结核分支杆菌对抗痨药物组合依赖的初步调查

目的调查结核分支杆菌对抗痨多药组合的依赖情况。方法用双向匡氏琼脂培养基对184例结核杆菌阳性菌株进行多药组合HR、HRS、HRE依赖性实验。结果HR、HRS、HRE组合的依赖率分别为13．04％（24／184）,9．78％（18／1841,7．07％（13／184）。对HR组合依赖的24株菌株中,依赖R的占75％（17／24）,依赖H的占50％（12／24）,依赖H和R的占29．17％（7／24）,不依赖H和R的占4．17％（1／24）;对HRS组合依赖的18株菌中,依赖R的占94．44％（17／18）,依赖H的占44．44％（8／18）,依赖S的占38．89％（7／18）,同时依赖H、R、s的占16．67％（3／18）,均不依赖的占5．56％（1／18）,对HRE组合依赖的13株菌中,依赖R的占92．31％（12／13）,依赖H的占46．15％（6／13）,依赖E的占76．92％（10／13）,三者同时依赖的占30．77％（4／13）,三者均不依赖的未见。结论结核分支杆菌对多药组合HR、HRS、HRE具有不同程度的依赖现象,对三种药物组合依赖的菌株对R的依赖率最高。     

187株结核杆菌原发耐药分析

采用改良罗氏培养基对从初治肺结核分离出的187株结核杆菌做7种抗结核药物的药敏试验。187株结核菌原发耐药率为56.1％,耐药率依次是SM38.0％、INH35.3％、RFP23.0％、EMB17.6％、KM9.1％、PAS8.6％和CPM1.1％;耐1药、2药、3药和4药以上分别占原发耐药的24.8％、43.8％、14.3％和17.2％;耐HR33株为17.6％,占原发耐药的31.4％;H、R、E、S一线药物同时耐2种以上67株,占原发耐药的35.8％。S、H、R、E耐药发生率较高;耐多种药物结核(MRD-TB)急待有效预防和治疗。     

结核病:现行治疗和新药开发

结核病的控制很复杂，有长期化学治疗的困难、潜伏细菌不能消除和结核分支杆菌产生多药耐药菌株等问题。迫切需要能控制结核病的新药，包括开发短程抗生素疗法以减少药物耐药的发生，治疗多药耐药的结核菌株和根除潜伏细菌的新药。近年来见证了许多新结构类型的抗分支杆菌新药，一些药对敏感和耐药结核菌均呈现有希望的活性。尤其是新发现的二芳基喹啉具有较佳抗结核菌活性，硝基咪唑并吡喃最近研究结果令人鼓舞和独特的噁唑烷酮也很有意义。分支杆菌基因组学的成功促进遗传学和生化研究深入了解菌壁生物合成和代谢过程，揭示了许多潜在的药物靶标。     

83例初治肺结核耐药情况分析

目的：了解本地区结核菌耐药状况。方法：未用过抗结核药或用抗结核药未超过一个月痰培养阳性的肺结核病人进行检测。结果：83例培阳结核菌株，对4种抗痨药H、S、R、E全部敏感61例（73％），22例耐药（27％），耐H、S、R、E分别为14％、18％、7％、12％。耐H、R以上多耐药结核菌株占7％。结论：本地区结核菌的原始耐药率及耐多药结核菌耐药率高。应加强结核病患的治疗和管理。     

应用PCR—SSCP检测结核分支杆菌链霉素耐药基因的研究

结核病耐药问题十分严重，传统的药敏实验需1～2月。Sm是一线抗结核药物，结核分支杆菌耐Sm最常见的分子机制是由于核糖体S12蛋白编码基因（rpsL）突变。该文应用PCR－SSCP分析了62个结核分支杆菌临床分离株的rpsL基因，以H37Rv标准菌株为对照，13个药物敏感菌株中12个rpsL基因未见SSCP异常；37个耐Sm株中，31个（83．8％）有rpsL基因泳动异常；12个耐其它抗结核药物林中，仅1个单链DNA泳动异常。因此，PCR－SSCP有希望成为简便、快速地检测结核分支杆菌耐药突变株的方法，弥补常规药敏试验的不足，指导临床治疗。     

