AD-004蛋白表达、抗体制备及其在睾丸和肾上腺组织中的表达分析

目的以原核表达的小鼠肾上腺蛋白AD-004为免疫原，制备抗AD-004的兔多克隆抗体，并明确其在肾上腺、睾丸组织中的分布。方法将小鼠AD-004cDNA克隆于原核表达载体PET28，经IPTG诱导AD-004的表达。用Ni^2＋-NTA纯化后的蛋白为免疫原制备抗AD-004多克隆抗体。通过Western印迹鉴定抗体特异性及效价，并用此抗体对小鼠睾丸、肾上腺组织进行免疫组织化学分析。结果此原核表达系统可高效表达AD-004蛋白，Western印迹结果显示所制备的抗体具有很高的效价和特异性，免疫组化提示AD-004蛋白在肾上腺的髓质表达较高，而在睾丸中主要表达于间质的Leydig细胞。结论本研究获得了小鼠AD-004原核表达蛋白，成功制备了AD-004多克隆抗体，并发现其在睾丸间质Leydig细胞表达最高，提示AD-004可能在睾丸性激素的合成过程中起重要作用。     

妊娠与甲状腺疾病

妊娠甲状腺疾病可分为妊娠前原有甲状腺疾病和妊娠中伴发甲状腺疾病，甲状腺疾病是妊娠妇女最常见的疾病之一，其发病率1％～2％[不包括大量的没有被发现的亚临床甲状腺功能减退症（甲减）与甲状腺功能亢进症（甲亢）]。现日益清楚，有临床症状和临床症状不明显的甲状腺疾病都会影响生育，对母亲和胎儿产生长期和短期的不良影响。因此妊娠甲状腺疾病值得重视。     

STUDY ON INVOLVEMENT OF L-ARG-NO IN THE PROTECTIVE ACTION OF ELECTROACUPUNCTURE ON CEREBRAL ISCHEMIC INJURY IN THE RAT

In the present study, the involvement of L-arginine(L-Arg) NO on he protective action of electroacupuncture(EA) on cerebral ischemic injury was observed in acute ischemia-reperfusion(IR)rat model by taking regional cerebral blood flow(r-CBF), cerebral water content(CWC), and blood nitric oxide(NO) contents as indexes. Results showed that 1) EA could cause r-CBF and serum NO content to increase and CWC to lower, suggesting an protective action of EA on IR cerebral injury; 2) intravenous injection of L-Arg also had an protective effect on cerebral IR cerebral injury, while L-NNA had no this effect; and 3) pre-treatment with L-Arg might strengthen the effect of EA further, while pretreatment with L-NNA could weaken its effect. It indicates that L-Arg-NO may be involved in the effect of EA in protecting the brain from ischemic injury.     

电针对大鼠局灶性脑缺血后神经元损伤保护作用的研究

选择凝闭大鼠大脑中动脉致局灶性脑缺血为模型,观察电针对缺血区各指标的影响。结果：（１）造模６０ｍｉｎ后,局部脑血流量（ｒＣＢＦ）,超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）,单胺类神经递质均显著下降;脑组织水含量,丙二醛（ＭＤＡ０,兴奋性氨基酸（ＥＡＡ）中谷氨酸（Ｇｌｕ）和天门冬氨酸（Ａｓｐ）明显升高。（２）电针１０ｍｉｎ后,指标均得到改善。     

艾灸对急性脑缺血再灌流大鼠SOD、LPO的影响

众多研究表明，超氧化物歧化酶（SOD）广泛存在于生物体内，是能够特异性清除超氧自由基的抗氧化酶，也是机体内唯一能直接淬灭自由基的酶，可保护细胞免受超氧自由基的损伤。SOD可能与机体的衰老、肿瘤、炎症、自身免疫性疾病、血液病、心脑血管病有关。过氧化脂质（LPO）可以反映体内脂质过氧化程度，间接反映体内氧自由基水平，而自由基损伤对缺血性脑血管病的发生发展有着重要作用。为了探讨自由基损伤在脑缺血性疾病机理中的意义，我们对急性脑缺血再灌流损伤大鼠SOD、LPO变化进行了测定，并观察艾灸对其影响。现将结果报道如下…     

糖耐量受损和2型糖尿病患者血清脂联素与胰岛素敏感指数关系的研究

目的探讨IGT及新诊断T2DM患者血清APN水平与IS及胰岛β细胞功能的关系。方法纳入90例受试者,其中健康对照者28名、IGT及T2DM患者各31例,用减少样本数的Bergman微小模型技术评估各组ISI及急性胰岛素反应(AIR),同时测定血清APN水平。结果血清APN水平与BMI、WHR、SBP、FPG、2hPG、FIns、2hIns、HbA1c、TG呈负相关(P均<0.01),与ISI呈正相关(r=0.565,P<0.01),与AIR无关。结论 APN水平的下降与IR、MS的发生有关。     

