金钱胆通颗粒薄层鉴别及虎杖苷含量测定研究

目的:建立金钱胆通颗粒中药味茵陈的薄层鉴别及金钱胆通颗粒中虎杖苷含量的测定方法。方法:采用TLC法鉴别茵陈;HPLC法测定虎杖苷的含量,采用kromasil C18 (5μm,250×4.6mm)柱;流动相为乙腈-水(16∶84),流速:1mL/min;柱温:30℃,进样量:10μL;检测波长:306nm;理论踏板数按虎杖皂苷峰计算应不低于3000。结果:药味茵陈的TLC斑点清晰,阴性对照无干扰。虎杖苷浓度在0.8704～43.52μg·mL~(-1)范围内,与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),加样回收率在95.05%～95.91%之间,平均回收率为95.44%,RSD为0.30%(N=9)。精密度、稳定性、重复性良好,RSD分别为0.17%、0.27%和0.33%。结论:本研究建立的茵陈薄层鉴别及虎杖苷含量测定方法准确可行,能够有效控制金钱胆通颗粒的质量。     

红景天破壁饮片与传统饮片对缺血缺氧H9c2心肌细胞保护作用对比研究

目的:在细胞水平上探讨红景天破壁饮片与传统饮片对缺血缺氧H9c2心肌细胞的保护作用并对比两种饮片药效差异。方法:以H9c2心肌细胞为研究对象,实验分为八组,分别为正常组:正常培养基培养8 h;模型组:无糖无血清的培养基置于缺氧盒37℃密闭缺氧培养8 h;给药组:模型组+红景天传统饮片和破壁饮片低、中、高剂量组(0.002、0.020、0.200 mg·mL~(-1))进行相关指标检测。采用细胞增殖及毒性检测试剂盒(Cell Counting Kit-8)法检测药物对细胞存活率的影响,比色法检测各组细胞培养液中乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase LDH)含量及细胞内丙二醛(Malonic dialdehyde MDA)、肌酸激酶(Creatine kinase CK)、总超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase T-SOD)、三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate ATP)含量。实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase3)mRNA和蛋白相对表达量。结果:与正常组比较,模型组H9c2心肌细胞培养液LDH含量、细胞内MDA、CK含量、细胞Caspase3 mRNA及蛋白相对表达量均显著升高(P0.05),细胞内T-SOD、ATP含量均显著降低;与模型组比较,红景天破壁饮片与传统饮片各剂量组均可显著降低H9c2心肌细胞培养液LDH活性,细胞内MDA、CK含量,升高T-SOD、ATP含量(P0.05),显著降低受损H9c2心肌细胞Caspase3 mRNA和蛋白相对表达量(P0.05),且破壁饮片不同程度优于传统饮片。结论:红景天破壁饮片与传统饮片通过抑制氧化应激损伤,提高细胞活力对H9c2心肌细胞起保护作用,且红景天破壁饮片对H9c2心肌细胞损伤的保护作用优于传统饮片,作用机制可能与调控H9c2心肌细胞的MDA、CK、T-SOD、ATP含量及调节Caspase3 mRNA及蛋白表达水平有关。     

不同产地5种中药材安全限量研究——农药残留分析

目的:考查不同产地的太子参、野菊花、三七、茯苓、鱼腥草有机氯农药残留情况,了解我国目前中药材农药残留存在的问题,为后续开发利用药材资源提供理论依据和基础。方法:采用气相色谱-电子捕获检测(GC-ECD) Rtx-1701弹性石英毛细管柱(0.25 mm×30 mm×0.25μm),样品经丙酮,二氯甲烷与石油醚混合有机溶剂超声提取,进样口温度230℃,检测器温度300℃;程序升温,初始温度100℃,先以10℃/min升至220℃,再以8℃/min升至250℃保持10 min,外标法计算含量,应用SPSS 22.0软件对数据结果进行统计学分析。结果:9种有机氯的线性关系良好,相关系数均大于0.995;最低检出限为0.00012～0.00057μg/g;检测仪器的精密度良好,RSD均小于5%;检测方法重现性好,RSD均小于8%;回收率范围为94.91～105.09%。5种中药材中均含有滴滴涕,仅有三七中含有五氯硝基苯;参考2015版《中国药典》和《药用植物及制剂外经贸绿色行业标准》(WM-T2-2004)收载的品种项下"农药残留量"部分检查限度,50批中药材检出含有机氯农药残留率占50%,但含量均较低,其中总六六和总滴滴涕超标率分别为10%和6%,50批中药材合格率达84%,整体符合要求。结论:气相色谱检测法简便快捷、分离效果好,能广泛用于中药材有机氯农药残留的检测。     

丹参破壁饮片与传统饮片水溶性成分指纹图谱及丹酚酸B含量对比研究

目的建立10批丹参传统饮片、冷冻破壁饮片、普通破壁饮片的水溶性成分UPLC指纹图谱,同时测定水溶性指标成分丹酚酸B的含量,为丹参破壁饮片质量与安全性提供参考依据。方法采用UPLC法以Waters ACQUITY BEH C₁₈(2.1 mm×150 mm,1.7μm)为色谱柱,乙腈-0.02%的磷酸为流动相,梯度洗脱;检测波长270 nm;流速0.15 mL/min;柱温30℃;进样量2μL;采用HPLC法按照2015版《中华人民共和国药典》测定丹酚酸B含量,并利用相似度评价软件与SPSS 22.0软件对指纹图谱与丹酚酸B含量进行分析。结果通过相似度软件分析冷冻破壁饮片、普通破壁饮片、传统饮片分别为12、13、14个共有峰,并通过对照品指认得到丹参素钠(3号峰)、原儿茶醛(4号峰)、咖啡酸(6号峰)、迷迭香酸(13号峰)、丹酚酸B(14号峰)等5种成分,丹酚酸B含量范围为2.354%~7.606%,利用SPSS 22.0的多个相关样本的非参数检验对10批3种粉碎方式指纹图谱与丹酚酸B含量分析得到3种粉碎方式的水溶性指纹图谱与丹酚酸B含量均无明显差异性。结论从定性与定量两个方面对丹参破壁前后水溶性化学成分进行研究,可为丹参破壁饮片的临床应用与开发提供依据。     

贵州金丝桃中11种微量元素含量测定与分析

目的:对贵州金丝桃中Pb,Cd,Hg,As,Cu,Mn,Se等11种微量元素含量分析。方法:采用硝酸作为消解体系以微波消解按照一定消解程序进行消解,检测方法参照2015版中国药典用ICP-MS内标法测中药金丝桃中的Pb、Cd、Hg、As、Cu含量,同时以外标法测Mn,Zn,Se,Cr,Sn,Ba,Ag。结果:各元素线性关系均良好(r0.997),平均回收率为86.8%～107.8%%,各元素精密度试验RSD值均小于4.64%,样品各元素重复性的RSD值小于5.42%,测得Pb、Cd、Hg、As含量均低于5 mg/kg;测得Mn,Zn,Se,Cr,Sn,Ba,Ag中Mn、Ba、Cu含量较高:分别为73.57、14.74、11.64 mg/kg,其他元素含量均低于1 mg/kg,同时检测中发现金丝桃中无Cr。结论:本研究采用ICP-MS法检测贵州金丝桃中微量元素,揭示了贵州金丝桃中微量元素分布与含量情况,为贵州金丝桃质量标准研究及其进一步的安全性研究提供一定的基础。