菊花总黄酮含药血清对干眼细胞模型AR、NF-κB磷酸化蛋白及TGF-β1表达的影响＊

目的 观察菊花总黄酮在体外条件下对泪腺上皮细胞中雄激素受体（Androgen Receptor，AR）的调控作用及对下游的核因子κB（Nuclear Factor kappa B，NF-κB）、转化生长因子-β1（transforming growth factor-beta1，TGF-β1）的表达影响。方法 以过氧化氢（H₂O₂）诱导泪腺上皮细胞凋亡，建立细胞模型，设立无雄激素培养空白对照组、含雄激素培养对照组、无雄激素培养黄酮治疗组。以MTT法摸索含药血清最佳干预加入量；免疫印迹实验（Western Blot）以及实时荧光定量PCR法（Quantitative Real-Time PCR，qPCR）检测泪腺上皮细胞中AR、NF-κB及TGF-β1的表达情况；并应用雄激素受体阻断剂氟他胺进行AR阻断后再次检测上述指标 。结果 MTT法检测后计算得出含药血清干预细胞的最终浓度为13.2%；无雄激素培养黄酮治疗组及含雄激素培养对照组中AR、NF-κB及TGF-β1的表达增强，与空白对照组对比有显著差异（P<0.01）；无雄激素培养黄酮治疗组中NF-κB表达量比含雄激素培养对照组表达量低，两者间的差异有统计学意义。氟他胺及含药血清干预后，无雄激素培养黄酮治疗组及含雄激素培养对照组中AR及NF-κB的表达未见提高，无统计学意义。结论 菊花总黄酮对泪腺上皮细胞可能存在拟雄激素效应，从而使AR、NF-κB表达增加，并通过上调TGF-β1的表达，可能起到在泪腺局部的抗炎作用。     

布鲁氏菌的IV型分泌系统

布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的一种人兽共患病,给养殖业、人类健康和动物性食品安全带来很大威胁。布鲁氏菌不产生外毒素、没有荚膜、鞭毛、质粒,不形成芽孢,缺乏这些经典的致病因子,但是该菌却具有较强的侵袭力,并且在宿主细胞内的生存繁殖能力极强,因此布鲁氏菌的相关毒力因子的研究一直是布鲁氏菌病中的重要问题之一。布鲁氏菌的IV型分泌系统在布鲁氏菌的致病力上发挥重要作用,与布鲁氏菌在宿主细胞内生存、复制有密切关系。IV型分泌系统由virB操纵子编码,由同一启动子调控,是一个多蛋白的跨膜复合物,受感染宿主细胞类型、生长温度、营养条件、PH值等多因素调控。     

布鲁杆菌OMP25蛋白前体的表达与反应原性鉴定

布鲁杆菌病(布病)是由布鲁杆菌(Brucella)引起的人兽共患病,目前在我国被称为再度肆虐的疾病。布鲁杆菌感染动物主要表现为睾丸炎、不孕不育;人类主要表现为关节痛、波浪热、肝脾肿大、多汗、神经痛等症状,给养殖业生产、人类健康和动物性食品安全带来很大威胁。做好布病的快速、准确诊断及预防显得尤为重要。目前常用血清学方法诊断布病,但存在     

青光安颗粒剂对DBA/2J小鼠视神经中自噬途径相关蛋白表达的影响

目的 研究青光安颗粒剂(以下简称为青光安)对自发性青光眼模型DBA/2J小鼠视神经中自噬途径相关蛋白表达的影响.方法 将10只C57BL/6J小鼠作为空白组;采用随机数字法将30只DBA/2J小鼠分为模型组、低剂量组、高剂量组,每组10只.喂养小鼠至38周龄,期间观测小鼠眼压,待DBA/2J小鼠自动成模后开始灌胃.模型...     