河南省结核菌耐药监测研究

目的 :河南省作为世界卫生组织首轮全球结核菌耐药监测第一个中国成员 ,在全省 3 0个点进行了结核菌耐药监测 ,以评价现行结核病控制措施效果。方法 :按世界卫生组织 /IUATLD结核菌耐药监测指南实施。随机整群抽样 3 0个监测点。用抗结核药史小于 1月及 1月的涂阳肺结核顺序入选 ,对用药史进行了复核 ,痰标本抗酸染色 ,L J培养基培养 ,比例法作药敏 ,检查药物为链霉素 (S)、利福平 (R)、异烟肼 (H)、乙胺丁醇 (E) (SHRE) 4药。接受韩国跨国参比实验室 (SRL)质控并已达标 ,资料分析用世界卫生组织的SDRTB软件分析 ,χ2 检验等统计学处理。结果 :①入选 13 72例 ,无用药史 (含用药小于 1月 ) 916例 ,有用药史 (用药 1月 ) 45 6例 ;②始耐药率 43 0 % ,获得性耐药率68 2 % ,综合耐药率 5 1 4%。③各药初耐率S、H、R、E依次为 3 2 5 % ,3 1 0 % ,2 0 7% ,10 3 % ,获耐率相应为 5 2 2 % ,49 5 % ,48 3 % ,2 0 4%。④多耐药率 (至少H +R)初耐 16 5 % ,获耐 3 7 1%。结论 :河南省结核菌耐药形势严峻 ,相应的治疗成功率则明显较低 ,应引起卫生主管部门和社会各界高度重视。采取有力措施加以控制     

赣榆县结核杆菌与非结核杆菌感染情况及菌株耐药分布研究

目的了解本地区典型肺结核病人结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌感染及菌株耐药分布情况。方法收集2008年6月-2009年底我县典型肺结核病人痰标本,进行直接痰涂片检查、痰菌培养、耐药检测及结核分枝杆菌及非结核杆菌鉴定。结果 345例痰标本检出306例菌株。结核分枝杆菌288株,占94.12%,对H、R、E、S4种一线抗痨药耐药率分别为18.06%、18.40%、8.33%、21.53%;非结核分枝杆菌18株,对H、R、E、S4种一线抗痨药耐药率分别为100%、33.3.3%、33.33%、100%。结论本地区结核病人对一线抗痨药物耐药情况较为严重,非结核分枝杆菌感染比例较高,在今后工作中值得重视。     

阿坝州人民医院101株结核分枝杆菌耐药情况分析

目的 通过药敏实验,探讨马尔康地区藏族肺结核患者的结核分枝杆菌对抗结核药物的敏感性和耐药性情况,指导临床制定合理的化疗方案.方法 采用绝对浓度间接法检测101株结核分枝杆菌对五种抗结核药物:异烟肼(INH,H)1μg/ml和10μ g/ml,利福平(RFP,R)50μg/ml和250μg/ml,链霉素(SM,S)10μg/ml和20μg/ml,乙胺丁醇(EMB,E)5μg/ml和50μg/ml,氧氟沙星(OFLX,O)5μg/ml和50μg/ml的敏感性.药物依赖判定:在含抗结核药物的培养基上生长旺盛程度和菌量,高浓度药物培养基≥低浓度药物培养基≥对照培养基.结果 101株结核分枝杆菌总耐药率为50.50%,初治耐药率为45.46%,其中耐多药(含 H和R)耐药率22.22%;复治耐药率为72.72%,其中耐多药(含H和R)耐药率45.45%.结论 马尔康地区属高耐药区,应加强结核菌的耐药监测,强化用药及严格管理,预防控制耐药菌株的传播.     

329株结核分枝杆菌药敏试验结果分析

目的分析我院2002年至2004年结核病病人的临床药敏试验及耐药结果,以提供临床诊断和治疗参考.方法采用改良罗氏酸性培养基按绝对浓度法对结核菌株经PNB、TCH鉴别分型后的结核分枝杆菌作为药物敏感试验对象.结果329例分枝杆菌总耐药率43%,初治耐药率22%,其中耐多药(所耐药物中含H和R)菌株5例,复治耐药率51.8%,复治耐多药率39.8%,复治耐药率和耐多药率明显高于初治耐药率及耐多药率二者经统计学处理有非常显著性差异(P＜0.01).结论我市属高耐药区应加强结核菌的耐药监测,强化用药及严格管理预防控制耐药菌株的传播.     

