白色念珠菌感染诱导人气道上皮细胞的损伤机制

目的探讨不同产膜能力白色念珠菌入侵后诱导人气道上皮细胞的免疫损伤机制。方法选择2019年6至12月宁夏医科大学总医院分离培养的25株白色念珠菌, 质控菌株SC5314为标准菌株。建立白色念珠菌生物膜体外模型, 利用结晶紫染色和酶标板法检测不同白色念珠菌的生物膜形成能力;采用酶标板法测定570 nm处的吸光度值(A570):A570≥0.5为强产膜菌(SBF), 0.25上皮细胞的气液相培养模型, 分为5组:空白对照组(n=20)、标准菌株组(n=20)、强产膜组(n=19)、不产膜组(n=17)、耐氟康唑组(n=18)。扫描电镜观察气液相培养上皮细胞的形态。采用免疫荧光检测气液相培养上皮细胞体外模型标志蛋白的表达。通过微孔板法检测细胞中乳酸脱氢酶(LDH)含量, 利用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞培养液中细胞内β-防御素(hBD2)、粒巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)等的分泌情况。结果强产膜菌株以菌丝相互交错生长, 能看到...     

菊花总黄酮含药血清对干眼细胞模型AR、NF-κB磷酸化蛋白及TGF-β1表达的影响＊

目的 观察菊花总黄酮在体外条件下对泪腺上皮细胞中雄激素受体（Androgen Receptor，AR）的调控作用及对下游的核因子κB（Nuclear Factor kappa B，NF-κB）、转化生长因子-β1（transforming growth factor-beta1，TGF-β1）的表达影响。方法 以过氧化氢（H₂O₂）诱导泪腺上皮细胞凋亡，建立细胞模型，设立无雄激素培养空白对照组、含雄激素培养对照组、无雄激素培养黄酮治疗组。以MTT法摸索含药血清最佳干预加入量；免疫印迹实验（Western Blot）以及实时荧光定量PCR法（Quantitative Real-Time PCR，qPCR）检测泪腺上皮细胞中AR、NF-κB及TGF-β1的表达情况；并应用雄激素受体阻断剂氟他胺进行AR阻断后再次检测上述指标 。结果 MTT法检测后计算得出含药血清干预细胞的最终浓度为13.2%；无雄激素培养黄酮治疗组及含雄激素培养对照组中AR、NF-κB及TGF-β1的表达增强，与空白对照组对比有显著差异（P<0.01）；无雄激素培养黄酮治疗组中NF-κB表达量比含雄激素培养对照组表达量低，两者间的差异有统计学意义。氟他胺及含药血清干预后，无雄激素培养黄酮治疗组及含雄激素培养对照组中AR及NF-κB的表达未见提高，无统计学意义。结论 菊花总黄酮对泪腺上皮细胞可能存在拟雄激素效应，从而使AR、NF-κB表达增加，并通过上调TGF-β1的表达，可能起到在泪腺局部的抗炎作用。     

术前SCC与CYFRA21-1在肺鳞癌患者表达上调及临床意义

目的 分析术前SCC、CYFRA21-1与肺鳞癌临床病理特征、预后之间的关系。方法 收集2017年3月~2018年4月在云南省肿瘤医院确诊的肺鳞癌患者100例为观察组，确诊为肺良性肿瘤患者90名为肺良性肿瘤组、以及正常人群90名为健康人群组。通过电化学发光法对SCC、CYFRA21-1两种指标进行检测。检测SCC、CYFRA21-1含量，分析在肺鳞癌中表达的临床意义。结果 SCC、CYFRA21-1在肺鳞癌中比在肺良性肿瘤、健康人群中含量要高，差异有统计学意义（P＜0.001），并且敏感性均高于其他两组；男性患者的SCC、CYFRA21-1含量高于女性患者，差异具有统计学意义（P＜0.05）；SCC、CYFRA21-1含量在年龄≥60岁的含量高于＜60岁患者，差异无统计学意义（P＞0.05）；有吸烟史患者的SCC含量高于无吸烟史患者，差异无统计学意义（P＞0.05）。CYFRA21-1在吸烟史患者中高表达，差异有统计学意义（P＜0.05）；SCC、CYFRA21-1在有淋巴结转移、远处转移、肿瘤直径≥5 cm、病理分期为晚期时高表达，差异具有统计学意义（P＜0.05）；SCC、CYFRA21-1阳性患者OS、PFS比阴性患者短；SCC、CYFRA21-1两者之间呈正相关,相关系数（r）为0.630。结论 SCC、CYFRA21-1在肺鳞癌中表达上调；SCC、CYFRA21-1与性别之间存在某种内在联系；SCC、CYFRA21-1与肺鳞癌的TNM分期呈正相关；SCC、CYFRA21-1阳性患者OS、PFS比阴性患者短；SCC、CYFRA21-1两者之间呈正相关,相关系数（r）为0.630。     

维生素A对糖基化终末产物诱导的角膜上皮细胞损伤的作用及机制研究

目的糖基化终末产物(AGEs)在糖尿病患者在角膜外伤或接受角膜手术时极易出现角膜上皮愈合延迟甚至不愈的过程中起着关键作用,本文研究维生素A(VA)对以糖基化终末产物AGE-BSA诱导角膜上皮细胞损伤的影响及可能的作用机制。方法以HCE-2细胞为研究对象,AGE-BSA为诱导剂,试剂盒检测VA对细胞凋亡率及线粒体膜电位的影响,荧光显微镜检测细胞内凋亡小体,Western blot检测相关的蛋白表达量。结果VA抑制AGE-BSA诱导的HCE细胞凋亡,调节AGEBSA引起的凋亡相关蛋白的变化。同时,VA与JNK的抑制剂同等程度的减少AGE-BSA诱导的JNK和NF-κB的磷酸化。结论VA可能通过抑制JNK介导的NF-κB炎症通路而起到减少AGE-BSA诱导的角膜上皮细胞凋亡的作用,可以作为糖尿病患者角膜上皮损伤的保护剂。     

