扶正抗癌方通过调控Bcl-2家族蛋白促肺癌细胞凋亡

【目的】探讨中药复方扶正抗癌方促非小细胞肺癌(NSCLC)细胞凋亡的机制。【方法】以高效液相色谱(HPLC)法检测扶正抗癌方的稳定性。以人NSCLC细胞株H1650、A549为研究对象,采用流式细胞术检测不同剂量(0、0.5、1.0、1.5 mg/mL)扶正抗癌方处理的H1650、A549细胞的凋亡情况,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测不同剂量(0、0.5、1.0、1.5 mg/mL)扶正抗癌方处理的H1650、A549细胞中抗凋亡基因Bcl-2、Mcl-1的蛋白表达水平。【结果】扶正抗癌方可明显增加H1650、A549细胞凋亡率,抑制Bcl-2、Mcl-1的蛋白表达水平,均呈剂量依赖性。【结论】扶正抗癌方可通过调控Bcl-2家族蛋白表达促进非小细胞肺癌细胞凋亡。     

RNAi沉默Polo-like kinase-1基因表达对大肠癌细胞端粒酶活性的影响

 目的 探讨polo-like kinase-1（PLK1）基因对大肠癌细胞增殖和端粒酶活性的影响。 方法根据PLK1基因序列特点,设计并用化学方法合成小干扰核糖核酸分子（small interfering RNA,siRNA）,转染人大肠癌SW480细胞后,分别采用实时定量PCR和Western blot检测PLK1基因mRNA和蛋白表达水平。分别采用MTT法和TRAP-ELISA方法检测PLK1基因转染对大肠癌细胞增殖和端粒酶活性的影响。 结果 所设计的5个siRNA均能明显抑制大肠癌SW480细胞PLK1 mRNA水平,以P4效果最好。以P4转染处理大肠癌细胞后,PLK1 mRNA水平和蛋白水平明显下调,且呈浓度和时间依赖性。MTT和TRAP-ELISA方法检测发现,P4siRNA转染组细胞增殖和端粒酶活性明显受到抑制,且呈浓度和时间依赖性（P＜0.05,P＜0.05）。 结论 PLK1基因对大肠癌细胞增殖具有重要的调控作用,以PLK1 siRNA转染处理大肠癌细胞,可明显抑制大肠癌细胞的恶性增殖,其机制可能与抑制端粒酶活性有关。     

藤黄酸诱导肺癌细胞H1975凋亡的机制研究

目的 研究藤黄酸（GA）诱导人肺癌细胞H1975凋亡的分子机制,探讨氧自由基（ROS）和JNK信号通路在GA杀伤 肺癌细胞中的作用。方法 以人肺癌细胞H1975为研究对象,MTT法测定GA抑制细胞增殖的作用,Annexin V/PI 双染法测定细胞凋亡率,DCFH-DA 法测定ROS 含量,JC-1探针染色分析线粒体膜电位（MMP）,Western blot检测JNK 信号通路的激活和线粒体凋亡途径相关蛋白表达的变化。结果 GA 呈剂量依赖性抑制H1975细胞的增殖,各实验组细胞存活率与空白对照组比较,均有统计学差异（P＜0.05 或0.01）。1、2.5 和5滋mol/L GA 作用24h 后,细胞凋亡率分别为25.2%、51.8%和75.1%,剪切型凋亡相关蛋白cleaved caspase-9、cleaved caspase-3 和cleaved PARP 的表达随GA 浓度增高而显著增加,与空白对照组比较,均有统计学差异（P＜0.05或0.01）。GA 作用2h 后H1975细胞ROS 含量显著升高,磷酸化JNK（p-JNK）表达上调（P＜0.05或0.01）。GA 作用16h后各实验组细胞MMP 均明显降低（均P＜0.05）。GA 作用24h后实验组细胞线粒体凋亡途径相关蛋白Bax、Bak、Bik表达增加,而抗凋亡蛋白Bcl-2表达与空白对照组相比明显下降（P＜0.05 或0.01）。结论 GA 具有诱导H1975 细胞凋亡的作用,其可能机制是上调细胞内ROS含量,激活JNK 信号通路,进而引起MMP 降低和线粒体凋亡途径激活。     