耐多药结核分支杆菌突变基因检测

目的：研究耐多药结核分支杆菌耐药分子机制,建立快速检测耐药基因型的分子药敏试验方法,方法：通过16S rRNA聚合酶链反应单链的构象多态性（polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism,PCR-SSCP)方法对30株耐多药分离株和20株药物敏感株进行初步分子菌种鉴定。通过PCR－SSCP分析30株耐多药结核病临床分离株的rpoB,katG,rpsL基因。结果：经16S rRNA PCR-SSCP菌种鉴定,所分析菌株均为结核分支杆菌;30株耐多药分离株经SSCP分析,56．7％存在rpoB基因突变,43．3％有katG基因突变,91．3％有rpsL基因突变,结论：rpoB,rpsL,katG基因突变分别是结核分支杆菌耐利福平,链霉素,异烟肼的分子机制,耐多药结核病是药物靶基因突变所致。通过PCR－SSCP可简便,快速地检测大部分耐多药结核病的耐药基因。     

卷曲霉素对结核分枝杆菌体外抑菌作用的研究

目的 :探讨卷曲霉素 (Capreomycin ,CPM)对结核分枝杆菌 (MycobacteriumTuberculosis,MTB)体外抑菌作用。方法 :采用改良罗氏培养基绝对浓度间接法对 10 4 6株MTB和 349株MDR TB(多耐药 ,即至少耐INH和RFP的结核分支杆菌 )进行链霉素 (SM)、卡那霉素 (KM)、阿米卡星 (AMK)、卷曲霉素 (CPM)、异烟肼 (INH)、利福平 (RFP)体外抑菌试验的对照研究 ,比较CPM与SM、KM、AMK之间耐药率的差异。结果 :在 10 4 6株MTB中 ,CPM的耐药率为 3 3% ,明显低于SM的 30 3%、KM的 10 5 %、AMK的 8 2 % ,χ2 值分别为 2 80 0 1、5 5 5 0、36 76 ,P <0 0 1;对其中 349株多耐药结核杆菌 (MDR TB)的耐药率 ,CPM为 9 7% ,也明显低于SM的 72 5 %、KM的 31 5 %和AMK的 2 4 1% ,χ2 值分别为2 17 0 0、80 0 5、37 88,P <0 0 1。结论 :CPM是一种对MTB(特别是对MDR TB)有较强抑菌活性的二线抗结核药。     

Prevalence and Risk Factors of Primary Drug-Resistant Tuberculosis in China

ObjectiveTo investigatetheprevalence of primary drug-resistant tuberculosis (TB) and associated risk factors in China.We also explored factors contributing tothe transmission of multidrug-resistant tuberculosis (MDR-TB). MethodsA total of 2794 representative,Mycobacterium tuberculosis isolates from treatment-naive patients were subjected to drug susceptibility testing, and risk factors for drug-resistant TBwere analyzed. We also analyzed MDR-TB strain sublineages, drug-resistance-conferring mutations, and risk factors associated with clustered primary MDR strains. ResultsAmong 2794Mycobacterium tuberculosis isolates from treatment-naive patients, the prevalence of any resistance to first-line drugs was 33.2%andthe prevalence of MDR-TB was 5.7%. We did not find any risk factors significantly associated with resistance to first-line drugs.The93 primary MDR-TB isolates were classified into six sublineages, of which, 75 (80.6%) isolates were the RD105-deleted Beijing lineage.The largest sublineage included 65 (69.9%) isolates with concurrent deletions of RD105, RD207, and RD181.Twenty-nine (31.2%) primary MDR strains grouped in clusters;MDR isolates in clusters were more likely to have S531LrpoBmutation. ConclusionThis study indicates that primary drug-resistantTBand MDR-TBstrains are prevalent in China,and multiplemeasures should be taken toaddress drug-resistant TB.     

深圳市结核病耐药情况及影响因素分析

目的了解深圳市结核分枝杆菌耐药情况及耐药产生的影响因素,为制定科学的耐药结核病预防控制策略提供依据。方法以深圳市2008年间新登记的结核分枝杆菌感染的涂阳肺结核病人为研究对象,用比例法进行药物敏感试验获得结核分枝杆菌耐药信息,并通过问卷调查获得患者其他相关信息;单因素分析采用卡方检验、方差分析、Kruskal—Wallis秩和检验,多因素分析采用多分类Logistic回归分析。结果759例结核分枝杆菌感染的涂阳肺结核患者中,总耐药率为17．52％（133／759）,耐多药率为5．14％,单耐药率为9．88％,多耐药率为2．50％。多分类Logistic回归分析显示影响结核分支杆菌耐药性的因素有3个：登记分类、流动人口以及饮酒史。结论深圳市耐药结核病疫情相对严重,加强对复治患者、外来人口和经常喝酒的涂阳肺结核患者的耐药性筛查及治疗管理。     