菊花总黄酮含药血浆对干眼症细胞模型Bax mRNA及Bcl-2mRNA表达的影响

目的观察菊花总黄酮含药血浆对大鼠泪腺上皮细胞干眼症模型中Bax mRNA及Bcl-2 mRNA表达的影响。方法将培养生长状态良好的大鼠泪腺上皮细胞随机分为无雄激素培养组(空白组)、雄激素培养组(雄激素组)、无雄激素培养黄酮组(菊花总黄酮组),分别加入空白血浆、丙酸睾酮、菊花总黄酮含药血浆干预48 h,然后加入100μmol/L H_2O_2继续培养60 min诱导细胞凋亡。RT-PCR法检测泪腺上皮细胞中Bax mRNA及Bcl-2 mRNA的表达情况。结果雄激素组和菊花总黄酮组Bax mRNA表达量均明显低于空白组(P均0.05),Bcl-2 mRNA表达量均明显高于空白组(P均0.05),雄激素组和菊花总黄酮组比较差异均无统计学意义(P均0.05)。结论菊花总黄酮含药血浆有可能通过抑制泪腺上皮细胞中Bax mRNA表达及促进Bcl-2 mRNA表达的途径,起到抑制泪腺上皮细胞凋亡的作用。     

上皮间充质转化在后囊膜下混浊中的研究进展

白内障是我国首位致盲性眼病，也是世界上多数国家致盲的主要原因，目前手术是唯一有效的治疗方法。而后囊膜下混浊即后发性白内障(PCO)是白内障术后常见的并发症，也是导致术后视力下降的主要原因。研究表明，术后残留的晶状体上皮细胞(LECs)发生上皮间充质转化(EMT)在PCO的发生发展中起到了重要的作用。本文主要概述了近些年来EMT在PCO中的研究进展。     

转化生长因子-β_1对子宫内膜上皮细胞增殖和转分化的影响

目的探究转化生长因子-β_1(TGF-β_1)对子宫内膜组织上皮细胞数目和转分化的影响。方法收集2017年6月1日—12月1日河北工程大学附属医院手术获取的正常子宫内膜组织并分离其上皮细胞。将细胞分为正常对照组(只加培养液)和实验组(培养液和不同浓度的TGF-β_1),采用噻唑蓝染色检测活细胞的数量;用酶联免疫法检测各组细胞悬液中Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)和纤黏连蛋白(FN)的分泌情况;免疫印迹法比较各组细胞胞质中的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和钙黏附蛋白-E(E-cadherin)的含量。结果经TGF-β_1作用后,子宫内膜上皮细胞增殖明显,且浓度越大,时间越长,增殖率越高;5 ng/ml TGF-β_1组细胞悬液中Col-Ⅰ和FN的分泌量显著高于正常对照组,差异有统计学意义(t=10.784、16.974,P<0.01);与正常对照组比较,实验组胞质中表达的E-cadherin含量降低,而α-SMA含量增高,且随TGF-β_1浓度增高,E-cadherin、α-SMA含量呈梯度降低/升高,差异有统计学意义(F=171.149、204.618、P<0.01)。结论 TGF-β_1能刺激子宫内膜组织上皮细胞数目增加,诱导其向肌成纤维细胞转变。     

汉防己丙素干预亚硝基胺致大鼠膀胱癌的作用及机制研究

目的探讨汉防己丙素(Cyc)干预亚硝基胺(BBN)致大鼠膀胱癌的作用及机制。方法雄性SD大鼠随机分为对照组,模型组,Cyc低、高剂量(20、40 mg/kg)组,顺铂(5 mg/kg)组。大鼠ig 0.5 m L BBN(0.4 kg/L),2次/周,连续8周,建立膀胱癌模型。除对照组和模型组ip生理盐水外,其余各组ip设定剂量的药物,1次/d,连续8周。实验结束后,收集大鼠膀胱组织;通过HE染色观察大鼠膀胱组织病理变化;通过免疫组化法检测膀胱组织MMP9、Ki67的表达;通过免疫印迹法检测膀胱组织KLF4、p21、CyclinD1、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Wnt、β-catenin蛋白的表达。结果与模型组相比,Cyc可有效抑制膀胱炎细胞浸润、促进癌细胞出现不同程度退变、减少质比例;显著下调膀胱组织MMP9、Ki67的表达(P0.05、0.01);显著上调膀胱癌组织中KLF4、p21、E-cadherin的表达(P0.05、0.01);显著下调CyclinD1、Wnt、β-catenin、N-cadherin、Vimentin的表达(P0.05、0.01)。结论 Cyc通过促进KLF4表达、阻断Wnt/β-catenin信号传导、抑制膀胱癌细胞上皮细胞-间充质转化进程,进而抑制膀胱癌细胞迁移与侵袭能力;同时通过上调KLF4水平,调控下游因子p21、CyclinD1表达,影响膀胱癌细胞的增殖能力,从而延缓BBN诱导的大鼠膀胱癌的病理进程。