅱ中的表达高于RC—MD，但与RAEB—Ⅰ的表达没有显著性差异（P〉0．05）。与AML—M1和AML—M2相比，RAEB—Ⅱ中CD13和CD117的表达无显著差别（P〉0．05）；CD33（P〈0．01）和CD34（P〈0．05）表达均低于AML—M1，而与AML—M2表达无显著差别（P〉0．05）；CD15（P〈0．01）和CD11b（P〈0．05）表达低于AML—M2，而与AML-M1相比表达无显著差别（P〉0．05）；RAEB—Ⅱ中MPO的表达低于AML—M1和AML—M2（P〈0．05）；HLA—DR表达高于AML-M2（P〈0．05），与AML—M1表达无显著差别（P〉0．05）。与T—ALL相比，RAEB—Ⅱ不表达CD2、CD3、CD5和CD8（阳性率为0％，P〈0．01）；CD4（P〈0．05）和CD7（P〈0．01）表达均低于T—ALL。与B—ALL相比，CD19和CD20在RAEB-Ⅱ中不表达（阳性率为0％，P〈0．01）；CD10、CD22和CCD79a表达均低于T—ALL（P〈0．05）。CD117（P=0．0197）及MPO（p=0．0085）是影响本组MDS总存活期（OS）的主要免疫学标志；Cox回归显示CD117（P=0．003）为OS最主要影响因素。结论：RAEB—Ⅱ以髓系抗原表达为主，基本不表达或者低表达淋巴系抗原，似乎有着自己较独特的免疫表型特征。HLA—DR可作为RAEB—Ⅱ的特异性指标与MDS其它亚型相鉴别。CD17有望成为判断MDS预后的独立指标。     

四色荧光标记抗体在白血病免疫分型中的应用及意义

为探讨多参数流式细胞术对白血病免疫分型的方法及意义，本研究自行设计了一系列4种荧光标记的单克隆抗体组合，对88例急性白血病患骨髓或外周血进行流式细胞仅免疫表型分析。应用本组抗体组合可对T—ALL和B—ALL及AML－M1—M7患做出诊断，并可诊断形态学难以辨认的AML－M0，及一般免疫分型法较难辨认的单核细胞白血病。应用4组四色荧光标记的抗体组合，共含13种抗体，既可将90％以上的白血病患分为ALL或AML，并可鉴别急性白血病的主要亚型，及反映血细胞的分化成熟度。结论：四色荧光抗体组合可用较少的抗体，特异地对白血病细胞进行多参数免疫分型分析，提高免疫分型的准确性。     

Inv(16)急性髓系白血病的分子细胞遗传学研究

Inv(16 ) (p13q2 2 )或t(16 ;16 ) (p13q2 2 )是急性髓系白血病(AML)特征性染色体异常,通常见于AML M4EO亚型,占总AML患者的5 % [1] 。其分子特征为CBFB/MYH11融合基因形成。最新WHO分型中inv(16 ) /HY11 CBFB为一个独立类型[2 ] 。我们应用荧光原位杂交(FISH)技术对临床上诊断为M4EO及伴有嗜酸粒细胞增高的AML患者进行研究,回顾性分析inv(16 )患者临床与实验室特点。病例和方法1　病例　我院1998～2 0 0 2年有细胞遗传学资料的AML患者5 30例,选择伴有嗜酸粒细胞增高的AML患者32例(核型伴有2 2三体3例)作为研究对象,其中…     

中、小剂量化疗对老年急性髓细胞白血病疗效观察

随着强烈化疗和骨髓移植的进展 ,中青年急性髓细胞白血病 (AML)的完全缓解率和长期无病生存率不断提高[1] ,而老年人AML的疗效比儿童和成人的疗效差得多[2 ] 。因此 ,老年人AML的治疗已成为一个令人关注的问题。我们对我院 3 0例老年AML患者使用不同剂量HA(VP16)、DA(VP16)方案治疗的情况进行了总结 ,分析如下。1　资料和方法1.1　一般资料 :3 0例均为我院 1997年 1月～ 2 0 0 3年 5月收治的AML病人。男 15例 ,女 15例 ,年龄 60～ 82岁 ,中位年龄 67.2岁。FAB分型分别为 :M14例 ,M2 7例 ,M3 2例 ,M42例 ,M56例 ,M69例。其中由…     