6- 姜辣素对黑色素瘤细胞增殖和凋亡的影响及机制研究

目的??探究 6- 姜辣素对黑色素瘤细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制。方法??使用不同浓度 6- 姜 辣素处理黑色素瘤细胞,采用 MTT 法检测黑色素瘤增殖能力的变化 ; 流式细胞仪检测 6- 姜辣素对黑色素瘤细 胞凋亡的影响 ; 应用 Western?blotting 检测黑色素瘤细胞半胱天冬氨酸蛋白酶 3（Caspase-3）/ 活化型半胱天冬 氨酸蛋白酶 3（Cleaved-Caspase-3） 、多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）/ 活化型多聚腺苷二磷酸核糖聚合 酶（Cleaved-PARP） 、免疫球蛋白结合蛋白（BIP） 、肌醇激酶 1（IRE1）和 c-Jun 氨基末端激酶（JNK）蛋白表 达水平变化 ; 敲减 IRE1 阻断内质网应激信号通路,检测 6- 姜辣素对黑色素瘤细胞增殖和凋亡的影响。结果? 6- 姜辣素抑制黑色素瘤细胞增殖呈浓度依赖性,对 M14 和 A375 细胞的半数抑制浓度（IC 50 ）分别为 46.070 和 33.152?μmol/L; 6- 姜辣素处理后, 黑色素瘤细胞 Cleaved-Caspase-3 和 Cleaved-PARP 蛋白表达上调（ P <0.05） , 细胞凋亡率升高（ P <0.05） ; 6- 姜辣素激活内质网应激,BIP、IRE1 和 JNK 蛋白表达上调（ P <0.05） ; 6- 姜辣 素处理 IRE1 基因敲减细胞, 与对照组相比对细胞增殖抑制减弱、 凋亡蛋白Cleaved-Caspase-3表达下调 （ P <0.05） 。 结论??6- 姜辣素可通过激活内质网应激, 抑制黑色素瘤细胞增殖并促进其凋亡, 从而发挥抗肿瘤功能。     

尼美舒利通过PPA Rγ途径抑制结肠癌细胞增殖

目的：观察过氧化物酶增殖物激活受体γ（PPARγ）抑制剂GW9662干预后,尼美舒利（N）对结肠癌细胞凋亡和增殖的影响,探讨PPARγ途径在N抗癌机制中的作用。方法体外培养结肠癌SW480细胞,设立不加药对照组、单用PPARγ抑制剂GW9662组（GW9662组,药物浓度0．1、0．5、1．0、5．0μmol／L）、单用N组、GW9662＋N组共4组。MTT检测各组细胞生长抑制率;流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡及细胞周期的变化。Westernblot检测各组中PPARγ、p21Waf1、p27Kip1、Bcl‐2、Bax、VEGF蛋白的表达。结果MTT检测结果：GW9662组较对照组细胞增殖差异无统计学意义（P＞0．05）;N组呈时间依赖性抑制SW480细胞增殖（P＜0．01）;在GW9662＋N组中GW9662呈剂量及时间依赖性减弱N抑制细胞增殖的作用。FCM检测结果：细胞凋亡率在GW9662组与对照组之间差异无统计学意义（P＞0．05）;N组与对照组比较,SW480细胞凋亡率显著增加,差异有统计学意义（P＜0．01）,G0／G1期细胞比例明显增加,S期及G2／M期细胞比例显著减少;GW9662＋N组细胞凋亡率较N组明显降低（P＜0．01）,细胞在G0／G1期的比例降低,S期和G2／M期细胞的比例升高。Westernblot检测结果：N组与对照组比较SW480细胞的PPARγ、p21Waf1、p27Kip1、Bax蛋白表达率显著增加（P＜0．05或P＜0．01）,Bcl‐2、VEGF的表达率则明显下调（P＜0．01）;GW9662＋N组与N组比较,SW480细胞的PPARγ、p21Waf1、p27Kip1、Bax蛋白显著表达下调（P＜0．05或P＜0．01）,而Bcl‐2、VEGF的表达则上调（P＜0．05）。结论N在体外能有效抑制结肠癌细胞SW480的增殖,促进其凋亡。PPARγ通路在N影响结肠癌细胞增殖、凋亡中发挥重要作用。     

