黄芪调节维生素D介导OPG/RANKL/RANK信号通路对维甲酸诱导骨质疏松C57BL/6J小鼠股骨的影响

目的 通过研究黄芪对骨质疏松C57BL/6J小鼠股骨VDR、SOST、OPG、RANKL、RANK mRNA及蛋白表达的影响，初步探讨其治疗骨质疏松作用机制。方法 将30只C57BL/6J小鼠随机分为6组：模型组，黄芪低、中、高剂量组[2g/(kg·d)、4g/(kg·d)、8g/(kg·d)],骨化三醇组0.06μg/(kg·d)和正常组，各组均采用灌胃给药。HE染色法观察各组小鼠股骨组织病理学改变；比色法检测小鼠血清中Ca²⁺含量；ELISA法检测小鼠血清中BGP、25(OH)D₃含量；RT-PCR及Western-Blot法检测小鼠股骨中VDR、SOST、OPG、RANKL、RANK mRNA和蛋白表达量。结果 与正常组比较，模型组小鼠股骨骨皮质粗糙，破骨细胞增多，骨小梁变细，数量减少，间隙增大，见骨髓水肿；与模型组比较，黄芪高、中、低剂量组小鼠股骨骨小梁变细、数量减少程度均明显减轻。与正常组比较，模型组小鼠血清Ca²⁺、25(OH)D₃、BGP含量显著降低(P<0.01);模型组小鼠股...     

红景天破壁饮片对小鼠急性肝肾毒性研究

目的:对比研究不同剂量的红景天破壁饮片对小鼠的急性肝肾毒性.方法:将40只清洁级昆明小鼠随机分成空白组对照组、红景天破壁饮片低、中、高剂量组,每组10只,雌雄各半,禁食不禁水12 h后,分别给予红景天破壁饮片低、中、高剂量(29.578mg/g、34.797mg/g、40.938mg/g),空白组给于相同体积的蒸馏水,...     

自拟补肾健脾疏肝方治疗多囊卵巢综合征30例临床疗效观察

目的:观察"补肾健脾疏肝方"对多囊卵巢综合征的临床疗效。方法:将符合纳入标准的60例患者随机分成治疗组(补肾健脾疏肝方)和对照组(达英-35)各30例,使用B超法观察并记录各组治疗前后卵泡数大于10个的病例数,用酶联免疫法检测患者治疗前后血清黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、睾酮(T)的变化情况,并用积分方法对中医伴随症状疗效进行评价。结果:治疗3个月经周期后,治疗组和对照组总有效率和卵泡数大于10个的病例数均有明显改变,且治疗组优于对照组(P0.05);两组在治疗后血清LH、FSH、T均明显下降(P0.05),且治疗组下降趋势优于对照组,其降低血清FSH作用尤为突出;与治疗前比较,治疗组各伴随症状在治疗后有明显减轻(P0.05);对照组此作用不明显。结论:补肾健脾疏肝方能明显减轻或消除多囊卵巢综合症诸多症状,提高患者生活质量,值得临床推广应用。     

天麻普通粉、破壁粉、冻干粉对戊四唑诱导惊厥大鼠海马组织GABA-T mRNA及蛋白表达的影响

目的:研究天麻普通粉、破壁粉、冻干粉对戊四唑诱导惊厥大鼠海马组织γ-氨基丁酸转氨酶(7-Aminobutyrate transaminase,GABA-T) mRNA及蛋白表达的影响,初步探讨天麻破壁粉、冻干粉对神经细胞的保护作用机制,并对3种不同加工工艺的天麻的效应差异性进行对比,为合理使用不同加工工艺的天麻提供实验参考。方法:利用戊四唑惊厥模型,将SD大鼠随机分为正常组,模型组,阳性对照组,天麻(普通粉、破壁粉、冻干粉)低、中、高剂量组(0.5、1.0、2.0 g/kg)。用荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)检测不同工艺的天麻对戊四唑诱导惊厥大鼠海马组织GABA-T mRNA表达的情况;用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测不同工艺的天麻对戊四唑诱导惊厥大鼠海马组织GABA-T蛋白表达情况。结果:RT-PCR和WB检测显示,模型组大鼠海马组织GABA-T mRNA和蛋白相对表达量显著升高(P0.05);与模型组比较,阳性对照组和天麻各组均可显著降低大鼠海马组织GABA-T mRNA和蛋白相对表达量(P0.05),天麻冻干粉和破壁粉抗惊厥效果不同程度优于天麻普通粉,其中冻干粉的效果优于破壁粉,破壁粉的效果优于普通粉,且在一定范围内呈量效关系。结论:天麻冻干粉和破壁粉对戊四唑诱导惊厥大鼠的神经保护作用效果强于普通粉,与加工方式有关,且呈量效关系,其作用机制可能与大鼠海马组织GABA-T mRNA及蛋白表达水平有关。     

