构建p53双荧光报告载体及其功能验证

目的：构建p53双荧光报告载体,验证其能否模拟野生型p53的生物学活性并适用于高通量筛选。方法：用PCR在p53和萤火虫荧光素酶的开放阅读框两端引入酶切位点并移除p53的终止密码和萤火虫荧光素酶的起始密码,然后将二者插入到由内部核糖体进入位点引导的海肾荧光素酶的上游,从而构建出一个能表达P53萤火虫荧光素融合蛋白的p53FL/IRES/RL双荧光报告载体。转染该报告载体后,检测被表达的P53荧光素融合蛋白是否被MDM2降解、该融合蛋白的亚细胞定位和它对p53特异性启动子的诱导。结果：成功构建出p53双荧光报告载体。该载体在宿主细胞内表达的P53荧光素融合蛋白能被MDM2降解;主要分布于细胞核;具有野生型p53的转录活性。结论：新构建的p53双荧光报告载体p53FL/IRES/RL能有效模拟野生型p53的功能,适用于高通量筛选调节P53蛋白含量的药物、基因或化合物。     

医院培养青年医学人才的思考

21世纪的卫生事业建设进入飞速发展的阶段，对医院的管理和建设都提出了更高的要求。新时期的医学事业发展，需要一大批敢于开拓、勇于创新的医学人才，他们不但要具有高水准的专业知识，还要具备高尚的职业道德，良好的创新意识，全面的综合能力，以应对当今时代的飞速发展。医学人才的培养是一个长期的过程，需要个人的努力和组织的培养共同完成。在医学生成长的过程中，学校的教育为医学人才打下了良好的基础，进入工作岗位以后，医院应继续加强对青年医务工作者的培养和教育，积极开拓各种渠道，创造各种条件，为青年医务工作者的不断成长创造良好的氛围。     

依那普利对大鼠肢体缺血-再灌注心肌细胞的影响

目的探讨不同剂量依那普利对大鼠肢体缺血-再灌注后心肌细胞的作用。方法健康雄性SD大鼠60只,采用随机数字表法,将其随机分为5组(n=12):正常对照组,模型组,低、中、高剂量药物组。模型组和低、中、高剂量药物组以橡皮带环绕结扎大鼠双后肢根部3 h并经激光多普勒血流仪监测证实血流被阻断,正常对照组大鼠双后肢松绕橡皮带3 h。低、中、高剂量药物组经颈内静脉分别注入依那普利0.01,0.02,0.04 mg.kg-1,其他两组大鼠给予等量0.9%氯化钠溶液,30 min后,松开橡皮带。再灌注3 h后取心肌组织,TUNEL法测定心肌细胞凋亡,免疫组化法测定心肌组织Bcl-2、Bax蛋白表达,采用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果与正常对照组比较,其他组心肌细胞凋亡指数(AI)及心肌组织Bax蛋白表达和MDA含量升高,而Bcl-2蛋白表达及SOD活性降低(P<0.05)。与模型组比较,低、中、高剂量药物组AI及Bax蛋白表达和MDA含量降低,而Bcl-2蛋白表达及SOD活性升高(P<0.05)。结论依那普利可减轻大鼠肢体缺血-再灌注心肌损伤,但与剂量无关,其机制与抗氧化和抑制细胞凋亡有关。     

麦冬多糖对心肌缺血再灌注大鼠脂质过氧化反应的影响

[目的]研究麦冬多糖(MDG-1)对心肌缺血再灌注大鼠脂质过氧化反应的影响.[方法]40只SD大鼠随机分为五组:假手术组、心肌缺血再灌注1h组、心肌缺血再灌注24 h组、麦冬多糖治疗1h组、麦冬多糖治疗24 h组.建立大鼠心肌缺血再灌注模型,采用试剂盒法检测各组大鼠血清中谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量;采用荧光分光光度计检测各组大鼠心肌组织中活性氧(ROS)水平;采用real time PCR和Western blot方法检测大鼠心肌组织中iNOS和eNOS的表达水平.[结果]与假手术组比较,心肌缺血再灌注模型组大鼠血清中GSH和SOD含量下降,MDA含量有所增加,心肌组织中ROS水平、iNOS和eNOS表达也存在增加趋势,经麦冬多糖治疗后,GSH和SOD含量有所回升,而MDA、ROS水平呈现降低趋势,iNOS和eNOS水平也有所下降.[结论]麦冬多糖可缓解心肌缺血再灌注损伤,其作用机制可能与降低NOS水平、抑制脂质过氧化作用有关.     

