扶正抗癌方通过 SAPK／JNK －Sp1通路对 H1650细胞增殖的影响

目的：探讨扶正抗癌方抑制H1650细胞增殖的分子机制。方法 MTT活力检测法观察扶正抗癌方对H1650细胞增殖的影响;蛋白质印迹法检测扶正抗癌方对p－SAPK／JNK、SAPK／JNK和Sp1蛋白表达的影响,并加入SP600125（SAPK／JNK抑制剂）后检测扶正抗癌方对Sp1表达的影响; MTT活力检测法观察抑制SAPK／JNK后扶正抗癌方对H1650细胞增殖的影响。结果扶正抗癌方以浓度和时间依赖性抑制H1650细胞的增殖（P＜0.05）;扶正抗癌方以时间依赖性上调 p－SAPK／JNK和SAPK／JNK蛋白的表达（P＜0.05）,以浓度依赖性下调Sp1蛋白的表达（ P＜0.05）;抑制SAPK／JNK逆转了扶正抗癌方对Sp1蛋白表达的下调和对H1650细胞增殖的抑制作用（ P＜0.05）。结论扶正抗癌方可通过介导SAPK／JNK通路抑制Sp1蛋白的表达,进而抑制H1650细胞的增殖。     

扶正抗癌方诱导H1650细胞凋亡的分子机制

目的:观察扶正抗癌方对H1650细胞凋亡的影响,并探讨其诱导H1650细胞凋亡的分子机制。方法:以人肺腺癌细胞株H1650细胞为研究对象,用0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0 g·L~(-1)扶正抗癌方处理H1650细胞24,48,72 h,另设空白组,四氮唑蓝盐化合物(MTS)法检测细胞增殖;用0.5,1.0,1.5 g·L~(-1)扶正抗癌方处理H1650细胞24 h,另设空白组,Annexin VFITC/碘化丙啶(PI)流式细胞术检测细胞凋亡;用0.5,1.0,2.0 g·L~(-1)扶正抗癌方处理H1650细胞24 h,另设空白组,半胱氨酸蛋白酶-3/7(Caspase-3/7)活力检测试剂盒检测Caspase-3/7活力;蛋白免疫印迹法检测扶正抗癌方对pro Casapse-3,聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(PARP),Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。结果:与空白组比较,扶正抗癌方能明显抑制H1650细胞的增殖(P0.05),且呈浓度和时间依赖性。与空白组比较,扶正抗癌方明显诱导H1650细胞的早期凋亡,增强Caspase-3/7的活力(P0.05),且呈浓度依赖性。与空白组比较,扶正抗癌方明显下调pro Casapse-3和PARP的表达(P0.05),呈浓度依赖性,明显上调Bax的表达(P0.05),且呈时间依赖性。结论:扶正抗癌方可通过激活Caspase-3和Bax诱导H1650细胞的凋亡。     

薄层鉴别结合多成分测定方法评价苓桂术甘颗粒质量

目的:建立苓桂术甘颗粒中肉桂酸、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ的薄层鉴别定性方法及绿原酸类成分、肉桂酸、桂皮醛含量同时测定的定量方法。方法:采用薄层色谱法鉴别制剂中的白术和桂枝;利用高效液相色谱法同时测定新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、桂皮醛和肉桂酸的含量。结果:目标斑点清晰、无阴性干扰,新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、桂皮醛和肉桂酸在线性范围内与峰面积的线性关系良好,平均回收率分别为109.46%、93.46%、97.19%、103.70%、102.41%。结论:该薄层鉴别方法专属性强,含量测定方法准确可靠、操作简便,可以有效控制苓桂术甘颗粒的质量。