樟树化学型形成关键萜类合酶的系统鉴定

樟树Cinnamomum camphora为我国重要的经济树种。根据叶片挥发油中主要成分的种类和含量,樟树通常被分为龙脑型、樟脑型、芳樟醇型、桉叶油型和橙花叔醇型5种化学型,萜类合酶(terpene synthase, TPS)是形成这些化合物的关键酶。虽然多个关键酶基因已得到鉴定,但最具经济价值的(+)-龙脑的生物合成途径未见报道。该研究通过对4种化学型叶片的转录组分析,克隆了9个萜类合酶基因CcTPS1～CcTPS9。经过大肠杆菌诱导表达重组蛋白后分别以香叶基焦磷酸(GPP)和法尼基焦磷酸(FPP)为底物进行酶促反应,结果CcTPS1和CcTPS9均可催化GPP生成冰片基焦磷酸,并在磷酸水解酶的作用下得到(+)-龙脑,产物占比分别为0.4%、89.3%。CcTPS3和CcTPS6均可催化GPP生成单一产物芳樟醇,CcTPS6还可与FPP反应生成橙花叔醇。CcTPS8与GPP反应生成1,8-桉叶油(30.71%)。9个萜类合酶共计产生9个单萜和6个倍半萜类化合物。该研究首次确定樟树中负责(+)-龙脑生物合成的关键酶基因,为进一步阐明化学型形成的分子机制及利用生物工程技术培育高产龙脑新...     

龙脑消痔露的制备工艺及体外抑菌实验研究

目的：制备龙脑消痔露及观察其体外抑菌作用。方法：按标准工艺制取龙脑消痔露。采用平板打洞法及试管法观察其体外抑菌作用。结果：龙脑消痔露制剂成功。其对标准菌株和临床分离菌株金黄色葡萄球菌与大肠杆菌均有一定的抑菌作用。结论：龙脑消痔露制备工艺简便易行；有一定的体外抑菌作用；该作用为该药治疗痔疮肿痛提供了药理依据。     

GC测定痛瘀消散贴中冰片和樟脑的含量

目的:采用GC测定痛瘀消散贴中冰片和樟脑的含量.方法:石英毛细管色谱柱(30m×0.28mm,0.32μm,聚甲基硅油,HP-5),FID检测器,检测温度250℃,进样口温度200℃,分流比10.0:1.结果:冰片以龙脑计,龙脑在0.0897～0.5384μg范围内,龙脑与内标物的峰面积比值呈良好线性关系(r=0.9999,n=6),平均回收率为96.47%;樟脑在0.0950～0.5702μg范围内,樟脑与内标物的峰面积比值呈良好线性关系(r=0.9999,n=6),平均回收率为1 00.02%.结论:该方法简单、快速、准确,可用于该制剂的质量控制.     

气相色谱法测定马应龙麝香痔疮膏中龙脑的含量

目的:建立马应龙麝香痔疮膏中龙脑的含量测定方法.方法:气相色谱法,2 m×3 mm不锈钢柱,15%丁二酸二乙二醇聚酯(DEGS)Chromsorb W-AW(80～100目),柱温105℃,进样口温度250℃,FD检测器,载气为氮气.结果:平均回收率为99.92%(n=6),RSD为0.65%.结论:本法简便高效,结果准确可靠,可用于本品的质量控制.     

气相色谱法测定双料喉风含片中龙脑的含量研究

目的:建立双料喉风含片中龙脑的含量测定方法.方法:以水杨酸甲酯作内标物,采用毛细管气相色谱法:CBP-20(聚乙二醇20M)12m×0.53mm毛细管色谱柱,程序升温,FID检测器.结果:平均回收率为100.2%,RSD为0.8%(n=5);测得本品含龙脑2.7mg/片,RSD为3.54%(n=10).结论:测定龙脑的含量快速、准确、重现性好,可用于本品的质量控制.     

双鱼颗粒挥发性成分指纹图谱和定量分析

目的建立双鱼颗粒挥发性成分指纹图谱及定量测定方法。方法 Agilent DB-1毛细管柱(30 m×0.32 mm,0.25μm);进样量为1μL;分流比为25∶1;进样口温度为230℃;以氮气为载气,体积流量0.6 mL/min;FID检测器温度为250℃;程序升温。结果建立的指纹图谱分离度和重复性良好,确定12个共有峰,各批次样品相似度在0.95以上;采用GC/MS对色谱峰进行定性分析,其中7个成分经对照品比对,分别为桉油精(峰2)、樟脑(峰3)、薄荷酮(峰4)、龙脑(峰5)、薄荷脑(峰6)、(+)-胡薄荷酮(峰9)、甲基正壬酮(峰10),其中1、10、11、12号峰主要来自于鱼腥草,2、5号峰主要来自于艾叶和薄荷,3号峰主要来自于艾叶,4、6、8、9号峰主要来自于薄荷,7号峰主要来自于艾叶、薄荷和鱼腥草。并对其中桉油精、薄荷脑进行定量分析,平均回收率分别为103.9%和98.2%,RSD分别为2.1%和2.3%。10批次样品中桉油精为0.17～0.23mg/g,薄荷脑为0.45～0.67mg/g。结论建立的双鱼颗粒指纹图谱和2个指标成分定量分析方法,快速、简便、准确,能有效评价该制剂的质量。     

羌活祛风通络贴的稳定性考察与葛根素和龙脑的检测方法研究

目的 考察羌活祛风通络贴的稳定性。方法 通过测定葛根素和龙脑的含量，测定贴剂中的粘附性，对3批样品在加速试验（40℃、75±5％RH）6个月中的变化进行了跟踪监测,检测贴剂内在质量的变化。葛根素的测定采用HPLC的方法，龙脑的测定采用气相色谱法。结果 葛根素测定方法的线性方程为Y=2.1958×10-5X-0.3741，r=0.9999，在20～100ng范围内具有良好的线性关系，回收率98.31％，RSD 1.19％。龙脑测定方法的线性方程为Y=4.058X＋0.1726，r=0.9999粘附性，在130～720ng范围内具有良好的线性关系,回收率为98.13％。葛根素的含量下降5％，龙脑含量下降15％，粘附性良好。结论 贴剂样品在包装完整的情况下可放置2年。     

GC测定健儿清解液中6个挥发性成分的含量

目的 测定不同厂家生产的健儿清解液中挥发油成分糠醛、樟脑、苯甲醛、4-萜品醇、α-松油醇和龙脑的含量。方法 采用HP-INNOWAX毛细管柱为分离柱,以环己酮为内标,程序升温,进样口温度200 ℃,检测器：FID,温度220 ℃。结果 糠醛、樟脑、苯甲醛、4-萜品醇、α-松油醇和龙脑的线性范围分别为5.139～128.467 μg?ml_^-1(r=0.99990),1.900～47.500 μg?ml_^-1(r=0.99937),6.537～163.436 μg?ml_^-1(r=0.99996),1.057～26.423 μg?ml_^-1(r=0.99938),2.398～59.958 μg?ml_^-1(r=0.99923),1.014～25.346 μg?ml_^-1(r=0.99936);该方法的回收率分别为97.0%,99.3%,98.6%,94.6%,93.5%,101.2%。不同厂家生产的健儿清解液中上述成分含量存在较大差别。结论 该方法可为健儿清解液质量标准的提高提供科学数据。