噬菌体展示布鲁氏菌蛋白文库构建及差减筛选融合蛋白

目的 建立噬菌体展示羊型布鲁氏菌16M株表面蛋白文库,差减筛选具有良好特异性、亲和力及反应原性的蛋白,为确定新型诊断用抗原奠定基础。方法 利用噬菌粒载体pYW01构建重组羊型布鲁氏菌16M株基因文库,辅助噬菌体VCSM13感染基因文库进而构建噬菌体展示羊型布鲁氏菌16M蛋白文库。利用PEG纯化后,扩增蛋白文库。随机挑取单克隆,提取质粒,测序鉴定蛋白文库。通过差减筛选,选择具有良好特异性、亲和力及反应原性的表面蛋白,为确定诊断用抗原奠定基础。结果 通过DNA重组技术,构建羊型布鲁氏菌16M基因文库,库容量达到10⁸ pfu/ mL,并且随机性良好。利用辅助噬菌体VCSM13包装基因文库,随机挑取蛋白文库中单克隆,提取质粒,经测序鉴定,成功构建噬菌体展示羊型布鲁氏菌16M株表面蛋白文库。利用免疫血清及感染血清对噬菌体展示蛋白文库进行差减淘选,筛选出6个噬菌体融合蛋白。经Western-blot分析6个噬菌体融合蛋白均具有较好的反应原性及特异性。结论 成功构建噬菌体展示布鲁氏菌蛋白文库,差减筛选出6个具有较好反应原性及特异性的融合蛋白,为后续新型血清学诊断制剂筛选奠定基础。     

FS-LASIK与ICL植入术后临床疗效的Meta分析

目的:比较FS-LASIK与ICL植入术治疗近视的临床疗效。方法:计算机检索2015-01/2020-01中国知网数据库、万方数据库、重庆维普中文科技期刊全文数据库、中国生物医学文献数据库(CBM)、Cochrane Library、PubMed、MEDLINE等数据库关于采用FS-LASIK与ICL植入术治疗近视的临床对照研究相关文献,使用Rev-man5.3统计软件进行Meta分析和统计处理。结果:共纳入11项研究,患者673例1301眼。Meta分析结果显示,FS-LASIK与ICL植入术后的安全性指数(术后最佳矫正视力/术前最佳矫正视力)、客观视觉质量、等效球镜度、柱镜度、球镜度、三叶草像差、彗差均无差异,但与ICL植入术相比,FS-LASIK术后有效性指数(术后裸眼视力/术前最佳矫正视力)较高,引入的总高阶像差和球差大,对比敏感度下降。结论:FS-LASIK较ICL植入术后总高阶像差、球差引入较大,对比敏感度下降,ICL植入术较FS-LASIK的临床疗效更具优势。     

菊花总黄酮对去势所致干眼雄兔泪腺组织中AR、AR mRNA、Bax mRNA及形态学的影响

目的考察菊花总黄酮治疗去势雄兔干眼的具体机制。方法采取随机数字法将150只雄兔分为15组,编号分别为A1、A3、A5、B1、B3、B5、C1、C3、C5、D1、D3、D5、E1、E3、E5,每组10只,A-E组中序号对应干预时间,其中A组不做任何干预处理,B组行假去势术,C、D、E组行双侧去势术建立雄激素水平缺乏型干眼模型。A、B、C组均用生理盐水灌胃,D组行雄激素(丙酸睾酮)肌肉注射,E组用菊花总黄酮灌胃。分别于治疗后的1、3、5月,将动物处死。观察:(1)雄激素样效应以免疫组织化学法测定泪腺组织中雄激素受体(androgen receptor,AR)光密度,辅以RT-PCR技术测定AR mRNA表达,以观察泪腺组织中AR上调情况;(2)细胞凋亡以RT-PCR技术测定泪腺中细胞凋亡相关基因蛋白Bax mRNA的表达;(3)形态学改变使用透射电镜观察泪腺超微结构变化。结果 (1)雄激素样效应:E组与C组相比,其泪腺组织中AR明显上调(P0.01),AR mRNA表达率明显增长(P0.01);(2)细胞凋亡:E组Bax mRNA表达率与C组比较下降明显(P0.01);(3)形态学改变:E组在干预后,线粒体肿胀减轻,丢失或成空泡变,而C组线粒体肿胀,局灶凋亡坏死,凋亡明显。结论菊花总黄酮具有较好的雄激素样效应,能够抑制Bax mRNA凋亡,恢复泪腺组织形态。它将有望应用于由雄激素水平下降所致干眼的临床治疗中。