凝胶渗透色谱-多角度激光散射联用技术研究 红芪多糖中4个组分分子特征

目的:测定红芪多糖3(HPS-3)中4个组分的绝对分子量,相对分子质量分布,均方根旋转半径(Rg),多分散系数(Mw/Mn)等分子特征参数,以均方根旋转半径(Rg)对重均分子量(Mw)作图,计算4个组分在溶液状态的构象。方法:采用凝胶渗透色谱-多角度激光散射(GPC-MALLS)联用技术,流动相为含0.02%NaN3的0.1 mol.L-1NaNO3溶液,Ultrahydro-gelTM1000,500色谱柱串联。结果:HPS-3的4个组分中,HPS-3-C的Mw最大(1.986×105g.mol-1);其次为HPS-3-B(1.113×105 g.mol-1)和HPS-3-D(8.457×104 g.mol-1);HPS-3-A的Mw最小(1.223×104 g.mol-1),而Rg最大(55.5 nm)。HPS-3-D相对分子质量分布范围最广,Mw/Mn 2.543。在流动相中,HPS-3-A为球型构象,HPS-3-C为无规则线团构象,HPS-3-B和HPS-3-D则均为高枝化度结构。结论:为进一步研究HPS-3中4个组分分子特征与其生物活性的关系提供必要依据。     

红芪多糖3中4个组分的单糖组成分析及多糖含量测定

 目的 对红芪多糖3（HPS-3）进行分离纯化,研究红芪多糖3中4个组分单糖组成以及多糖含量测定。方法 红芪多糖经水提醇沉,Sevag法脱蛋白,H₂O₂脱色,醇沉,透析,再经DEAE-cellulose 52和 Sephadex G-100柱色谱纯化,得到HPS-3-A、HPS-3-B、HPS-3-C、HPS-3-D 4个组分;HPGPC法分析, 4个组分均为单一组分; TLC法与GC法分析4个组分单糖组成;改良苯酚硫酸法测定4个组分中多糖含量。结果 HPS-3-A主要由葡萄糖组成,多糖含量为99.2%;而HPS-3-B、HPS-3-C、HPS-3-D主要由阿拉伯糖与半乳糖组成。多糖含量依次为96.5%,95.3%,95.2%。结论 本实验为红芪多糖3构效关系研究提供基础。
     

LC-MS-MS方法测定大鼠血浆中蝉翼素的 药代动力学及代谢物

目的:建立测定蝉翼素血浆药物浓度的液相色谱-电喷雾离子化-质谱(LC-MS-MS)联用的分析方法,探讨其在大鼠体内的药动学及其在体内的代谢产物。方法:大鼠灌胃蝉翼素后不同时间点采血,LC-MS-MS法测定血药浓度,拟合药动学模型并计算相关药动学参数。结果:蝉翼素在0.132 5～53.00μg.L-1线性关系良好(r=0.999 2),方法学考察均符合要求。日内、日间变异系数(RSD)均<10%,精密度和准确度等均符合生物样品分析的要求。结论:该法准确、灵敏、特异,适用于蝉翼素的体内定量分析,蝉翼素在大鼠体内药动学过程属于二室模型,蝉翼素吸收后经过胃肠道转化为代谢产物2-甲基丁酸。     

参橘止咳滴丸的指纹图谱研究

目的建立中药参橘止咳滴丸HPLC指纹图谱,全面评价其质量。方法采用HPLC法,色谱柱:Hypersil C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-0.2%醋酸溶液梯度洗脱,检测波长280 nm,柱温25℃,流速0.6~1.0 mL min-1。结果找到16个共有峰;鉴别了肉桂酸、橙皮苷、哈巴俄苷。结论该方法准确可靠,为全面控制制剂质量提供了依据。     

LC-MS/MS 测定大鼠血浆中香柑内酯及其药代动力学研究

目的:建立测定香柑内酯(berg)血浆药物浓度的液相色谱-电喷雾离子化-质谱(LC-ESI-MS)联用的分析方法,并探讨其在大鼠体内的药动学。方法:采用Hypersil ODS柱(4.6 mm×250 mm,5 mm),流动相甲醇-水(77.5∶2.5),流速0.8mL.min-1,柱温30℃,检测波长300 nm。结果:Berg在8.12～162.4μg.L-1(r=0.999 9)线性关系良好。方法学考察均符合要求。日内、日间变异系数(RSD)均<10%,精密度和准确度等均符合生物样品分析的要求。结论:该法准确、灵敏、特异,适用于berg的体内定量分析,berg在大鼠体内药动学过程属于一级吸收二室模型。     

红芪多糖的纯化及初步结构鉴定

目的 研究红芪多糖的分离纯化及初步的结构.方法 采用超声辅助提取多糖,比较 Sevag法、三氯乙酸法和三氯乙酸-正丁醇法脱蛋白的效果,并用 GC、TLC及 IR分析多糖的初步结构.结果 三氯乙酸-正丁醇法脱蛋白,经 Sephadex G-25柱层析分离纯化后得红芪多糖2(HPS-2),HPLC确定为均一多糖,糖含量为 98.02%,糖组成分析表明其含有鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖,摩尔比为 0.3∶0.2∶2.7∶16.1∶2.0.结论 HPS-2是一种以 β苷键为主的吡喃型杂多糖.     

高效液相色谱法同时测定复方当归栓中5种活性组分的含量

目的:建立一种高效液相色谱分析方法,用于同时测定复方当归栓中5种活性成分苦参碱、氧化苦参碱、阿魏酸、左旋紫草素和β,β-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量。方法:采用HPLC法,Kromasil ODS色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇-0.1%三乙胺水溶液(用磷酸调节pH3)梯度洗脱,分别在检测波长220,316,516 nm,测定了苦参碱和氧化苦参碱、阿魏酸、左旋紫草素和β,β-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量。结果:通过1次进样,同时测定了复方当归栓中理化性质差异较大的5种活性成分的含量,且线性关系良好(r0.999 6),平均回收率为96.92%～102.22%,RSD3.1%。结论:该法简便、灵敏、准确、重复性好,可用于同时测定该制剂中5种活性成分的含量,并为该制剂质量控制提供了方法学基础。