伴3系病态造血初发性急性髓细胞白血病的临床及实验研究

目的 探讨AML—TMDS的临床特点、血液学特征和化疗效果。方法 对12例AML—TMDS与93例无MDS的AML的血象、骨髓象及临床疗效进行比较分析。结果 12例(11．4％)AML—TMDS见于除M3以外的FAB各亚型。二的Hb、WBC、BPT无显性差异(P＞0．05)；AML—TMDS乃组骨髓原始细胞计数及首次完全缓率均低于无MDS的AML组，两有显性差异(P＜0．05)。结论 AML—TMDS治疗后3系病态造血并不消失，对化疗不敏感，首次完全缓解率低，预后差。     

急性髓系白血病初诊患者β-连环蛋白和周期蛋白D1mRNA的表达及其意义

本研究旨在检测急性髓系白血病（AML）患者β-连环蛋白（beta—catenin）及周期蛋白D1（cyclinD1）mRNA的表达变化，分析其相关性，为探讨Wnt／β联蛋白（Wnt／beta—catenin）通路在AML发病机制中的作用提供理论依据。采用实时荧光定量RT—PCR的方法检测beta—catenin及cyclin D1 mRNA的相对表达水平，分析两者在AML不同亚型及良性血液病患者中的表达变化及相关性。结果表明，AML骨髓单个核细胞（BMMNC）中beta-cateninmRNA的表达水平明显高于良性血液病患者（P〈0．05），但在AML各亚型之间其表达量无统计学差异（P〉0．05，在AML中存在cyclinD1 mRNA的过度表达，其表达水平明显高于良性血液病组（P〈0．05），在各亚型间其表达量无统计学差异（P〉0．05）。Beta-catenin与cyclinD1的表达水平在AML-M1、M2、M4中存在显著正相关性（r值分别为0．822，0．627，0．712，P值分别为0．001，0．020，0．002）。结论：在AML患者中存在beta—catenin及cyclin D1的过度表达，且在部分亚型中存在显著相关性；Wnt／beta-catenin通路在AML中被异常激活，很可能是通过该通路下游靶基因cyclinD1的激活，参与白血病细胞的周期紊乱和异常增殖的调节。     

Ph染色体阳性的成人急性髓系白血病

Ph染色体为慢性粒细胞白血病 (CML)的标记染色体 ,但亦可见急性白血病 ,骨髓增生异常综合征 ,淋巴瘤 ,和骨髓瘤等其他疾病。[1] 近年来 ,我院共发现Ph染色体阳性成人急性髓系白血病 (AML) 6例 ,现报告如下。1　临床资料1)　病例。自 1997年 9月～ 2 0 0 1年 9月对 10 6例成人初治AML患者进行了染色体检查 ,发现Ph染色体阳性患者 6例 ,其中男 5例 ,女 1例 ,年龄 15～ 6 3岁 ,平均 4 1.3岁。所有病例均按 1985年FAB诊断标准分型确认的AML。其中M44例 ,M52例。2 )　染色体核型分析。采用骨髓细胞直接法和不加植物蛋白血凝素的短期培养…     

MPO mRNA表达对急性髓系白血病微分化型(AML-M0)分型的意义

急性髓系微分化型白血病 (AML M0 )临床少见 ,单纯形态学诊断有困难。自 1999年开始 ,我们采用链亲和素 胶体金原位杂交 (ISH SAG)方法 ,结合免疫分型、细胞化学染色对16 1例急性白血病 (AL)进行分型 ,其中诊断为AML M0 者 7例 ,同时还检测了 3株白血病细胞系的髓过氧化酶 (MPO)基因表达。现报告如下。　病例资料　初诊AL 16 1例。按FAB分型标准诊断为急性淋巴细胞白血病 (ALL) 4 9例 ,急性髓系白血病 (AML) 10 7例 ,不能分类AL(UAL) 5例。2　免疫表型　初诊AL患者骨髓或外周血经肝素抗凝 ,常规分离单个核细胞 ,选取淋系 (…     