Akt1在环氧合酶-2抑制剂抑制宫颈癌Hela细胞增殖中的作用

目的研究Akt1在环氧合酶2抑制剂NS398抑制宫颈癌Hela细胞增殖过程中的作用。方法以不同浓度的NS398或Akt1选择性激动剂IGF-1与NS398共同处理Hela细胞,采用噻唑蓝（MTT）比色法分析细胞生长抑制率,Western blotting免疫印迹技术分别检测Akt1蛋白表达的变化。结果与对照组比较,不同浓度的NS398处理Hela细胞后,细胞生长抑制率（IR）增加（P〈0.05）;NS398呈浓度和时间依赖性下调Hela细胞Akt1蛋白质的表达（P〈0.05）;与单独用NS398组比较,Akt1激动剂与NS398共同处理细胞后,细胞IR值逐渐下降,并且其作用呈浓度依赖和时间依赖性（P〈0.05）。结论 NS398呈剂量和时间依赖性抑制Hela细胞的增殖,其作用机制可能与下调Akt1蛋白的表达有关。     

苦参碱调控结肠癌奥沙利铂耐药性及机制研究

目的 探讨苦参碱（Ma）对人结肠癌耐奥沙利铂（Oxa）细胞株（SW480/Oxa）的逆转耐药作用及 其机制是否与抑制c-Jun 氨基末端激酶（JNK/SAPK）信号通路有关。方法 采用MTT 法检测Ma 对SW480/ Oxa 细胞增殖的影响,采用流式细胞术检测Ma 对SW480/Oxa 细胞凋亡的影响,qRT-PCR 检测Ma 对SW480/ Oxa 细胞P- 糖蛋白（P-gp）、MDR1 mRNA 表达的变化,Western blot 检测Ma 对SW480/Oxa 细胞P-gp、 磷酸化c-Jun 氨基末端激酶(p-JNK) 蛋白表达的变化。结果 不同组细胞增殖活性的比较,Oxa 组细胞增殖活 性低于NC 组,Ma+Oxa 组细胞增殖活性低于Oxa 组（P<0.05）。Oxa 组细胞总凋亡率高于NC 组（P <0.05）, Ma+Oxa 组细胞总凋亡率高于Oxa 组（P <0.05）。与PPARy+Oxa 组比较,PPARy+Ma+Oxa 组中P-gp、 MDR1 mRNA 水平均下调,差异有统计学意义（P <0.05）。与SP600125+Oxa 组比较,SP600125+Ma+Oxa 组 中P-gp、MDR1 mRNA 水平均下调,差异有统计学意义（P <0.05）。与PPARy+Oxa 组比较,PPARy+Ma+ Oxa 组中P-gp、p-JNK 蛋白水平均下调,差异有统计学意义（P <0.05）。与SP600125+Oxa 组比较,SP600125+ Ma+Oxa 组中P-gp,p-JNK 蛋白水平均下调,差异有统计学意义（P <0.05）。结论 Ma 具有调控人结肠癌耐 药细胞株耐药性的作用,可能与抑制JNK/SAPK 信号通路,降低P-pg 表达有关。     

HSP90抑制剂对人多发性骨髓瘤细胞增殖及HSP90蛋白表达的影响

目的 探讨HSP90抑制剂17-AAG对人多发性骨髓瘤细胞增殖及HSP90蛋白表达的影响. 方法 采用MTT法检测HSP90抑制剂对人多发性骨髓瘤U266细胞增殖能力的影响;采用Western blot检测不同浓度的HSP90抑制剂17-AAG(0.001,0.01,0.1,1.0,10.0 μmol/L)对人多发性骨髓瘤细胞中HSP90蛋白表达水平的影响. 结果 HSP90抑制剂17-AAG对人多发性骨髓瘤细胞株U266细胞有剂量依赖性的增殖抑制作用(P＜0.05),无时间依赖性的增殖抑制作用(P＞0.05).随着药物浓度的增加,HSP90蛋白水平的表达也逐渐下降. 结论 HSP90抑制剂能剂量依赖性抑制人多发性骨髓瘤细胞增殖能力,同时下调人多发性骨髓瘤细胞株U266细胞中HSP90蛋白水平的表达.     

盐酸小檗碱对血管平滑肌细胞增殖的干预研究

目的：探讨盐酸小檗碱对抑制血管平滑肌细胞增殖的干预机制。方法：分离培养大鼠血管平滑肌细胞（vascularsmoothmllsclecells,VSMC）,并分为实验组,对照组及空白组;MTT法选择盐酸小檗碱干预浓度;MTT法和[3H]-胸腺嘧啶核苷渗入法检测VSMC增殖率;Westernblotting方法检测ERKl／2、Akt的磷酸化蛋白的变化。结果：VSMC实验组细胞增殖率与对照组相比明显下调,P〈0．05;小檗碱干预后,VSMC细胞ERKl／2、Akt的磷酸化蛋白的表达明显下调,与对照组相比,P〈0．05。结论：盐酸小檗碱对血管平滑肌细胞的增殖有一定的抑制作用,可能与其抑制ERKl／2、Akt等的表达有关。     