黄芪多糖对小鼠MC-3T3-E1成骨细胞维生素D受体mRNA及蛋白表达的影响

目的探讨黄芪多糖对小鼠MC-3T3-E1成骨细胞维生素D受体(VDR)mRNA及蛋白表达的影响。方法采用Real-Time PCR、Western Blot检测黄芪多糖对小鼠MC-3T3-E1成骨细胞维生素D受体(VDR)mRNA及蛋白表达情况。实验分为5组,正常组、维生素D组(10-5mmol·L-1)、10μg·ml-1黄芪多糖组、1μg·ml-1L黄芪多糖组、0.1μg·ml-1黄芪多糖组。结果 Real-Time PCR、Western Blot检测结果显示,与正常组比较,不同剂量的黄芪多糖均可上调小鼠MC-3T3-E1成骨细胞VDR mRNA及蛋白相对表达量,且在黄芪多糖剂量为1μg·ml-1时其表达量显著增高(P0.05)。结论黄芪多糖治疗骨质疏松症重要机制之一可能与上调VDR mRNA及蛋白表达水平有关。     

葛根散对酒伤雄性大鼠睾丸组织病理损伤的影响

目的探讨中药解酒方"葛根散"对酒伤大鼠睾丸病理组织的影响,为临床应用葛根散治疗酒精性生殖细胞损伤积累实验依据。方法实验分为五组:正常组、模型组、葛根散低剂量组、葛根散中剂量组、葛根散高剂量组。观察记录各组雄性大鼠腹腔注射西地那非后30min内追逐雌鼠次数;HE染色观察各组大鼠睾丸组织病理损伤情况。结果模型组酒伤大鼠对雌鼠的追逐次数显著低于正常组(P0.05),葛根散各剂量组均可显著提高酒伤大鼠追逐次数(P0.05);光镜下模型组酒伤大鼠睾丸组织可见少量曲细精管萎缩,边缘皱缩、不规则,不同程度的曲细精管内生精细胞变性,胞质内含大小不等的空泡,部分细胞坏死或脱落于管腔,胞核碎裂、溶解或消失;葛根散低剂量组睾丸组织所见与模型组类似,但较之程度减轻;葛根散中剂量组睾丸组织或见少量曲细精管内生精细胞变性、坏死或脱落,或见部分曲细精管内生精细胞数量减少;葛根散高剂量组睾丸组织仅见部分曲细精管内生精细胞数量略微减少,少量细胞脱落。结论葛根散具有预防或修复酒伤大鼠睾丸组织病理损伤的作用,可在一定程度上改善雄性酒伤大鼠性欲。     

红景天破壁饮片与传统饮片对缺血缺氧H9c2心肌细胞保护作用对比研究

目的:在细胞水平上探讨红景天破壁饮片与传统饮片对缺血缺氧H9c2心肌细胞的保护作用并对比两种饮片药效差异。方法:以H9c2心肌细胞为研究对象,实验分为八组,分别为正常组:正常培养基培养8 h;模型组:无糖无血清的培养基置于缺氧盒37℃密闭缺氧培养8 h;给药组:模型组+红景天传统饮片和破壁饮片低、中、高剂量组(0.002、0.020、0.200 mg·mL~(-1))进行相关指标检测。采用细胞增殖及毒性检测试剂盒(Cell Counting Kit-8)法检测药物对细胞存活率的影响,比色法检测各组细胞培养液中乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase LDH)含量及细胞内丙二醛(Malonic dialdehyde MDA)、肌酸激酶(Creatine kinase CK)、总超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase T-SOD)、三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate ATP)含量。实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase3)mRNA和蛋白相对表达量。结果:与正常组比较,模型组H9c2心肌细胞培养液LDH含量、细胞内MDA、CK含量、细胞Caspase3 mRNA及蛋白相对表达量均显著升高(P0.05),细胞内T-SOD、ATP含量均显著降低;与模型组比较,红景天破壁饮片与传统饮片各剂量组均可显著降低H9c2心肌细胞培养液LDH活性,细胞内MDA、CK含量,升高T-SOD、ATP含量(P0.05),显著降低受损H9c2心肌细胞Caspase3 mRNA和蛋白相对表达量(P0.05),且破壁饮片不同程度优于传统饮片。结论:红景天破壁饮片与传统饮片通过抑制氧化应激损伤,提高细胞活力对H9c2心肌细胞起保护作用,且红景天破壁饮片对H9c2心肌细胞损伤的保护作用优于传统饮片,作用机制可能与调控H9c2心肌细胞的MDA、CK、T-SOD、ATP含量及调节Caspase3 mRNA及蛋白表达水平有关。     