实时定量RT-PCR技术测定初治白血病患者常见融合基因转录子水平及其标准化的探讨

目的 了解白血病常见融合基因M—bcr—abl（表达产物为P210^bcr-abl）、m—bcr—abl（表达产物为P190^bcr-abl）、TEL—AML1、AML1-ETO、PML—RARα、CBFβ-MYH11在初治白血病患者中的表达水平。方法 采用基于TaqMan探针的实时定量RT—PCR（RQ—PCR）技术检测195例白血病患者骨髓细胞融合基因转录子水平，其中M—bcr—abl^＋慢性粒细胞白血病慢性期（CML—CP）50例、M—bcr—abl^＋急性淋巴细胞白血病（ALL）10例、m—bcr—abl^＋ALL19例、TEL—AML1^＋ALL11例、AML1-ETO^＋急性髓系白血病（AML）30例、PML—RARα急性早幼粒细胞白血病（APL）58例、CBFβ-MYH11^＋AML患者17例，并检测13例M—bcr-abl^＋CML-CP患者的外周血细胞融合基因转录子水平。以abl作为内参基因，融合基因转录子水平以融合基因转录子拷贝数／abl基因转录子拷贝数×100％表示。结果CML—CP患者骨髓及外周血M-bcr—abl转录子水平相似（中位值分别为30％和35％，P〉0.05）、ALL患者M—bcr—abl及m-bcr-abl转录子水平相似（中位值分别为64％和54％，P〉0．05），ALL患者M—bet—abl转录子水平明显高于CML—CP患者（P〈0．001）。ALL患者TEL—AML1转录子中位水平为228％。表达特异性融合基因的AML患者中，AML1-ETO转录子水平明显高于CBFβ-MYH11及PML—RARα（中位值分别为388％，145％和47％，P值均〈0．001），CBFβ-MYH11转录子明显高于PML—RARα（P〈0．001）。L型、V型及S型PML—RARα转录子中位水平分别为45％、44％及55％，L型明显低于S型（P=0．04）。结论 不同类型融合基因转录子在初治白血病患者中的水平不同，并有个体差异。初治患者融合基因转录子水平的测定不仅为检测微量残留病、评价疗效提供基准值，而且是不同实验室间数据比较、实现标准化的基础。     

低分化急性髓细胞白血病AML-Mo型识别的建议

应用单克隆抗体(单抗)协助诊断急性白血病时,发现了一些不符合FAB 分型标准的急性髓细胞白血病(AML)(M1—M7)。这些病例的形态学上大多符合FAB 最初描述的急性淋巴细胞白血病(ALL)L2型,少数符合L1型,但免疫学分析无淋巴系分化的证据。为了探讨这种低分化AML 的识别特征,作者对18例曾被疑诊为AML-Mo 型病例进行了复习。其血片及骨髓片经形态学、细胞化学、免     

CD64和CD14单核细胞相关性急性髓系白血病诊断中的意义

目的探讨CD64、CD14在急性单核细胞相关的髓系白血病免疫分型鉴别诊断中的意义。方法采用CD45/SSC散点图设门多参数流式细胞术分析70例急性髓系白血病(AML)患者细胞CD64、CD14及其他相关抗原的表达情况。结果 CD64在AML上的表达情况为:M0(0.0%)、M1(0.0%)、M2(10.5%)、M3(46.2%)、M4(78.6%)、M5(100.0%),其中弱阳性、阳性表达可以出现在各型AML中,唯独强阳性表达出现在M5中(P<0.01)。CD14在AML上的表达情况为M4(57.1%)、M5(77.8%),其余均为阴性。结论 CD64对诊断AML的灵敏度优于CD14,CD14的特异度优于CD64,二者结合有助于提高AMLM4/M5型的检出率及其与其他AML亚型的鉴别诊断。     

上海市成人急性白血病572例世界卫生组织分型的临床研究

目的 分析上海市急性白血病（AL）采用世界卫生组织（WHO）分型的基本情况，比较WHO分型和FAB分型的优缺点。方法 收集连续性样本，对上海市中美联合白血病协作组收治的572例AL患者同时采用FAB和WHO标准进行分型诊断。结果 572例AL中急性髓系白血病（AML）436例（76.2％），急性淋巴细胞白血病（ALL）119例（20.8％），急性全髓细胞白血病1例，急性混合细胞白血病5例，急性侵袭性NK细胞白血病9例，急性浆细胞白血病2例，AML和ALL之比为3．66：1。再现性细胞遗传学异常AML占35．3％，AML伴多系病态造血占13.1％，治疗相关性AML占0.9％，不属于上述分类的AML占50．7％，治疗相关性AML比例低于国外报道。ALL中B—ALL占84．9％。AMLFAB分型中M4型最多，占38.5％，M3和M4亚型比例高于国外报道，M1型比例低于国外报道。AML染色体异常率为60.8％，AML伴t（15：17）比例高于国外报道，染色体预后良好者占30.6％，预后中等者占51.5％，预后不良者占17.9％。B—ALL中t（9：22）占33，7％。结论 上海市成人AML的WHO分型和染色体异常类型与国外有显著不同。与上海市1984至1994年AL资料相比，AML的亚型分布有所变化，M4亚型比例增多，M1和M5亚型比例减少。