大鼠内脏脂肪含量与ghrelin分泌的关系

目的了解大鼠内脏脂肪含量对ghrelin分泌的影响。方法80只大鼠分别制成正常大鼠模型组、高脂大鼠模型组及减重大鼠模型,使用GE Lightspeed 16排螺旋CT全扫,计算大鼠内脏脂肪组织面积,从而计算出内脏脂肪含量,并根据内脏脂肪含量将所有大鼠重新分为A组(内脏脂肪含量<3%)、B组(3%≤内脏脂肪含量<6%)、C组(6%≤内脏脂肪含量<9%)、D组(内脏脂肪含量≥9%),应用放射免疫测定法测定血清中ghrelin的含量,进一步分析大鼠内脏脂肪含量与ghrelin分泌之间的关系。结果(1)与正常饲料喂养大鼠相比,高脂饮食后大鼠体质量与内脏脂肪含量均明显增加(P<0.01);而肥胖大鼠减重后,体质量与内脏脂肪含量均下降(P<0.01),尤其内脏脂肪含量下降更为明显(P<0.01)。(2)与A组内脏脂肪含量相比,B组、C组、D组内脏脂肪含量分别是A组的3.15倍、5.84倍、7.69倍。B组与A组之间ghrelin的分泌无显著差异(P>0.05);C组、D组ghrelin的分泌较A组明显下降(P<0.01)。结论不同内脏脂肪含量的大鼠,其ghrelin的分泌不同,在内脏脂肪含量相差较明显时,ghrelin分泌的下降才具有显著差异。     

高脂饲养诱导胰岛素抵抗大鼠脂肪组织C反应蛋白及脂联素的表达

目的 探讨C-RP、APN在IR大鼠各组织的表达情况. 方法 19只SD大鼠,随机分为对照组（NC,n=9）与高脂组（HF,n=10）,饲养20周后,行OGTT和胰岛素释放试验（IRT）,采用实时荧光定量PCR（RT-PCR）及Northern blot法检测大鼠肝脏、脂肪组织C-RP及APN的表达. 结果 与NC组比较,HF组血糖、胰岛素水平增加,表明已处于IR状态.Northern blot检测显示,HF组脂肪组织中APN的表达较NC组下降（P＜0.01）.RT-PCR显示,HF组肝脏组织C-RP较NC组上升约62％（P＜0.01）,脂肪组织中C-RP的表达较NC组上升约88％（P＜0.01）. 结论 高脂饲养诱导的IR大鼠,肝脏、脂肪组织C-RP表达增加,而脂肪组织APN表达下降.     

左旋精氨酸—一氧化氮通路在电针保护大鼠急性缺血再灌流性脑损伤中的作用研究

通过建立大鼠急性缺血再灌流性脑损伤的模型，选用局部脑血流量（ｒ－ＣＢＦ）、脑含水量和脑组织及血中—氧化氮（ＮＯ）含量等为指标，静注外源性ＮＯ前体左旋精氨酸（Ｌ－ａｒｇ）、一氧化氮合酶（ＮＯＳ）抑制剂硝基左旋精氨酸（Ｌ－ＮＮＡ）等物质，探讨Ｌ－ａｒｇ＼｜ＮＯ通路在电针保护缺血性脑损伤过程中的作用。结果：（１）电针可提高ｒ－ＣＢＦ，降低脑含水量，增高脑组织和血清中的ＮＯ，对缺血再灌流（ＩＲ）性脑损伤有保护作用；（２）ＮＯ前体Ｌ－ａｒｇ静脉注射对ＩＲ脑损伤也有保护作用，而ＮＯＳ抑制剂Ｌ－ＮＮＡ未显示对ＩＲ脑损伤的保护作用；（３）Ｌ－ａｒｇ预处理可加强电针的保护作用，Ｌ－ＮＮＡ预处理可使电针效应下降。表明Ｌ－ａｒｇ－ＮＯ通路可能参与电针保护ＩＲ脑损伤的作用过程     

KAI1基因在甲状腺乳头状癌组织中的表达及意义

目的 探讨KAI1基因在人类甲状腺乳头状癌组织中的表达及其与临床病理特征和预后的关系.方法 应用Real Time-PCR检测21例甲状腺乳头状癌组织及相应的21例癌旁正常组织和7例甲状腺良性病变组织中KAI1 mRNA的表达情况,同时应用免疫组织化学法检测60例甲状腺乳头状癌组织和20例甲状腺腺瘤组织中KAI1蛋白的表达水平.结果 KAI1 mRNA在甲状腺乳头状癌组织中的表达量显著高于癌旁正常甲状腺组织（P＜0.05）及甲状腺良性病变组织（P＜0.05）.KAI1蛋白在甲状腺乳头状癌组织中的阳性表达率为68.3%,在甲状腺腺瘤组织中阳性表达率为25%,二者差异有高度统计学意义（P＜0.01）.KAI1蛋白在甲状腺乳头状癌无淋巴结转移组的阳性表达率要高于有淋巴结转移组,差异有统计学意义（P＜0.05）;KAI1蛋白在男性和女性患者中的阳性表达率差异无统计学意义（P＞0.05）.KAI1蛋白的表达与患者的年龄、肿瘤大小、TNM分期及包膜侵犯均无关（P＞0.05）.结论 KAI1 mRNA及其蛋白的异常表达与甲状腺乳头状癌的发生、发展有关,有助于甲状腺乳头状癌的治疗和预后判断.