朱砂安神丸、朱砂、硫化汞、氯化汞、甲基汞对小鼠肾转运体基因表达的影响

目的:探讨朱砂安神丸、朱砂、硫化汞(Hg S)、氯化汞(Hg Cl2)和甲基汞(Me Hg)对小鼠肾转运体基因表达的影响。方法:将健康雄性小鼠分别ig等量生理盐水、朱砂安神丸1.8 g·kg-1(含汞0.17 g·kg-1)、朱砂0.2 g·kg-1(含汞0.17 g·kg-1)、高剂量朱砂2 g·kg-1(含汞1.7 g·kg-1)、Hg S 0.2 g·kg-1(含汞0.17 g·kg-1)、Hg Cl20.032 g·kg-1(含汞0.024 g·kg-1)、Me Hg 0.026 g·kg-1(含汞0.024 g·kg-1),每天1次,连续30 d,记录小鼠体重变化。30 d后处死取肾脏,双道原子荧光光度法检测小鼠肾组织汞蓄积量,RT-PCR方法检测小鼠肾组织有机阴离子转运体基因(Oat1,Oat3,Oat2)、多药耐药相关蛋白基因(Mrp2,Mrp4)、尿酸转运体基因(Urat1)的表达。结果:与正常组相比,Hg Cl2组和Me Hg组小鼠肾汞蓄积量显著升高(P<0.05),其余各组肾汞蓄积量与正常组无显著差异;Hg Cl2组和Me Hg组Oat1,Oat2表达显著降低(P<0.05);Me Hg组Mrp2基因的表达显著升高(P<0.05);Hg Cl2组和Me Hg组Mrp4基因表达显著升高(P<0.05);Me Hg组Urat1基因表达显著降低(P<0.05)。结论:Hg Cl2组和Me Hg组小鼠肾汞蓄积量、肾转运体基因表达与正常组有显著差异,其余各组各项检测指标与正常组小鼠相比无显著差异。与Hg Cl2和Me Hg相比,朱砂及其复方对小鼠造成的肾毒性相对较低。     

黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞CYP27B，CYP24A mRNA及蛋白表达的影响

目的:通过研究黄芪多糖对成骨细胞增殖及1α羟化酶(CYP27B),24-羟基化酶(CYP24A)基因与蛋白表达情况的影响对其治疗骨质疏松症(OP)作用机制进行初步探讨。方法:以MC-3T3-E1成骨细胞为研究对象,实验分为5组,分别为正常组,维生素D组(1×10-5mmol·L-1),黄芪多糖高、中、低剂量组(10,1,0.1 mg·L~(-1))。用噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度的黄芪多糖在不同时间(24,36,48 h)对MC-3T3-E1成骨细胞增殖率的影响。实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)检测黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞CYP24A,CYP27B mRNA的表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞CYP24A,CYP27B蛋白的表达情况。结果:MTT比色法显示黄芪多糖的质量浓度在0.1,1,10 mg·L~(-1)时可以提高MC-3T3-E1成骨细胞的增殖率,且在48 h促增殖作用最佳。Real-time PCR,Western blot检测结果显示,与正常组比较,维生素D组MC-3T3-E1成骨细胞CYP27B mRNA表达量、蛋白表达量有显著促进作用(P0.05);与维生素D组比较,黄芪多糖在质量浓度为10,1,0.1 mg·L~(-1)时对MC-3T3-E1成骨细胞CYP24A mRNA表达量、蛋白表达量有显著抑制作用(P0.05)。结论:黄芪多糖能够治疗骨质疏松症其机制与提高成骨细胞活性及调节MC-3T3-E1成骨细胞CYP24A,CYP27B mRNA及蛋白表达水平有关。     

Morris水迷宫法探讨化风丹对大鼠空间记忆能力的影响

目的：比较万胜化风丹、廖元和堂化风丹、氯化汞（HgCl2）和亚砷酸钠（NaAsO：）对健康SD大鼠空间记忆能力的影响。方法：清洁级SD大鼠每天分别喂食万胜化风丹（420rag·kg-1,含汞10．9mg·kg-1,含砷8．8mg·kg-1）、廖元和堂化风丹（420mg·kg,含汞10．9mg·kg,含砷8．8mg·kg。）、HgCl＼-2（5mg-kg,含汞3．7g·kg-1）、NaAsO＼-2（5mg·kg-1,含砷2．9mg·kg-1）以及空白对照组,持续60天,使用Morris水迷宫（MwM）法检测其空间学习能力。结果：用药前大鼠潜伏期在第1～4天无明显变化,训练第5天各组潜伏期显著下降;用药后训练第1～5天各组潜伏期呈明显下降趋势。与正常组比较,用药前各组在第1～5天均无显著差异,用药后HgCl2组在第2～5天均有显著性差异（P〈0．05）,万胜化风丹组、廖元和堂化风丹组及去NaAsO2组仅在第4天差异显著（P〈O．05）;与HgCl。组比较,用药前各组在第1～5天均无显著差异,用药后万胜化风丹组、廖元和堂化风丹组和NaAsO2组在第2～5天均差异显著（P〈0．05）。结论：HgCl2长期应用可显著降低大鼠中枢神经系统的空间记忆能力,化风丹对此无明显影响。