盐酸小檗碱对结肠癌HT29细胞鸟氨酸脱羧酶表达的影响

[目的]观察盐酸小檗碱对结肠癌HT29细胞鸟氨酸脱羧酶(ODC)表达的影响.[方法]以不同浓度的盐酸小檗碱作用于HT29细胞72 h,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞增殖抑制,采用荧光定量PCR法及Western blot方法分别检测ODC mRNA及蛋白的表达水平.[结果]盐酸小檗碱可抑制HT29细胞增殖,剂量依赖性地显著下调ODC蛋白表达(P＜0.05或P＜0.01),但对ODCmRNA表达无显著影响.[结论]盐酸小檗碱具有抑制HT29细胞的增殖作用,其机制可能与下调ODC蛋白表达相关.     

川芎嗪通过Akt信号通路影响前列腺癌PC3细胞的增殖和凋亡

目的 研究盐酸川芎嗪对前列腺癌PC3细胞增殖和凋亡的影响及作用机制.方法 0、0.2、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 mg/mL盐酸川芎嗪处理雄激素非依赖性前列腺癌PC3细胞,MTT法检测各组细胞的增殖能力,荧光显微镜观察细胞核形态学改变,Western blot检测Akt以及下游相关蛋白mTOR、p70S6蛋白及蛋白磷酸化的表达,以及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达.结果 盐酸川芎嗪能有效抑制前列腺癌PC3细胞增殖,且显示浓度时间依赖性(P＜0.05).1.5、2.5 mg/mL的盐酸川芎嗪能够降低Akt和p-Akt的表达,进而下调mTOR、p-mTOR、p70S6及p-p70S6的表达(P＜0.05);同时下调Bcl-2、上调Bax蛋白的表达(P＜0.05).结论 Akt及其下游信号通路介导了盐酸川芎嗪抑制前列腺癌PC3细胞增殖及促凋亡作用.     

VCAN通过PI3K/AKT信号通路调控乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖

目的 探讨多能蛋白聚糖（VCAN）通过PI3K/AKT 信号通路对乳腺癌细胞MDA-MB-231 增殖的影响。方法 利用Western Blot 和qRT-PCR 检测VCAN 在正常人乳腺细胞MCF-10A 和三株乳腺癌细胞中的表达水平。选取VCAN 高表达细胞株MDA-MB-231 为实验对象,实验分组为NC 组、siRNA1-VCAN 组和siRNA2-VCAN 组。采用MTT 法及克隆形成法检测转染后的乳腺癌细胞增殖变化。Western Blot 检测p-AKT、AKT、p-PI3K、PI3K 的蛋白相对表达水平。结果 与正常人乳腺细胞相比,VCAN 在乳腺癌细胞中的表达量显著上升（P＜0.05）。下调VCAN 表达量,MDA-MB-231 细胞的增殖显著被抑制（P＜0.05）。同时,下调VCAN 表达量,p-AKT、p-PI3K 蛋白水平显著下降（P＜0.05）。结论VCAN 在乳腺癌MDA-MB-231 细胞中,可能通过PI3K/AKT 信号通路调控细胞增殖能力。     

miR-181b-5p调节EGR1/BIM通路对ALL细胞增殖、凋亡和迁移的影响

探讨miR-181b-5p在急性淋巴细胞白血病（ALL）中的作用及其潜在的分子机制。方法 采用qRT-PCR检测四川大学华西医院2019年1月—2021年1月80例ALL患者miR-181b-5p和早期生长反应因子1（EGR1） mRNA的表达水平。分别使用miR-181b-5p模拟物、miR-181b-5p抑制物或（和）EGR1过表达质粒转染人ALL细胞系NALM-6细胞。采用MTT、流式细胞仪和划痕愈合实验检测miR-181b-5p对细胞增殖、凋亡和迁移的影响。通过双荧光素酶验证miR-181b-5p和EGR1的相互作用关系。Western blot检测细胞中EGR1蛋白和细胞增殖、凋亡和迁移相关蛋白的表达水平。结果 miR-181b-5p在ALL中表达显著上调,EGR1表达下调（P＜0.05）。抑制miR-181b-5p不仅抑制细胞增殖、迁移,诱导细胞凋亡,而且上调EGR1和BIM蛋白表达（P＜0.05）;上调miR-181b-5p则具有与之相反的效果（P＜0.05）。EGR1是ALL细胞中miR-181b-5p的靶基因（P＜0.05）。miR-181b-5p过表达可明显削弱EGR1过表达对ALL细胞增殖、凋亡和迁移的影响（P＜0.05）。结论 抑制miR-181b-5p可通过靶向上调EGR1和BIM表达在ALL中抑制细胞增殖和迁移,促进细胞凋亡     