HAG预激方案治疗中高危骨髓增生异常综合征的临床研究

目的:观察高三尖杉酯碱、小剂量阿糖胞苷以及粒细胞集落刺激因子组成的HAG预激方案在中高危骨髓增生异常综合征患者中的疗效。方法:回顾性分析我院从2008年1月至2012年2月收治的16例HAG方案化疗及12例CAG方案化疗的初诊MDS患者的临床资料。结果:HAG方案诱导缓解的有效率为87.50%(14/16),其中完全缓解率为56.25%(9/16)。CAG方案诱导缓解的有效率为91.67%(11/12),其中完全缓解率为50%(6/12)。两组之间完全缓解率及总有效率比较无统计学差异(P>0.05)。结论:HAG方案治疗中高危MDS患者安全有效,取得CR后应继续巩固强化治疗,避免早期复发。     

自体造血干细胞移植治疗恶性淋巴瘤疗效分析

目的:观察自体外周血造血干细胞移植（autologous hematopoietic stem cell transplantation,Auto-HSCT）治疗恶性淋巴瘤的疗效。方法:选择2007年8月-2013年12月恶性淋巴瘤病例28例,均采用Auto-HSCT,移植前采用化疗联合G-CSF动员外周血造血干细胞,并积极预防感染及并发症。结果:本组1例回输后因脑出血死亡,其余均成功植入并快速重建造血,随访至2014年3月1日,共3例死亡,其中1例为回输后因脑出血死亡,其余2例均为复发。共6例复发,中位复发时间为3.5（1-15）个月,2例患者行双次自体移植,均无复发,28例移植患者预期中位无进展生存时间21个月。结论:自体造血干细胞移植能很快重建造血,病死率较低,安全可行,是治疗恶性淋巴瘤有效的手段之一。     

核小体结合蛋白1在膀胱癌中的表达和意义

目的通过检测核小体结合蛋白1（NSBP1）在膀胱癌组织和正常黏膜组织中的表达,探讨其与膀胱癌发生、发展的关系。方法采用逆转录PCR检测NSPB1在20例膀胱癌组织和正常黏膜组织中RNA水平的表达差异,采用免疫组织化学染色方法检测NSBP1在80例膀胱癌组织和正常黏膜组织中的表达差异,采用Western blot方法检测NSBP1在20例膀胱癌组织和正常黏膜组织中的蛋白表达差异。用配对t检验比较两种组织的逆转录PCR和Western blot的结果,用卡方检验比较两种组织免疫组织化学染色阳性率的差异。用Spearman相关性分析验证免疫组织化学结果与膀胱癌病理分期和组织学分级之间的关系。结果在膀胱癌组织和正常黏膜组织中,NSBP1的mRNA平均相对表达量分别为0.555±0.146和0.411±0.111（t=5.647,P〈0.01）。膀胱癌组织的免疫组织化学染色的阳性率、弱阳性率和阴性率分别为58.8%（47/80）、26.2%（21/80）和15.0%（12/80）,正常膀胱黏膜组织染色均为阴性,两种组织的染色阳性率存在明显差异（χ^2=66.55,P〈0.01）。Western blot提示两种组织中NSBP1蛋白的相对表达量分别为0.127±0.044和0.089±0.019（t=5.615,P〈0.01）。Spearman相关性分析显示NSBP1的表达与膀胱癌的病理分期及组织学分级存在正相关（P〈0.01）。结论NSBP1在膀胱癌中高表达,其表达与膀胱癌的病理分期、组织学分级呈正相关,可能参与了膀胱癌的发生与发展过程。     

基于人文关怀理念的医患沟通技巧在泌尿外科实习中的应用分析

目的探讨基于人文关怀理念的医患沟通技巧在泌尿外科实习中的应用效果分析。方法选取2012年1月—2013年1月经我院泌尿外科的实习医生80名,将80名实习医生分为实验组和对照组,实验组实习医生进入泌尿外科后给予基于人文关怀的沟通培训;对照组实习医生进入泌尿外科实习后给予常规入科宣教。结果科室对实验组实习医生的各项能力评分均高于对照组,对比差异均有统计学意义（P〈0.05）。患者对实验组实习医生非常满意21例,满意18例,不满意1例;对照组非常满意14例,满意19例,不满意18例。两组满意度对比差异有统计学意义（P〈0.05）。结论基于人文关怀的沟通技巧有助于泌尿外科实习医生提高业务技能及工作能力,也有助于提高医院的医疗服务质量。     

艾滋病恐怖症典型案例分析

随着艾滋病在世界范围内的迅速蔓延,艾滋病感染人数的不断增加,人们对艾滋病的关注程度也在增加,在关注艾滋病的同时出现了艾滋病恐怖症人群.本文对艾滋病恐怖症典型案例进行了分析和探讨.     

应用三氧化二砷治疗白血病患者尿中砷水平的变化及其与不良反应的关系

目的检测应用三氧化二砷治疗白血病患者的尿中砷化物水平,探讨砷代谢情况及对肝功能、血常规的影响。方法观察12例住院应用三氧化二砷治疗的患者,于用药前、用药后10 d及20 d留取晨尿,检测尿中无机砷(iAs)、一甲基砷(MMA)和二甲基砷(DMA)的水平,并检测肝功能及血常规等各项临床指标,采用重复测量的方差分析及相关分析进行研究。结果治疗前、治疗后10 d及20 d尿中iAs、MMA、DMA水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。患者治疗前、治疗后10 d及20 d的总蛋白、清蛋白、天冬氨酸氨基转移酶水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);而丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。患者治疗前后血常规各项指标水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。患者治疗后10 d尿中iAs水平与ALT水平呈正相关(r=0.65,P<0.05)。结论三氧化二砷治疗后患者ALT水平与无机砷水平有关,而对肝脏其他功能及血液系统无不良反应,为一种安全有效的药物。监测尿中砷化物的水平可有效反映砷在体内的代谢情况,必要时可进行驱砷治疗。