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1.
2.
3.
目的筛选出抗SARS-CoV病毒N蛋白的单链抗体。方法利用原核表达所获得的SARS病毒N蛋白,筛选人源单链抗体噬菌体展示库,经特异性的检测,以期得到抗SARS-CoV病毒N蛋白的特异单链抗体。结果获得了8个抗SARS病毒N蛋白的候选克隆。经测序,获得了编码抗体可变区的基因序列,并进行了原核表达。结论筛选得到的抗SARS-CoV病毒N蛋白单链抗体具有高度的特异性,可以用作临床实验或研究SARS病毒过程中快速检测SARSN蛋白或SARS病毒粒子的候选抗体。 相似文献
4.
(His)6 -eIF3s4融合蛋白在人乳腺癌细胞Bcap37中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:构建真核细胞翻译起始因子3第4亚单位(eIF3s4)真核表达载体用于进一步功能研究。方法:设计引物,以K562细胞的总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增eIF3s4的全长编码区cDNA,克隆于pGEM-TEasy载体,经DNA测序并与GenBank数据库序列进行比对后,将该cDNA序列亚克隆于真核表达载体pcDNA4/HisMaxB载体,构建成(His)6-eIF3s4融合蛋白的表达载体,用LipofectamineTM2000瞬时转染人乳腺癌细胞株Bcap37,利用Westernblot方法检测(His)6-eIF3s4融合蛋白的表达。结果:DNA序列测定表明,利用RT-PCR方法克隆的eIF3s4全长编码区cDNA序列与GenBank数据库序列一致,Westernblot结果证实(His)6-eIF3s4融合蛋白在Bcap37细胞中获得预期表达。结论:成功地构建了eIF3s4的真核表达载体并在人乳腺癌细胞Bcap37中表达,为建立稳定的eIF3s4高表达细胞系,进而研究eIF3s4与肿瘤细胞多药耐药相关性打下了基础。 相似文献
5.
6.
人大肠癌中基质金属蛋白酶-7 mRNA的表达 总被引:11,自引:0,他引:11
目的:探讨基质金属蛋白酶-7(matrix metalloproteinase 7,MMP-7)与大肠癌浸润和转移的关系.方法:用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测大肠癌和正常黏膜、炎性息肉、腺瘤及淋巴结中MMP-7 mRNA的表达.结果:97.4%(37/38)的大肠癌和1例肝转移中MMP-7 mRNA表达阳性,而相应正常黏膜几乎不表达;大肠癌中MMP-7 mRNA的表达水平随Dukes分期的进展而逐渐升高(P<0.01),A期(0.28±0.08),B期(0.54±0.17),C期(0.55±0.09),D期(0.73±0.06).5例腺瘤MMP-7均为阳性,但表达水平低于癌组织(P<0.01);3例炎性息肉均未见MMP-7表达.传统组织学检查有癌转移的13个淋巴结MMP-7表达均为阳性;组织学检查未见转移的12个淋巴结MMP-7表达6个阴性、6个阳性,再次行组织学检查于6个MMP-7阳性者中发现3个有微转移.结论:MMP-7的高表达可能在大肠癌的浸润和转移过程中具有重要作用;用RT-PCR方法检测淋巴结中MMP-7mRNA的表达是诊断大肠癌淋巴结微转移的敏感方法. 相似文献
7.
肝癌相关性甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶检测法 总被引:8,自引:2,他引:6
目的:进一步探讨血清肝癌相关性GPDA同工酶分离检测条件,提高其对原发性肝癌的诊断价值。方法:对分离血清肝癌相关性GPDA同工酶电泳体系的凝胶浓度及梯度、缓冲液的pH及离子强度、电泳的环境温度、标本 用量以及呈色条件等进行了逐项摸索,建立了稳定且分离效果好的GPDA同工酶检测方法。结果:采用三层阶段梯度聚丙烯酰胺凝胶体系将血清GPDA分为肝癌相关性的快带(GPDA-F)和相关性的慢带(GPDA-S),肝癌相关性GPDA的检出率明显提高。结论:肝癌相关性血清GPDA检测法稳定可靠、敏感,适合于临床推广应用。 相似文献
8.
目的:探讨老年冠心病患红细胞免疫功能与胰岛素抵抗(IR)之间的关系。方法:将老年冠心病人(59%)分为不稳定型心绞痛组(27例)和稳定型心绞痛组(22组),并与32例健康老人组对照。采用“郭峰改良法”及PEG双抗法分别检测各组的红细胞C3b受体花环(RBC-C3bRR),红细胞免疫复合物花环率(RBC-ICR)及空腹和餐后2h胰岛素(IS)。结果:老年冠心病组RBC-ICR,空腹及糖负荷后的IS均明显高于对照组,P<0.01,老年冠心病组RBC-C3bRR与对照组无显性差异。结论:RBC-ICR和IR参与老年冠心病的发病过程,并相互影响,加重血管内皮的损伤。 相似文献
9.
10.
目的 介绍后颅窝骨性扩大术治疗Chiari畸形合并脊髓空洞症。方法 该手术分为两种亚术式 ,一种是枕颈固定扩大术 :取自体髂骨 5cm× 10cm ,打磨成“凹”字形。上端为齐头端 ,固定在后颅窝减压窗缘。缺口端为下端 ,固定在枢椎棘突上 ,将扩大的硬脑 (脊 )膜修补筋膜片固定在植骨片内面 ,使筋膜片贴附在植骨片内面 ,形成帐篷状 ;另一种是单纯骨性扩大术 :取自体髂骨 6cm× 8cm的梯形骨片 ,并利用较厚的髂骨缘打磨成弧形。植骨片固定在后颅窝减压窗上 ,弧形端构成枕骨大孔后缘。将扩大的硬脑 (脊 )膜修补筋膜片也固定在植骨片内面 ,使筋膜片贴附在植骨片内面 ,也形成帐篷状。结果 本组病例随访 2~ 7年 ,术后症状体征缓解总有效率为91.6% ,肌力比以前提高 2~ 3级。结论 该术式比其他治疗Chiari畸形合并脊髓空洞症的术式 ,治疗效果显著 ,疗效切实可靠 相似文献