黄连素抑制人喉癌 Hep-2细胞增殖及机制研究

目的：探讨黄连素对人喉癌 Hep-2细胞增殖的抑制作用及其可能机制。方法体外培养 Hep-2细胞,使用不同浓度黄连素诱导不同时间,应用 MTT 法检测细胞增殖抑制率;流式细胞术测定细胞周期及凋亡;实时荧光定量 PCR 和蛋白质免疫印迹（Western blot）法分别检测细胞周期蛋白 D（CyclinD）、B 细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关 X 蛋白（Bax）基因和蛋白表达水平。结果与0μmol/ L 黄连素对照组比较,2.5、5.0、10.0、20.0μmol/ L 黄连素作用 Hep-2细胞24、48 h,可明显抑制细胞增殖,且呈浓度时间依赖性（P ＜0.05）;2.5、5.0、10.0μmol/ L 黄连素作用 Hep-2细胞48 h,细胞早期凋亡率明显升高,呈浓度依赖性（P ＜0.05）;G0/ G1期细胞增多（P ＜0.05）,诱导细胞阻滞于 G0/ G1期;10μmol/ L 黄连素作用 Hep-2细胞48 h,Bax 基因和蛋白表达水平明显升高（P ＜0.05）,CyclinD、Bcl-2基因和蛋白表达水平明显下降（P ＜0.05）。结论黄连素能抑制喉癌细胞增殖,引起 G0/ G1期阻滞,并诱导其凋亡,其作用机制可能与 Bax 基因表达上调及 CyclinD、Bcl-2基因表达下调有关。     

下调MCT1表达抑制宫颈癌Hela细胞增殖并促进其凋亡

［摘要］ 目的探讨下调单羧酸转运蛋白1(monocarboxylate transporter 1,MCT1)表达对宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响及其机制。 方法将体外培养的Hela细胞分为未转染组、阴性对照组和MCT1-siRNA组,Western blot检测Hela细胞中MCT1、Bcl-2和Bax蛋白表达水平,MTT法检测Hela细胞增殖活力,流式细胞仪检测Hela细胞周期分布和凋亡率。 结果与未转染组比较,阴性对照组Hela细胞中MCT1、Bcl-2、Bax蛋白表达水平和细胞增殖、周期分布以及细胞凋亡率差异均无统计学意义（P＞0.05）,MCT1-siRNA组细胞中MCT1和Bcl-2蛋白表达水平、细胞增殖活力和细胞在S期所占百分比均明显降低,Bax蛋白表达水平、细胞在G0/G1期所占百分比和细胞凋亡率均明显升高（P＜0.05）。 结论下调MCT1表达可通过诱导细胞周期阻滞抑制Hela细胞增殖,并通过上调Bax和下调Bcl-2蛋白表达促进Hela细胞凋亡。     

siRNA 沉默胸腺素β4对鹿茸间充质干细胞增殖的影响

目的：利用 siRNA 干扰技术研究胸腺素β4（Tβ4）基因沉默对鹿茸间充质干细胞（MSC）增殖的影响。方法鹿茸 MCS 分为阴性对照组、siRNA-Tβ4转染组2组。MTT 检测 MSC 增殖的变化,Real-time PCR 检测 ILK、AKT 及 CyclinD1 mRNA 表达量差异变化,Western blot 检测 AKT 及 P-AKT 蛋白含量变化。结果 siR-NA-Tβ4转染组 MSC 增殖受到显著抑制（P ＜0.01）;siRNA-Tβ4转染组 ILK、CyclinD1 mRNA 表达量下调,AKT mRNA 表达量不变;siRNA-Tβ4转染组总 AKT 蛋白含量无变化,P-AKT 蛋白含量减少。结论 Tβ4基因沉默能显著抑制 MSC 增殖,并可能通过下调 ILK、P-AKT 及细胞周期相关蛋白 CyclinD1从而抑制 MSC 细胞增殖。     

