二烯丙基二硫诱导人白血病HL-60细胞分化差异表达cDNA文库的构建

目的　应用抑制性消减杂交技术构建二烯丙基二硫(diallyldisulfide ,DADS)诱导人白血病细胞分化的消减杂交cDNA文库 ,以期克隆DADS诱导人白血病HL 6 0细胞分化的相关基因。方法　用DADS诱导人白血病HL 6 0细胞分化 ,提取polyA+ RNA ,反转录合成cDNA ,消化成短片段后分成两组 ,分别与两种不同的接头连接 ,再与未处理的白血病细胞cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR扩增 ,将PCR产物与pGEM T线性载体连接 ,转化大肠杆菌进行文库扩增 ,随机挑取克隆进行酶切鉴定。结果　成功地构建了具有高消减效率的DADS诱导白血病细胞分化的cDNA文库 ,随机挑取消 2 0 0个克隆制备质粒并酶切分析 ,其中 84 5 %的克隆均具有 1 0 0～ 6 0 0bp左右的插入片段 ,说明每一克隆中均含有特异性的目的片段 ,从而为大批量筛选、克隆DADS诱导人白血病细胞分化的相关未知新基因奠定了基础。结论　DADS能诱导人白血病HL 6 0细胞分化 ,并引起相关的基因发生改变 ,而抑制性消减杂交技术能有效地分离差异表达的基因。     

细菌性前列腺炎致病菌的分布与耐药监测

目的 了解细菌性前列腺炎致病菌的分布和对抗菌药物的耐药性，为临床合理用药提供依据。方法采用无菌方法采集前列腺炎患者的前列腺液进行细菌培养，将分离获得的菌株进行菌种和耐药性鉴定，同时作药物敏感试验。结果264例患者的前列腺液中共分离出195个菌株(每例患者的前列腺液中不统计重复菌株)，阳性检出率为739%。检出致病菌中革兰阳性菌(G＋)共166株，占851%；革兰阴性菌(G－)共26株，占135%；真菌3株，占14%。药物敏感实验结果提示G＋对万古霉素、呋喃妥因、利福平、复方磺胺甲唑、四环素等敏感，G 对亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他巴唑等敏感。结论该地区细菌性前列腺炎致病菌以G＋为主，致病菌对抗菌药物呈多重耐药。治疗细菌性前列腺炎应根据药敏试验结果选择合适的抗菌药物。     

二烯丙基二硫对小鼠肾包膜下移植人胃癌细胞的生长抑制作用

二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)是大蒜的主要有效成分,对多种肿瘤均有明显的抑制作用[1].本室体外研究表明:DADS可明显抑制人胃癌MGC803细胞生长[2],其机制与G2/M期阻滞和信号传导通路ERK/AP-1途径有关[3,4].本研究采用人肿瘤细胞肾包膜下移植模型,探讨DADS对体内生长的MGC803细胞的抑制作用.     

脂蛋白磷脂酶 A2与心脏病学的研究

脂蛋白磷脂酶A2（ Lp－PLA2）有望成为动脉粥样硬化新一代的治疗靶点。在动物实验中,Lp－PLA2与动脉粥样硬化的相关性被反复验证,部分动物实验亦证实Lp－PLA2抑制剂在抗动脉粥样硬化过程中体现价值,但是新近多项Ⅲ期临床试验数据却提示Lp－PLA2抑制剂darapladib的阴性结果,提示Lp－PLA2在动脉粥样硬化病理生理过程中的地位被撼动。 Lp－PLA2究竟是未来心脑血管疾病治疗的有效靶点还是附带衍生出来的生物标记物,对Lp－PLA2及其抑制剂的研究将何去何从,有待探索。     