微阵列芯片技术在耐多药结核病临床诊断中的应用研究

目的 探讨微阵列芯片技术在耐多药结核病（multidrug resistant tuberculosis,MDR-TB）临床诊断中的应用。方法 收集2020年6月至2021年5月经滨州市中心医院确诊的245例住院肺结核患者的标本（痰液标本125例和痰培养分离菌株120例）。痰液标本同时采用DNA微阵列芯片技术和传统培养法检测其结核杆菌阳性率。痰液标本和分离菌株均采用DNA微阵列芯片技术进行肺结核耐多药检测和分枝杆菌菌种鉴定。结果 125例痰液标本经DNA微阵列芯片技术和痰培养法检测,阳性率分别为58.4%（73/125）和24.8%（31/125）,两种方法比较差异有统计学意义（2=14.520,P<0.001）。采用DNA微阵列芯片技术检测125例痰液标本和120例分离菌株,共检出结核分枝杆菌复合群192例,非结核分枝杆菌7例。结核分枝杆菌复合群192例检出耐药者41例,其中耐异烟肼15例,耐利福平19例,同时耐两种药物7例。非结核分枝杆菌包括胞内分枝杆菌4例,堪萨斯分枝杆菌2例,鸟分枝杆菌1例。结论 DNA微阵列芯片技术检测周期短,能同时进行结核分枝杆菌耐多药检测和菌种鉴定,对MDR-TB的早期诊断和治疗有较大的临床应用价值。     

骨关节结核不同类型标本进行Xpert MTB/RIF技术检测的研究

目的 比较利福平耐药荧光定量核酸扩增检测(Xpert MTB/RIF)技术在骨关节结核病灶不同类型标本检测中的差异。 方法 选取骨关节结核患者245例,通过手术获取病灶中的脓液（199份）、干酪组织（161份）、肉芽组织（178份）、骨组织（87份）,分别进行结核分枝杆菌培养、Xpert MTB/RIF检测,比较4种组织标本阳性率。计算2种检测方法的联合阳性率;以结核分枝杆菌培养和药物敏感试验作为金标准,计算Xpert MTB/RIF技术在骨关节结核标本及利福平耐药基因检测中的敏感度和特异度。 结果 245例患者中结核分枝杆菌培养阳性112例(45.71%),625份标本中结核分枝杆菌培养阳性213份,结核分枝杆菌培养阳性率比较脓液＞干酪组织＞肉芽坏死组织＞骨组织(P＜0.01)。245例患者中Xpert MTB/RIF检测阳性128例(52.24%),625份标本中Xpert MTB/RIF检测阳性255份,Xpert MTB/RIF检测阳性率比较脓液＞干酪组织＞肉芽组织＞骨组织(P＜0.01)。2种方法联合检测阳性率为185例（75.51%）。Xpert MTB/RIF检测技术检验脓液、肉芽组织、干酪组织、骨组织阳性率均高于结核分枝杆菌培养(P＜0.05或P＜0.01)。Xpert MTB/RIF技术检测诊断骨关节结核的敏感度为96.43%,特异度为84.96%,诊断利福平耐药的敏感度为97.92%,特异度为93.75%。 结论 为了准确诊断骨关节结核及利福平耐药性应尽量收集多种标本,特别是病灶中的脓液,Xpert MTB/RIF技术可简便、快速、准确地诊断结核分枝杆菌感染及其耐药性。     

Hain和Xpert MTB/RIF技术对结核分枝杆菌药物敏感性的检测

目的应用线性探针耐多药检测技术(Hain)和利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Xpert MTB/RIF)分析辽宁地区耐多药结核分枝杆菌(multiple-drug resistant Mycobacterium tuberculosis,MDR-TB)的检出情况,为本地区结核病的控制及临床诊断治疗提供科学依据。方法收集193株结核分枝杆菌菌株应用Hain、Xpert MTB/RIF和比例法鉴定利福平(rifampin,RFP)和异烟肼(isoniazid,INH)的耐药性;以比例法为金标准,分析另外两种方法检测耐药结核分枝杆菌的敏感性和特异性。结果 Hain检测利福平耐药的灵敏度为81.8%(72/88),特异度为87.6%(92/105);Hain检测异烟肼耐药的灵敏度为81.2%(82/101),特异度为70.7%(65/92);Hain检测MDR-TB的灵敏度为76.7%(46/60),特异度为81.2%(108/133);Xpert MTB/RIF检测利福平耐药的灵敏度为90.9%(80/88),特异度为81.9%(86/105)。Hain、Xpert MTB/RIF两种检测方法与比例法相比差异均无统计学意义(P0.05)。结论 Hain和Xpert MTB/RIF是快速有效地检测结核分枝杆菌耐药的方法,适用于辽宁地区结核病患者耐药性检测。     