脂联素对PDGF诱导的肾小球系膜细胞增殖的影响

目的：探讨脂联素（adiponectin,ADPN）对血小板源性生长因子（PDGF）诱导的系膜细胞增殖及凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax表达的影响。方法：脂联素预孵系膜细胞,采用PDGF-BB刺激系膜细胞,应用MTT法检测细胞增殖,应用Western法检测增殖细胞核抗原PCNA、凋亡抑制蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax的表达。结果：（1）脂联素抑制PDGF-BB所致的系膜细胞增殖,与单用PDGF-BB组比较差异有统计学意义（P＜0．05）。（2）脂联素抑制PDGF-BB所致系膜细胞Bcl-2的表达,促进Bax蛋白的表达,与PDGF-BB组比较差异有统计学意义（P＜0．05）。结论：PDGF-BB能够促进系膜细胞增殖,使凋亡抑制蛋白Bcl-2表达增加,而促凋亡蛋白Bax表达减少。加入脂联素干预后通过下调Bcl-2,上调Bax的表达而抑制了由PDGF-BB引起的系膜细胞增殖。     

miR-222通过MMP1对增生性瘢痕成纤维细胞的调控机制研究

目的观察成纤维胶原酶1（MMP1）和miR-222在增生性瘢痕（HS）成纤维细胞中的表达水平,探讨miR-222对HS发生、发展的调控机制。方法选取36例HS患者的HS组织,并各留取HS旁正常组织作为对照。分离培养出HS组织与正常组织的成纤维细胞;采用RT-PCR法检测成纤维细胞MMP1mRNA和miR-222表达水平;采用Westernblot法检测成纤维细胞MMP1蛋白表达水平;采用MTT法检测成纤维细胞增殖情况;采用双荧光素酶报告实验检测miR-222是否可调控MMP1基因。结果与正常组织比较,HS组织成纤维细胞MMP1mRNA、蛋白表达水平均下调（均P＜0.05）,miR-222表达水平上调（P＜0.05）。与空白对照成纤维细胞比较,HS组织转染MMP1过表达质粒后的成纤维细胞MMP1mRNA、蛋白表达水平均上调（均P＜0.05）,增殖速度明显减慢（P＜0.05）;转染antagomiR-222质粒后的成纤维细胞miR-222表达水平下调（P＜0.05）,MMP1mRNA表达水平上调（P＜0.05）,增殖速度明显减慢（P＜0.05）。双荧光素酶报告实验结果表明miR-222能与MMP1基因的3′-UTR区相结合,从而调控其表达。结论miR-222在HS组织中存在过表达,miR-222或通过负调控其靶基因MMP1的表达而发挥其调控成纤维细胞增殖和凋亡的作用。     

EGCG对体外培养子宫肌瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的研究EGCG对体外培养子宫肌瘤细胞增殖和凋亡的作用,及对p-AKT和PTEN蛋白表达的影响。方法体外培养子宫肌瘤细胞,不同浓度EGCG干预后,应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增生活性;PI染色FCM法分析检测细胞周期变化及凋亡率;免疫细胞化学测定p-AKT和PTEN蛋白表达情况。统计学分析采用方差分析和t检验。结果 EGCG对体外培养子宫肌瘤细胞有增殖抑制作用（P〈0.05）,呈时间、浓度依赖性,以剂量依赖方式诱导子宫肌瘤细胞凋亡（P〈0.05）,上调PTEN表达,下调p-AKT表达。结论 EGCG通过上调PTEN表达、下调p-AKT表达抑制肌瘤细胞的体外增生。     

参芪扶正注射液对K562/ADM多药耐药的影响

目的研究参芪扶正注射液对K562耐药细胞株（K562／ADM）多药耐药的影响。方法采用MTT法检测参芪扶正注射液的细胞毒性；采用PI单染色流式细胞术检测ADM加以及不加参芪扶正注射液处理K562／ADM后的细胞凋亡率；采用直接免疫荧光法流式细胞术检测参芪扶正注射液处理K562／ADM细胞的Bcl-2基因表达水平。结果（1）参芪扶正注射液在10μL／mL时对K562／ADM增殖无抑制作用；（2）参芪扶正注射液明显增加ADM对K562／ADM的毒性作用（P〈0.05），参芪扶正注射液在10μL／mL时耐药逆转倍数为1．71；（3）参芪扶正注射液可明显增强ADM对K562／ADM的促凋亡作用（P〈0．05）；（4）参芪扶正注射液可明显抑制K562／ADM的Bcl-2基因表达（P〈0.05）。结论参苠扶正注射液可以逆转K562／ADM耐药性，其可能机制是促进细胞凋亡和下调Bcl-2表达。