贴合式能力培训对ICU专科护士知识水平及操作技能的影响

目的:探讨贴合式能力培训对ICU专科护士知识水平及操作技能的影响。方法:将68名ICU专科护士作为研究对象,进行贴合式能力培训。比较培训前后护士考核成绩情况、操作技能掌握情况、自信心情况及培训效果。结果:培训后,护士专科理论、专科操作、健康教育、综合技能评分均高于培训前(P<0.01),护士心肺复苏技术、经气管插管吸痰法、动脉采血、心电监测、呼吸机的应用、中心静脉压测量等操作技能掌握水平高于培训前(P<0.01),护士在技术操作、合作沟通、风险认知、临床决策方面的自信心均强于培训前(P<0.01),护士带教质量、学习积极性、团队协作能力评分高于培训前(P<0.01)。结论:贴合式能力培训可显著提高ICU专科护士知识水平及操作技能,同时有利于提高护士的自信心水平,值得推广应用。     

蛋白质芯片技术与电化学发光技术检测多肿瘤标志物结果的评价

目的:研究蛋白质芯片法与电化学发光法检测多肿瘤标志物结果的差异。方法:分别用蛋白质芯片法和电化学发光法对69例肿瘤患者和65例正常对照组进行12项指标的检测,即糖类抗原199(CA199)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原242(CA242)、铁蛋白(ferritin)、β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)、甲胎蛋白(AFP)、游离前列腺特异性抗原(F-PSA)、前列腺特异性抗原(PSA)、糖类抗原125(CA125)、人生长激素(HGH)和糖类抗原153(CA153)。结果:蛋白质芯片法和电化学发光法检测12项指标的符合率均大于85%,总符合率为90.4%。2种方法有相关性(P<0.05)。结论:蛋白质芯片能正确反映肿瘤标志物的水平,且较电化学发光法简单、方便,适合中小型医院开展。电化学发光法能更精确检测高含量肿瘤标志物。     

二烯丙基三硫诱导人胃癌细胞凋亡与活性氧之间的关系

目的:探讨二烯丙基三硫(diallytrisulfide,DATS)诱导人胃癌细胞系MGC-803凋亡与细胞内活性氧(re-activeoxygenspecies,ROS)之间的关系。方法:用12mg/L的DATS作用于体外培养的MGC-803细胞24h后,用流式细胞术检测凋亡率及细胞内活性氧水平。结果:12mg/LDATS作用于MGC-803细胞24h后,细胞凋亡率明显上升;细胞内活性氧水平与DATS呈浓度依赖性升高。用抗氧化剂NAC预处理细胞,能抑制细胞内活性氧水平的升高及DATS诱导的细胞凋亡。结论:DATS诱导胃癌细胞凋亡与细胞内活性氧产生增加有关。     

LRRC4通过SDF-1α/CXCR4生物学轴抑制脑胶质瘤细胞侵袭迁移能力

目的:探讨LRRC4(leucine-rich repeats containing 4)通过SDF-1 α/CXCR4(stromal cell-derived factor-1 α/CXC receptor 4)对脑胶质瘤细胞侵袭迁移能力的影响.方法:将LRRC4基因转入脑胶质母细胞瘤U251细胞,分别通过RT-PCR实验、黏附实验、侵袭实验、细胞运动试验、划痕标记荧光染料示踪实验,研究SDF-1α干预前后LRRC4对U251细胞迁移能力的影响.结果:将LRRC4基因转入脑胶质瘤细胞U251,通过RT-PCR实验发现CXCR4的表达下调.用CXCR4的特异配体SDF-1α干预后,肿瘤黏附内皮实验、侵袭实验、细胞迁移实验、划痕标记染料示踪实验表明脑胶质瘤细胞迁移能力增强,LRRC4可以抑制细胞的这种侵袭迁移能力.SDF-1 α能够改善细胞间的通讯能力,LRRC4可以进一步增强这种通讯能力.结论:SDF-1 α/CXCR4的相互作用可以增强脑胶质瘤细胞U251的运动迁移能力,LRRC4基因可以通过调控SDF-1α/CXCR4生物学轴有效地抑制肿瘤细胞的侵袭迁移能力.