Xpert MTB/RIF检测利福平耐药结核分枝杆菌的表型药敏结果分析

目的：分析Xpert MTB/RIF（Xpert）检测利福平耐药肺结核患者的表型药敏结果,为耐药结核病的治疗方案制定提供依据。方法：选取2015年1月至2020年12月期间在温州市中心医院感染科就诊,且痰液或肺泡灌洗液Xpert检测显示利福平耐药的结核患者,回顾分析患者结核分枝杆菌表型药敏结果。结果：570例Xpert检测利福平耐药患者获得一线抗结核药物药敏试验结果,总耐药顺位为利福平（90.18%）＞异烟肼（88.60%）＞链霉素（56.32%）＞乙胺丁醇（29.47%）;复治患者异烟肼、利福平、乙胺丁醇的耐药率（分别为94.50%、94.50%、35.78%）均高于初治患者（分别为84.94%、87.50%、25.57%）,差异有统计学意义（均P ＜0.05）;24 株菌株对一线抗结核药物均敏感,耐1种、2种、3种及4种药物分别有46株、156株、226株、118株;耐多药结核菌株476株,初治278株,复治198株,复治患者耐多药结核病比例更高（90.83% vs.78.98%,χ2=13.723,P ＜0.001）。302例Xpert检测利福平耐药患者获得二线抗结核药物药敏试验结果,总耐药顺位为氧氟沙星（35.76%）=阿米卡星（35.76%）＞卡那霉素（13.25%）=卷曲霉素（13.25%）;初治患者氧氟沙星耐药率低于复治患者（26.46% vs. 51.33%,χ2=19.044,P ＜0.05）;128株菌株对二线抗结核药物全敏感,耐1种、2种、3种及4种药物分别有111株、23株、21株、19株;泛耐药结核菌株50株,初治、复治各25株,复治患者泛耐药结核病比例更高（22.12% vs. 13.23%,χ2=4.051,P =0.044）。结论：异烟肼、氧氟沙星及阿米卡星耐药在Xpert利福平耐药肺结核患者中常见;复治患者耐药情况比初治患者更为严峻,应尽早获得一二线抗结核药物药敏结果,以指导临床用药。     

Genetic Diversity and Drug Susceptibility of Mycobacterium tuberculosis Isolates in a Remote Mountain Area of China

Objective

We determined the genetic diversity of Mycobacterium tuberculosis (MTB) in a remote mountainous area of southwest China and evaluated the resolving ability of single nucleotide polymorphism (SNP) genotyping combined with variable number tandem repeat (VNTR) genotyping for Beijing family strains in association with drug resistance status.

广西百色地区结核分枝杆菌利福平耐药基因rpoB的突变特征分析

目的分析百色地区结核分枝杆菌(MTB)利福平耐药相关基因rpoB的突变特征。方法收集128例结核病患者痰液标本,采用改良罗氏培养基分离培养结核分枝杆菌,绝对浓度法检测利福平耐药性,PCR技术检测耐药结核分枝杆菌rpoB基因序列并测序分析利福平耐药相关基因rpoB的突变特征。结果分离培养获得98例MTB,98例MTB出现36株利福平耐药,耐药率为36.73%,36株耐利福平菌株中有27株rpoB基因发生突变,基因突变率为75.00%,其中516位点突变率为3.70%(1/27),531位点突变率为59.26%(16/27),526位点突变率为29.63%(8/27),533位点突变率为7.41%(2/27)。突变热点依次为rpoB531、rpoB526和rpoB533。结论百色地区耐利福平结核分枝杆菌耐药性产生的主要分子机制是因为rpoB的基因发生突变。     

结核分枝杆菌异烟肼依赖株与耐受株的耐药性调查

目的调查结核分枝杆菌异烟肼的依赖株和耐受株对临床常用抗结核药物的抗药性差异,探讨其原因与意义。方法采用双向匡氏琼脂培养基分离痰结核菌并作耐药性和依赖性测定。结果依赖组菌株对8种药物的耐药率均高于耐受组菌株;依赖组中耐多药（Multidrug-Resistant,MDR）株和广泛耐药（Extensively Drug-Resistant,XDR）株的比例分别为94.4%和13.9%,均高于耐受组。结论结核分枝杆菌异烟肼依赖株94.4%为MDR株,对一线和二线抗结核药物耐药率高,容易发展为XDR株,应予高度警惕和关注。